IV Simpósio de Ciências da UNESP Dracena. V Encontro de Zootecnia Unesp Dracena

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1 ESTRATÉGIAS UTRICIO AIS PARA REDUZIR A MORTALIDADE EMBRIO ÁRIA DURA TE O PERÍODO CRÍTICO EM FÊMEAS BOVI AS - REVISÃO DE ARTIGOS Rita Cristina Rossetti 1, Mariana Soares Peres 2, Antônio Chaves Assis eto 3, Flávia Thomaz Verechia Pereira 4, Claudia Bertan 5 1 Graduanda de Mestrado em Ciência Animal - UNESP/Araçatuba. rcristinar@dracena.unesp.br 2 Graduanda do Curso de Zootecnia - UNESP/Dracena. marianaperes@zootecnista.com.br 3 Prof. Dr. Assistente - UNESP/Dracena. antonioassis@dracena.unesp.br 4 Profa. Dra. Assistente - UNESP/Dracena. fverechia@dracena.unesp.br 5 Profa. Dra. Assistente - UNESP/Dracena. cbertan@dracena.unesp.br RESUMO Em fêmeas bovinas a mortalidade embrionária, ocasionada entre 15 e 19 dias de gestação, determina perdas de 30 a 40% nas taxas de concepção. Durante tal período, considerado como crítico para a gestação, moléculas sintetizadas pelo concepto devem inibir a síntese de prostaglandina F2α (PGF2α), fundamental para o estabelecimento da gestação. Falhas neste processo causam 30 a 40% de mortalidade embrionária. Para reduzir tais perdas, foram desenvolvidas estratégias que se baseiam na inibição da síntese de PGF2α, através de componentes incorporados à dieta. Uma possível estratégia refere-se ao fornecimento de compostos ricos em ácido linoléico. A incorporação de tais componentes na suplementação alimentar determina um diferenciado pool de lipídios nas células endometriais, característica que ocasiona uma restrição na síntese de PGF2α. Dois outros lipídios com atividade inibidora da síntese de PGF2α são os ácidos eicosapentanóico (20:5n-3) e docosahexanóico (22:6n-3), encontrados em peixes que habitam águas geladas. Ambos apresentam ação inibidora à enzima cicloxigenase 2 (COX-2), enzima fundamental para a síntese de PGF2α. Esta revisão objetiva apresentar as estratégias nutricionais que foram propostas até o momento para reduzir a mortalidade embrionária durante o período crítico em fêmeas bovinas. Palavras-Chave: Ácido Docosahexanóico, Ácido Eicosapentanóico, Ácido Linoléico, Mortalidade Embrionária, PGF2α. ABSTRACT In females the bovine embryo mortality, caused between 15 and 19 days of pregnancy, provides losses of 30 to 40% in the rates of conception. During that period, seen as critical for pregnancy, molecules synthesized by the concept should inhibit the synthesis of prostaglandin F2α (PGF2α), which is fundamental to the establishment of pregnancy. Failure in this process causes 30 to 40% of embryonic mortality. To reduce such losses strategies have been developed through embedded components based on the inhibition of synthesis of PGF2α, through incorporated components in the diet. One possible strategy is the provision of compounds rich in linoleic acid. The incorporation of such components in supplementary feeding provides a differentiated "pool" of lipids in endometrial cells, a characteristic that causes a restriction in the synthesis of PGF2α. Two other lipids inhibitory activity with the

2 synthesis of PGF2α are eicosapentanóico acids (20:5 n-3) and docosahexanóico (22:6 n-3), found in fish that inhabit the icy water. Both have inhibitory action on the enzyme cyclooxygenase 2 (COX-2), enzyme essential for the synthesis of PGF2α. This review aims to present the nutrition strategies that have been proposed so far to reduce embryo mortality during the critical period in female cattle. Keywords: Docosahexanóico Acid, Eicosapentanóico Acid, Linoléico Acid, Mortality Embrionária, PGF2α. I TRODUÇÃO Em fêmeas bovinas, o período crítico do ciclo estral ocorre 15 a 19 dias após a ovulação, momento em que o estado fisiológico reprodutivo da fêmea deve ser definido para a manutenção do corpo lúteo e prenhez ou desencadeamento da luteólise para a ocorrência de um novo estro. A luteólise é desencadeada pela ocorrência de cinco a oito pulsos de PGF2α liberados pelo endométrio durante um período de 48 a 72 horas, compreendido entre o período crítico. Durante tal período, considerado como crítico para a gestação, moléculas sintetizadas pelo concepto devem inibir a síntese de prostaglandina F2α (PGF2α), fundamental ao estabelecimento da gestação. Falhas neste processo causam 30 a 40% de mortalidade embrionária. Para reduzir tais perdas, foram desenvolvidas estratégias que se baseiam na inibição da síntese de PGF2α, através de componentes incorporados à dieta. Esta revisão objetiva apresentar as estratégias nutricionais que foram propostas até o momento para reduzir a mortalidade embrionária durante o período crítico em fêmeas bovinas. DESE VOLVIME TO As prostaglandinas são compostos eicosanóides bioativos, derivados de ácidos graxos com 20 carbonos. O ácido araquidônico, estocado na membrana fosfolipídica, é o precursor primário das prostaglandinas. A síntese de PGF2α nas células endometriais resulta de uma complexa cascata de eventos intracelulares altamente coordenados. Esta cascata envolve a ativação seqüencial da proteína acopladora da guanosina trifosfato (proteína G) que promove a ativação da fosfolipase C (PLC) 3. A PLC ao ser ativada cliva o fosfatidil inositol bifosfato em inositol trifosfato (IP 3 ) e diacilglicerol (DAG). O IP 3 se liga a receptores no retículo endoplasmático, promovendo um aumento das concentrações de cálcio no citoplasma. O DAG ativa uma serina/treonina da proteína quinase C (PKC), também dependente de cálcio para sua ativação 1. A PKC ativada, fosforila a fosfolipase A 2 (PLA 2 ). O aumento de cálcio no citosol, induzido pelo IP 3, age estimulando a atividade da PLA 2, de fato dependente de cálcio. A PLA 2 é uma enzima que cliva preferencialmente na posição sn-2 da fosfatidilcolina e assim promove a liberação AA da membrana plasmática 5. A seguir o AA livre, por ação da enzima ciclooxigenase 2 (COX-2), é convertido a prostaglandina H 2 (PGH 2 ). Finalmente a PGH 2, pela ação da PGF sintase (PGFS), é convertida a PGF2α. A mudança do estado cíclico para o estado prenhe depende de efetivo de bloqueio da luteólise. A prenhez é estabelecida somente quando o concepto torna-se suficientemente competente para enviar os sinais antiluteolíticos apropriados e o endométrio e este responde a tais sinais, bloqueando a produção de PGF2α. Constituintes específicos da dieta podem ter efeito direto sobre o endométrio uterino, promovendo a sobrevivência embrionária. O ácido

3 linoléico foi identificado como um inibidor da síntese de PGF2α. Portanto, uma possível estratégia para se reduzir a produção de PGF2α é a administração, através da dieta, de compostos ricos em ácido linoléico. Wilkins et al. 13 alimentaram vacas de corte com uma dieta de caroço de algodão descascado, tratado com formol. Tal dieta era rica em ácido linoléico protegido, que escapa à bioidrogenação no rúmen. Vacas controle receberam farinha de caroço de algodão peletizada. As taxas de concepção foram maiores para as vacas que receberam a dieta rica em ácido linoléico no primeiro (61% vs. 46%) e segundo estro (71% vs. 56%). Contudo, Hemádez Ceron et al. 6 e Galvão et al. 4 verificaram que o gossipol encontrado no caroço de algodão é tóxico aos embriões, pois menores taxas de concepção foram verificadas depois do primeiro serviço, e maiores índices de abortamento quando as vacas foram alimentadas com dietas contendo 10% de mistura de caroço de algodão. Em vacas leiteiras, Santos et al. 10 obtiveram maiores taxas de prenhez quando administraram o ácido linoléico incorporado aos sais de cálcio. Em estudo realizado na Califórnia com 397 vacas, Juchem et al. 7 observaram que o grupo alimentado com dieta contendo 2% (em base de matéria seca) de sais de cálcio de uma mistura de gorduras rica em ácido linoléico e ácidos monoenóicos tendeu (P<0,09) a uma maior taxa de prenhez ao primeiro serviço (34%) que as vacas alimentadas com uma dieta contendo 2% de sais de cálcio de óleo de palma (26%). Diversos estudos indicam que o fornecimento de dietas ricas em ácidos graxos insaturados pode aumentar a taxa de concepção. Ambrose et al. 2 observaram que o fornecimento de dieta suplementada com linhaça tendeu (P<0,07) a resultar em taxas de concepção mais elevadas ao primeiro serviço se comparado a dieta suplementada com sementes de girassol. As taxas de concepção aos 32 dias depois da inseminação foram 48% para o grupo que recebeu linhaça e 32% para o grupo alimentado com óleo de semente de girassol. Não houve efeito do tratamento sobre a taxa de concepção no segundo serviço. Dois outros lipídios com atividade inibidora da enzima COX-2 são os ácidos eicosapentanóico (20:5n-3) e docosahexanóico (22:6n-3; Thatcher et al. 12, Mattos et al. 9 ), ambos encontrados em alguns tipos de peixe de águas geladas. Tais lipídios foram descritos com atividade inibidora da enzima COX-2. Thatcher et al. 11 alimentaram vacas Holandesas não lactantes com farinha de peixe do Manhaden por 25 dias e mediram as concentrações plasmáticas de um pico de PGFM (um metábolito da PGF2α facilmente mensurável na corrente sangüínea) induzido pela administração de estradiol seguido de ocitocina no 15 o dia do ciclo estral. A farinha de peixe do Manhaden inibiu o pico de PGFM causado pelo estradiol e pela ocitocina em comparação com a dieta controle, que não continha a farinha de peixe. Tais resultados foram confirmados por Mattos et al. 8, para vacas em lactação. CO CLUSÃO Conclui-se que o controle os ingredientes da dieta possibilita uma manipulação no pool de lipídios da membrana das células endometriais, condição que restringe a possibilidade de síntese da PGF2α, característica fisiológica que favorece a sobrevivência embrionária durante o período crítico.

4 REFERE CIAS BIBLIOGRÁFICAS 1 ALBERTS, B.; BRAY, D.; LEWIS, J.; RAFF, M.; ROBERTS, K.; WATSON, J. D. Biologia Molecular da Célula. 3. ed. Porto Alegre: Artes Médicas, p. 2 AMBROSE, D.J., J.P. KASTELIC, R. CORBETT, P.A. PITNEY, H.V. PETIT, J.A. SMALL, and P. ZALKOVIC. Lower pregnancy losses in lactating dairy cows fed a diet enriched in α- linolenic acid. J. Dairy Sci. 89; , BURNS, P. D.; GRAF, G. A.; HAYES, S. H.; SILVIA, W. J. Cellular mechanisms by which oxytocin stimulates uterine PGF2α alpha synthesis in bovine endometrium: roles of phospholipases C and A 2. Domestic Animal Endocrinology, v. 14, n. 3, p , GALVAO, K. N.; SANTOS, J. E.; COSCIONI, A.C.; JUCHEM, S. O.; CHEBEL, R. C.; CHEBEL, W. M.; SEISCHO, M. V. Embryo survival from gossypol-fed heifers after transfer to lactating cows treated with human chorionic gonadotropin. J. Dairy Sci. v.89, p , GIJON, M. A.; LESLIE, C. C. Regulation of arachidonic acid release and cytosolic phospholipase A 2 activation. Journal of Leukocites Biology, v. 65, p , HEMADEZ, C.; JOUSAN, F. D.; SOTO, P.; HANSEN, P. J. Timing of inhibitory actions of gossypol on cultural bovine embryos. J.Dairy Sci. v.89, p , JUCHEM, S.O., R.L.A. CERRI, R. BRUNO, G. N. GALVÃO, E.W. LEMOS, M. VILLASENOR, A.C. COSCIONI, H.M. RUTGLIANO, W.W. THATCHER, D. LUCHINI, and J.E.P. SANTOS. Effect of feeding Ca salts of palm oil (PO) or a blend of linoleic and monoenoic trans fatty acids (LTFA) on uterine involution and reproductive performance in Holstein cows. J. Dairy Sci. 87 (Suppl 1); 310 (abstr.) MATTOS, R., STAPLES, C.R., WILLIAMS, J., AMOROCHO, A., MCGUIRE, M.A., THATCHER, W.W. Uterine, ovarian, and production responses of lactating dairy cows to increasing dietary concentrations of Menhaden fish meal.j. Dairy Sci., v.85, p , MATTOS, R.; GUZELOGLU, A.; BADINGA, L.; STAPLES, C. R.; TATCHER, W. W. Polynsaturated fatty acids and bovine interferon-tau modify phorbol ester-induced secretion of prostaglandin F2 alpha and expression of prostaglandin endoperoxide synthase-2 and phospholipase-a2 in bovine endometrial cells. Biology of Reproduction, v. 69, p , SANTOS, J. E. P.; TATCHER, W. W.; CHEBEL, R. C.; CERRI, R. L. A.; GALVAO, K. N. The effect embryonic death rates in cattle on the efficacy os estrous synchronization progrms. Anim. Reprod. Sci. v.82-83, p , THATCHER, W. W.; BINELLI, M.; BURKE, J.; STAPLES, C.R.; AMBROSE, J. D.; COELHO, S. Antiluteolytic signl between the conceptus and endometium. Theriogenology, v.47, p , THATCHER, W. W.; GUZELOGLU, A.; MATTOS, R.; BINELLI, M.; HANSEN, T. R.; PRU, J. K. Uterine-conceptus interactions and reproductive failure in cattle. Theriogenology, v.56, p , 2001.

5 13 WILKINS, J. F.; HOFFMAN, W. D.; LARSSON, S. K.; HAMILTON, B. A.; HENNESSY, D. W.; HILLARD, M. A. Protected lipid/protein supplement improves synchony of oestrus and conception rate in beef cows. In:INTERNATIONAL CONGRESS IN ANIMAL REPRODUCTION, 13 th, 1996, Sydney, Australia, Anais p

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