DESCRIÇÃO ANATÔMICA DOS TESTÍCULOS E CORPOS ADIPOSOS DE Scinax fuscovarius (ANURA, HYLIDAE)

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1 DESCRIÇÃO ANATÔMICA DOS TESTÍCULOS E CORPOS ADIPOSOS DE Scinax fuscovarius (ANURA, HYLIDAE) Classius de Oliveira I Carlos Alberto Vicentini2 RESUMO Utilizando-se 15 exemplares de Scinax fuscovarius, machos adultos, realizamos a caracterização anatômica e o estudo histológico geral dos testículos e dos corpos adiposos associados às gônadas. Os testiculos são órgãos ovóides de coloração branco-leitosa, localizados ventralmente aos rins e revestidos pelo peritônio. A túnica albugínea é delgada e os elementos seminíferos (lóculos) são unidades morfológicas que abrigam o epitélio germinativo cístico. Os corpos adiposos estão organizados como diversos prolongamentos digitifonnes aderidos à extremidade cranial de cada testículo, possuindo arranjo reticular de tecido conjuntivo que confere o suporte às células adiposas. Palavras-chave: Scinaxfuscovarius; Anura; Hylidae; anatomia; testículo; corpos adiposos. ABSTRACT Anatomical description ofthe Scinaxfuscovarius fat bodies and testes (Anura, HyUdae). This report describes general anatomical and histological characteristics of the Scinax (uscovarius fat bodies and testes. From 15 adult males collected at the Botucatu city area (São Paulo, Brazil), ten animais were macroscopically observed and five were submitted to histological analysi. The testes are ovoid organs that are located ventrally to the kidneys, and coated by peritoneum. The albuginea tunic is tenuous, and the seminiferous elements (locules) are morphological units that contain cystic genninal epithelium. The fat bodies looks many fingerlike prolongations attached to the cranial edges of each testis. These structures have a thin arrangement offibrous connective tissue Ihal supports the large fat cells. Key words: Scinax fuscovarius; Anura; Hylidae; anatomy; testis; fatty bodies. Recebido em: ; aceito em: I Departamento de Biologia, Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas, UNESP - CEP , São José do Rio Preto, SP, Brasil. 2 Departamento de Ciências Biológicas, Faculdade de Ciências, UNESP - CEP , Bauru, SP, Brasil BIOCIÊNCIAS, Porto Alegre, v. 6, n. I, p , jun. 1998

2 80 OLIVEIRA, C. & VICENTINI, C.A. INTRODUÇÃO O aparelho reprodutor masculino de alúíbios está representado por um par de testículos ligados direta ou indiretamente aos duetos arquinéfricos, os quais abrem-se na cloaca transportando o esperma (ROMER, PARSONS, 1985). Estas gônadas estão localizadas na cavidade corporal aderi das à parede dorsal pelo mesórquio, através do qual transitam dúctulos eferentes que ganham os rins e em seguida os duetos arquinéfricos. Os testículos dos anuros são órgãos ovóides pares, com uma massa de túbulos seminíferos convolutos circundada por uma camada fibrosa elástica (LOFTS, 1974). Alguns estudos prévios em Scinaxfuscovarius descreveram características macroscópicas e a arquitetura histológica testicular, bem como aspectos histológicos e ultra-estruturais das células germinativas, células de Sertoli e de Leydig (OLIVEI- RA, 1996). Na margem anterior dos testículos estão presentes os corpos adiposos abdominais, de coloração amarelada e com muitos prolongamentos delgados. Estes corpos adiposos constituem uma característica estrutural comum a todos os anfibios (DUELLMAN, TRUEB, 1986) e servem como uma reserva nutricional para as gônadas (FITZPATRICK, 1976). Uma similaridade morfológica destas estruturas foram relatadas na descrição do aparelho reprodutor feminino de Scinaxfuscovarius (OLIVEIRA, ANDRADE, 1997). Uma análise das características estruturais internas dos anfibios indica que estes animais apresentam características intermediárias entre aquelas de peixes e amniotas (DUELLMAN, TRUEB, 1986). Assim, o conhecimento mais preciso da morfologia destes animais é de valioso proveito biológico e, portanto, apresentamos neste estudo algumas considerações morfológicas dos testículos e corpos adiposos da espécie Scinaxfuscovarius (A. LUTZ, 1925), um hilídeo adaptado à vida terrestre com dependência aquática para postura de ovos e desenvolvimento da prole. MATERIAL E MÉTODOS Foram utilizados 15 machos adultos, com aproximadamente 4,5cm de comprimento rostro-anal, de Sei nax fuseovarius (Anura, Hylidae), provenientes de uma área do Setor de Pesqu isa em Nutrição de Organismos Aquáticos da FMVZIUNESP - Botucatu. Os animais foram obtidos através de coletas noturnas realizadas no período de junho a dezembro de Do campo de coleta, os exemplares foram transportados para o laboratório acondicionados em sacos plásticos umedecidos internamente; em seguida, foram transferidos para um aquário (adaptado como terrário) para serem posteriormente submetidos à dissecção. Dez exemplares, recém-sacrificados, foram fixados em solução de formalina neutra a 10% para realização da descrição anatõmica geral dos órgãos. Deste total, cinco exemplares analisados BIOCIÊ!\CIAS, Porto Alegre, v. 6, n. I, p ,jun. 1998

3 Descrição anatõmica dos testículos e posteriormente foram fixados e mantidos integros, apenas com uma pequena incisão mediana no abdome para penetração do fixador e melhor preservação das visceras em suas posições normais. Para exposição das visceras os animais foram abertos através do rebatimento e retirada da parede corporal ventral até a altura da cintura dos membros anteriores. Para as análises da sintopia gonadal, descrição e documentação fotográfica utilizamos um estereomicroscópio Olympus. Em outros cinco animais, os órgãos reprodutores foram fixados com solução de Bouin. Seqüencialmente o material foi encaminhado à rotina histológica convencional para desidratação, diafanização e inclusão em parafina. Foram obtidos cortes de 6 micrometros e realizadas as técnicas de colorações com H/E, tricrõmicos de Masson e de Mallory (BEHMER et ai., 1976). A análise e fotodocumentação foi realizada através de fotomicroscópio Zeiss-Jena vai. Após a coleta dos órgãos e documentação fotográfica, todos os exemplares utilizados foram devidamente fixados e depositados na Coleção Herpetológica do Departamento de Zoologia do IBILCE/UNESP - São José do Rio Preto, com a numeração de registro dos 15 exemplares em lote único - n RESULTADOS As gônadas de Scinaxfuscovarius são órgãos pares, ovóides, geralmente assimétricos, localizados na cavidade celomática (Fig. 1), em posição ventral aos rins e em sintopia com a face visceral destes, por quase toda sua extensão (Fig. 2). Os rins se encontram em posição imediatamente ventral à parede dorsal da cavidade abdominal e estão intimamente associados aos testículos através do mesentério gonadal ou mesórquio (Fig. 5). Os testículos, de coloração branco-leitosa, apresentam vascularização superficial evidente, observada por transparência através da cápsula testicular. Externamente, os testículos apresentam aspecto granuloso, referente aos elementos seminíferos, dentro dos quais se encontram cistos de células germinativas em diversos estádios de diferenciação (Fig. 4). Nas proximidades da extremidade cranial de cada testículo encontram-se aderidos os corpos adiposos abdominais formados por muitos prolongamentos digitiformes amarelados. Estas estruturas manifestam acentuadas diferenças de tamanho (Figs. 1 a 3) e, dependendo do seu grau de desenvolvimento, apresentam vasos sangüíneos que correm longitudinalmente aos prolongamentos. Estes corpos adiposos são observados como estruturas vacuolizadas, quando utilizada a presente rotina histológica que destrói as células adiposas, restando apenas um árranjo reticular conjuntivo e vasos sangüíneos de diferentes calibres (Fig. 6). Limitando externamente o testículo existe uma delgada cápsula testicular conjuntiva denominada de túnica albugínea, constituída basicamente por BlOCIÊNCIAS, Porto Alegre, v. 6, n. I, p , jun. 1998

4 82 OLIVEIRA, C. & VICENTINI, C.A. fibras colágenas (Fig. 7). Recobrindo esta túnica existe um revestimento peritoneal, o mesórquio, no qual se fixam os corpos adiposos (Fig. 6). A análise histológica revela que os testículos são constituídos por unidades morfológicas, os elementos seminíferos. Nos cortes analisados, com diferentes planos de secção, são observadas numerosas unidades aproximadamente esféricas, denominadas lóculos seminíferos, delimitadas por delicado arcabouço conjuntivo. Entre os lóculos observa-se a constante presença de células intersticiais, fibroblastos, vasos sangüíneos e alguns dúctulos eferentes (Fig. 7). DISCUSSÃO Nos vertebrados, as gônadas são geralmente descritas como um par de órgãos alongados em animais com corpo delgado (maioria dos peixes, cecílias e urodelos) ou como uma estrutura ovóide e compacta em alguns peixes cartilaginosos, anuros e amniotas. Normalmente os testículos são mais lisos, firmes e menores que os ovários na mesma espécie e, entre os dois membros do par, não é rara a ocorrência de assimetrias de tamanho e posição (HILDEBRAND, 1995), similar ao observado em Scinax fuscovarius. Uma boa visão da constituição geral das gônadas dos anuros é comerida por DUELLMAN, TRUEB (1986), que descrevem os testículos como estruturas pares, esféricas ou ovais, localizadas numa posição ventral ao nível da metade anterior dos rins, podendo em algumas espécies serem longos e se estenderem até a extremidade posterior dos rins. Não apresentam lobações, como ocorre em muitas salamandras; estão aderidos aos rins pelo mesórquio através de dúctulos eferentes, cujo número (de 4 a 12 para cada testículo, tanto nos anuros como nos urodelos) varia de acordo com o tamanho dos testículos (NOBLE, 1931). O aspecto macroscópico dos testículos de ScinaxjÚscovarius revela grande assimetria morfológica interindividual de tamanho, forma e localização, além de também ocorrer variações intra-individuais destes parâmetros, quando comparamos os membros do par gonadal. Dentre estas, as mais notáveis cabem à posição das gônadas, que podem ser deslocadas para diferentes alturas, profundidades e orientações de seus eixos longitudinal e transversal. Esta grande mobilidade ocorre em função dos estados fisiológicos das vísceras adjacentes e principalmente dos segmentos do tubo digestivo, o que sem dúvida alguma é uma característica extremamente protetora para o processo gametogênico. BIOCIÊ!\CIAS, Porto Alegre, v. 6, n. I, p ,jun. 1998

5 Descrição anatõmica dos testículos e Uma descrição anatômica mais detalhada (KÜKENTHAL et ai., 1986) em Rana esculenta, descreve os testículos como corpos ovóides de cor amarela, que assentam sobre a face ventral dos rins e freqiientemente manifestam assimetria quanto às suas dimensões e posição. São sustentados pelo mesórquio (ligamento suspensor), prendendo-se a eles através da borda testicular interna. Atravessando esta dependência peritoneal estão vasos sangüíneos (arteriais e venosos) e finos canais cferentes. Os corpos adiposos estão aderidos ao pólo anterior (cranial) dos respectivos testículos. Uma caracterização morfológica geral dos testículos semelhante a esta é apresentada para Caudiverbera caudiverbera (HERMOSILLA et ai., 1983), Leptodactylus labyrinthicus (AGOSTINHO, 1988) e também para outras espécies (LOFTS, 1974). Em Scinax fuscovarius e nos anuros de forma geral, cujo corpo é muito deprimido, os testículos são mais compactos e não estão divididos em lobos (LOFTS, 1974;DUELLMAN, TRUEB, 1986; HILDEBRAND, 1995). Nos testículos de Caudiverbera caudiverbera pode-se diferenciar três regiões: cranial, medial e caudal. Porém, não existem diferenças quanto ao arranjo dos elementos seminiferos nestas regiões (HERMOSILLA et ai., 1983). As gônadas estruturalmente simples dos anuros aumentam de tamanho e peso durante a espermatogênese, um processo que ocorre em unidades testiculares denominadas de lóculos (DUELLMAN, TRUEB, 1986). Em Scinax (Úscovarius estas estruturas seminíferas são unidades morfológicas que contêm um epitélio germinativo cístico com células em todos os estádios da diferenciação e com um lume mal delimitado na maioria das vezes. Quanto à utilização do termo "túbulos seminíferos" para caracterizar as estruturas que contêm o epilélio genninativo dos anuros, acreditamos que não seja uma denominação muito apropriada, embora algumas similaridades com os vertebrados amniotas tenham sido constatadas em Scinax Iuscovarius. Num testículo composto por este arranjo tipicamente tubular as estruturas são, histologicamente, observadas em vários planos de secção; além disto, tanto o lume quanto o epitélio germinativo estratificado são muito bem definidos. Nas análises em Scinaxluscovarius foram observadas estruturas esféricas ou ovais denominadas de lóculos seminíferos. A presença de algumas estruturas irregulares pode sugerir um arranjo locular ou túbulo-iocular seminífero, mas não túbulo seminífero típico como aqueles dos vertebrados amniotas. Em Hyla ranki = Scinax ranki (TABOGA, DOLDER, 1991), o testículo é denominado também como túbulo-iocular e os lóculos ou lojas seminíferas BIOCIÊNCIAS, Porto Alegre, v. 6, n. I, p , jun. 1998

6 84 OLIVEIRA, C. & VICENTINI, CA são delimitados por tecido conjuntivo frouxo. Na nomenclatura o uso do termo "túbulo seminífero" é fluente, sendo empregado em algumas espécies como Bufo arenarum (CAVICCHIA, MOVIGLIA, 1983), Caudiverbera caudiverbera (HERMOSILLA et ai., 1983), Hyla japonica (TOYOSHIMA, IWASAWA, 1984), Odontophrynus cultripes (BÁO et ai., 1991), Pachymedusa dacnicolor (RASTOGI et ai., 1988), Rana esculenta (BERGMANN et ai., 1983) e Rana perezi (DELGADO et ai., 1989). Uma estrutura anexa ao aparelho reprodutor que merece destaque são os corpos adiposos. Estas estruturas sofrem variações sazonais e a energia neles armazenada (como tecido adiposo) possivelmente seja utilizada em alguma etapa do processo de espenniogênese. As variações sazonais dos corpos adiposos foram constatadas em várias espécies de anfibios (FITZP ATRICK, 1976). Estes corpos adiposos em Scinax jitscovarius e outros anuros são vários prolongamentos digitiformes presos na extremidade cranial dos testículos. Já nos Caudata são fitas longitudinais localizadas paralelamente entre as gônadas e rins (NOBLE, 1931), e nos Gymnophiona estão organizados em numerosos corpos em forma de folhas (DUELLMAN, TRUEB, 1986). Portanto estes corpos adiposos são mais semelhantes entre os dois Últimos, quando os três grupos são comparados entre si. As variações morfológicas dos corpos adiposos nos machos de Scinax (uscovarius se comportam de maneira similar às variações descritas para as fêmeas (OLIVEIRA, ANDRADE, 1997) e possivelmente ocorrem mantendo uma relação com o próprio desenvolvimento gonadal ao longo do ciclo reprodutivo. AGRADECIME'JTOS Ao Biólogo Benedito Rinaldo Cardana pelo auxílio na identificação dos espécimes. A Profa. Dra. Cláudia Márcia Aparecida Carareto, pelo auxílio na versão do resumo para língua inglesa. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ]. AGOSTINHO, C.A Estimativa dos parâmetros genéticos e fenotípicos de caracteristicas de produção em rã-pimenta, Leptodactylus labyrilltlticus (Spix, 1824). Dissertação (Mestrado em Genética) - Universidade Federal de Viçosa, Minas Gerais, ] p. 2. BÃO, S.N., DALTON, G.C., OLIVEIRA, S.F. Spem1iogenesis in Odontophrynus cultripes (Amphibia, Anura, Leptodactylidae): ultrastructural and cytochemical studies of proteins using E-PTA Journa] of Morphology, v. 207, p ]4, ] BEHMER, OA, TOLOSA, E.M.C., FREIT AS-NETO, AG. Manua] de téclúcas para histologia normal e patológica. São Paulo: EdaJtlEdusp, ] ] p. BlOCIÊl\CIAS, Porto Alegre, v. 6, n. ], p ,jun. ]998

7 Descrição anatõmica dos testículos e BERGMANN, M., GREVEN, H., SCHINDELMEISER, J. Observations on the blood-testis barrier in a frog and a salamander. CeIl and Tissue Research, v. 232, n. I, p , CA VICCHIA, J.c., MOVIGLIA, G.A The blood-testis barrier in the toad (Bufo arenarum, Hensel): A freeze-fracture and lanthanum tracer study. Anatomical Record, v.205, p , DELGADO, M.J., GUTIÉRREZ, P., ALONSO-BEDATE, M. Seasonal cycles in testicular activity in the frog, Rana perezi. General and Comparative Endocrinolo~y, v. 73, p.i-ii, DUELLMAN, W.E., TRUEB, L. Biolo~y of Anlplúbians. New York: McGraw-Hill, p. 8. FITZP ATRICK, L.C. Life history pattems of storage and utilization of lipids for energy in amphibians. American Zoologist, v. 16, p , HERMOSILLA, \.B., URBlNA, AP., CABRERA, J.C.P. Esperrnatogenesis en Ia rana Chilena Caudiverbera caudiverbera (Linné, 1758) (Anura, Leptodactylidae). BoI. Soc. Bio\. Concepción, Chile, v.54, p , HILDEBRAND, M. Análise da Estrutura dos Vertebrados. São Paulo: Atheneu, p. li. KÜKENTHAL, W., MATTHES, E., RENNER, M. Amplúbia. In: Guia de Trabalhos Práticos de Zoologia. 15.ed. Coimbra: Atlântida, p LOFTS, B. Reproduction. In: Physiology ofthe Amplúbia. New York: Academic Press, v. 2, p NOBLE, G.K. The Biolo~y ofthe Amphihia. New York: McGraw-Hill, p. 14. OLIVEIRA, C. Estudo morfológico do testículo de ScinaxfuscOl.aria (Amplúbia, Anura, Hylidae). Tese (Doutorado em Anatomia) -Instituto de Biociências, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, São Paulo, p. 15. OLIVEIRA, c., ANDRADE, U.J.A Anatomia dos ovários e corpos adiposos de Scinax fílscovaria (Anura, Hylidae). Acta Biolo~ica Leopoldensia, v.19, n.2, p , RASTOGl, R.K., BAGNARA, J.T., 1ELA, L., KRASOV1CH, MA Reproduction in the mexican leaffrog, Pachymedusa dacnicolor. IV. Sperrnatogenesis: a light and ultrasonic study. Journal of Morpholo~y, v.197, p , ROMER, AS., PARSONS, T.S. Anatomia Comparada dos Vertebrados. São Paulo: Atheneu, p. 18. TABOGA, S.R., DOLDER, M.AH. Análise histológica da espermatogênese de Hyla ranki (A.mphibia, Anura, Hylidae). Revista Brasileira de Ciências Morfológicas, v. 8, n. 2, p , TOYOSHIMA, S., 1WASAW A, H. Annual dynamics of gerrn cells in male Hyla japonica. Herpetologica, v. 40, n. 3, p , BIOCIÊNC1AS, Porto Alegre, v. 6, n. I, p , jun. 1998

8 86 OLIVEIRA, C. & VICENTINL CA Figs Vista ventral da cavidade abdominal após remoção da parede corporal ventral e de algumas vísceras. Aumento de 3,2X. Indicações: coração (c); corpo adiposo (ca); estômago (e); fígado (I); pulmão (p); rim (r) e testículo (t). 1. Testículos globosos achatados dorso-ventralmente, estando o esquerdo em nível mais caudal; corpos adiposos com numerosos prolongamentos digitíformes longos e delgados. 2. Testículo direito em sintopia com a fi\ce ventral do rim homolateral; corpos adiposos mais espessos fixando-se na e"1remidade cranial testicular (cabeça de seta). 3. Testículo alongado; corpos adiposos bem desenvolvidos e muito espessos. BIOCIÊI\CIAS, Porto Alegre, v. 6, n. I, p ,jun. 1998

9 Descrição anatômica dos testículos e "* Figs Face testicular ventral com destaque para o aspecto granuloso do testículo, onde está indicado um lóculo seminífero (estrela). (17X). 5. Secção histológica transversal dos testículos (T) localizados ventralmente aos rins (R) e unidos pelo mesórquio (cabeça de seta); também estão índicadas as membranas peritoneais que os envolvem (estrelas). (HIE, 13X). BIOCIÊNCIAS, Porto Alegre, v. 6, n. I, p , jun. 1998

10 88 OLIVEIRA, C. & VICENTINI, C.A. Figs, Corpos adiposos em sintopia com a superficie testicular. 011"".11.( delgada lúmina peritoneal (cabeça de seta) que envolve o testículo e na qual se fixam os corpos adiposos. Os espaços vacuolizados das células adiposas são delimitados por finos septos de tecido conjuntivo (seta); observe a presença de vasos sangüíneos de vários calibres (V). (T. Mallory, I 44X). 7. Lóculo seminífero (L) delimitado por arcabouço conjuntivo e contendo cistos gemúnativos em diversos estádios. No tecido interlocular observa-se células intersticiais de Leydig (circulo) e dúctulos eferentes (seta). No recorte, destaque da delgada túnica albugínea (cabeça de seta) revestindo o órgão. (T. Masson, 23üX). BIOCIÊ!\CIAS, Porto Alegre, v. 6, n. I, p ,jun. 1998

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