SOLUÇÕES SALINAS ALTERNATIVAS PARA FLOTAÇÃO DE TECAS DE FORAMINÍFEROS

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1 SOLUÇÕES SALINAS ALTERNATIVAS PARA FLOTAÇÃO DE TECAS DE FORAMINÍFEROS Décio Luis Semensatto-Jr.1; Dimas Dias-Brito1 1 Depto. Geologia Aplicada, LAMBdA (Laboratório de Análises Micropalentológicas, Microbióticas e de Ambientes), UNESP, Rio Claro (SP), (semensattojr@terra.com.br) Abstract. The goal of this work was compare the efficiency of recovering tests of a traditional floatation agent (thichloroethylene C2HCl3) with two alternative saline solutions (sodium nitrate/sodium thiosulfate solution NaNO3/Na2O3S2 and zinc chloride solution ZnCl2). For this, three treatments were performed: (1) C2HCl3, with density of 1.46 g ml-1 (same of CCl4); (2) NaNO3/Na2O3S2 solution, with density of 1.46 g ml-1 and; (3) ZnCl2 solution with density of 1.70 g ml-1. The treatment (3) was done to determine the influence of density on recovery. Results showed that ZnCl2 was the better floatation agent (recovered 91% of the total tests, while C2HCl3 and NaNO3/Na2O3S2 recovered 59.1% and 72.8%, respectively). Both quantitative and qualitative results had significantly improved with higher density. Therefore, the use of ZnCl2 instead of CCl4 or C2HCl3 is strongly recommended, which is less toxic for health and the environment. Whether the density of 1.46 g ml-1 must be maintained, then the use of NaNO3/Na2O3S2 is the more appropriate. Palavras-chave: flotação, metodologia, foraminíferos 1. Introdução A flotação de tecas é amplamente empregada em estudos envolvendo foraminíferos, com o fim de concentrá-las e reduzir o esforço de triagem. Tetracloreto de carbono (CCl4) e tricloroetileno (C2HCl3) são os compostos orgânicos mais comumente usados, ambos com densidade de 1,46 g ml-1. Contudo, são substâncias cancerígenas (Orme & Kegley 2004) e sua manipulação deve ser bastante cuidadosa, sendo necessário o uso de capela, máscara, óculos de proteção e luvas. Além disso, ao final do processo tem-se um resíduo problemático, que deve ser adequadamente tratado antes de ser descartado. Quando se usa o C2HCl3, deve-se ainda lavar as amostras com água abundante logo após a flotação para evitar que o C2HCl3 ataque a parede dos frascos de acrílico para armazenamento. Outra questão importante é a influência da flotação na eficiência da recuperação de tecas, ou seja, a flotação interfere nos resultados de uma análise? É importante conhecer as limitações de cada líquido pesado para que se escolha aquele que garanta os melhores resultados. Tendo em vista os riscos potenciais à saúde e ao meio ambiente relacionados ao uso do CCl4 e do C2HCl3, este trabalho testou a aplicação de duas soluções salinas alternativas menos agressivas (nitrato de sódio / tiossulfato de sódio NaNO3/Na2O3S2 e cloreto de zinco ZnCl2). Além disso, a influência da densidade nos resultados também foi analisada. 2. Métodos e Técnicas 2.1. Preparação das soluções salinas A solução de NaNO3/Na2O3S2 foi preparada através da dissolução de 70,66 g de NaNO3 e 120,56 g de Na2O3S2 em 100 ml de água destilada (Cringoli et al. 2004). A densidade da solução é de 1,46 g ml-1 (mesma do C2HCl3). Recomenda-se a dissolução em banho de ultrassom para acelerar a dissolução do tiossulfato.

2 Para a solução de ZnCl2, dissolveu-se 72,07 g de sal em 46,84 ml de água destilada, obtendo-se a densidade de 1,70 g ml-1 (Uesugui, 1979). Deve-se tomar cuidado durante a dissolução, pois esta é uma reação exotérmica que pode alcançar até 70ºC Tratamentos Três alíquotas de 1 g de sedimento, previamente homogeneizado e peneirado em malhas de 500 e 62 µm, foram flotadas, respectivamente, em béqueres com: (1) C2HCl3; (2) NaNO3/Na2O3S2 e; (3) ZnCl2. Conforme flota-se sucessivamente, as soluções salinas tendem a ter a densidade reduzida. Assim, deve-se monitorá-la e adicionar mais sal, conforme a necessidade. As frações sobrenadante e decantada de cada alíquota foram recuperadas separadamente em papel filtro assentado em um funil de büchner sob vácuo. Em seguida, foram armazenadas em frascos com álcool 70% até o momento da triagem. As tecas triadas foram transferidas para porta-foraminíferos e identificadas ao nível de gênero. Estes passos estão ilustrados na Figura 1. A eficiência de cada tratamento foi analisada comparando-se os dados quantitativos e qualitativos obtidos na fração sobrenadante, decantada e total ( sobrenadante + decantada ). As variáveis utilizadas na comparação foram a porcentagem de tecas recuperadas (razão entre sobrenadante e total ), erro relativo da abundância relativa de cada gênero na fração sobrenadante, riqueza de gêneros, diversidade e eqüitatividade (McIntosh), composição da microfauna e gênero dominante. Para verificar a exatidão da abundância relativa de cada gênero encontrada no sobrenadante, calculou-se o módulo de seu erro relativo (Er), comparando-a à abundância relativa no total. Assim, temos: p E r = sob 100 pt (1) Na equação (1), psob é a abundância relativa do gênero no sobrenadante e pt é a abundância relativa do gênero na amostra total. Para ilustrar, serão apresentados os resultados obtidos a partir de uma amostra coletada em Março de 2004, na zona de entre-marés no delta do Rio São Francisco. 3. Resultados Os dados quantitativos estão dispostos na Tabela 1. Enquanto C2HCl3 e NaNO3/Na2O3S2 recuperaram respectivamente 59,1% e 72,8%, ZnCl2 recuperou 91% das tecas presentes na amostra total. Considerando-se a diversidade e eqüitatividade, nota-se que seus valores sofreram uma variação mínima, podendose considerar que a flotação não interfere significativamente no resultado final. Do ponto de vista qualitativo, os resultados mostram que para C2HCl3 e NaNO3/Na2O3S2 há gêneros que ocorrem exclusivamente na fração decantada, que serão excluídos se a análise levar em conta somente o sobrenadante. Já para ZnCl2 todos os gêneros presentes na fração decantada também estão representados no sobrenadante. O erro relativo foi determinado para os cinco gêneros mais abundantes na amostra, que representam cerca de 80% das tecas (Tabela 2). De um modo geral, o erro reduziu-se significativamente conforme a densidade aumentou, sendo que a média do erro relativo para os cinco gêneros é cerca de três vezes menor para o ZnCl2. 4. Discussões Os resultados obtidos indicam que o ZnCl2 garante maior representatividade ao sobrenadante. Como a recuperação de tecas no sobrenadante não é de 100%, se

3 utilizarmos um líquido com densidade menor o número total de tecas extrapolado será subestimado. Levando-se em conta as espécies dominantes, nota-se que a densidade não afeta significativamente a interpretação. A Figura 2 mostra que as conclusões serão basicamente as mesmas: e são dominantes, seguidas de, e. Assim, interpretações de trabalhos prévios que usaram CCl4 e C2HCl3 são válidas e confiáveis. Entretanto, em alguns casos as informações obtidas junto às espécies raras são muito importantes, sendo que são prejudicadas com líquidos de menor densidade. 5. Conclusões A flotação com ZnCl2 com densidade 1,70 g ml-1 garante maior recuperação de tecas e maior acurácia da informação, especialmente quantitativa, fato relevante para estudos sazonais e de monitoramento. Recomenda-se a substituição do CCl4 e do C2HCl3 pela solução de ZnCl2 com densidade 1,70 g ml-1 que, além das vantagens intrínsecas aos resultados, é menos agressiva à saúde e ao meio ambiente. Para os casos em que a densidade de 1,46 g ml-1 deve ser mantida, recomenda-se o uso da solução de NaNO3/Na2O3S2, que possui basicamente as mesmas vantagens do ZnCl2. 6. Agradecimentos Os autores são gratos ao Programa de Formação de Recursos Humanos para o Setor de Petróleo e Gás (PRH-05/ ANP/MCT/UNESP) pelo apoio financeiro. Agradecimentos são devidos a Dra. Geórgia C. L. Araújo e ao Prof. David Scott por suas contribuições. 7. Referências Cringoli, G, Rinaldi, L, Veneziano, V, Capelli G and Scala A The influence of flotation solution, sample dilution and the choice of McMaster slide area (volume) on the reliability of the McMaster technique in estimating faecal eggs counts of gastrointestinal strongyles and Dicrocoelium dendriticum in sheep. Vet Par 123: Orme, S, Kegley, S PAN Pesticide Database. Pesticide Action Network, North America (San Francisco, C.A. 2004), Uesugui, N Palinologia: técnicas de tratamento de amostras. Bol Téc Petr 22: Fig. 1. Esquema de obtenção das frações analisadas.

4 Tabela 1. Dados quantitativos dos três tratamentos. N: abundância de tecas (proporção em parêntesis); G: riqueza de gêneros (em parêntesis, o número de gêneros que ocorrem exclusivamente na fração decantada); D: diversidade de McIntosh; E: eqüitatividade. N G D E Fração C2HCl3 NaNO3 / Na2O3S2 ZnCl2 Decantada 210 (40,9%) 137 (27,2%) 45 (9,0%) 304 (59,1%) 365 (72,8%) 457 (91,0%) Decantada 14 (4) 10 (1) 8 (0) Fração C2HCl3 NaNO3 / Na2O3S2 ZnCl ± ± Erro realtivo (%) Tabela 2. Abundância relativa dos cinco gêneros dominantes e erro relativo da abundância. Média dos erros relativos ± 3.3

5 Fig. 2. Abundância relativa dos cinco principais gêneros da amostra.