ASSOCIAÇÃO DE ISOLADOS DE Trichoderma SPP. E ÁCIDO INDOL-3- BUTÍRICO (AIB) NA PROMOÇÃO DE ENRAIZAMENTO DE ESTACAS E CRESCIMENTO DE MARACUJAZEIRO

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1 Originl Article 966 ASSOCIAÇÃO DE ISOLADOS DE Trichoderm SPP. E ÁCIDO INDOL-3- BUTÍRICO (AIB) NA PROMOÇÃO DE ENRAIZAMENTO DE ESTACAS E CRESCIMENTO DE MARACUJAZEIRO ASSOCIATION OF ISOLATES OF Trichoderm SPP. AND INDOLE-3-BUTYRIC ACID (IBA) IN PROMOTING ROOT AND GROWTH OF PASSION Hugo Almeid dos SANTOS 1 ; Sueli Corrê Mrques MELLO 1 ; José Ricrdo PEIXOTO Embrp Recursos Genéticos e Biotecnologi, Prque Estção Biológic, Brsíli, DF, Brsil. hugoosn@cenrgen.embrp.br ; 2. Professor, Doutor, Universidde de Brsíli - UnB, Brsíli, DF, Brsil. RESUMO: Este trblho teve como objetivo estudr o efeito de isoldos de Trichoderm no enrizmento e no desenvolvimento de estcs de cule de Pssiflor edulis Sins f. flvicrp Deg. juntmente com o ácido indol-3-butírico (AIB). Os experimentos form relizdos em cs-de-vegetção, dotndo-se o delinemento experimentl em blocos csulizdos, em esquem ftoril (6x2), com cinco trtmentos: (isoldos de Trichoderm) com e sem plicção do AIB e qutro repetições. A prcel experimentl constituiu-se de um vso com qutro plnts. A nálise dos ddos obtidos revelou diferenç significtiv entre os trtmentos qunto à mss de mtéri sec e fresc ds plnts de mrcujzeiro. Os cinco isoldos de Trichoderm presentrm efeito positivo no incremento de mtéri sec e fresc. Houve interção significtiv entre os ftores com e sem hormônio. Não foi detectdo efeito significtivo do uso de Trichoderm, qunto o enrizmento de estcs. No entnto, os isoldos proporcionrm resultdos positivos no incremento de mtéri fresc e sec ns estcs de mrcujzeiro. PALAVRAS CHAVE: Fungo. Promotores de crescimento de plnts. Pssiflor edulis. INTRODUÇÃO O mrcujzeiro-zedo (Pssiflor edulis Sims f. flvicrp Deg.) constitui um ds principis espécies frutífers cultivds no Brsil. A mior prte d produção concentr-se ns regiões Nordeste e Sudeste, responsáveis, em 2006, por proximdmente 83% d produção ncionl, seguids pels regiões Norte e Centro Oeste, com 13%. O pís vem se destcndo no cenário mundil, com um produção em torno de tonelds (Agrinul, 2007). A obtenção de muds de lt qulidde é estrtégic pr mior competitividde d cultur, tendo em vist tnto o mercdo interno como o externo (MINAMI, et l.1994). A propgção vegettiv por estqui é o método mis recomenddo pr multiplicção comercil ds fruteirs tropicis perenes, especilmente dquels de polinizção cruzd, justmente por trnsmitir o ptrimônio genético ds plnts mtrizes pr s plnts clonds, umentndo precocidde e uniformidde fenotípic dos pomres (SOUSA; ARAÚJO, 1999). O trtmento hormonl ds estcs proporcion mior porcentgem de enrizmento, uniformidde fenológic do mteril e produção em menor tempo, reduzindo ssim, permnênci d estc no leito de enrizmento (ALVARENGA; CARVALHO, 1983). O ácido 3-indolcético (AIA) e o ácido indolbutírico (AIB) são uxins e presentm importnte ppel no enrizmento de plnts (VÁLIO, 1986). Fungos do gênero Trichoderm estão entre os microrgnismos mis comumente estuddos como gentes de biocontrole de doençs e presentm, tmbém, tividde como promotores de crescimento de plnts (ALTMORE, et l. 1999). Muits desss espécies possuem cpcidde de se ssocir às rízes, formndo um interção interespecífic de simbiose, por mecnismos similres àqueles de fungos micorrízicos (BENÍTEZ, 2004). O presente trblho teve por objetivo estudr o efeito de isoldos de Trichoderm no enrizmento e incremento de biomss em estcs de mrcujzeiro-zedo e seu desempenho ssocido o ácido indolbutírico (AIB). MATERIAIL E MÉTODOS Obtenção dos isoldos Form utilizdos os isoldos CEN 280 (T. longibrchitum), CEN 201 (T. sperellum), CEN 251 (T. hrzinum), CEN 523 (T. sperellum) e CEN 524 (T. hrzinum) pertencentes à Coleção de Microrgnimos pr Controle Biológico de Fitoptógenos e Plnts Dninhs d Embrp Recursos Genéticos e Biotecnologi. Os dois últimos form obtidos prtir de mostrs de solo, Received: 09/09/09 Accepted: 15/02/10

2 967 retirds d rizosfer de mrcujzeiro, enqunto os demis são provenientes de diferentes bioms. Os isolmentos form relizdos pelo método de diluição em série de prtículs de solo (WOLLUM, 1982), utilizndo-se o meio de Mrtin pr desenvolvimento ds colônis. O meio de bttdextrose-ágr (BDA) foi utilizdo pr purificção e rmzenmento dos isoldos. A incubção ds culturs ocorreu em incubdor do tipo B.O.D. (mrc Nov Técnic, 374 CDG), reguld pr tempertur de 25 o C, com fotoperíodo de 12 hors. Pr produção do inoculnte, três discos de micélio-ágr (9 mm de diâmetro), retirdos de culturs cultivds por sete dis em meio BDA, form trnsferidos pr scos plásticos utoclváveis (42 cm de comprimento e 28 cm de lrgur) contendo o substrto sólido. Este, que consistiu de 200 g de rroz prboilizdo, foi umedecido com 120 ml de águ destild e, então, utoclvdo 120 o C durnte 25 minutos, ntes de receber o fungo. O cultivo ocorreu em sl de incubção, onde tempertur se mnteve 25 ºC e o fotoperíodo de 12 hors, durnte 10 dis. Preprção ds estcs de cule e enrizmento Os ensios form conduzidos em cs de vegetção, n Estção Biológic d Universidde de Brsíli (UnB), onde tempertur vriou de C e umidde reltiv foi mntid em torno de 80%. Estcs com 15 cm de comprimento e sem folhs (NOGUEIRA, 2007) form obtids de cules de clones de mrcujzeiro-zedo d vriedde MAR 2050, pertencentes à coleção d Fculdde de Agronomi e Veterinári d UnB. As bses ds estcs form mergulhds por 600 segundos em solução de AIB 1000 ppm (SOUZA, 2006), e em seguid, plntds à profundidde de cinco centímetros, em substrto comercil à bse de vermiculit mis csc de Pinus sp. (Plntmx ), previmente inoculdo com os isoldos de Trichoderm spp., n proporção de 5 g de rroz colonizdo kg -1 de substrto. Nos trtmentos sem AIB, s bses ds estcs form mergulhds por 600 segundos em águ destild e, então, procedeuse o estquimento em substrto previmente inoculdo com Trichoderm, n mesm proporção cim, foi incluído um trtmento de controle, com s bses ds estcs mergulhds em águ destild e plntds em substrto sem Trichoderm. O delinemento experimentl foi em blocos csulizdos, seguindo o esquem ftoril 6 x 2, totlizndo 12 trtmentos, sendo cinco isoldos de Trichoderm + controle (ftor ), com (1000 ppm) e sem AIB (ftor b), com qutro repetições. c) Análise esttístic A prcel experimentl foi constituíd de um vso com qutro plnts. Aos 90 dis, s estcs form coletds, determinndo-se porcentgem de estcs enrizds. Pr determinção do incremento d mtéri fresc e sec, s plnts form pesds, condicionds em scos de ppel e levds à estuf 50 ºC, onde permnecerm por 72 hors. Os ddos form submetidos à nálise de vriânci e s médis comprds pelo teste de Duncn 5% de probbilidde. Tmbém se relizou nálise de correlção liner, entre s vriáveis, bsendo-se n significânci de seus coeficientes. N clssificção de intensidde d correlção pr p 0,01, est foi considerd muito forte (r ± 0,91 ± 1,00), forte (r ± 0,71 ± 0,90), médi (r ± 0,51 ± 0,70) e frc (r ± 0,31 ± 0,50), de cordo com Guerr e Liver (1999). Pr os cálculos referentes às nálises esttístics utilizou-se o progrm computcionl SANEST (ZONTA; MACHADO, 1995). RESULTADOS E DISCUSSÃO Os resultdos obtidos evidencirm efeito diferencido de isoldos do fungo Trichodem sobre o enrizmento e o incremento de mtéri fresc e sec ns estcs de mrcujzeiro (Figurs 1 e 2; Tbel 1). O isoldo CEN 201 foi o único que não presentou diferenç em relção o controle, enqunto os isoldos CEN 280, CEN 523, CEN 524 e CEN 251 não diferirm significtivmente entre si. Com relção o cúmulo de mtéri sec, os miores vlores médios form verificdos com os isoldos CEN 280 e CEN 523, que não diferirm do CEN 524, nem do CEN 251, o qul não diferiu significtivmente do CEN 201 e do controle. Ao serem comprdos os trtmentos com e sem AIB em mtéri fresc (Tbel 1), efeito positivo com dição do reguldor de crescimento foi verificdo pens com o isoldo CEN 251. Este ddo obtido corrobor reltos de Pires, (2007), o demonstrr que estcs trtds com AIB presentrm mior índice de mss fresc de prte ére. Entretnto, pr os demis isoldos qui estuddos e pr o controle (sem o fungo) os vlores médios d mss d mtéri fresc obtidos com dição do reguldor de crescimento form inferiores os obtidos sem su dição, embor este efeito tenh sido significtivo pens com os isoldos CEN 280 e CEN 201.

3 peso d mtéri fresc (g) b b CEN 280 CEN 523 CEN 524 CEN 251 CEN 201 Controle Trtmentos Figur 1. Efeito do Trichoderm no incremento de mtéri fresc (g) em plnts oriunds de estcs de mrcujzeiro, independente do uso de AIB, o nível de 5% de significânci, pelo teste de Duncn. peso d mtéri sec (g) b bc bc c 0 CEN 523 CEN 280 CEN 524 CEN 251 CEN 201 Controle Trtmentos Figur 2. Vlores médios de mtéri sec (g) de plnts de mrcujá obtids pelo trtmento ds estcs com isoldos de Trichoderm, independente do uso de AIB, o nível de 5% de significânci, pelo teste de Duncn. Tbel 1. Vlores médios de mtéri fresc (g) obtid em muds de mrcujzeiro produzids por estcs submetids trtmento com diferentes isoldos de Trichoderm, com e sem hormônio (AIB). Hormônio CEN 280 CEN 523 CEN524 CEN 201 CEN251 Controle 0 AIB 35,07 A 32,55 A 30,90 b A 18,10 bc A 15,47 c B 10 c A 1000 ppm AIB 21,65 b B 21,92 b A 22,97 A 6,95 c B 30,87 A 8,42 bc A * Médis seguids de mesm letr, miúsculs n verticl e minúsculs n horizontl, não diferem entre si pelo teste de Duncn o nível de 5% de significânci.

4 969 Três dos cinco isoldos testdos presentrm efeitos positivos significtivos, em relção o controle, com relção o cúmulo de mtéri sec: CEN 280, CEN 523 e CEN 524. (Figur 2). Neste cso, o efeito do AIB não se mostrou significtivo e, por isso, são presentds pens s médis geris, n Tbel 2. Estudos relizdos por Sntos (2008) demonstrrm que, lém desses três isoldos, CEN 201 tmbém se destcou como promotor de crescimento, em ensios conduzidos em cs de vegetção, utilizndo Glycine Mx (L.) Merril, Ze mys, e Phseolus vulgris L., Tshouridou e Thnssoulopoulos (2001) observrm que isoldos de T. koningii promoverm mior emergênci de sementes de Solnum lycopersicum, ssim como o incremento de mtéri sec e fresc. Resende (2004) tmbém verificou mior cumulo de mtéri sec ns rízes ds plnts de Ze mys oriunds de sementes inoculds com T. hrzinum. Com relção o enrizmento ds estcs, não foi detectdo efeito significtivo do uso de Trichoderm, qundo se desconsiderou o uso de AIB, ns nálises (Tbel 2). Tbel 2. Efeito do Trichoderm no enrizmento de estcs de mrcujá independente do uso de AIB. Trtmentos CEN 201 CEN 251 CEN 280 CEN 523 CEN 524 Controle Peso (g) 67,79 66,66 66,66 65,62 62,5 57,26 * Médis seguids de mesm letr, não diferem entre si o nível de 5% de significânci, pelo teste de Duncn. N presenç de AIB os isoldos CEN 524 e CEN 201 presentrm os miores vlores médios de porcentgem de estcs enrizds. Porém, tis vlores não diferirm significtivmente dos obtidos com os isoldos CEN 251 e CEN 523. Este, por su vez, não diferiu do CEN 280 e do controle (sem o fungo). O CEN 524 foi o único, pr o qul, o efeito d dição de reguldor de crescimento diferiu significtivmente (Tbel 3). Tbel 3. Efeito de isoldos de Trichoderm como indutor de enrizmento de estcs de mrcujá com e sem AIB. CEN 524 CEN 201 CEN 251 CEN 523 CEN 280 Controle COM AIB 88,33 A 79,16 A 77,08 b A 58,33 bc A 52,08 bc A 50 c A SEM AIB 50 B 60,41 A 56,25 A 72,91 A 72,91 A 64,58 A * Médis seguids de mesm letr, miúscul n verticl e minúscul n horizontl, não diferem entre si o nível de 5% de significânci, pelo teste de Duncn. Os resultdos obtidos neste trblho estão em concordânci com reltos de Fchinello (1995), cujos ddos obtidos indicrm eficiênci, tnto de AIB qunto de Ácido α-nftlenocético (ANA), em promover enrizmento de estcs de mrcujzeiro. Segundo esses utores, os dois reguldores de crescimento são citdos como eficientes e superrm o efeito de outro fitormônio ácido indol-3-cético (AIA) tmbém vlido. Hrmn (2000) reltou promoção de crescimento verificd com um isoldo comercil de T. hrzinum (T-22), ns culturs de Glycine Mx (L.) Merril e Ze mys, lém de incremento n produção de frutos de Cpsicum nnum L, comprtivmente o controle (plnts não trtds com o fungo). Esse isoldo vem sendo utilizdo comercilmente, em vários píses, como princípio tivo de inoculntes de efeito biofungicid e promotor de desenvolvimento de plnts. Altmore, et l. (1999) postulou que promoção de crescimento, pelo menos no cso do isoldo T-22, reside n su cpcidde de solubilizção de nutrientes importntes pr plnt. Trblhos nest linh de pesquis já hvim sido conduzidos por Kleifeld e Chet (1992), que reltou um umento n produção de mss sec de plnts de Cucumis stivum trtds com T. hrzinum, tnto em solo utoclvdo (26%) qunto em solo não utoclvdo (43%). Crvlho Filho, et l (2008) demostrrm produção de AIA por isoldos de T. hrzinum, ssim como colonizção de rízes e incremento de prte ére em clones de híbridos de Euclyptus urophill x E. grndis (G100). Bker (1988) postulou que o umento do crescimento induzido por espécies de Trichoderm, resultri no controle de ptógenos secundários, lido à produção de ftores estimulntes de crescimento. Portnto, o presente trblho vem contribuir com informções sobre o efeito de fungos do gênero Trichoderm, pertencentes à Coleção de Microrgnimos pr Controle Biológico de Fitoptógenos e Plnts Dninhs d Embrp Recursos Genéticos e Biotecnologi, n promoção de desenvolvimento em plnts, ssim como su ssocição com AIB, em um espécie frutífer de grnde relevânci.

5 970 Vle slientr que utilizção de reguldores de crescimento tem sido indicd com o objetivo de celerr formção de rízes, umentr o percentul de enrizmento ds estcs, promover melhori d qulidde ds muds e umentr uniformidde no viveiro. Pr Albuquerque e Albuquerque, (1981), o teor dequdo de uxin exógen pr estímulo do enrizmento depende d espécie e d concentrção de uxin existente no tecido. Estudos conduzidos por Pires (2007) evidencirm o efeito de AIB no enrizmento de mrcujzeiro. Efeito semelhnte foi reltdo por Chves (2004), que obteve 100% de enrizmento de estcs de mrcujzeiro trtds com AIA. Do mesmo modo, Junqueir (2006) obtiverm bons resultdos, utilizndo esse hormônio, em estcs de espécies de Pssiflor ntivs do cerrdo. CONCLUSÕES A ssocição de Trichoderm spp. com AIB pr enrizmento de estcs de mrcujzeiro não foi vntjos. No entnto, é importnte que estudos com o uso de isoldos de Trichoderm, ssocidos ou não com reguldores de crescimento, sejm relizdos no futuro pr observção desses efeitos em outrs culturs. Os isoldos testdos no presente estudo não promoverm enrizmento ds estcs de mrcujzeiro. O uso de Trichoderm spp. proporcionou resultdos positivos no incremento de mtéri fresc e sec de plnts de mrcujá oriunds de estcs. ABSTRACT: This work imed to study the effect of isoltes of Trichoderm on rooting nd development of cuttings of Pssiflor edulis Sins f. flvicrp Deg. together with indol butyric-3- cid (IBA). The experiments were performed under greenhouse conditions, dopting the experimentl design of rndomized blocks in fctoril scheme (6x2) nd using the following tretments: five isoltes of Trichoderm, with nd without ppliction of the hormone IBA, with four replictions. The experimentl plot consisted of pot with four plnts. The nlysis of dt reveled significnt differences mong tretments for dry mtter weight of Pssiflor plnt. The five isoltes of Trichoderm showed positive effect on incresing both dry nd fresh weight. There ws n Significnt interction between fctors with nd without hormone. No significnt effect of Trichoderm ws found. However, the isoltes showed positive effects on fresh nd dry mss of Pssiflor cuttings. KEYWORDS: Fungus. Promoter of plnt growth. Pssiflor edulis. REFERÊNCIAS ALBUQUERQUE, T. C. S. de; ALBUQUERQUE, J. A. S. de. Influênci do tipo de estc e de lguns reguldores de crescimento no enrizmento e desenvolvimento de estcs de figueir (Ficus cric L.). In: CONGRESSO BRASILEIRO DE FRUTICULTURA, 6., Recife. Anis. Recife: UFPE, n. 3, p AGRIANUAL: Anuário d gricultur Brsileir, São Pulo. (Ed) FNP Consultori & comércio, p. ALVARENGA, L. R.; CARVALHO, V. D. Uso de substâncis promotors de enrizmento de estcs frutífers. Informe Agropecuário. Belo Horizonte, v. 9, n. 101, p , ALTOMARE, C.; NORVELL, W. A.; BJORKMAN, T.; HARMAN G. E. Solubiliztion of phosphtes nd micronutrients by the plnt growth promoting nd biocontrol fungus Trichoderm hrzinum Rifi. Applied nd Environmentl Microbiology, v. 65, n. 7, p , BAKER, R. Trichoderm spp. s plnt growth stimulnts. Criticl Reviews in Biotechnology, Boc Rton. v. 7, n. 1, p BENÍTEZ, T.; RINCÓN, A. M.; LIMÓN, M. C.; CODÓN, A. C. Biocontrol, Mechnisms of Trichoderm Strins. Interntionl Microbiology, v. 7, p

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