TÍTULO: IMUNOMARCAÇÃO DE COX-2 DE MODELO CARCINOGÊNESE MAMARIA POR INDUÇÃO QUÍMICA
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1 TÍTULO: IMUNOMARCAÇÃO DE COX-2 DE MODELO CARCINOGÊNESE MAMARIA POR INDUÇÃO QUÍMICA CATEGORIA: EM ANDAMENTO ÁREA: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E SAÚDE SUBÁREA: FARMÁCIA INSTITUIÇÃO: FACULDADE DE JAGUARIÚNA AUTOR(ES): TATIANA MIRA DO COUTO ORIENTADOR(ES): ANDRÉ LISBOA RENNO COLABORADOR(ES): RAQUEL MEDEIROS E OTAVIO
2 Resumo: A mama é um dos principais órgãos do corpo humano onde não são totalmente desenvolvidos após o nascimento, desenvolve-se decorrente ao longo da vida por diferentes modificações.sabe-se que este órgão sofre mutações podendo desenvolver um câncer mamário onde é a neoplasia mais diagnosticada no mundo entre as mulheres. Esta neoplasia depende de vários fatores biológicos e moleculares e há evidencias da expressão de COX-2 em tumorais mamários havendo dificuldades nas estratégias terapêuticas promovendo a importância de se estudar o câncer de mama. Assim buscou por meio da metodologia o objetivo de avalia-se a expressão da Cox-2 em modelos de carcinoma mamário, gerado por indução química com DMBA em ratas Sprague-Dawley virgens com 40 dias de vida na dose 100mg/kg de peso vivo diluída em 1 ml de óleo de soja e administrada intragastricamente por gavagem.de acordo com este método obteve-se resultados preliminares cm media de 4 tumores desenvolvidos por animal sendo estes encontrados bilateralmente. A média do volume tumoral foi de 3,74 cm 3. Os subtipos histológicos encontrados foram predominantes de carcinoma ductais, tumor filoide e carcinoma papelífero. A imunomarcação da COX-2 foi predominante citoplasmática e nuclear e foi expressa apenas em tecidos de carcinoma ductal. A COX-2 foi expressa em 64,04% das células cancerígenas. INTRODUÇÃO Inúmeros casos de câncer de mama independente do subtipo histológico, possuem resistência aos tratamentos clássicos como imunoglobulinas, quimioterapia, radioterapia e inibidores de receptores hormonais (MARTIN et al, 2014). Atualmente, novas opções terapêuticas vêm se destacando, como o uso de inibidores da ciclooxigenase (COX-2) (e.g. aspirina) e mais recentemente com drogas que diminuem o metabolismo como a metformina (HOLMES et al, 2012). A fisiopatologia do câncer de mama depende de vários fatores biológicos e moleculares e há evidencias da expressão de COX-2 em tumorais mamários, sendo esta enzima responsável pela produção de prostaglandinas (MOSALPURIA, et al., 2014). Pelo método de imunohistoquímica foi possível detectar e avaliar a expressão de COX-2 em tumores mamários, sendo que a expressão desta enzima correlaciona-se com piores prognósticos, volume tumoral, proliferação celular e metástase linfática (Sun et al; 2014). Em alguns estudos realizados a COX-2 apresenta promovendo a carcinogênese da proliferação de tumores, angiogênese, imunossupressão e
3 prevenção de apoptose onde vem sido associada a comportamentos tumoral e prognósticos em diversos tipos de câncer (HOLMES et al, 2011). Em geral, também pode ser observado em vários modelos experimentais em animais com tumores, que a inibição da atividade de COX-2 é associada a uma demanda de produção de novos vasos sanguíneos tumoral aumentando o tumor e obtendo-se uma apoptose celular (ZHI-JUN DAI, 2012). OBJETIVOS O projeto tem como objetivo avaliar a expressão da COX-2 em modelo de carcinoma mamário gerado por indução química com DMBA em ratas Sprague-Dawley. METODOLOGIA Ratas Sprague-Dawley virgens com 40 dias foram tratadas com de 7,12 dimetilbenz- (a)-antraceno (DMBA), na dose 100mg/kg de peso vivo diluída em 1 ml de óleo de soja e administrada intragastricamente por gavagem (n=4) (Comitê de ética: CEUA-IB). Após o desenvolvimento macroscópico da neoplasia mamaria foi medido aproximadamente 1 cm de largura e comprimento, os animais foram analisados clinicamente durante 15 dias consecutivos. Os tumores foram medidos com um auxílio de um paquímetro digital, sendo o volume calculado segundo à formula: V=Comprimento x Largura x Altura x π /6 e por final submetidos a necropsia completa e a cortes histológicos em imersão a formalina 10% por 24 horas,os tecidos foram submetidos a processamento histológico automatizado e inclusão a parafina. Foram realizado imuno-histoquímica de COX-2, utilizando anticorpos policlonais na diluição de 1:100. Para a quantificação da imuno-marcação, foram analisadas 6 campos de médio aumento por lâmina (200x), contando número de células positivas e negativas. DESENVOLVIMENTO O câncer de mama permanece sendo a neoplasia mais frequente diagnosticada entre as mulheres. Em diversas neoplasias há expressão da COX-2 com evidencias que esta enzima está ligada com a fisiopatologia do câncer. A COX-2 também pode ser um importante biomarcador auxiliando no diagnóstico, já que sua expressão está ligada a um pior prognóstico. Com isso, torna-se a COX-2 um possível alvo terapêutico (HOLMES et al, 2012). Para o estudo do câncer, modelos in vivo vêm
4 sendo utilizados já que podem fornecer dados sobre fisiopatologia, diagnóstico e da farmacologia anti-neoplásica. O modelo de carcinogênese mamária por indução química com o DMBA pode fornecer informações sobre a função da COX-2 em neoplasias mamárias. RESULTADOS PRELIMINARES A média de tumores desenvolvidos foi de 4 tumores por animal sendo estes encontrados bilateralmente. A média do volume tumoral foi de 3,74 cm 3. Os subtipos histológicos encontrados foram predominantes de carcinoma ductais, tumor filoide e carcinoma papelífero. A imunomarcação da COX-2 foi predominante citoplasmática e nuclear e foi expressa apenas em tecidos de carcinoma ductal. A COX-2 foi expressa em 64,04% das células cancerígenas. Figura 01: Expressão de Cox-2 53% Quantificação positiva; 80% Quantificação Negativa. Fontes Consultadas HOLMES, M. D. et al. Breast Cancer Res Treat. Author manuscript. PMC 2012 Nov HOLMES, M. D. et al. COX-2 expression predicts worse breast cancer prognosis and does not modify the association with aspirin. Breast Cancer Res Treat. November ; 130(2): LAVILDSEN, R et al. Evidence for a stem cellhierarchy in the adult human breast. The journal of cell Biology. 2007,177: MARTIN, HL et al. Multidrug-resistant breast cancer: current perspectives. Breast cancer: Targets and trerapy. 6: MOSALPURIA, K et al. Cyclooxygenase 2 expression in non metastatic SUN L, et al.; Expressions of ER, PR, HER-2, COX-2, and VEGF in primary and relapsed/metastatic breast cancers; Cell Biochem Biophys. Apr triple negative breast cancer patients. MOLECULAR AND CLINICAL ONCOLOGY 2: ZHI-JUN DAI et al. Antitumor activity of the selective cyclooxygenase-2 inhibitor, celecoxib, on breast cancer in Vitro and in Vivo; Cancer Cell International
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Revista Intellectus N 35 Vol
IMUNOMARCAÇÃO DE COX-2 EM MODELO DE CARCINOGÊNESE MAMÁRIA POR INDUÇÃO QUÍMICA Immunostaining of COX-2 in Model of Breast Carcinogenesis by Chemical Induction COUTO,Tatiana Mira Faculdade de Jaguariúna
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