2. Aplicabilidade: Bioquímicos/biomédicos do setor de imunologia
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- Maria Clara Fialho Lancastre
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1 1. Sinonímia: BHCG qualitativo, GCH 2. Aplicabilidade: Bioquímicos/biomédicos do setor de imunologia 3. Aplicação clínica Teste qualitativo indicado para a triagem imunológica do beta-gch em soro, plasma ou urina. Detecta níveis da fração beta-gch a partir de 10 UI/L pelo método imunocromatográfico. O GCH, Gonadotrofina Coriônica Humana, é um hormônio glicoproteico constituído por subunidades alfa e beta, produzido pelas células trofoblásticas da placenta após a implantação do blastocisto (ou em casos de tumores trofoblásticos ou de próstata). A fração beta é imunoespecífica, e não se encontra presente em outros hormônios, como o caso da fração alfa. A pesquisa do GCH no soro ou urina é utilizada principalmente como auxiliar no diagnóstico precoce da gestação (no presente caso ao redor de 7 dias após a concepção). Outra utilização para a pesquisa imunológica do betagch é como auxiliar no diagnóstico de tumores trofoblásticos ou tumores de testículo. Na gestação, o pico máximo de beta-gch ocorre ao final do primeiro trimestre, quando chega a atingir entre a UI/L e, portanto, o GCH Teste Strip não irá detectar o hormônio devido a ocorrência do fenômeno da prozona. Assim, na ocorrência de gestação, o beta-gch irá sendo liberado em quantidades gradativamente mais elevadas até poder ser detectado pela metodologia analítica. A presença de beta-gch é indicativa de gestação, porém, não indica a viabilidade da 1
2 mesma, não se devendo, portanto confundir a presença de baixos níveis de beta-gch eventualmente detectados como falso positivo. 4. Princípio do teste Teste imunocromatográfico que utiliza partículas coradas, ligadas a um anticorpo monoclonal anti-beta-gch. O beta-gch, se presente na amostra em quantidade suficiente, reage com o anticorpo ligado e migra através da membrana de nitrocelulose. Este complexo irá reagir com o anticorpo de captura policlonal, formando outro complexo que se tornará evidente com o aparecimento de uma faixa horizontal colorida na área teste (faixa inferior), indicando assim um resultado positivo, isto é, presença de beta- GCH em concentração igual ou superior a 25 UI/L. Sempre deverá aparecer uma faixa horizontal colorida na área controle (faixa superior) independente da amostra conter ou não beta-gch em concentração detectável. Esta faixa serve para fins de controle de qualidade de cada tira reagente. O não surgimento da faixa controle significa que os reagentes estão inativos ou que o produto não foi corretamente utilizado, e em alguns casos, altas concentrações do hormônio que precedem a ocorrência da prozona. Tanto na área teste como na área controle, a intensidade da coloração das faixas pode variar conforme a concentração de beta-gch. Por se tratar de teste com leitura visual, em amostras com teores de beta- GCH próximos a 25 UI/L pode surgir uma faixa de teste com baixa intensidade de coloração. 2
3 5. Equipamentos 6. Calibração 7. Amostra Soro, plasma e urina 8. Reagentes e materiais GCH Teste Strip: tiras de nitrocelulose impregnadas com anticorpo monoclonal anti-beta-gch ligado a partículas coradas e anticorpo de captura policlonal anti-beta-gch; Pipetas; Ponteiras. 9. Procedimento: Aguardar que os reagentes e as amostras atinjam a temperatura ambiente; Colocar a amostra em um tubo ou recipiente apropriado de forma que a tira possa atingir o nível indicado ao ser imersa; Remover a tira reativa de seu invólucro protetor (no momento do uso) e imergir a mesma verticalmente no tubo ou recipiente contendo a amostra até atingir a marca indicada; tiras imersas acima do nível indicado induzem resultado falso negativo devido à não migração da amostra com o 3
4 conjugado e se imersas abaixo do nível indicado podem impedir a migração da amostra através da fita; Aguardar o tempo necessário para que a amostra percorra a membrana (normalmente entre 1-2 minutos); Retirar a tira do recipiente, colocar sob uma superfície plana e seca, e aguardar entre 3 a 15 minutos para realizar a leitura. 10. Controle de qualidade Interno Não temos no momento Externo Mensalmente são analisadas amostras do Programa Nacional de Controle de Qualidade. Estas devem ser reconstituídas conforme orientação da bula que acompanha a amostra. Os resultados são inseridos no site do programa e após a análise da coordenadoria do programa, são liberados através de conceitos (Bom, Aceitável ou Inaceitável). Para os resultados com conceito Inaceitável, os bioquímicos/biomédicos devem realizar uma análise crítica de todas as etapas do processo. 11. Resultados Inferior a 25 UI/L (negativo) Superior a 25 UI/L (positivo) 4
5 11.1. Unidades UI/L Cálculos 12. Bibliografia Manual do kit Laborclin. Manual de exames Laboratório Álvaro. 13. Anexos Revisado por Data da revisão Alterações Próxima revisão Dezembro/2017 5
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