2.1 Prevalência e Padrões de Consumo Actuais Legislação. 39
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- Ana Luiza Palma Teixeira
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3 TABELA DE CONTEÚDOS PREFÁCIO DIVULGAÇÃO DOS RESULTADOS: PUBLICAÇÕES E PRÉMIOS CIENTÍFICOS I V TABELA DE CONTEÚDOS 1 LISTA DE SIGLAS E ABREVIATURAS 9 RESUMO ABSTRACT 13 Parte I REVISÃO DA LITERATURA 23 Capítulo I Canabinóides 25 1 ANTECEDENTES HISTÓRICOS CONSUMO DE CANNABIS Prevalência e Padrões de Consumo Actuais Legislação BOTÂNICA: Cannabis sativa L FORMAS DE CONSUMO ESTRUTURA QUÍMICA E PROPRIEDADES Tipos de compostos presentes nas diferentes variedades da planta Propriedades dos Canabinóides PROPRIEDADES FARMACODINÂMICAS MECANISMO DE ACÇÃO Receptores dos canabinóides Canabinóides endógenos EFEITOS FARMACODINÂMICOS Potencialidades terapêuticas de antagonistas dos receptores dos canabinóides Determinação de Canabinóides em amostras biológicas por LC-MS Aplicação em Toxicologia Forense 1
4 7 TOXICOCINÉTICA Absorção Distribuição Metabolismo Eliminação Capítulo II Canabinóides e Condução Rodoviária. 91 Estado de Influenciado. 1 DROGAS E CONDUÇÃO RODOVIÁRIA: A PREVALÊNCIA DOS CANABINÓIDES ESTADO DE INFLUENCIADO A prática da condução A influência dos canabinóides na condução PROJECTOS DE INVESTIGAÇÃO NA EUROPA Capítulo III Determinação de Canabinóides em Amostras Biológicas: 107 Saliva, Sangue e Urina. 1 INTRODUÇÃO AMOSTRAS BIOLÓGICAS Saliva Sangue Urina DETERMINAÇÃO ANALÍTICA DE CANABINÓIDES TRIAGEM/ANÁLISE PRELIMINAR Análise em Saliva Análise em Sangue Análise em Urina Determinação de Canabinóides em amostras biológicas por LC-MS Aplicação em Toxicologia Forense
5 3.2 CONFIRMAÇÃO Introdução Cromatografia Líquida de Alta Resolução/Espectrometria de Massa Cromatografia Líquida de Alta Resolução Espectrometria de Massa Ionização Interfaces de ionização química à pressão atmosférica (APCI) Interfaces de tipo Electrospray (ES) MÉTODOS DE PREPARAÇÃO E/OU EXTRACÇÃO DAS AMOSTRAS Extracção Líquido-Líquido Extracção Sólido-Líquido Parte II DEFINIÇÃO E JUSTIFICAÇÃO DOS OBJECTIVOS FUNDAMENTOS GERAIS PARA A DEFINIÇÃO DOS OBJECTIVOS OBJECTIVOS GERAIS E OBJECTIVOS ESPECÍFICOS Parte III CONTRIBUIÇÃO PESSOAL TRABALHO EXPERIMENTAL 163 Capítulo I Caracterização do Método Analítico para Determinação de 165 Canabinóides em Amostras Biológicas 1 INTRODUÇÃO DEFINIÇÃO DOS PARÂMETROS DE VALIDAÇÃO METODOLOGIA DE VALIDAÇÃO APLICADA NO ESTUDO I ESPECIFICIDADE/SELECTIVIDADE II SUPRESSÃO IÓNICA III LIMITES DE DETECÇÃO E DE QUANTIFICAÇÃO IV LINEARIDADE/RECTA DE CALIBRAÇÃO V PRECISÃO E EXACTIDÃO Determinação de Canabinóides em amostras biológicas por LC-MS Aplicação em Toxicologia Forense 3
6 VI RECUPERAÇÃO. 177 VII ESTABILIDADE Estabilidade das soluções-padrão. 177 Estabilidade dos analitos em amostras processadas Estabilidade dos analitos após curtos períodos à temperatura de trabalho no laboratório Estabilidade dos analitos após ciclos de congelação-descongelação Capítulo II Desenvolvimento de um Método Analítico para a Detecção e 179 Quantificação de Canabinóides em Saliva 1 INTRODUÇÃO MATERIAL E MÉTODOS Substâncias estudadas Reagentes/Gases Material utilizado Sistema de LC-MS ENSAIOS EFECTUADOS Caracterização da metodologia analítica usada para a detecção, identificação e quantificação das substâncias em estudo Aplicação das condições analíticas finais aos padrões em fase móvel Estudo em saliva Selecção e preparação da amostra biológica Extracção de canabinóides a partir da saliva por fase sólida Validação do Método Analítico Resultados Obtidos I ESPECIFICIDADE/SELECTIVIDADE II SUPRESSÃO IÓNICA III LIMITES DE DETECÇÃO E DE QUANTIFICAÇÃO IV LINEARIDADE/RECTA DE CALIBRAÇÃO Determinação de Canabinóides em amostras biológicas por LC-MS Aplicação em Toxicologia Forense
7 V PRECISÃO E EXACTIDÃO VI RECUPERAÇÃO. 203 VII ESTABILIDADE COMENTÁRIOS FINAIS E CONCLUSÕES Capítulo III Aplicação do Método Analítico Validado em Saliva 209 a Amostras de Casos Reais 1 INTRODUÇÃO MATERIAL E MÉTODOS Enquadramento do consumo Caracterização dos indivíduos voluntários envolvidos no estudo Colheita das amostras Preparação das amostras para determinação dos canabinóides RESULTADOS E DISCUSSÃO COMENTÁRIOS FINAIS E CONCLUSÕES Capítulo IV Desenvolvimento de um Método Analítico para Detecção, 225 Identificação e Quantificação simultânea de 9 -THC, 9 -THC-OH e 9 -THC-COOH em Saliva, Sangue e Urina 1 INTRODUÇÃO MATERIAL E MÉTODOS Substâncias estudadas Reagentes/Gases Material utilizado Sistema de LC-MS ENSAIOS EFECTUADOS Caracterização da metodologia analítica usada para a detecção, identificação e quantificação das substâncias em estudo Aplicação das condições analíticas finais aos padrões em fase móvel Determinação de Canabinóides em amostras biológicas por LC-MS Aplicação em Toxicologia Forense 5
8 3.3 Estudo em Saliva Selecção e Preparação da amostra biológica Extracção de canabinóides a partir da saliva por fase sólida Validação do Método Analítico Resultados Obtidos Estudo em Urina Selecção e Preparação da amostra biológica Extracção de canabinóides a partir da urina por fase sólida Validação do Método Analítico Resultados Obtidos Estudo em Sangue Selecção e Preparação da amostra biológica Extracção de canabinóides a partir do sangue por fase sólida Validação do Método Analítico Resultados Obtidos DISCUSSÃO DOS RESULTADOS E CONCLUSÕES Capítulo V Aplicação do Método Analítico Validado a Amostras 297 de Casos Reais 1 INTRODUÇÃO MATERIAL E MÉTODOS Caracterização dos indivíduos voluntários envolvidos no estudo Enquadramento do Consumo Colheita das Amostras Determinação dos Canabinóides por LC-MS Determinação dos tempos de semi-vida de 9 -THC e 9 -THC-COOH Análise Estatística RESULTADOS Concentrações de Canabinóides em Saliva Concentrações de Canabinóides em Sangue Concentrações de Canabinóides em Urina DISCUSSÃO DOS RESULTADOS Concentrações de Canabinóides em Saliva Determinação de Canabinóides em amostras biológicas por LC-MS Aplicação em Toxicologia Forense
9 4.2 Concentrações de Canabinóides em Sangue Concentrações de Canabinóides em Urina Concentrações de Canabinóides em Saliva versus Sangue Concentrações de Canabinóides em Saliva versus Urina Concentrações de Canabinóides em Sangue versus Urina COMENTÁRIOS FINAIS E CONCLUSÕES Capítulo VI CONCLUSÕES 351 Parte IV REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 359 Determinação de Canabinóides em amostras biológicas por LC-MS Aplicação em Toxicologia Forense 7
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