EXAMES COMPLEMENTARES Imunologia Clínica Prof Manuel Junior www.professormanueljunior.com Imunologia Clínica Setor do laboratório clínico que estuda os componentes do sistema imunológico Imuno-hematologia: Estuda exames correlacionados aos dois setores: Tipagem sanguínea, coombs direto e indireto Anticorpos x Antígenos Sistema Complemento Dosagens de Imunoglobulinas (anticorpos) SORO (NÃO É PLASMA!!!) SALIVA: apenas para IgA salivar, que reflete níveis de IgA secretora nas mucosas IMUNOGLOBULINAS Níveis anormais estão envolvidos com: - a resposta imune da imunidade humoral - Alguns tipos de câncer como linfomas e leucemias - Hepatopatias - Artrite reumatóide - Lúpus eritematoso sistêmico - Alergias e parasitas - Crianças até 1 ano: 200 a 1070mg/dL - Crianças de 1 a 12 anos: 340 a 1600mg/dL - Adultos: 844 a 1912mg/dL (Fonte: Laboratório Rhesus) Uso: Avaliação da imunidade humoral, monitoramento terapêutico de mielomas causados por IgG, macroglobulinas e alguns tipos de linfomas. Principal uso específico: Monitoramento/Diagnóstico de infecções/contato antigo Subclasses também são dosadas - Aumento: pacientes portadores de mieloma múltiplo, infecções ou processos inflamatórios crônicos Antígenos proteicos: aumentam IgG1 e IgG3 Antígenos polissacarídeos (membranas): aumentam IgG2 e IgG4 1
DOSAGEM NO LÍQUOR até 3,4 mg/dl Utilizada para avaliar o envolvimento do sistema nervoso central com infecções, neoplasia, ou doença neurológica primária (em particular, esclerose múltipla), porém níveis normais de IgG não excluem a doença Deve ser dosado em paralelo com o soro, pois pode ocorrer contaminação do material com soro durante a punção O teste de avidez de anticorpos é um exame laboratorial que permite estimar o período aproximado em que ocorreu a infecção por toxoplasmose ou rubéola Avidez é a força das ligações químicas na interação antígeno anticorpo Numa infecção primária os anticorpos apresentam baixa avidez, a medida que a resposta amadurece, os Ac aumentam sua avidez Avidez superior a 60% sugere que a infecção tenha ocorrido há mais de 3 meses e que anticorpos da classe IgM eventualmente presentes sejam residuais e provavelmente desprovidos de significado clínico. Avidez situada entre 36% e 60% não permite definir o período mais provável que a infecção tenha ocorrido. Em se tratando de gestantes, a variação deve levar em conta o tempo de gestação. Valores de avidez menores que 36% indicam infecção ocorrida há pelo menos 3 meses. IMUNOGLOBULINA IgM - Crianças até 1 ano: 25 a 150mg/dL - Crianças de 1 a 8 anos: 45 a 250mg/dL - Jovens: de 9 a 15 anos: 50 a 300mg/dL - Adultos: 55 a 300mg/dL (Fonte: Laboratório Rhesus) Uso:Avaliação da imunidade humoral, diagnóstico e acompanhamento de macroglobulinemia ou Mieloma Principal uso específico: Monitoramento/Diagnóstico de infecção/contato aguda 2
IMUNOGLOBULINA IgM - Aumento: Cirrose biliar, fatores reumatólogicos e outras doenças adquiridas ou congênitas IMUNOGLOBULINA IgM DOSAGEM NO SANGUE DO CORDÃO UMBILICAL até 4,5 mg/dl Utilizado no diagnóstico de infecções intrauterinas como toxoplasmose, citomegalia e rubéola. Nessas situações o nível de IgM é superior a 4,5 mg/dl IMUNOGLOBULINA IgD 0 a 40mg/dL (???) Níveis baixos não tem significado patológico Níveis elevados são encontrados em alguns casos de mieloma múltiplo, em infec agudas e crônicas, doenças auto-imunes, dermatites e fumantes IMUNOGLOBULINA IgA - Crianças até 1 ano: 2 a 90mg/dL - Crianças de 1 a 12 anos: 18 a 250mg/dL - Adultos: 68 a 423mg/dL (Fonte: Laboratório Rhesus) Uso:Diagnóstico de imunodeficiência congênita ou adquirida de IgA quando dosada no soro. Reflete níveis de IgA secretora nas mucosas, quando dosada na saliva. IMUNOGLOBULINA IgA Sua deficiência causa infecções de repetição por vírus e bactérias, principalmente em crianças. É extremamente raro o indivíduo apresentar IgA sérica normal com IgA secretora baixa ou ausente. IMUNOGLOBULINA IgE - Crianças até 1 ano: 0,1 a 15 IU/mL - Crianças de 1 a 2 anos:1 a 19 IU/mL - Crianças de 2 a 3 anos: 0,1 a 32 IU/mL - Crianças de 3 a 8 anos: 0,1 a 101 IU/mL - Jovens de 9 a 15 anos: 1,4 a 300 IU/mL - Adultos: 1 a 183 IU/mL (Fonte: Laboratório Rhesus) 3
IMUNOGLOBULINA IgE - diagnóstico de alergias mediadas por IgE (sistêmicas) como asma, rinite alérgica, urticária, alergia alimentar - doenças parasitárias IMUNOGLOBULINA IgE Os teste de IgE incluem o IgE total e específicos para alérgenos isolados ou em conjunto (múltiplo) IgE específico (códigos determinados): D. farinae (D2), veneno de abelha, alho, amendoim, carne de boi, leite de vaca, soja, pólem, bromélia, cacau, banana, Candida albicans, formiga, pêlo de cão, penas de galinha, penicilina, etc IMUNOGLOBULINA IgE IgE múltiplo: Ex1: epitélios, partículas e pêlos (gato, cavalo, boi e cachorro) EX71 penas: frango, ganso, pato, peru EX72 penas: periquito, canário, papagaio FX1: amendoim, avelã, nozes, amêndoa, côco FX2: Peixe, camarão, mexilhão, atum, salmão FX3: cereais (trigo, aveia, milho, gergelim)... Sistema Complemento Proteínas séricas inativas que recebem ativação podendo agir como enzimas, são produzidas pelos macrófagos no fígado Quando ativadas atuam principalmente como proteínas de fase aguda Funções: Marcação celular para fagocitose e atuação imunológica Imunologia Clínica Exame: Complemento total e frações As anormalidades de complemento podem ser genéticas ou adquiridas, sendo as adquiridas as mais comuns. Níveis deprimidos de complemento total formação excessiva de complexo antígeno-anticorpo síntese insuficiente de complemento formação de inibidor ou catabolismo aumentado de complemento são característicos em LES, glomerulonefrite pós estreptocóccica aguda. Os baixos níveis também podem ocorrer em pacientes com cirrose hepática avançada, mieloma múltiplo, hipogamaglobulinemia e rejeições 4
Níveis elevados de complemento total O complemento total elevado pode ocorrer icterícia obstrutiva, tireoidite, febre reumática aguda, artrite reumatóide, infarto agudo do miocárdio, colite ulcerativa, infecções, inflamações e diabetes. Dosagens de Antígenos Dosados no soro de acordo com a doença/antígeno pesquisado Ex.: Para suspeita de hepatite B, faz-se a dosagem de antígenos da hepatite B e respectivos anticorpos Alguns antígenos não são dosados, dosa-se os anticorpos. Ex. Herpes vírus: Anti Herpes IgM e IgG Hepatite A: Sorologias Anti HAV IgM: Anticorpo produzido contra proteínas do capsìdeo viral. Surge com os sintomas iniciais aumenta por 4 a 6 semanas e então declina gradualmente ate níveis indetectaveis em 3 a 6 meses. O achado de Anti-HAV IgM positivo é indicativo de infecção aguda. Anti HAV IgG: Anticorpos IgG específicos são detectáveis no soro na fase aguda ou convalescente precoce da infecção e permanece por toda vida. Promove a imunidade contra a hepatite A. Hepatite B: Sorologias HBsAg:Também conhecido como antígeno Austrália é um determinante antigênico encontrado na superfície do HVB. Aparece na corrente sanguínea de 2 a 6 semanas antes do inicio dos sintomas ou alterações O HBsAG esta presente tanto na fase aguda quanto na crônica Portadores que o mantém positivo por mais de 6 meses provavelmente permanecerão portadores e desenvolverão hepatite crônica. Hepatite B: Sorologias Anti-HBs:É detectado semanas após o desaparecimento do HBsAg. Pode persistir por muitos anos e depois cair ate níveis indetectaveis,porem não é indicador da cura da hepatite. O anti-hbs é o anticorpo que confere imunidades porém é especifico para cada subtipo isto é não confere proteção contra infecções futuras por subtipos diferentes do HVB. Hepatite B: Sorologias Anti-HBc:Refere-se a anticorpos contra antígenos do nucleocapsideo do HBV e se dividem em dois tipos: Anti-HBc IgM: Eleva-se e declina gradualmente em 6 ou 8 meses sem correlação com cura ou cronificação da doença. Cerca de 5% dos pacientes podem manter os níveis deste anticorpo baixo, assim a presença de anti HBc IgM significa infecção aguda ou recente. Anti-HBc IgG: Surge em torno da 8 semana de infecção e tipicamente persiste por toda a vida.este anticorpo não confere imunidade. 5
Hepatite B: Sorologias HBeAg: Surge na hepatite aguda logo após o HBsAg.È uma proteína do nucleocapsideo viral do HVB, produzida durante a replicação viral ativa cuja a função é desconhecida. A presença de HBeAg correlaciona-se com maior quantidade de vírus completos no sangue. Permanece positivo cerca de 3 a 6 semanas período em que a infecção possui alto risco de contaminação. Anti-HBe: É o primeiro sinal de recuperação. O aparecimento do anti-hbe indica redução do risco de contágio. Pacientes anti-hbe podem ser portadores crônicos, mas têm melhor evolução e menor risco de transmissão. Hepatite B: Biologia Molecular PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) Pode ser do tipo qualitativo ou quantitativo A pesquisa direta do DNA Viral é o marcador mais sensível na avaliação de infectividade e replicação viral em pacientes portadores crônicos. Útil no diagnóstico de infecção por cepas mutantes ou quando a sorologia é negativa (cerca de 90% dos casos de hepatite crônica de etiologia indeterminada apresentam PCR positivo para Hepatite B) Hepatite C: Sorologia Anti HCV: método enzimático que detecta a presença de anticorpo contra o vírus HCV Resultados falso positivos podem ocorrer em gestantes, vacinados contra gripe, pacientes com febre reumática e outras doenças Podem demorar 2 a 6 meses para serem detectados persistindo por anos Hepatite C: Biologia Molecular Genotipagem e PCR O HCV apresenta grande variabilidade genética, assim a genotipagem é feita para ver a qual subgrupo pertence o vírus do paciente, se mais grave ou mais brando O PCR é realizado para detectar o vírus, após um resultado sorológico positivo ou duvidoso Hepatite Delta: Sorologias Anti-HDV IgM:surgem anticorpos da classe IgM 5 a 7 semanas após o início da infecção Anti - HDV IgG: aparecem apenas na fase de convalescença em títulos baixos MARCADORES DAS HEPATITES A somente anticorpos, Anti HAV IgM e IgG B possui os antígenos c, e e s Ag e Anticorpo e antígeno (HBeAg e Anti HBe) Ag c anticorpos (Anti HBc IgM e IgG) Ag s anticorpo e antígeno (HBsAg e Anti HBs) Biologia Molecular: PCR C somente anticorpo (Anti HCV) Biologia molecular: Genotipagem e PCR D somente anticorpo (anti HDV IgM e IgG) 6
Metodologias Empregadas Aglutinação Hemaglutinação Imunofluorescência ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay) Radioimunoensaio OBRIGADO!!! www.professormanueljunior.com 7