Pontifícia Universidade Católica do Rio de Janeiro Departamento de Química INCERTEZA DE MEDIÇÃO EM ENSAIOS DE ECOTOXICIDADE COM Artemia sp. Roberta L. Santos Neves Joseneide M. da S. Antonio Roberta L. Ziolli Jun/2008
INCERTEZA DA MEDIÇÃO INTRODUÇÃO Parâmetro associado ao resultado de uma medida que caracteriza a dispersão dos valores que podem ser razoavelmente atribuídos ao medidos (VIM, 1993); A incerteza pode ser expressa como um desvio-padrão ou um múltiplo calculado; Considerar explicitamente todas as fontes possíveis de incerteza e avaliar cada componente;
ARTEMIA sp. INTRODUÇÃO - microcrustáceo de água salgada; - os náuplios são atraídos pela luz; - adaptável à grande faixa de salinidade; - adaptável à grande faixa de temperatura; - ciclo de vida curto; - filtradores não seletivos.
ENSAIO COM ARTEMIA sp. INTRODUÇÃO - utilizado em testes de toxicidade de novos compostos; - utilizado em monitoramento de efluentes; - utilizado no monitoramento ambiental; -...
INTRODUÇÃO ENSAIO COM ARTEMIA sp. Eclosão dos cistos 24h;
INTRODUÇÃO ENSAIO COM ARTEMIA sp. Transferência dos náuplios para novo recipiente 24h; Exposição dos náuplios ao dicromato de potássio 24h; Contagem dos indivíduos mortos e vivos.
INTRODUÇÃO ENSAIO COM ARTEMIA sp. Escolha da faixa de concentração a ser testada; % de mortos concentração PROBIT Bliss, C.I., 1934
INTRODUÇÃO ENSAIO COM ARTEMIA sp. % mortos em unidade Probi Probit 12.0, 10.0, 8.0, 6.0, 4.0, 2.0, y = 12.405x - 18.495 R 2 = 0.9301 0.0, 1.0, 1.2, 1.4, 1.6, 1.8, 2.0, 2.2, 2.4, log (dose) log (concentração) CL Mensurando: 49,99 10b ( ) = 10 10a 50 CL 50 : concentração letal para 50% da população
DIAGRAMA DE CAUSA E EFEITO IDENTIFICAÇÃO DO MENSURANDO
DIAGRAMA DE CAUSA E EFEITO IDENTIFICAÇÃO DO MENSURANDO
CÁLCULO DAS FONTES DE INCERTEZA Solução de dicromato de potássio Volume Pureza C 1 = m V P Balão volumétrico Concentração Repetição Massa Certificado Incerteza das grandezas de entrada µ volume = U balão K µ bal = U bal K µ rep = s n µ pur = U pur K 2 2 µ m = ( µ bal + µ rep )
CÁLCULO DAS FONTES DE INCERTEZA Solução de dicromato de potássio C 1 = m V P Coeficiente de sensibilidade y x i 1 1 m = 2 C = m P V C P V V 1 C = P m V
CÁLCULO DAS FONTES DE INCERTEZA Solução de dicromato de potássio C 1 = m V P Componentes da incerteza µ( y) y x i Incerteza combinada µ + 2 2 2 C ( C ) = µ 1 C1 ( m) + µ C1 ( V ) µ C1 ( P)
DIAGRAMA DE CAUSA E EFEITO IDENTIFICAÇÃO DO MENSURANDO
CÁLCULO DAS FONTES DE INCERTEZA Fator de diluição f = V f V i Vi Fator de diluição Vf U ador µ micropipet Vi = K Incerteza relativa µ Vf = U balãovol. K (µ ) V V
CÁLCULO DAS FONTES DE INCERTEZA Fator de diluição f = V f V i Vi Fator de diluição Vf Incerteza relativa Incerteza relativa combinada (µ ) V V µ f f = µ ( V Vf f ) 2 + µ ( V Vi i ) 2
CÁLCULO DAS FONTES DE INCERTEZA Concentração da amostra C Cdil = 1 n i f i incertezas calculadas anteriormente µ C C dil µ f µ 1 2 f µ 2 2 C1 = ( ) + ( ) + ( dil f 1 f 2 C 1 ) 2
DIAGRAMA DE CAUSA E EFEITO IDENTIFICAÇÃO DO MENSURANDO
CÁLCULO DAS FONTES DE INCERTEZA Repetitividade µ repe = s n Reprodutibilidade µ repro = s combinado n
DIAGRAMA DE CAUSA E EFEITO IDENTIFICAÇÃO DO MENSURANDO
CÁLCULO DAS FONTES DE INCERTEZA Resposta dos náuplios de diferentes origens µ origem = s n Diferentes origens: - Maramar Great Salt Lake, E.U.A. - Inve Great Salt Lake, E.U.A. - Bioartemia Grossos, RN, Brasil
DIAGRAMA DE CAUSA E EFEITO IDENTIFICAÇÃO DO MENSURANDO
CÁLCULO DAS FONTES DE INCERTEZA Regressão Probit Tratada como a incerteza da regressão linear; Como o eixo x é o log (concentração) foi calculado o antilog da incerteza da regressão. Diferente de um procedimento analítico instrumental, em ensaios de ecotoxicidade é necessário calcular uma regressão probit para cada ensaio.
CÁLCULO DAS FONTES DE INCERTEZA Regressão Probit Testes Incerteza (mg L -1 ) 1 1,070 2 1,135 3 1,081 4 1,128 5 1,063 6 1,098 7 1,207 Média 1,112 Mediana 1,098 Desvio padrão 0,050 %CV 4,5
RESULTADOS Fontes de Incerteza Incerteza (mg L -1 ) Concentração 1,44 Curva probit 1,11 Repetitividade 1,83 Reprodutibilidade 2,15 População 12,71 U C 13,15 Fontes de Incerteza Concentração Curva probit Repetitividade Incerteza (mg L -1 ) 1,44 1,11 1,83 Reprodutibilidade 2,15 U C 3,36 UC Populacao Reprodutibilidade Repetitividade Curva probit Concentração,,,,,,,, 0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0 14.0
Cálculo da incerteza expandida RESULTADOS U = k u c Fator de abrangência (k) fator numérico usado como multiplicador da incerteza padrão combinada para obter a incerteza expandida CL 50 = 70,61 ± 6,72mg L -1
TRABALHOS FUTUROS Estudar outros modelos para o cálculo da CL 50 ; Estudar as grandezas de influências tais como salinidade e temperatura; Estudar diferentes volumes para incubação; Estudar organismos de diferentes níveis tróficos.
OBRIGADA!