AVALIAÇÃO DA ESTERILIZAÇÃO APÓS A OCLUSÃO DOS VASOS SANGUÍNEOS OVARIANOS DE COELHAS UTILIZANDO ELÁSTICO DE AFASTAR OS DENTES OU ABRAÇADEIRAS DE NÁILON Tatiane Guedes Bueno*, Laiza Sartori de Camargo, Karym Christine de Freitas Cardoso, Anelise Ribeiro Peres, Fabiana Ferreira de Souza Hospital Veterinário, Universidade de Franca, Franca - SP *E-mail: thatygb13@hotmail.com O objetivo deste experimento foi avaliar a esterilização de coelhas, após a oclusão do fluxo sanguíneo ovariano, utilizando elástico de afastar os dentes ou abraçadeira de náilon. Foram utilizadas 18 coelhas, separadas em 3 grupos, sendo Grupo I, controle (não foi realizado nenhum procedimento), Grupo II, oclusão com elástico de afastar os dentes, e Grupo III, oclusão com abraçadeira de náilon. As coelhas foram acompanhadas com citologia vaginal, durante 7 dias e posteriormente foram anestesiadas para a oclusão dos vasos sanguíneos ovarianos. Durante 30 dias após a cirurgia, a citologia vaginal, foi realizada a cada 3 dias. Ao final dos 30 dias, o comportamento reprodutivo foi avaliado, colocando-se as fêmeas na gaiola do macho, durante 15 minutos, 2 vezes ao dia, durante 7 dias. As coelhas foram eutanasiadas 47 dias, após o procedimento cirúrgico e as regiões contendo o ovário e o útero foram avaliadas por histologia. No Grupo II, na avaliação macroscópica, notou-se regressão dos ovários em 4 fêmeas, contudo na histologia apenas uma fêmea não apresentou tecido ovariano. Nas demais, notou-se edema ao redor dos folículos. Todas as fêmeas deste grupo foram agressivas com o macho, não permitindo a cópula; ao contrário, das fêmeas do Grupo I. O Grupo III ainda não foi concluído, e será realizado com os mesmos procedimentos dos outros grupos, durante a prorrogação do projeto. Até o momento, concluiu-se que a oclusão dos vasos ovarianos pode ser uma alternativa para a esterilização de animais errantes, com aplicação em campanhas comunitárias. Palavras-chave: Castração-fêmea; Fluxo-ovariano; Ovário. Suporte Financeiro: PIBIC/CNPq. COMPARAÇÃO DOS MÉTODOS TRADICIONAL E AUTOMATIZADO DE CONGELAÇÃO DO SÊMEN COLHIDO DO EPIDÍDIMO DE TOUROS Anelise Ribeiro Peres*, Luciano Munita, Mábilis Yumi Kanazawa, Fabiana Ferreira de Souza Hospital Veterinário, Universidade de Franca, Franca - SP * E-mail: ane.medvet@hotmail.com A utilização da técnica de congelação do sêmen é uma importante ferramenta para o aproveitamento do germoplasma de animais de alto valor genético que possam ter morrido inesperadamente. O objetivo deste trabalho foi comparar os métodos de congelação (tradicional ou automatizado) pelos testes de motilidade, vigor espermático, concentração, integridade estrutural e funcional da membrana espermática, função citoquímica mitocondrial, viabilidade espermática e fragmentação do DNA. Foram analisados 20 epidídimos (10 pares) obtidos de um abatedouro comercial. A cauda do epidídimo foi isolada e os espermatozóides foram retirados pelo método de fluxo retrógrado, utilizando-se um catéter e uma seringa contendo 10 ml de meio de congelação. As médias de motilidade, vigor espermático, integridade funcional de membrana, viabilidade espermática e fragmentação de DNA foram melhores pelo método tradicional de congelação, enquanto que as médias de integridade estrutural da membrana, função citoquímica mitocondrial e morfologia obtiveram melhor sucesso pelo método automatizado. Vol. 11 Suplemento 1 (2011) 13
O uso do método automatizado mostrou-se inviável pelo alto valor do equipamento, quantidade elevada de nitrogênio líquido e valores inferiores da maioria dos testes realizados quando comparado ao método tradicional. Palavras-chave: Ejaculado; Bovino; Máquina-Congelação; Espermatozóide; Criopreservação. AVALIAÇÃO DA VIABILIDADE DO SÊMEN CONGELADO OBTIDO DO EPIDÍDIMO DE TOUROS POST-MORTEM Luciano Munita Barbosa *, Anelise Ribeiro Peres, Mábilis Yumi Kanazawa, Fabiana Ferreira de Souza Universidade de Franca, Franca - SP *E-mail: lucianomunita@hotmail.com O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos da congelação sobre a viabilidade dos espermatozoides colhidos do epidídimo de touros. Utilizaram-se 10 pares de epidídimo provenientes de um abatedouro comercial. O sêmen foi colhido da cauda do epidídimo pela técnica de fluxo retrógrado e avaliado para motilidade, vigor, concentração, morfologia espermática, integridade de DNA, atividade mitocondrial, viabilidade, integridade e funcionalidade da membrana. O sêmen foi diluído em meio comercial (Botubov, Biotech, Botucatu, SP), envasado em palhetas francesas de 0,5 ml, refrigerado e congelado em nitrogênio líquido. As amostras foram descongeladas a 37 C, durante 30 segundos e o sêmen foi reavaliado para os mesmos parâmetros, com exceção da concentração espermática. O número de espermatozoides recuperados do epidídimo foi de 1,7 a 12,7x10 9. A motilidade e vigor verificou-se média e desvio padrão de 74,0±7,0% e 3,6±0,7 para o sêmen fresco, e 30,0±8,2% e 1,3 ±0,5% para o sêmen congelado. A média da porcentagem de espermatozóides normais foi de 66,8% e 62,7%, no sêmen fresco e congelado, respectivamente. Baseado nestes aspectos testou-se a correlação da motilidade espermática e o índice médio de atividade citoquímica mitocondrial, contudo não foi encontrada nenhuma correlação no sêmen fresco ou congelado. Com base nos resultados concluiu-se que a colheita de espermatozoides da cauda do epidídimo é viável, rápida e eficiente, e pode ser usada para a preservação do material genético de animais superiores. Palavras-chave: Criopreservação; Ejaculado; Bovino. Suporte Financeiro: FAPESP (Processo nº 2010/11675-0). AVALIAÇÃO DA VIABILIDADE DO SÊMEN CANINO CONGELADO EM VAPOR DE NITROGÊNIO LÍQUIDO E PELO MÉTODO AUTOMATIZADO Natália Regina de Souza Bravo *, Laíza Sartori de Camargo, Anelise Ribeiro Peres, Fabiana Ferreira de Souza Universidade de Franca, Franca - SP * E-mail: regininhabravo@hotmail.com O objetivo deste trabalho é estudar a qualidade e viabilidade do sêmen congelado pelo sistema automatizado (Cryogen-Dualflex, Neovet, Uberaba-MG), comparado ao sistema tradicional (em vapor de nitrogênio líquido). Serão utilizados 6 cães adultos para a colheita de sêmen através da manipulação digital do pênis. Após a colheita, o sêmen será avaliado quanto à motilidade, vigor, concentração, morfologia espermática, integridade e funcionalidade da membrana, atividade citoquímica mitocondrial, capacitação e reação do acrossoma e fragmentação do DNA. Então, o sêmen será diluído em meio à base de TRIS-GEMA-GLICOSE, 14 Vol. 11 Suplemento 1 (2011)
envasado em palhetas francesas de 0,5 ml, numa concentração de 100x10 6 espermatozoides móveis/ml, na temperatura ambiente. Metade das palhetas será congelada pelo método tradicional (vapor de nitrogênio líquido) e a outra metade pelo sistema automatizado. Até o momento o sêmen foi colhido de quatro cães, contudo a congelação automatizada ainda não foi efetuada. A preparação do meio diluente TRIS-GEMA-GLICOSE foi treinada. Os parâmetros encontrados para o sêmen do cão 1 foi 1,0 ml de volume, 80% de motilidade, escore 3 de vigor e concentração espermática total de 683x10 6 espermatozoides. Já no cão 2 obteve-se os seguintes resultados; volume 3,5 ml, motilidade 80%, vigor entre 3 e 4, concentração espermática total 1,13x10 9 espermatozoides. O sêmen será descongelado posteriormente, em uma única oportunidade e reavaliado. Palavras-chave: Criopreservação; Máquina de congelação; Espermatozoide. Suporte Financeiro: FAPESP (Processo nº 2011/00281-4). Vol. 11 Suplemento 1 (2011) 15