NODULAÇÃO E DESENVOLVIMENTO INICIAL DE CULTIVARES DE SOJA EM FUNÇÃO DA INOCULAÇÃO, CO-INOCULAÇÃO E MICRONUTRIENTES

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1 NODULAÇÃO E DESENVOLVIMENTO INICIAL DE CULTIVARES DE SOJA EM FUNÇÃO DA INOCULAÇÃO, CO-INOCULAÇÃO E MICRONUTRIENTES NODULATION AND INITIAL DEVELOPMENT OF SOYBEAN CULTIVARS DEPENDING ON THE INOCULATION, CO- INOCULATION AND MICRONUTRIENTS Paloma Helena da Silva Libório (1) Ivana Marino Bárbaro-Torneli (2) Sandra Helena Unêda-Trevisoli (3) Fábio Olivieri de Nóbile (4) Fernando Bergantini Miguel (2) Fabiana Mota da Silva (5) Resumo Objetivou-se avaliar a nodulação e parâmetros de crescimento em cultivares de soja submetidas a inoculação e co-inoculação com diferentes tipos de bactérias, bem como sua relação com a aplicação ou não de micronutrientes. Os experimentos foram conduzidos em vasos com solo de área experimental já cultivado com soja, em casa de vegetação da APTA, Pólo Regional da Alta Mogiana, Colina, SP. O delineamento foi de blocos casualizados, em esquema fatorial 4x4x2 que consistiu da avaliação de 4 cultivares, 4 tipos de bactérias, na ausência ou presença de micronutrientes nas sementes com quatro repetições. As avaliações foram realizadas com quantificação da germinação, número e a massa seca de nódulos, comprimento da parte aérea e radicular, massa seca da parte aérea e radicular. As cultivares de soja exibiram comportamento diferenciado quanto a nodulação, sendo 5D634RR e NS7338 IPRO mais responsivas quando submetidas a co-inoculação. A. brasilense promoveu incrementos em termos de matéria seca de raiz e parte área. De modo geral, a aplicação de micronutrientes nas sementes foi prejudicial as bactérias. Palavras-chave: Bactéria diazotrófica. Genótipos. Glycine max. L. Interação Abstract This study aimed to evaluate the nodulation and growth parameters in soybean cultivars submitted to inoculation and co-inoculation with different types of bacteria as well as its relation to the application or not of micronutrients. The experiments were conducted in pots in a greenhouse belonging to APTA, Regional Pole High Mogiana, Colina-SP in the summer of 2015 in a randomized block design, in 4x4x2 factorial scheme which consisted of the evaluation of 4 cultivars, 4 types of bacteria in the absence or presence of micronutrients in seeds with four replications. The evaluations were performed to quantify germination, the number and mass of nodules, length of root and shoot, dry weight of root and shoot. Genotypes evaluated soybean showed different responses, and cultivating 5D634RR IPRO and NS7338 were more responsive nodulation treatment involving the co-inoculation. (1) Graduanda do curso de Agronomia do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos- SP, UNIFEB (2) paloma_liborio@hotmail.com; Pesquisadores Científicos da APTA/SAA- Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios, Polo Regional de Desenvolvimento Tecnológico da Alta Mogiana, Colina- SP; (3) Professora Unesp - FCAV Jaboticabal-SP; (4) Professor do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos- SP, UNIFEB, (5) Pós doutoranda em Genética e Melhoramento de Plantas - Unesp/FCAV Jaboticabal-SP.

2 A. brasilense promoted increments of dry matter of root and part area. The seeds application of micronutrients was harmful bacteria. Keywords: Diazotrophic bacteria. Genotypes. Glycine max. L. Interaction. 1. Introdução Pesquisas têm reportado uma nova tecnologia para soja denominada de co-inoculação, que consiste em adicionar mais de um microrganismo reconhecidamente benéfico as plantas visando maximizar a contribuição dos mesmos. Assim, combina uma prática já bem conhecida pelos produtores que consiste na inoculação de soja com bactérias do gênero Bradyrhizobium, com o uso do Azospirillum, uma bactéria até então conhecida por sua ação promotora de crescimento em gramíneas (BÁRBARO et al., 2011; HUNGRIA et al. 2013). Diante do exposto, objetivou-se analisar, os efeitos da interação de cultivares de soja, tipos de bactérias envolvidas na inoculação tradicional e co-inoculação, com a aplicação ou não de micronutrientes no desenvolvimento inicial (nodulação e parâmetros de crescimento) de plântulas cultivadas em vasos em casa de vegetação. 2. Material e Métodos Os experimentos foram instalados em vasos com solo de área experimental já cultivado com soja, em condições de casa de vegetação, na APTA, Pólo Regional da Alta Mogiana (PRDTA-AM), em Colina, SP, no verão de Os tratamentos constituíram da combinação de quatro cultivares: Brasmax Flecha IPRO, BMX Pôtencia RR, 5D634RR e NS 7338 IPRO, com quatro tipos de bactérias [Testemunha, Bradyrhizobium (inoculação tradicional), Azospirillum e Bradyrhizobium + Azospirillum (co-inoculação) e a aplicação ou não de micronutrientes cobalto e molibdênio nas sementes. A parcela experimental foi de um vaso com 30 sementes, desbastando-se para 16 plântulas e, após 8 plântulas finais, para as avaliações aos 8 e 32 dias, respectivamente. O delineamento foi em blocos casualizados com quatro repetições em esquema fatorial 4x4x2. Para o tratamento das sementes, foram utilizados inoculantes comerciais com Bradyrhizobium e para gramíneas com Azospirillum brasilense, nas doses recomendadas pelo fabricante. Na co-inoculação, utilizou-se metade da dose de ambos os inoculantes. A aplicação do produto contendo 1,5% de Co e 15% de Mo foi realizada antes da inoculação na dose de 100mL.ha -1, sendo que as sementes já vieram tratadas com mistura pronta de inseticida/fungicidas. Os vasos receberam adubação N-P-K com fórmula nas doses

3 calculadas conforme o laudo de análise química do solo. Ressalta-se ainda, que o solo apresentava elevado número de bactérias nodulantes de soja, estimado em 2,14x10 7 unidades formadoras de colônias por grama de solo, pois foram realizadas as contagens das mesmas antes da semeadura. Foram avaliados aos 5 e 8 dias após a semeadura (DAS) a % de germinação (G5 e G8), comprimento de raízes (CR8 e CR32), parte aéreas (CPA8 e CPA32) em cm e massa seca de parte aéreas (MSPA8 e MSPA32) e de raízes (MSR8 e MSPA32) em g.planta -1 aos 8 e 32 DAS. O número de nódulos (NNOD32) em unidade planta -1 e a massa seca de nódulos (MSNNOD32) em mg.planta -1 foram avaliados somente aos 32 DAS. Para as variáveis que não apresentaram homogeneidade das variâncias e/ou normalidade dos erros, efetuou-se a transformação dos dados e em seguida, realizou-se a análise de variância pelo teste F para verificar os efeitos isolados (independentes) e/ ou combinados (interação) nas variáveis consideradas, sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. 3. Resultados e Discussão Considerando os efeitos dos fatores isolados, no fator (A) cultivares e (C) micronutrientes foram detectadas significância estatística para quase todos os parâmetros com exceção da MSNNOD32 para A e CR 8, MSR 32 e MSNNOD32 para C. Para o fator (B) tipos de bactérias, foram significativos apenas os parâmetros: MSPA8, NNOD32 e MSNNOD32. No desdobramento da interação (A) cultivares x (B) bactérias, a cultivar Brasmax Flecha IPRO teve melhor desempenho quanto a MSPA8 e MSR32 nos diferentes tipos de bactérias analisadas. Para NNOD32 e CPA32, melhores respostas foram obtidas quando a cultivar BMX Potência RR foi submetida a inoculação tradicional (Bradyrhizobium) e coinoculação (Bradyrhizobium + Azospirillum), respectivamente. A cultivar 5D634RR destacou-se com resultados superiores de G5 e CPA8 na testemunha e inoculação tradicional, NNOD32 nas inoculações isoladas com Bradyrhizobium e Azospirillum, MSR8 na coinoculação e MSPA8 quando submetida a inoculação tradicional, bem como, a co-inoculação. Já a NS7338 IPRO em MSR8 na inoculação com Azospirillum e maior nodulação na coinoculação (Tabela 1). Os resultados do presente trabalho corroboram com a literatura que reporta que a co-inoculação promove a potencialização da nodulação e maior crescimento radicular em soja, pela capacidade de A. brasilense em produzir fitohormônios que são

4 responsáveis pelo maior desenvolvimento do sistema radicular com possibilidade de exploração de um volume mais amplo de solo (FERLINI, 2006; BÁRBARO et al., 2011). TABELA 1 - Desdobramento da interação (A) cultivares x (B) bactérias em parâmetros de nodulação e crescimento inicial de soja em vasos. APTA. Verão de Cultivares (A) Tipos de Bactérias (B) Testemunha Bradyrhizobium Azospirillum Brady +Azos F % Germinação aos 5 dias após semeadura (G5) Brasmax Flecha IPRO 18,93Ab 26,79Aab 18,93Aa 17,14Aa 1,18NS BMX Potência RR 23,21Aab 32,14Aab 25,36Aa 16,07Aa 1,95NS 5D634RR 39,84Aa 35,94Aa 27,34Aa 24,22Aa 2,25NS NS 7338 IPRO 37,50Aab 21,09Bb 30,47ABa 35,94ABa 3,29* F 3,11* 3,53* 1,17NS 2,67NS Comprimento da parte aérea aos 8 dias após a semeadura (CPA8) em cm Brasmax Flecha IPRO 5,55Ac 6,10Ac 5,96Ab 5,98Ab 0,06NS BMX Potência RR 7,13Ac 7,15Abc 10,61Aa 8,79Aab 2,92* 5D634RR 17,39Aa 16,61Aa 12,85Ba 12,08Ba 7,52** NS 7338 IPRO 13,73Ab 9,963Bb 13,19ABa 10,66ABa 3,65* F 33,00** 23,80** 11,83** 7,41** Comprimento da parte aérea aos 32 dias após a semeadura (CPA 32) em cm Brasmax Flecha IPRO 20,05Bc 23,81Ab 24,41Aab 25,13Aab 5,67** BMX Potência RR 24,25ABb 24,038ABb 22,24Bb 26,14Aa 2,82* 5D634RR 30,42Aa 29,10Aa 27,64ABa 25,58Bab 4,78** NS 7338 IPRO 20,73ABc 19,98Bc 23,94 Ab 22,53ABb 3,54* F 24,92** 15,52** 5,64** 2,83* Número de nódulos (NNOD 32) em unidade planta -1 Brasmax Flecha IPRO 0Ba 5,88Ab 0Ba 8,00Ab 83,78** BMX Potência RR 0Ca 13,00Aa 0Ca 7,38Bb 142,59** 5D634RR 0Ca 7,63Bb 0Ca 13,50Aa 146,52** NS 7338 IPRO 0Ca 6,50Bb 0Ca 12,38Aa 133,96** F 0,00NS 17,71** 0,00NS 14,46** Massa seca da parte aérea aos 8 dias após a semeadura (MSPA 8) em em g planta -1 Brasmax Flecha IPRO 1,54Ba 1,74Aa 1,55 Ba 1,53Ba 4,96** BMX Potência RR 1,23 Ab 1,33Ab 1,19Ab 1,22Ab 1,86NS 5D634RR 1,16 Bb 1,58Aa 1,10Bb 1,64Aa 37,56** NS 7338 IPRO 1,075 Bb 1,29Ab 1,23ABb 1,28Ab 4,67** F 19,86** 22,13** 19,02** 19,59** Massa seca da raiz aos 8 dias após a semeadura (MSR 8) em g planta -1 Brasmax Flecha IPRO 1,01 Aa 1,03A a 0,86 Ac 0,89 Ab 1,48NS BMX Potência RR 0,96 Aa 1,03 Aa 0,86 Ac 0,89 Ab 1,15NS 5D634RR 1,13 Aa 1,27 Aa 1,13 Ab 1,30 Aa 1,65NS NS 7338 IPRO 1,08 Ba 1,13 Ba 1,40 Aa 1,11 Bab 4,64** F 1,26NS 2,85* 14,05** 8,34** Massa seca da raiz aos 32 dias após a semeadura (MSR32) em g planta -1 Brasmax Flecha IPRO 3,01ABa 3,04ABa 3,34Aa 2,99Ba 3,01* BMX Potência RR 1,44Cb 1,50BCb 1,81Ab 1,81ABb 5,21** 5D634RR 1,19Ab 1,25Ab 1,08Ac 1,08Ac 0,62NS NS 7338 IPRO 1,27Ab 1,23Ab 1,16Ac 1,16Ac 0,27NS F ( 83,48** 84,10** 118,14** 87,53** Médias (de 4 repetições) seguidas pela mesma letra maiúscula na linha e minúscula na coluna, não diferem entre si pelo teste de Tukey, a 5% de probabilidade. No desdobramento da interação (A) cultivares x C (micronutrientes), maiores médias foram obtidas na ausência da aplicação dos micronutrientes. Na presença dos micronutrientes no tratamento de sementes para o CPA32, observou-se redução de 14,57% na média geral das cultivares. A cv. BMX Potência RR foi a que apresentou maior redução (21,00%), e 5D634RR menor (8,13%). Problemas têm sido detectados com a aplicação direta nas sementes de micronutrientes, afetando a sobrevivência de bactérias, a nodulação e a eficiência do processo simbiótico (EMBRAPA, 2014). No desdobramento da interação B (bactérias) x C (micronutrientes), os parâmetros

5 significativos foram: CPA32, CR32, NNOD32, MSPA8, G5 e G8. Apenas a testemunha não apresentou diferença estatística na presença e ou ausência de micronutrientes nas sementes. Na inoculação tradicional com Bradyrhizobium apenas a MSPA8 e G5, apresentaram significância estatística, sendo superiores na ausência dos micronutrientes. Na inoculação com A. brasilense e co-inoculação, a presença dos micronutrientes exerceu influência negativa sobre todos os parâmetros avaliados. 4. Conclusões Em solo já cultivado com soja, as cultivares exibiram comportamento diferenciado nos parâmetros conforme o tipo de bactéria utilizada no procedimento de inoculação. A co-inoculação destacou-se em algumas cultivares promovendo melhor nodulação e crescimento inicial de plântulas. Os micronutrientes aplicados diretamente nas sementes das cultivares afetaram a sobrevivência das bactérias. Referências BÁRBARO, I.M.; BARBARO JUNIOR, L.S.; TICELLI, M.; MACHADO, P.C.; M.; MIGUEL, F.B. Resultados preliminares da co-inoculação de Azospirillum juntamente com Bradyrhizobium em soja. Pesquisa & Tecnologia. v.8, n. 2, jul-dez de ISSN: EMBRAPA. Tecnologias de produção de soja Região Central do Brasil Londrina: Embrapa Soja, p.; 21cm. (Sistemas de Produção / Embrapa Soja, ISSN ; n.16) FERLINI, H.A. Co-inoculación en soja (Glicyne max) con Bradyrhizobium japonicum y Azospirillum brasilense. Engormix, Santa Fé p. HUNGRIA, M.; NOGUEIRA, M.A.; ARAUJO, R.S. Co-inoculation of soybeans and common beans with rhizobia and azospirilla: strategies to improve sustainability.2013 (online). Biology and Fertility of Soils, v. 49 p , 2013.