Confirmação do HBsAg (Conf)

Manual do Ensaio Confirmação de HBsAg 1 / 12 Confirmação do HBsAg (Conf) Ensaio para a Confirmação Qualitativa do Antigénio de Superfície da Hepatite B Indica informação revisada Resumo do ensaio Tipo de amostra Volume da amostra Calibrador Soro, plasma EDTA, plasma com heparina de lítio de sódio, plasma com citrato 200 µl (2 x 100 µl) HBsAg Conteúdo Aplicação REF Conteúdo Número de testes 03393818 1 auxiliar ReadyPack contendo 100 Reagente de Confirmação de HBsAg A A 1 auxiliar ReadyPack contendo o Reagente de Confirmação de HBsAg B B Para uma definição dos símbolos utilizados na rotulagem dos produtos, consulte Para entender os símbolos no Apêndice D. O ensaio de confirmação HBsAg é um imunoensaio de diagnóstico in vitro para a confirmação qualitativa da presença do antigénio de superfície da hepatite B (HBsAg) no soro plasma humanos (plasma EDTA, plasma com heparina de lítio de sódio, plasma comcitrato) utilizando o sistema. O ensaio foi concebido para confirmar a presença de HBsAg em amostras que foram repetitivamente reactivas utilizando o ensaio HBsAg. Materiais necessários mas não fornecidos REF Descrição Conteúdo 03393362 Ensaio HBsAg (200 testes) 03394660 Material de controlo de qualidade HBsAg * 07948423 (110314) Multi-diluente 2 HBsAg 03395373 Líquido de lavagem de sondas auxiliares 1 1 primário ReadyPack contendo HBsAg de fase sólida e reagente auxiliar 1 auxiliar com HBsAg, reagente fluorescente Cartão de curva principal HBsAg Cartão de curva principal de confirmação HBsAg 1 frasco de calibrador baixo HBsAg 1 frasco de calibrador alto HBsAg Cartão de valor atribuído ao calibrador HBsAg Controlo positivo de 2 x 10,0 ml Controlo negativo de 2 x 10,0 ml Cartão do valor previsto 2 x 10 ml/ 2 embalagens auxiliar ReadyPack contendo 25 ml/ 04121900 Rev. E, 2005-12 Conf

Confirmação de HBsAg 2 / 12 Manual do Ensaio REF Descrição Conteúdo 2 x 1500 ml/ 01137199 (112351) * Apenas o controlo positivo pode ser processado no ensaio de confirmação HBsAg. Resumo e explicação do teste O ensaio de confirmação HBsAg baseia-se no princípio de neutralização de anticorpos específicos. A amostra é incubada com o anticorpo (humano) policlonal humano ao HBsAg. O anticorpo liga-se ao HBsAg presente na amostra neutralizando o antigénio. A ligação do HBsAg neutralizado aos anticorpos no ensaio é bloqueada. O bloqueio do HBsAg pelos anticorpos do ensaio resulta numa redução do sinal quando comparado com uma segunda alíquota de amostras incubada com um reagente de controlo não neutralizante. O reagente de controlo não neutralizante serve como um controlo para a neutralização assim como o 0% de linha de referência para o cálculo da quantidade de redução no sinal com % de neutralização. Uma amostra é considerada positiva para o HBsAg se a % de neutralização for 50% superior a seguir ao tratamento com o anticorpo (reagente neutralizante). Princípio do ensaio Líquido de lavagem 1 HBsAg O ensaio de confirmação de HBsAg utiliza o princípio de neutralização de anticorpos específicos para confirmar a presença de HBsAg numa amostra que é repetidamente considerada para o HBsAg. A amostra é sujeita a um pré-tratamento e testada paralelamente; uma alíquota de amostra é distribuída e incubada com um reagente neutralizante que contém doses elevadas de anti-hbs (Reagente A); a segunda alíquota de amostra é incubada com um reagente de controlo não neutralizante (Reagente B). O HBsAg na amostra do doente é ligado pelo anti-hbs no Reagente A e é permitido entre em reacção no ensaio HBsAg. Quando ambas as alíquotas forem processadas no ensaio HBsAg, a inibição do sinal de RLU na alíquota com o Reagente A é comparada ao sinal de RLU na alíquota com o Reagente B. A % de neutralização relativa é calculada e é gerada uma interpretação da amostra. O sistema efectua automaticamente os seguintes passos para o pré-tratamento da amostra: distribui 100 µl de amostras em cada uma das 2 cuvetes distribui 50 µl de Reagente A na primeira cuvete distribui 50 µl de Reagente B na segunda cuvete incuba durante 29 minutos a 37ºC No segundo passo do ensaio de confirmação, as amostras pré-tratadas são testadas de acordo com o princípio do ensaio HBsAg. Consulte o Princípio do ensaio nas instruções do HBsAg para utilização. Existe uma relação directa entre o volume de actividade do HBsAg presente na amostra do doente e a quantidade de unidades de luz relativa (RLUs) detectadas pelo sistema. A % de neutralização é calculada através da comparação dos valores de RLU obtidos com o Reagente A e dos valores obtidos com o reagente de controlo, o Reagente B. Se o valor de RLU com o Reagente B for inferior ao cutoff, o ensaio é considerado inválido. Consulte Interpretação dos resultados para uma descrição das interpretações do ensaio e do cálculo para a % de neutralização. Conf 04121900 Rev. E, 2005-12

Manual do Ensaio Confirmação de HBsAg 3 / 12 Recolha e manuseamento da amostra Reagentes Os tipos de amostra recomendados para este ensaio são o soro, plasma com EDTA, plasma com heparina de lítio de sódio, plasma com citrato. Não utilize amostras com contaminação microbiana evidente. O desempenho do ensaio HBsAg não foi determinado com sangue do cordão umbilical, amostras de sangue de recém-nascidos, amostras de sangue de cadáveres, amostras desactivadas por calor tros fluidos corporais para além do soro e do plasma, nomeadamente saliva, urina, líquido amniótico fluidos pleurais. As recomendações gerais que se seguem referentes ao manuseamento e armazenamento de amostras de sangue são fornecidas pelo National Committee for Clinical Laboratory Standards 1, e completadas com estudos adicionais sobre o manuseamento de amostras com a utilização do ensaio HBsAg : Manuseie todas as amostras como potenciais transmissores de doenças. As amostras são processadas através de centrifugação, normalmente seguida por uma separação física do soro plasma dos eritrócitos. A etapa de centrifugação pode ocorrer até 24 horas após a recolha. Ao testar 10 amostras nas quais a etapa de centrifugação vari até 24 horas após a recolha, não foram observadas diferenças clínicas significativas. Analise as amostras o mais rapidamente possível após a sua recolha. Armazene as amostras entre 2 e 8 C se não forem imediatamente analisadas. Armazene sempre as amostras vedadas e na vertical entre 2 e 8 C e até um máximo de 7 dias. Armazene os tubos de amostras primários entre 2 e 8 C até 7 dias. Mantenha sempre as amostras vedadas e na vertical. As amostras do tubo primário incluem soro armazenado coagulado, plasma armazenado em glóbulos vermelhos empacotados e amostras processadas e armazenadas em tubos de recolha de amostras com barreira de gel. Ao testar 10 amostras que permaneceram nestes tubos primários até 7 dias, não foram observadas diferenças clínicas significativas. Para um período de armazenamento mais longo, congele as amostras, isentas de eritrócitos, a uma temperatura de -20 C inferior. Não guarde as amostras num frigorífico com descongelamento automático. Após terem sido submetidas 10 amostras a 4 ciclos de congelamento/descongelamento, não foram observadas quaisquer diferenças clínicas significativas. Misture bem e centrifugue as amostras descongeladas antes de as utilizar. Embale e coloque as etiquetas nas amostras para envio de acordo com os regulamentos federais e internacionais aplicáveis respeitantes ao transporte de amostras clínicas e agentes etiológicos. As amostras mantidas à temperatura ambiente durante 2 dias arrefecidas durante 7 dias não demonstraram diferenças qualitativas. Armazene as amostras vedadas e na vertical entre 2 e 8 C após a sua chegada. Se o período de envio ultrapassar os 7 dias, envie as amostras congeladas. Antes de colocar as amostras no sistema, verifique o seguinte: As amostras não contêm fibrina nem tras partículas. Remova as partículas através da centrifugação. As amostras não contêm bolhas nem espuma. Armazene os reagentes na posição vertical, a uma temperatura entre 2 e 8 C. Agite manualmente todas as embalagens s primários antes de as colocar no sistema. Inspeccione visualmente a parte inferior da do reagente, para se certificar de que todas as partículas estão dispersas e em suspensão. Para obter informações detalhadas sobre a preparação dos reagentes, consulte o Apêndice C, Manuseamento s. 04121900 Rev. E, 2005-12 Conf

Confirmação de HBsAg 4 / 12 Manual do Ensaio reagente Reagente Volume Ingredientes reagentes auxiliares ReadyPack Conf A reagentes auxiliares ReadyPack Conf B reagentes auxiliares ReadyPack Conf 2 * reagentes auxiliares ReadyPack 1* Reagente neutralizante Reagente de controlo não neutralizante 5,0 ml/ 5,0 ml/ Multi-Diluente 2 10,0 ml/ Líquido de lavagem Fase sólida reagentes primários ReadyPack HBsAg * reagentes auxiliares ReadyPack HBsAg * Frascos do calibrador HBsAg* frascos de material de controlo de qualidade do ensaio HBsAg Auxiliar Reagente Reagente fluorescente Calibradores Controlos 25,0 ml/ 21,0 ml/ 5,0 ml/ 24,0 ml/ 3,0 ml/ frasco 10,0 ml/ frasco plasma humano positivo para anticorpos para o HBsAg com conservantes plasma humano negativo para o HBsAg e anticorpos para o HBsAg com conservantes Armazenamento 2 8 C 2 8 C soro caprino com azida 2 8 C sódica (0,1%) e conservantes 0,4 N de hidróxido de sódio partículas de látex magnéticas revestidas com estreptadivina tamponadas com albumina de sangue bovino, soro caprino, tensioactivo e azida sódica (< 0,1%) e conservantes Reagente de colina (~69,8 mg/ml) e partículas de látex não magnéticas tamponadas com azida sódica (< 0,1%) 2 8 C 2 8 C 2 8 C anticorpo monoclonal de 2 8 C rato biotinilado anti-hbsag (~1,0 µg/ml) e anti-hbsag monoclonal de rato marcado com éster de acridínio (~0,1 µg/ml) tamponado com albumina de sangue bovino, gamaglobulina bovina, soro caprino, IgG de rato, tensioactivo, azida sódica (< 0,1%) e conservantes calibrador alto: HBsAg 2 8 C humano purificado tamponado com azida sódica (< 0,1%) calibrador baixo: plasma humano normal processado com azida sódica (< 0,1%) plasma humano processado 2 8 C negativo e positivo para o HBsAg com conservantes Estabilidade rótulo da 41 dias consecutivos após a abertura da do reagente auxiliar rótulo da 41 dias consecutivos após a abertura da do reagente auxiliar rótulo da 28 dias consecutivos após a abertura da do reagente auxiliar rótulo da 14 dias consecutivos após a abertura da do reagente auxiliar rótulo da. Relativamente à estabilidade de utilização, consulte Estabilidade de utilização e intervalo de calibração. rótulo da. Para a estabilidade de utilização, consulte Estabilidade de utilização e intervalo de calibração. rótulo da. Para a estabilidade de utilização, consulte Estabilidade de utilização e intervalo de calibração. até à data de validade do frasco 8 horas de utilização até à data de validade do frasco 8 horas de utilização Conf 04121900 Rev. E, 2005-12

Manual do Ensaio Confirmação de HBsAg 5 / 12 reagente Reagente Volume Ingredientes 1* Líquido de lavagem 1 1500 ml/ Armazenamento salina tamponada de fosfato 2 25 C com azida sódica (< 0,1%) e tensioactivo Estabilidade até à data de validade do frasco 14 dias de utilização * Consulte Materiais necessários mas não fornecidos. Consulte Materiais necessários mas não fornecidos. Apenas o controlo positivo pode ser processado no ensaio de confirmação HBsAg. NOTA: A azida sódica pode reagir com o cobre e o chumbo existentes nas canalizações, formando azidas metálicas explosivas. Quando eliminar os reagentes, utilize água em abundância para evitar a acumulação de azidas. Certifique-se primeiro de que a eliminação destes materiais através da rede de esgotos cumpre a legislação em vigor. Para utilizar no diagnóstico in vitro. Carregar os reagentes PRECAUÇÃO! POTENCIAIS RISCOS BIOLÓGICOS: Alguns componentes deste produto contêm material de origem humana. Não existe qualquer método de ensaio conhecido que ofereça a segurança total de que os derivados do sangue humano não transmitam agentes infecciosos. Todos os produtos fabricados a partir de material de origem humana devem ser manuseados como potencialmente infecciosos. Manuseie este produto de acordo com as boas práticas de laboratório e com as precauções universais. 2-4 O controlo negativo e o calibrador baixo foram ensaiados através de métodos aprovados pela FDA e considerados não reactivos para o antigénio de superfície da hepatite B (HBsAg), o anticorpo para a hepatite C (VHC) e o anticorpo para VIH-1/2. O controlo positivo e o calibrador alto contêm plasma humano que é reactivo para o HBsAg. As unidades foram tratadas com um procedimento de inactivação de betapropiolactona - raios ultra-violeta; contudo, todos os produtos fabricados com o uso de material de origem humana devem ser manuseados como potencialmente infectantes. Certifique-se de que o sistema contém embalagens suficientes s primários e auxiliares. Para obter informações mais detalhadas sobre a preparação do sistema, consulte as instruções de funcionamento do sistema o sistema de ajuda online. PRECAUÇÃO: Agite manualmente todas as embalagens s primários antes de as colocar no sistema. Inspeccione visualmente a parte inferior da do reagente, para se certificar de que todas as partículas estão dispersas e em suspensão. Para obter informações detalhadas sobre a preparação dos reagentes, consulte o Apêndice C, Manuseamento de reagentes. NOTA: Para efectuar o ensaio de confirmação HBsAg, carregue as embalagens s primários ReadyPack HBsAg no compartimento s primários utilizando as setas das embalagens para as colocar correctamente. O sistema mistura automaticamente as embalagens dos reagentes primários para manter uma suspensão homogénea dos reagentes. Coloque o reagente fluorescente HBsAg, o Reagente A e o Reagente B de confirmação HBsAg, o Multi-diluente 2 e as embalagens s auxiliares Readypack do líquido de lavagem de sonda auxiliares 1 na entrada s auxiliares. Para informações detalhadas sobre como colocar os reagentes, consulte as instruções de funcionamento do sistema o sistema de ajuda online. PRECAUÇÃO: Os calibradores alto e baixo fornecidos no kit HBsAg são combinados com a s primários ReadyPack. Não misture lotes de calibradores com lotes diferentes de embalagens s. PRECAUÇÃO: A s auxiliares Readypack do reagente fluorescente fornecida no no kit HBsAg é combinada com a fase sólida e o reagente auxiliar. Não misture os lotes auxiliar com lotes diferentes de fase sólida e de reagente auxiliar. 04121900 Rev. E, 2005-12 Conf

Confirmação de HBsAg 6 / 12 Manual do Ensaio Estabilidade de utilização e intervalo de calibração e Calibração da curva principal Calibração Uma vez que o ensaio de confirmação HBsAg utiliza as embalagens de reagentes primários HBsAg, consulte Estabilidade de utilização e intervalo de calibração e Calibração da curva principal nas instruções para a utilização do HBsAg ADVIA Centaur. O cartão de curva principal de confirmação HBsAg está incluído no kit HBsAg. Calibre o ensaio de confirmação do HbsAg sempre que o ensaio HBsAg for calibrado. O Reagente A e o Reagente B de confirmação HBsAg possuem uma estabilidade de utilização de 41 dias com um intervalo de calibração de 21 dias. Para informações detalhadas sobre a introdução dos valores de calibração, consulte as instruções de funcionamento do sistema o sistema de ajuda online. Certifique-se que as calibrações para os ensaios HBsAg e Confirmação HBsAg estão completas antes de analisar amostras pelo ensaio de Confirmação HBsAg. O Reagente A e o Reagente B do ensaio de Confirmação HBsAg serão calibrados com os Calibradores Alto e Baixo. Para a calibração do ensaio de confirmação do HBsAg, utilize os Calibradores HBsAg fornecidos com cada kit de HBsAg. Os calibradores fornecidos com este kit são combinados com a s primários ReadyPack. Utilizar as etiquetas de código de barras NOTA: As etiquetas de códigos de barras são específicas do número do lote. Não utilize etiquetas de códigos de barras de um lote de calibradores com qualquer tro lote de calibradores. Utilize as etiquetas de código de barras do calibrador HBsAg para identificar os copos de amostras do calibrador baixo e do calibrador alto ao executar o ensaio de confirmação do HBsAg. Coloque a etiqueta de código de barras no copo da amostra de forma a que os caracteres legíveis na parte lateral da etiqueta fiquem na vertical no copo da amostra. Efectuar uma calibração Cada lote de calibradores contém um cartão de valores atribuídos aos calibradores para facilitar a introdução dos valores de calibração no sistema. Introduza os valores utilizando um leitor de código de barras o teclado. Para informações detalhadas sobre a introdução dos valores do calibrador, consulte as instruções de funcionamento do sistema o sistema de ajuda online. NOTA: Este procedimento utiliza suficientes volumes do calibrador para medir cada calibrador em duplicado tanto para o Reagente A como para o Reagente B. 1. Programe os calibradores na lista de trabalho para o teste de confirmação do HBsAg. 2. Coloque etiquetas de códigos de barras dos calibradores em dois copos de amostras: um para o calibrador baixo e tro para o calibrador alto. NOTA: Cada gota do frasco do calibrador tem aproximadamente 50 µl. 3. Misture suavemente os calibradores baixo e alto e distribua pelo menos 10 a 12 gotas nos copos de amostras adequados. 4. Coloque os copos de amostras num suporte. 5. Coloque o suporte na fila de entrada das amostras. 6. Certifique-se de que todos os reagentes para o ensaio estão carregados. Conf 04121900 Rev. E, 2005-12

Manual do Ensaio Confirmação de HBsAg 7 / 12 7. Inicie a fila de entrada, se necessário. NOTA: Elimine qualquer quantidade de calibrador que permaneça nos copos das amostras durante mais de 8 horas. Não encha novamente os copos das amostras quando o conteúdo se tiver esgotado; se necessário, distribua calibradores novos. Controlo de qualidade Para o controlo de qualidade do ensaio de confirmação do HBsAg, utilize o material de controlo de qualidade positivo do HBsAg. O controlo positivo deve ser programado da mesma forma que uma amostra repetidamente reactiva. O ADVIA Centaur processa uma alíquota de controlo positivo com Reagente A e uma alíquota de controlo positivo com Reagente B. Para o processamento ser válido, a % de neutralização para o controlo positivo deve ser superior igual a 50% e deve ser obtido um resultado de confirmado. Relativamente ao ensaio de confirmação do HBsAg, o não irá controlar a neutralização o resultado da interpretação do controlo positivo. Tem de ser utilizado um método alternativo para controlar o controlo. Efectuar um controlo de qualidade Para monitorizar o desempenho do sistema, as amostras de controlo de qualidade devem ser ensaiadas em cada turno em que as amostras foram analisadas. Trate todas as amostras de controlo da qualidade da mesma forma que as amostras dos doentes. NOTA: Este procedimento utiliza suficientes volumes do controlo para medir o controlo positivo em duplicado. 1. Programe a amostra de controlo de qualidade positivo como amostra de doente na lista de trabalho. NOTA: O não permitirá a utilização do SID do controlo positivo do HBsAg. Tem de ser utilizado um tro SID. 2. Coloque uma etiqueta num copo de amostra PARA EFEITOS DE IDENTIFICAÇÃO. Não utilize as etiquetas de códigos de barras fornecidas com os controlos. NOTA: Cada gota do frasco do controlo tem aproximadamente 50 µl. 3. Misture suavemente o material de controlo de qualidade e deite pelo menos 8 a 10 gotas no copo de amostra adequado. 4. Coloque o copo de amostra num suporte. 5. Coloque o suporte na fila de entrada das amostras. 6. Certifique-se de que todos os reagentes para o ensaio estão carregados. 7. Inicie a fila de entrada, se necessário. NOTA: Elimine qualquer material de controlo da qualidade que permaneça no copo da amostra durante mais de 8 horas. Não encha novamente o copo da amostra quando o conteúdo se tiver esgotado; se necessário, distribua material de controlo de qualidade novo. Efectuar uma acção correctiva Se os resultados do controlo de qualidade não produzirem 50% de neutralização faça o seguinte: considere os resultados da amostra inválidos e repita o teste reveja estas instruções para se certificar de que este ensaio foi efectuado de acordo com os procedimentos recomendados pela Bayer HealthCare 04121900 Rev. E, 2005-12 Conf

Confirmação de HBsAg 8 / 12 Manual do Ensaio verifique se a validade dos materiais não expir verifique se a manutenção necessária foi efectuada se necessário, contacte a Bayer HealthCare para mais assistência Volume da amostra Este ensaio requer 200 µl de amostra para uma única determinação. Este volume não inclui o volume não utilizável no recipiente da amostra o volume adicional necessário ao efectuar duplicados tros testes na mesma amostra. Para informações detalhadas sobre o volume mínimo necessário, consulte Requisitos do volume da amostra no Manual de referência. Procedimento do ensaio Para informações detalhadas sobre os procedimentos, consulte as instruções de funcionamento do sistema o sistema de ajuda online. PRECAUÇÃO: Não coloque mais do que um tamanho do recipiente da amostra em cada suporte. O indicador do suporte deve estar colocado no posicionamento correcto para o tamanho do recipiente da amostra. 1. Prepare o recipiente da amostra para cada amostra e coloque etiquetas de códigos de barras nos recipientes das amostras, como necessário. 2. Carregue cada recipiente da amostra num rack e certifique-se de que as etiquetas do código de barras estão visíveis. 3. Coloque os suportes na fila de entrada. 4. Certifique-se de que todos os reagentes para o ensaio estão carregados. 5. Inicie a fila de entrada, se necessário. Notas sobre procedimentos Eliminação A eliminação de material perigoso biologicamente contaminado deve ser efectuada de acordo com as práticas da sua instituição. Elimine todos os materiais de uma forma segura e aceitável e em conformidade com todos os requisitos locais. Interpretação dos resultados Para obter informações detalhadas sobre a forma como o sistema calcula os resultados, consulte as instruções de funcionamento do sistema o sistema de ajuda online. O sistema calcula automaticamente o cutoff e a % de neutralização com base na calibração do ensaio de confirmação HBsAg e os valores obtidos para o processamento da amostra com o Reagente A e o Reagente B. NOTA: O cutoff baseia-se nos valores de RLU dos calibradores e não no Valor de índice HBsAg (Valor de índice = 1,0). Isto é assim para que o cutoff possa ser ajustado de forma a permitir a diluição da amostra com o Reagente A e o Reagente B. O sistema regista os valores do ensaio de confirmação HBsAg como Inválidos, Rediluídos, Não confirmados Confirmados. As amostras são registadas como Inválidas se o processamento da amostra com o Reagente B for inferior ao valor do cutoff do ensaio de confirmação HBsAg. O ensaio é inválido e deve ser repetido. Se a interpretação for Inválido Conf 04121900 Rev. E, 2005-12

Manual do Ensaio Confirmação de HBsAg 9 / 12 depois de repetir o teste, isso significa que não pode ser obtido um resultado válido com esta amostra e deve ser obtida uma nova amostra. As amostras registadas como Rediluídas requerem uma diluição posterior para confirmação. As amostras registadas como Não confirmadas são negativas para o HBsAg. As amostras registadas como Confirmadas são positivas para o HBsAg. Consulte o seguinte algoritmo de teste para a interpretação de amostras repetidamente reactivas: Limitações O ensaio de confirmação HBsAg limita-se à confirmação do HBsAg no soro plasma humanos (plasma com EDTA, plasma heparinizado com lítio sódio plasma com citrato) em amostras repetidamente reactivas utilizando o ensaio HBsAg. Para fins de diagnóstico e para fazer a distinção entre a infecção aguda e crónica pelo VHB, a detecção do HBsAg deve ser correlacionada com as informações clínicas do doente e tros marcadores serológicos do VHB. Reconhece-se que os métodos actualmente disponíveis para a detecção do antigénio de superfície da hepatite B podem não detectar todos os indivíduos potencialmente infectados. Um resultado de teste HBsAg não reactivo não exclui a possibilidade de exposição à hepatite B de infecção com hepatite B. 04121900 Rev. E, 2005-12 Conf

Confirmação de HBsAg 10 / 12 Manual do Ensaio As características de desempenho do ensaio ainda não foram estabelecidas para o teste de recém-nascidos. O desempenho do ensaio de confirmação HBsAg não foi determinado com sangue do cordão umbilical, amostras sanguíneas de recém-nascidos, amostras sanguíneas de cadáveres, amostras desactivadas por calor tros fluidos corporais para além do soro do plasma tais como saliva, urina, líquido amniótico fluidos pleurais. O desempenho do ensaio não foi estabelecido para populações de doentes hospedeiros imunodeprimidos imunodeficientes. Não utilize amostras com contaminação microbiana evidente. Os anticorpos heterofílicos no soro humano podem reagir com imunoglobinas e interferir com os imunoensaios in vitro. 5 Os doentes expostos frequentemente a animais a produtos de soro animal podem ter tendência para esta interferência e podem ser observados valores anómalos. Poderá ser necessária informação adicional para o diagnóstico. As amostras que contêm anticorpos heterofílicos não devem neutralizar através do ensaio de confirmação HBsAg. Características de desempenho Comparação do método Foi avaliado um total de 483 amostras positivas de VHB de indivíduos naturalmente infectados através do ensaio de confirmação HBsAg em dois locais de ensaios clínicos externos. Os teste foi efectuado de acordo as instruções de utilização. 481 das amostras testadas como reactivas através do método de referência também foram consideradas reactivas com o ensaio HBsAg. Os resultados da confirmação mostraram 100% das amostras naturalmente infectadas pelo HBV, as amostras repetidamente reactivas do HBsAg confirmadas através do método de confirmação HBsAg. Para além disso, o método de confirmação HBsAg não confirm 5 amostras falso positivas encontradas durante a avaliação do HBsAg. Percentagem confirmada (Locais 1 e 2 Combinados) Ensaio HBsAg (200 testes) Grupo de doentes Número testado Número confirmado (%) infectados pelo VHB 442 442/442 (100%) infectados pelo VHB (limite de "cutoff" positivo) 20 20/20 (100%) infectados pelo VHB (altamente positivo: > 50 ng) 21 21/21 (100%) Falso positivo (HBsAg não confirmado) 5 0/5 (0%) % Confirmada = 100,00%, 95% Intervalo de confiança (IC) = 99,24% 100,00% Distribuição da diluição para amostras positivas (Locais 1 e 2 combinados) Resultados Número testado % da população Total de amostras infectadas pelo VHB 483 Não diluídas confirmadas 321 321/483 (66,5%) Confirmadas com 1:50 de diluição 152 152/483 (31,5%) Confirmadas com 1:2500 de diluição 10 10/483 (2,0%) Conf 04121900 Rev. E, 2005-12

Manual do Ensaio Confirmação de HBsAg 11 / 12 Painel de desempenho de doses baixas O desempenho de doses baixas foi avaliado através de um painel de desempenho de doses baixas comercialmente disponível num do locais de ensaios clínicos externos. Todas as amostras positivas foram confirmadas como positivas conforme indicado na tabela que se segue: Assistência técnica Referências Membro Número de identificação (Índice) 80631705 2,25 Confirmado (101,6%) 80631706 3,87 Confirmado (101,4%) 80631707 9,99 Confirmado (100,6%) 80631708 8,19 Confirmado (100,1%) 80631709 3,12 Confirmado (89,3%) 80631710 13,95 Confirmado (100,1%) 80631711 < 0,10 Inválido 80631712 11,95 Confirmado (90,2%) 80631713 9,22 Confirmado (98,9%) 80631714 9,80 Confirmado (100,3%) 80631715 6,11 Confirmado (102,3%) 80631716 3,35 Confirmado (100,9%) 80631717 10,44 Confirmado (100,8%) 80631718 14,69 Confirmado (100,7%) 80631719 13,81 Confirmado (99,4%) Interpretação de confirmação do HBsAg Para serviços de atendimento ao cliente, contacte o seu distribuidor fornecedor de assistência técnica. 1. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for handling and processing of blood specimens; second edition; approved guideline. NCCLS Document H18-A2; Wayne (PA):NCCLS;1999 Oct. 40p. 2. Centers for Disease Control. Update: Universal precautions for prevention of transmission of human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR 1988;37:377-82, 387-8. 3. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections-second edition; approved guideline. NCCLS Document M29-A2. Wayne (PA):NCCLS; 2001 Dec. 105p. 4. Federal Occupational Safety and Health Administration, Bloodborne Pathogens Standard, 29 CFR 1910.1030. 5. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34:27 33. A denominação Bayer, a Cruz Bayer,, e ReadyPack são marcas comerciais da Bayer. 2003 Bayer HealthCare LLC. Todos os direitos reservados. US Pats 4,745,181; 4,918,192; 5,110,932; 5,656,426; 5,609,822; 5,788,928 04121900 Rev. E, 2005-12 Conf

Confirmação de HBsAg 12 / 12 Manual do Ensaio Conf 04121900 Rev. E, 2005-12