CERRADO AGROCIÊNCIAS Revist d Fculdde de Engenhri e Ciêncis Agráris do UNIPAM (ISSN 2178-7662) Ptos de Mins: UNIPAM, (1):1-, gosto. 2 Fontes de nitrogênio folir e tividde d nitrto redutse em mogno Nitrogen sources in the foli of nitrte reductse ctivity in mhogny Luís Henrique Sores¹; Evndro Binotto Fgn²; Derli Csroli² Krl Vilç Mrtins³; André Luís Sores 1 ; Elmiro Corre Peres¹ ; Dniel Moreir de Andrde 1 1. Grdundo do curso de Agronomi, Centro Universitário de Ptos de Mins, MG. 2. Professor Doutor do Centro Universitário de Ptos de Mins, Ptos de Mins, MG. 3. Alun de pós-grdução, Centro Universitário de Ptos de Mins, Ptos de Mins, MG. Resumo: O presente trlho foi relizdo em cs de vegetção, utilizndo plnts de Mogno com o ojetivo de vlir influênci d plicção folir de diferentes fontes de nitrogênio. As plnts form cultivds em vsos de litros contendo solo clssificdo como Ltossolo Vermelho. Utilizou-se o delinemento experimentl de locos csulizdos, constituído por qutro trtmentos e qutro repetições. Os trtmentos utilizdos form: T 1 testemunh (sem plicção); T 2 uréi (CO(NH 2 ) 2 ); T 3 nitrto de potássio (KNO 3- ) e T 4 fertiliznte queltdo por minoácido () (N %, P 2 O 8%, K 2 O 8%, C 1,%, S 2,4%, Mg,%, B,6%, Cu,2%, Mn,%, Mo,2%, Zn 1,%, Crono Orgânico Totl 12%). A tividde d enzim nitrto redutse foi mior ns plnts que receerm plicção folir de minoácidos em relção às plnts em que foi plicd uréi. Plvrs-chve: Aminoácido. Aplicção folir. 3 Swieteni mcrophill King. Astrct: This work ws conducted in greenhouse y using plnts of Mhogny with the ojective to evlute the lef ppliction of different nitrogen sources. Plnts were grown in pots contining liters of soil clssified oxisol. We used rndomized lock design consisting of four tretments nd four replictions. The tretments were: T 1 control (no ppliction), T 2 ure (CO(NH 2 ) 2 ), T 3 potssium nitrte (KNO 3- ) nd T 4 fertilizer chelted y mino cid (N %, P 2 O 8% K 2 O 8%, C 1. %, S 2.4%, Mg.%, B.6%, Cu.2%, Mn.% Mo.2%, Zn 1.%, Totl Orgnic Cron 12%). The nitrte reductse ctivity ws higher in plnts tht received lef ppliction of mino cids when compred to plnts in which were pplied ure. Key words: 1. Aminocid. Lef ppliction. 3 Swieteni mcrophill King. O mogno (Swieteni mcrophill King) é um espécie de grnde importânci e- conômic, pelo fto de su mdeir ser utilizd pr confecção de móveis de luxo e rtigos de decorção. A mdeir do mogno possui lt durilidde e om cmento, tornndo-se ssim um ds espécies mis importntes d Amzôni, devido à su elevd extrção (COUTO, 22).
Cerrdo Agrociêncis. Ptos de Mins: UNIPAM, (1): 1-, go. 2 O nitrogênio (N) é um dos nutrientes mineris mis requeridos pels plnts e, gerlmente, é o que mis limit o crescimento. Porém su disponiilidde nos solos rsileiros é ix. Ns plnts é um componente responsável por váris reções, lém de fzer prte d estrutur d clorofil, de enzims e proteíns (TAIZ; ZIEGER, 24; GROSSMAN; TAKAHASHI, 21). A deficiênci deste elemento ocsion clorose em folhs velhs, reduzindo tx fotossintétic e, consequentemente, o crescimento e produtividde ds culturs (GROSSMAN; TAKAHASHI, 21). As plnts sorvem N n form de NO 3 -, NH 4 + ou trvés d fixção iológic do N 2 (FAGAN et l., 27). A sorção de mônio (NH 4 +) ocorre de form pssiv por difusão, qundo s concentrções externs destes íons forem lts (WILLIAMS; MILLER, 21), porém o mônio é tóxico pr s plnts e precis ser rpidmente ssimildo, o que evit seu cúmulo nos tecidos. O nitrto (NO 3 -) é sorvido de form tiv vi simplsto, sendo que um pequen prte deste íon permnece no citoplsm, e outr é rmzend no vcúolo celulr ou redistriuíd pr outros tecidos pr ser ssimildo pel plnt (BONATO et l., 1998). O nitrto pode ser reduzido ns folhs ou ns rízes, trvés d enzim nitrto redutse, produzindo o nitrito que posteriormente é reduzido pel nitrito redutse, formndo NH 4 +, form pel qul o N é utilizdo pels plnts (TAIZ; ZEIGER, 24). A nitrto redutse é um enzim presente no citosol ds céluls corticis d e- piderme d riz e ns céluls mesofílics d prte ére. É formd por dus suuniddes idêntics com três grupos prostéticos cd: FAD, heme e um complexo entre o moliidênio e o colto e um pterin. A tividde d Nitrto Redutse (ANR) é incrementd com o umento de croidrtos e luz, e reduzid com créscimos de NH 4 + e A (TAIZ; ZEIGER, 24). Outr prátic que vem sendo dotd no mnejo nutricionl ds culturs é - plicção de minoácidos. O uso destes produtos em pulverizções folires está se tornndo cd vez mis frequente, emor existm lgums controvérsis qunto à sorção pels plnts (VIEIRA; CASTRO, 2). Sendo ssim quntificção d ANR é um prâmetro importnte pr vlição de su form de sorção. Com se no exposto, o ojetivo deste trlho foi vlir influênci d plicção de mônio, nitrto e minoácidos n tividde d enzim nitrto redutse em plnts de mogno. O experimento foi conduzido durnte o mês de junho de 29, em cs de vegetção n Fculdde de Engenhris e Ciêncis Agráris, Cmpus I do Centro Universitário de Ptos de Mins, em Ptos de Mins, MG, situd n região do Alto Prní, com 81 m de ltitude, 18 34 S e 46 31 O. Form utilizds plnts de mogno, espécie Swieteni mcrophill King. As plnts form trnsplntds dos tuetes pr vsos plásticos qundo presentrm cinco pres de folhs. Form utilizdos vsos de litros preenchidos com solo clssificdo como Ltossolo Vermelho. O delinemento experimentl dotdo foi o de locos csulizdos constituído por qutro trtmentos e qutro repetições. Os trtmentos utilizdos form: T 1 testemunh (sem plicção); T 2 uréi (CO(NH 2 ) 2 ); T 3 nitrto de potássio (KNO 3 -) e T 4 fertiliznte queltdo por minoácido () (N %, P 2 O 8%, K 2 O 8%, C 1,%, S 2,4%, Mg,%, B,6%, Cu,2%, Mn,%, Mo,2%, Zn 1,%, Crono Orgânico Totl 12%). Os trtmentos T 2 e T 3 form plicdos n concentrção de,% L -1 e o T 4 n concentrção de 1% L -1. Todos os trtmentos form plicdos com volume de cld de 2 L h -1. 2
André Luís Sores et l. Fontes de nitrogênio folir e tividde d nitrto redutse em mogno Um semn pós o trnsplnte foi relizd um vlição folir d ANR ns folhs ds plnts. Pr est form retirds mostrs de três folhs do terço superior d plnt completmente exposts à luz em qutro plnts por trtmento. As nálises form feits no 1., 3. e 8. dis pós plicção (DAA) ds 9 às 11 hors. A ANR foi determind conforme metodologi propost por Ctldo et l. (197). Assim s folhs form cortds em pedços pequenos, ds quis form colocdos 2 mg em tuos de ensio de 1 ml com tmps que continhm 4 ml de KNO 3,2 M em tmpão fosfto. Os tuos de ensio form envolvidos em ppel de lumínio e mntidos em nho-mri 3 C durnte 2 h gitdo de em minutos. Logo depois foi pipetdo 1 ml d solução de cd tuo de ensio pr lão volumétrico de ml pr cd um dos respectivos trtmentos, evitndo-se pedcinhos de folhs. Em seguid colocou-se H 2 O destild té completr 2 ml do lão e, seguir, 1 ml de ácido sulfnílico. Est solução foi mntid em repouso de minutos. Posteriormente foi diciondo 1 ml de lfnftlmin e 1 ml do tmpão de cetto de sódio e completou-se o volume ml com H 2 O destild. A leitur foi relizd depois de e ntes de 3 minutos no espectrofotômetro, o qul foi justdo o vlor zero com águ destild, um leitur de 4nm. A estimtiv d tividde d enzim nitrto redutse foi otid trvés d curv pdrão de nitrito (NO 2 -), justd de cordo com s concentrções de N n form de NO 2 - de,,, 1, 2 e 2 µg L -1. A prtir ds sorâncis, justou-se o gráfico (concentrção x leitur) otendo-se equção de regressão liner (y = x + ). De cordo com esses ddos procedeu-se o cálculo d tividde d enzim nitrto redutse (Equção 1) ANR =.FV.4.CN., (1) em que: ANR refere-se à tividde d enzim nitrto redutse em µg N-NO 2 g de fitomss verde -1 h -1 ; FV é quntidde de fitomss verde colocd no tuo de ensio (2 mg); CN é concentrção de nitrito (mg L -1 ) otid pel equção justd pel curv pdrão de cordo com sorânci d mostr; e os vlores, 4 e, form utilizdos n correção dos vlores pr µg N-NO 2 por g de fitomss verde por hor. Os vlores estimdos de ANR, otidos nos diferentes trtmentos, form sumetidos à nálise de vriânci, utilizndo-se o softwre esttístico Assitt, tendo sus médis comprds pelo teste de Tukey % de proilidde de erro. A tividde d enzim nitrto redutse (ANR) ds plnts em que foi plicdo (T 4 ), o 1. DAA, presentou um incremento de 69%, 78% e 6% em relção T 1, T 2 e T 3, respectivmente (figur 1). Ao 3. DAA houve redução n ANR em vlores solutos em relção à 1ª vlição; entretnto, o T 4 ind foi superior em 2%, 49% e 12%, respectivmente, de créscimo qundo s plnts form trtds com (figur 1). Ao 8. DAA o incremento n ANR, qundo se plicou, foi de 8,42,,26 e 6,98 µg N-NO 2 g fitomss fresc h -1 em relção T 1, T 2 e T 3 respectivmente, representndo 38%, 46% e 31% mis em relção os demis trtmentos (Figur 1c). O teor de nitrto e luz são ftores importntes n indução e mnutenção d - tividde d nitrto redutse nos tecidos vegetis (VINCENTZ et l., 1993). A ANR tmém é influencid pelo molidênio, coftor d enzim, sendo que deficiênci desse elemento pode reduzir su tividde pel concentrção de mônio e minoácidos (SMIRNOFF et l., 1984; CAMPOS, 29). Estes ftores podem ter contriuído pr mior 3
Cerrdo Agrociêncis. Ptos de Mins: UNIPAM, (1): 1-, go. 2 tividde d enzim no T 4 (figur 1), pois o produto utilizdo no experimento lém de ser queltizdo por minoácidos presentv teores de mcro e micronutrientes. Cmpell (1999) tmém relt que o fluxo ctlítico d nitrto redutse ou cpcidde totl de redução do nitrto pels plnts depende d presenç do sustrto (NO 3 -) e d disponiilidde de coftores e íons metálicos, FAD, heme, Fe, Mo-MPT (molidênio molidopterin) e Mo. De cordo com Vieir e Cstro (2), os minoácidos podem formr complexos com cátions como Zn 2+, Cu 2+, Mn 2+ e Fe 3+ umentndo su disponiilidde pr s plnts. A tividde d enzim nitrto redutse é mior em muds de mogno que receerm plicção folir de minoácidos qundo comprd àquels que não form trtds e àquels em que form plicdos uréi e nitrto de potássio. Referêncis BONATO, C. M.; RUBIN FILHO, C. J.; MELGES, E.; SANTOS, V. Nutrição minerl de plnts. Universidde Estdul de Mringá, Mringá, 137p, 1998. CAMPBELL, W. H. Nitrte reductese structure function nd regultion on ridging to gp etween iochemistry nd physiology. Annul Review Plnt Physiology Plnt Moleculr Biology, v., p. 277-33, 1999. CAMPOS, M. M. S. Ecofisiologi do uso de nitrogênio em espécies róres d Florest Omrófil Dens ds Terrs Bixs. Utu, SP. 29.113f. Dissertção (Mestrdo em Biodiversidde Vegetl e Meio Amiente) - Instituto de Botânic d Secretri do Meio Amiente, São Pulo, 29. CATALDO, D.A.; HAROON, M.; SCHRADEV, L.E.; YOUNGS, V.L. Rpid colorimetric determintion of nitrte in plnt tissue y nitrtion of slicylic cid. Communictions in Soil Science nd Plnt Anlysis. Athens, v. 6, p. 71-8, 197. COUTO, J.M.F. Germinção e morfogênese in vitro de Mogno (Swieteni mcrophill King). 22. 71f. Dissertção de Mestrdo (Pós-grdução em Ciênci Florestl). Universidde Federl de Viços, Viços, 22. FAGAN, E. B.; MEDEIROS, S. L. P.; MANFRON, P. A.; CASAROLI, D.; SIMON, J.; DOURADO NETO, D.; LIER, Q. J. V.; SANTOS, O. S.; MÜLLER, L. Fisiologi d fixção iológic do nitrogênio em soj: revisão. Revist d FZVA. Uruguin, v. 14, n. 1, p. 89-6, 27. GROSSMAN, A.; TAKAHASHI, H. Mcronutrient utiliztion y photosynthetic eukryotes nd the fric of interctions. Annul Review Plnt of Physiology. v. 2, p. 163-23, 21. SMIRNOFF, N.; TOOD, P.; STEWART, G. R. The occcurrence of nitrte reduction in the leves of woody plnts. Annul Botnicl, v. 4, p. 363-374,1984. TAIZ, L.; ZEIGER, E. Fisiologi vegetl. 3 ed. Porto Alegre: Artmed, 24. VIEIRA, E. L.; CASTRO, P. R. C. Ação de Stimulte n germinção de sementes, vigor de plântuls e crescimento rdiculr de plnts de milho (Ze mys L.). Pircic: Eslq USP, 2. 1 p. (reltório técnico). 4
André Luís Sores et l. Fontes de nitrogênio folir e tividde d nitrto redutse em mogno VINCENTZ, M.; MOUREAUX, T.; LEYDECKER, M. T. Regultion of nitrte nd nitrite reductse expression in Nicotin plumginifoli Leves y nitrogen nd cron metolites. Plnt Journl, v. 3, p. 313-324, 1993. WILLIAMS, L. E.; MILLER, A. J. Trnsporters responsile for the uptke nd prtitioning of nitrogenous solutes. Annul Review Plnt Physiology Plnt Moleculr Biology, v. 2, p. 69-688, 21. (A) 2 2 (B) (g fitomss fresc h -1 ) 2 1 * (g fitomss fresc h -1 ) 2 1 (g fitomss fresc h -1 ) 2 2 1 (C) Figur 1. Atividde d enzim nitrto redutse (ANR) em plnts de Mogno os 1 (A), 3 (B) e 8 (C) dis pós plicção de (T 1 testemunh (sem plicção); T 2 uréi (CO(NH 2 ) 2 ); T 3 nitrto de potássio (KNO 3 - ) T 4 fertiliznte queltdo por minoácido () (N %, P 2 O 8%, K 2 O 8%, C 1,%, S 2,4%, Mg,%, B,6%, Cu,2%, Mn,%, Mo,2%, Zn 1,%, Crono Orgânico Totl 12%)). UNIPAM, Ptos de Mins, 29. * Médis seguids pel mesm letr não diferem entre si pelo teste de Tukey % de proilidde de erro.