PERDA DE PESO EM RATOS ALIMENTADOS COM RAÇÃO HIPERCALÓRICA E TRATADOS COM O FITOTERÁPICO PHOLIANEGRA.
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- Rafael Barroso Álvares
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2 PERDA DE PESO EM RATOS ALIMENTADOS COM RAÇÃO HIPERCALÓRICA E TRATADOS COM O FITOTERÁPICO PHOLIANEGRA. Bernardi, M.M.; Spinosa, H.S; Ricci, E.L; Reis-Silva, M; Silva, A.C., Dalmolin, D.P. Departamento de Patologia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo. Resumo O objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos da administração prolongada do fitoterápico PHOLIANEGRA a ratos, machos e fêmeas, alimentados com ração hipercalórica. Para tanto os animais foram alimentados no primeiro mês do experimento com ração hipercalórica. No segundo mês os ratos receberam, per os, o fitoterápico ou água (grupo controle), sendo alimentados com ração normal. O peso corporal dos animais foi avaliado no início e final da administração da dieta hipercalórica e ao final da administração do fitoterápico ou água. Calculou-se a porcentagem de ganho de peso e o delta de perda de peso in vivo (DPP) dos ratos ao final dos tratamentos. Os resultados indicaram em relação aos ratos machos e fêmeas do grupo controle, houve redução significante no ganho de peso dos ratos machos e fêmeas tratados com o fitoterápico. O DPP para machos e fêmeas mostrou que o fitoterápico foi efetivo em promover perda de peso significante em ratos machos e fêmeas previamente alimentados com ração hipercalórica. Palavras chaves: Fitoterápico, emagrecimento, obesidade, PHOLIANEGRA Introdução A incidência de sobrepeso e obesidade vem aumentando em todo mundo, sendo considerada uma epidemia mundial. A obesidade reduz a qualidade de vida e aumenta o gasto público com pacientes porque está intimamente relacionada com doenças crônicas tais como diabetes e câncer (Calle et al.,2003; Kopelman, 2000).Para a Organização Mundial da Saúde (OMS) a relação do peso (quilograma- Kg) pelo quadrado da altura (em metrom), denominada como Índice de Massa Corpórea (IMC), é um bom indicador do estado nutricional de uma pessoa. Pessoas com IMC maior ou igual a 25 Kg/m2 são classificadas como pessoas com sobrepeso e aquelas com IMC maior ou igual a 30KG/m2 são consideradas obesas (OMS, 2004). A Fitoterapia constitui, na atualidade, uma área do mercado em desenvolvimento, de reconhecimento legal e com repercussão na saúde publica. Uma das justificativas para esse crescimento do consumo é que mais pessoas tenham o desejo de retornar a uma forma mais natural de vida e há uma convicção crescente de que cada produto natural é saudável e seguro. Os avanços no conhecimento técnico - cientifico das características de qualidade, segurança e eficácia, inerentes aos medicamentos a base de plantas, nos últimos anos, tem colocado a área de produtos naturais bioativos, em posição de grande destaque. Devido a fatores como o alto custo dos medicamentos e de seus efeitos colaterais dos anorexígenos alopáticos, a procura por produtos
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4 naturais utilizando plantas com ação emagrecedora estão cada vez mais sendo empregados pela população. Produto fitoterápico é todo medicamento manufaturado obtido exclusivamente de matériasprimas ativas vegetais, com a finalidade de interagir com meios biológicos, a fim de diagnosticar, suprimir, reduzir ou prevenir estados e manifestações patológicas, com benefício para o usuário (legislação Portaria nº 123, de 19 de outubro de 1994) A PHOLIANEGRA é um extrato produzido com material de partida das partes com alta concentração de ativos da planta Ilex sp. de origem indígena, mas também encontrada nas florestas da America do Sul, sendo que a PHOLIANEGRA é oriunda de cultivares exclusivos com altíssimo rigor e controle da produção para otimizar um extrato seco padronizado de alta concentração e balanceamento de seus marcadores ativos alem de protegido por tecnologia proprietária conhecida como X tract Vetorized para estender sua vida útil. Este extrato padronizado esta cadastrado na ANVISA sob o numero PHOLIANEGRA / Esta planta contém entre seus fitoquímicos as metilxantinas e saponinas responsáveis por sua propriedade de perda de peso. Contém também o cafeiol, ácido cafeico e clorogênicos, além de um elevado valor de ORAC, que lhe confere propriedades antioxidantes e antiglicantes (Gugliucci,1996). O seu efeito metabólico é o de estimular o sistema nervoso central (Ito et al, 1997). Os derivados de cafeiol são apontados como os responsáveis pela capacidade antioxidante do extrato (Filip et al., 2001), assim como as saponinas são ditas responsáveis pelo sabor amargo do extrato. Além disso, às saponinas são atribuídas propriedades antiinflamatórias e hipocolesterolêmicas (Gnoatto et al., 2005). Em relação aos flavonóides, o extrato de Ilex P. é considerado um potente inibidor de radicais livres (Schinella et al, 2005), tendo seu efeito reconhecido tanto in vitro (Gugliucci, 1996) quanto in vivo (Mosimann, 2006). Observou-se que a Ilex P., reduz os níveis de colesterol e a gordura abdominal (Pedroso et al, 2010). O mecanismo de desaceleração do esvaziamento gástrico e consequente saciedade precoce foi proposto por Andersen & Fogh (2001). Assim, neste trabalho investigou-se exclusivamente a perda de peso produzida pela administração prolongada do fitoterápico PHOLIANEGRA em ratos, machos e fêmeas, alimentados com ração hipercalórica. Calculou-se a perda de peso por meio de um índice- o delta de perda de peso (DPP)- que permite fácil visualização e percepção dos efeitos dos fitoterápicos. Material e métodos Foram utilizados ratos adultos da linhagem Wistar, sendo que as fêmeas pesavam entre g e os machos entre g no início dos experimentos. Estes animais foram obtidos do biotério do Departamento de Patologia (VPT) da Faculdade de Medicina Veterinária (FMVZ) - Universidade de São Paulo (USP), por meio de cruzamentos sucessivos. Os ratos foram alojados em
5 gaiolas de polipropileno(38x32x16) mantidas em uma sala com temperatura controlada por meio de aparelhos de ar condicionado (20 ± 2oC), umidade (65-70%) e com ciclo de controlado (ciclo de 12 hs com luz ligada as 6:00h). A maravalha e gaiolas foram esterilizadas e serviram como cama dos animais. Água filtrada e comida (Nuvital, Nuvita Co, São Paulo, Brasil) foram fornecidas ad libitum aos animais durante todo procedimento experimental. Os ratos deste estudo foram mantidos de acordo com as orientações do the Committee on Care and Use of Laboratory Animal Resources of the School of Veterinary Medicine, University of São Paulo, Brazil. Fitoterápico Foi empregada a seguinte apresentação manipulada: - Capsulas com 150mg de PHOLIANEGRA + excipientes: 30mg Manitol, 0,75mg Aerosil, 1,5mg Estearato de Magnésio, Celulose/Talco (1:1).. qsp.. 100% As capsulas foram manipuladas nos laboratórios da Pharmacopeia CIL (Brasil), para uso experimental exclusivo deste ensaio via oral, 1 capsula, duas vezes ao dia (08:00 e 17:00). As capsulas de gelatina dura utilizadas foram produzidas com pullulan para proteger o extrato e aumentar seu shelf-life. Delineamento experimental Quarenta ratos, vinte machos e vinte fêmeas foram divididos em quatro grupos iguais, sendo dois deles (1 de machos e outro de fêmeas) denominados de grupos controles tratados com 1,0 ml/kg de água. Os demais grupos formaram os dois grupos que receberam o fitoterápico (1 de machos e 1 de fêmeas). No início dos experimentos todos os ratos foram pesados e durante 1 mês receberam ração hipercalórica ad libitum. Ao final deste mês, os ratos machos e fêmeas foram pesados novamente e a ração foi substituída pela ração normal do biotério. Neste dia iniciou-se o tratamento com a PHOLIANEGRA e o veículo (água) que perdurou por mais um mês. Os ratos de todos grupos foram pesados a cada 2 dias até o final dos experimentos. Durante o tratamento com os fitoterápicos não foram observados sinais de toxicidade como pelos arrepiados, cianose, depressão, morte, etc. Calculou-se a porcentagem de perda de peso semanal e a total dos diferentes grupos. Calculou-se também o delta de perda de peso in vivo pela diferença de ganho de peso dos respectivos grupos controle e experimentais e apresentados em porcentagem. Resultados. O ganho de peso semanal dos ratos machos e fêmeas durante o tratamento com a PHOLIANEGRA e após o termino da administração da ração hipercalórica podem ser vistos na fig.1. A análise estatística indicou diferenças significantes entre os grupos. Nota-se que em machos os fitoterápicos promoveram redução no ganho de peso ou mesmo perda de peso o qual foi mais evidente na medida que o tratamento prosseguiu. No caso das fêmeas observa-se, com relação ao grupo controle, perda de peso significante
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7 a partir da segunda semana de tratamento com o tratamento com a PHOLIANEGRA. A fig.2 ilustra o ganho de peso total e o DPP de ratos alimentados com ração hipercalórica por um mês, tratados ou não com o fitoterápico PHOLIANEGRA. Nota-se que o ganho de peso de tanto dos machos como de fêmeas foi reduzido significantemente com relação aos animais do grupo controle ao final do experimento (Fig.2 A). Os valores de DPP para machos foi de 5,35 % e para fêmeas de 10,35% (Fig.2 B). Ganho de peso (g) S1 * * S2 Machos S3 * * S4 Ganho de peso (g) porcentagem Controle PHOLIANEGRA A B 5 0 * * Machos Fêmeas DELTA DE PERDA DE PESO IN VIVO Machos Fêmeas Controle PHOLIANEGRA. -1 Semanas Ganho de peso (g) S1 S2 Fêmeas * * * S3 Semanas Fig.1 Ganho de peso semanal (g) de ratos alimentados com ração hipercalórica por um mês, tratados ou não com o fitoterápico PHOLIANEGRA. Os dados são apresentados em delta de peso a cada semana após a ingesta com ração hipercalórica. S- semana após ingesta com ração hipercalórica. * p< 0,05 em relação ao grupo controle alimentado com ração hipercalórica que recebeu apenas água. ANOVA de uma via seguida pelo teste de Duncan S4 Fig.2. [A] Ganho de peso total de ratos alimentados com ração hipercalórica por um mês, tratados ou não com o fitoterápico PHOLIANEGRA Os dados de perda de peso total são apresentados como o delta de peso inicial menos o final após a ingesta com ração hipercalórica. * p< 0,05 em relação ao grupo controle alimentado com ração hipercalórica que recebeu apenas água. ANOVA de uma via seguida pelo teste de Duncan. [B] Delta de perda de peso in vivo (DPP) dos ratos ao final dos tratamentos. Notase que o DPP de fêmeas foi maior que daqueles dos ratos machos, indicando que o fitoterápico é mais efetivo em fêmeas. Discussão Os presentes resultados indicam que fitoterápico PHOLIANEGRA é efetivo em reduzir o peso corporal dos ratos machos e fêmeas. Estes animais foram mantidos com alimentação hipercalórica durante um mês com a finalidade de o
8 induzir situações de sobrepeso em humanos. Após o término da alimentação hipercalórica, iniciaram-se os tratamentos com o fitoterápico para comparação dos ganhos/perdas de peso destes animais com o grupo controle, tratado apenas com água. Empregaram-se ratos fêmeas e machos, pois é fato conhecido que existem diferenças sexualmente dimórficas no metabolismo de fármacos. A análise do ganho de peso semanal dos ratos mostrou que ratos machos apresentam redução no ganho de peso nas duas primeira semanas de tratamento verificando-se perda de peso nas duas semanas finais de tratamento. Nas fêmeas na primeira semana de tratamento não houve diferença no ganho de peso entre os animais do grupo controle e experimental, porém a partir da segunda semana verifica-se perda de peso acentuada com relação ao grupo controle. Com relação ao ganho de peso total, observa-se que, aparentemente, a redução de peso foi maior nos ratos machos em relação ao grupo de fêmeas tratadas com os fitoterápicos (fig.2a). No entanto, machos tem maior peso e consomem maior quantidade de ração que fêmeas, fato que pode levar a estas diferenças levando-se em conta apenas a perda de peso corporal. Assim, com a finalidade de eliminar este viés criou-se um índice o delta de perda de peso in vivo- DPP, que leva em conta estas diferenças. Neste sentido, verifica-se que as fêmeas apresentaram um DPP bem maior que os machos, sendo que nestas o tratamento com a PHOLIANEGRA foi bem mais efetivo. Desta forma, o fitoterápico PHOLIANEGRA utilizado para o controle de peso, pode ser classificado de acordo com o seu DPP (delta de perda de peso in vivo) conforme tabela abaixo: 3-7: EFICAZ 8 acima: EXCELENTE Tabela de DPP no fitoterápico estudado PHOLIANEGRA DPP FEMEAS 10,35 DPP MACHOS 5,35 Conclusões O tratamento com o fitoterápico PHOLIANEGRA reduziu de forma significante o peso corporal de ratos machos e fêmeas com sobrepeso quando comparados ao grupo controle. Estes tratamentos foram mais efetivos em fêmeas do que em machos expresso por um DPP maior nas fêmeas. Este relatório apresenta os dados obtidos de estudo experimental executado sob a responsabilidade da Farmacologista Prof. Dra. Maria Martha Bernardi, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo, sob a aprovação da Fundação desta Faculdade janeiro, Bibliografia Andersen, T.; Fogh, J Weight loss and delayed gastric emptying following a South American herbal preparation in overweight patients. J Hum Nutr Diet. 14:
9 Calle, E.E.; Rodriguez, C; Walker-Thurmond, K. ;Thun M.J Overweight, obesity, and mortality from cancer in a prospectively studied cohort of U.S. adults. N Engl J Med, 348: Filip R.; López P. ; Giberti, G.; Coussio, J.; Ferraro, G Phenolic compounds in seven South American Ilex species. Fitoterapia, 72: Gnoatto, S.C.; Schenkel, E.P.; Bassani, V.L HPLC method assay total saponins in Ilex paraguariensis aqueous extract. J Braz Chem Soc. 16: Gugliucci,A Antioxidant effects of Ilex paraguariensis:induction of decreased oxidability of human LDL in vivo. Biochem Biophys Res Commun.224: Ito, E. ; Crozier, A.; Ashihara, H Theophylline metabolism in higher plants. Biochim Biophys Acta, 1336: Kopelman, P. G Physiopathology of prolactin secretion in obesity. International Journal of Obesity and Related Metabolic Disorders, 24(Sup. 2): S104-S108. Mosimann,A.L; Wilhelm-Filho,D.; da Silva, E.L Aqueous extract of Ilex paraguariensis attenuates the progression of atherosclerosis in cholesterol fed rabbits. Biofactors.26: OMS- Organização Mundial de Saúde. Obesidade: prevenindo e controlando a epidemia global. Relatório da Consultadoria da OMS, Genebra, (2004).. Pedroso,G.L.; Mendes,R.H.; Persch,K.; Jahn, M.P.; Kucharski, L.C Efeito do extrato aquoso de Ilex paraguariensis sobre o metabolismo de ratos machos.rev HCP., 30: Schinella, G.; Fantinelli, J.C.; Mosca, S.M Cardioprotective effects of Ilex paraguariensis extract: evidence for a nitric oxide-dependent mechanism.clin Nutr. 24:
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Introdução. Resumo. O objetivo deste trabalho foi investigar os
PERDA DE PESO EM RATOS ALIMENTADOS COM RAÇÃO HIPERCALÓRICA E TRATADOS COM O FITOTERÁPICO PHOLIANEGRA, COMPARADO COM O MEDICAMENTO SIBUTRAMINA (ETAPA II). Bernardi, M.M.; Spinosa, H.S; Ricci, E.L; Reis-Silva,
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