PROGRAMA DE ENSINO DE DISCIPLINA Matriz Curricular Generalista Resolução Unesp 14/2010 alterada pela Resolução Unesp 02/2013.

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1 PROGRAMA DE ENSINO DE DISCIPLINA Matriz Curricular Generalista Resolução Unesp 14/2010 alterada pela Resolução Unesp 02/2013. Unidade Universitária: Curso: Farmácia-Bioquímica Departamento Responsável: Alimentos e Nutrição Docente Responsável/Colaborador(es) Rubens Monti e Iguatemy Lourenço Brunetti Identificação da Disciplina Nome da Disciplina: ENZIMOLOGIA FARMACÊUTICA Seqüência Aconselhada: informar ano e semestre de oferecimento, ou apenas o ano, se anual. Integral Noturno Ano de curso: 4º Semestre: 8º Ano de curso: 5º Semestre: 10º ( X ) Semestral ( ) Anual ( X ) Obrigatória ( ) Optativa ( ) Obrigatória Módulos Especializados Pré-requisito: Co-requisito: Créditos: 04 Carga Horária total: 60 Teórica: 02 Prática: 02 Número máximo de alunos por turma: Integral Noturno Teórica: 70 Prática: 25 Teórica: 30 Prática: 30 Objetivos Ao terminar o programa abaixo discriminado, a disciplina de Enzimologia Farmacêutica visa transferir os conhecimentos necessários e suficientes para o aluno saber utilizar enzimas de interesse das Análises Clínicas e Indústrias de Alimentos e Medicamentos.

2 Conteúdo Programático (título e discriminação das unidades) CURSO TEÓRICO: 1. Revisão de aminoácidos e proteínas. 2. Conceitos básicos de enzimologia Conceito do termo enzima, natureza química das enzimas, coenzimas e polimorfismo Poder catalítico das enzimas, especificidade, classificação, nomenclatura e modulação da atividade enzimática. 3. Parâmetros da atividade enzimática Condições ótimas de ensaio (concentração do substrato, da enzima, ph, temperatura) 3.2. Cinética enzimática: análise da velocidade inicial de reação, velocidade máxima e Km de enzimas michaelianas e K 0,5 para não-michaelianas, inibição enzimática. 4. Metodologias de quantificação da atividade enzimática Fundamentos e classificação dos métodos Unidades de atividade, critérios para escolha do método: cuidados gerais 5. Aspectos fisiológicos e patológicos na enzimologia clínica Classificação de Büchner para enzimas do plasma. Noção sobre liberação de enzimas das células. Noção sobre eliminação de enzimas do plasma Perfil enzimático sérico. Alterações do nível enzimático Reações catalisadas, propriedades e métodos para determinação das enzimas e suas isoenzimas; sua import ância e aplicação no auxíliodiagnóstico: óxido-redutases, transferases, hidrolases. 6. Enzimas industriais Fontes naturais: animais, vegetais e microbianas Extração e purificação através de filtração em gel, comatografia de troca iônica e afinidade. 7. Enzimas imobilizadas. 7.1 Importância e métodos de imobilização 7.2 Propriedades e aplicações de enzimas imobilizadas 8. Enzimas & Fármacos Enzimas como medicamentos: enzimas digestivas, enzimas em doenças inflamatórias, estratégicas de formulação para fins terapêuticos e terapia enzimática via lipossomos Enzimas na indústria de cosméticos, aplicações da enzimo cosmética, enzimas com ação conservante em cosméticos, formulações e preparações cosméticas. 9. Enzimas & Alimentos Oxidorredutases: peroxidases, polifenol-oxidases, catalase, glicose oxidase, produção e propriedades das enzimas Hidrolases: invertase, inulinase, amilases, celulases, proteases Transferases:ciclodextrina-glicosil-transferase, produção e propriedades das enzimas, estrutura e propriedades das ciclodextrinas, produção das ciclodextrinas.

3 CURSO PRÁTICO: 1. Determinação da atividade da fosfatase alcalina em soro sangüíneo humano 1.1. Determinação do coeficiente de extinção molar do p-nitrofenol Determinação da v o em função da variação da concentração de substrato Construção de gráfico de v o versus a concentração de substrato. 2. Determinação da atividade das transaminases AST e ALT por monitoramento de ponto final Método de Reitman & Frankel Construção da curva de calibração 2.2. Determinação no soro sanguíneo humano 3. Determinação da atividade de α-amilase (AMY) 3.1. No soro humano sanguíneo (quantitativo) e na saliva humana (qualitativo) 3.2. Em medicamento Creon 25000Unidades utilizando amido como substrato 4. Determinação da atividade da enzima conversora da angiotensina em soro sanguíneo humano. 5. Isolamento e determinação da atividade de invertase de Saccharomyces cerevisae Cur va de calibração de açúcar redutor(glicose) com ácido 3-5- dinitrosalisílico(dns). Determinação do coeficiente de extinção molar Determinação da velocidade inicial da reação da invertase com sacarose Determinação da velocidade inicial(v o ) Determinação de velocidade máxima(vmax) e Km Imobilização da invertase em alginato de sódio Reutilização da enzima imobilizada Produção de açúcar invertido com invertase imobilizada e aplicada em reator de leito fluidizado. Metodologia de Ensino Aulas teóricas e práticas. Nas aulas práticas os alunos deverão executar os protocolos experimentais para a obtenção de curvas de calibrações, bem como a dosagem de atividades enzimáticas nas amostras e elaborar relatório o qual deverá ser entregue aos Docentes. Bibliografia Básica e Complementar

4 1. LEHNINGER, A.L. Bioquímica, vol. 1-4, 2a. ed., São Paulo: Edgard Blucher, SEGEL, I.H. Bioquímica, teoria e problema, 1a. ed., Rio de Janeiro: Livros Técnicos e Científicos, REED, G. Enzymes in food processing. New York: Academic Press, SCHWIMMER, S. Source book of food enzymology. Westport: AVI Publishing, 1980, 967p. 5. WHITAKER, J.R. Principles of enzymology for the food science. New York: Marcer Dekker, GRACESA, P. y HUBBLE, J. Tecnologia de las enzimas. Zaragoza: Editorial Acribia, WISEMAN, A. Manual de Biotecnologia de las enzimas. Zaragoza: Editoral Acribia, EVANGELISTA, J. Tecnologia de alimentos. São Paulo: Atheneu, 2.ª Edição, VOET, D; VOET, J.; PRATT, C.W. Fundamentos de Bioquímica, São Paulo: Artmed, HUDSON, B.J. F. Biochemistry of food Protein, St. Louis: Elsevier, BURTIS, C.A.; ASHWOOD, E.R. (Eds.). Tietz fundamentos de química clínica, 6a. São Paulo: Elsevier, p. 12. BURTIS, C.A.; ASHWOOD, E.R. (Eds.). Tietz textbook of clinical chemistry and molecular diagnostics, 4th. ed., St. Louis: Elsevier, p. 13. BONN, E.P.S.; FERRARA, M.A.; CORVO, M.A. (Eds). Enzimas em biotecnologia: produção, aplicações e mercado. Rio de Janeiro: Interciência, p. 14. CICHOKE, ANTONY J.(Ed) The complete Book of enzymes Therapy. Avery, New York, p. Critérios da avaliação de aprendizagem e atividades de recuperação Conforme as normas estabelecidas pela Resolução UNESP Nº 106/2012, alterada pela Resolução UNESP Nº 23/2013, A avaliação do rendimento escolar na Disciplina Enzimologia Farmacêutica será feita em função do aproveitamento em duas provas teórica-práticas sob a forma de perguntas escritas/e ou oral, individual e/ou em grupo. O aluno deverá obter nota mínima de 5,0 em cada uma das provas. Substitutiva: O aluno que não obtiver nota 5,0 na primeira prova terá que realizar uma prova substitutiva referente aos tópicos abordados durante o período anterior à primeira prova e o mesmo procedimento deverá ser realizado para a segunda prova. A média final será a média aritmética das notas obtidas nas duas provas. Recuperação: O aluno reprovado na Disciplina Enzimologia Farmacêutica terá oportunidade de recuperação conforme calendário escolar e de acordo com a resolução da UNESP 106/2012. Portaria D.FCF/CAr 83/2013. Atividades propostas para a recuperação: Reunião dos alunos reprovados com os Docentes responsáveis pela Disciplina para orientação sobre elaboração de relatórios das aulas práticas e estudos dirigidos. Desenvolvimento das atividades e estudos propostos. Avaliação final- A avaliação dos estudos realizados no período de recuperação será feita em função do rendimento em uma prova sob a forma de perguntas escritas/e ou oral. O aluno deverá obter nota mínima de 5,0 para aprovação.

5 Ementa (tópicos que caracterizam as unidades do programa de ensino) Natureza e propriedades das enzimas; Cinética enzimática; Produção e purificação; Aplicações de enzimas em Análises Clínicas. Aplicações de enzimas em Fármacos e Medicamentos Aplicações de enzimas em Alimentos e Nutrição. Obtenção, produção e purificação de enzimas industriais Imobilização de enzimas e suas aplicações em biotecnologia. Aprovação do Conselho Departamental Aprovado em 21/10/2014 Aprovação do Conselho de Curso 17/11/2014 Aprovação da Congregação Portaria D.FCF/CAr 45/2006

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