Priscila Graziela Alves Martins
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- Maria Vitória Monteiro Canela
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1 Priscila Graziela Alves Martins
2 Tuberculose A doença é causada pela bactéria Mycobacterium tuberculosis. Em 2009 foram registrados 1,7 milhão de mortes ocasionadas pela tuberculose no mundo. A OMS estima que atualmente 1/3 da população mundial esteja infectado pela M. tuberculosis.
3 Tuberculose Vacina BCG Tratamento longo a base de antibióticos (isoniazida, rifampicina, pirazinamida e estreptomicina) com vários efeitos colaterais. Desenvolvimento de cepas resistentes conhecidas como multi-resistentes e ultraresistentes.
4 Diabetes mellitus É uma doença crônica que ocorre quando o pâncreas não produz insulina suficientemente ou o corpo não consegue usar eficientemente a insulina que o corpo produz. Segundo a OMS mais de 220 milhões de pessoas no mundo têm diabetes. Tipo 1 Tipos de diabetes Tipo 2 Gestacional
5 Diabetes mellitus e suas consequências comuns A doença aumenta o risco de doenças cardíacas e derrame. Combinada com o baixo fluxo sanguíneo pode aumentar a chance de lesões no pé. Falência de rins. Cegueira.
6 Peste bubônica A peste bubônica é causada por bactérias do gênero Yersinia. Três espécies patogênicas para o homem: - Yersinia pestis - Yersinia pseudotuberculosis -Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis causa febre, sepse e dor abdominal aguda. Yersinia enterocolitica causa síndromes gastrointestinais.
7 Peste bubônica Yersinia pestis é a causadora da peste bubônica. Paciente com sepse ocasionada pele peste. Inchaço de nódulo linfático (bubão). A peste bubônica ou peste negra dizimou entre 25 a 75 milhões de pessoas (1/3 da população) da Europa no século XIV. A peste já foi utilizada como arma biológica: Jaffa no século XIV; e na primeira guerra mundial foi usada contra civis chineses na Manchúria. Tem-se um medo crescente que esta possa ser utilizada atualmente como arma biológica.
8 Peste bubônica Via de transmissão: Vias de transmissão das espécies de Yersinia patogênicas para humanos.
9 O que a tuberculose, diabetes e peste têm em comum? Tuberculose PtpA PtpB Impedem a fusão fagossomo-lisossomo em macrófagos. Diabetes Peste PTP1B YopH Inibição da resposta imune à bactéria por: -Quebra de adesões focais -Inibição da fagocitose -Inibição da liberação de fator de necrose tumoral alfa - Inibição da resposta oxidativa
10 O que são as enzimas PtpA, PtpB, YopH e PTP1B? A fosforilação no resíduo de tirosina é essencial no controle de processos como: - Metabolismo; - Crescimento celular; - Comunicação célula-célula; - Migração celular; - Transcrição gênica; - Resposta imune. Controle do nível de fosforilação em resíduo de tirosina por quinase e fosfatase.
11 A busca de inibidores destas enzimas: O CEBIME (Centro de Biologia Molecular Estrutural) em parceria com o laboratório de Estrutura e Atividade do departamento de química da UFSC tem desenvolvido estudos de inibição das 4 enzimas. Centrifugação Obtenção do pellet de bactérias Ensaios enzimáticos e análise bioquímica da proteína Lise das bactérias Purificação da proteína de interesse
12 Purificação das proteínas recombinantes: Cromatografia de afinidade a metal imobilizado Histidina Imidazol
13 Medindo a atividade de fosfatase:
14 Testando os potenciais inibidores Triagem de inibidores para YopH Cálculos de IC 50 Cinética enzimática 265 compostos 25 µm Inibição (%) dayoph (14 nm) outra 30 % 35 compostos 10 a 100 µm Inibição de cinquenta por cento da atividade (%) dayoph (14 nm) outra 50 µm 1/3 e ½ da concentração encontrada nos testes de IC 50 4 compostos 0,2 mm a 12,8 mm de p-npp da absorbância convertida em unidades de concentração (coeficiente de extinção molar)/ tempo de reação e pela quantidade de proteína em mg Desconsiderado Cálculo de IC 50 Desconsiderado Cinética enzimática
15 Já tivemos alguns resultados:
16 CEBIME A galera!!!
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