WALTER ARTHUR SILVA VALENTE
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- Luiz Guilherme Rodrigues Balsemão
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1 WALTER ARTHUR SILVA VALENTE ANÁLISE IMUNOISTOQUÍMICA DA EXPRESSÃO DE Ki-67, Bcl-2, EGF e CD57 NO ESPECTRO EVOLUTIVO DE GRANULOMAS E CISTOS PERIRRADICULARES 2016 i
2 WALTER ARTHUR SILVA VALENTE ANÁLISE IMUNOISTOQUÍMICA DA EXPRESSÃO DE Ki-67, Bcl2, EGF e CD57 NO ESPECTRO EVOLUTIVO DE GRANULOMAS E CISTOS PERIRRADICULARES Dissertação apresentada ao Programa de Pós-graduação em Odontologia da Universidade Estácio de Sá, como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Odontologia (Endodontia). ORIENTADOR: Prof. Dr. Fábio Ramôa Pires UNIVERSIDADE ESTÁCIO DE SÁ RIO DE JANEIRO 2016 ii
3 Aquele que Crê em Mim, nunca estará sozinho. Jesus Cristo iii
4 AGRADECIMENTOS A Deus pela presença em minha vida e por me proporcionar força e vontade para a realização de mais um sonho. A minha família, na pessoa de minha mãe Letice Valente, ao meu pai Walter Valente, e a minha irmã, Andressa Shoyana, pelo incansável incentivo e apoio, fundamentais para meu crescimento profissional e pessoal, permitindo, assim, que eu realizasse esse grande sonho de ser um Mestre. Ao nobre Mestre e Prof. Fábio Ramôa Pires, meu orientador, pelo exemplo a ser seguido como Cirurgião-Dentista e Professor, pelo profissionalismo, atenção, paciência e seriedade com o qual conduziu esses dois anos de muito trabalho. Muito obrigado por todo o conhecimento acrescentado em minha vida. À Profa. Luciana Armada Dias, minha eterna inspiração, de uma humanidade admirável, pela amizade, dedicação, atenção e exemplo de vida. Obrigado por estimular e desejar sempre o meu crescimento profissional. Por tudo o que representa em minha vida, o meu agradecimento pessoal. À Profa. Águida Maria Menezes Aguiar Miranda, pela garra, atenção e colaboração com seus conhecimentos, experiência e profissionalismo que foram essenciais para a minha formação e amadurecimento profissional na minha jornada como Cirurgião-Dentista. Ao Prof. Renato Aló da Fontoura, pela confiança, por acreditar em minha capacidade, pelo estímulo ao meu crescimento dentro da odontologia, pela iv
5 paciência, dedicação e orientação sempre, cujos conhecimentos foram essenciais para a minha formação em Odontologia. Muito obrigado. Aos professores do Programa de Pós-Graduação em Odontologia (PPGO) pela acolhida, pela paciência, pela dedicação, estímulo, apoio, ensinamentos e experiências transmitidos durante o caminhar deste curso. Aos meus queridos amigos de turma Janderson Teixeira, Carolina Barrozo minha eterna dupla, Debora Barrocas, Thaís Boechat, Thaís Coutinho, Laura Julianelli, Márcia Luz, Mariane Lopes, Renata Val e Sabrina Brasil, sempre fortes e unidos pelo bem da turma, por partilharem comigo momentos de alegrias e dificuldades, tornando esse caminhar mais suave e que serão eternamente parte de minha memória. Ao Felipe Gustavo Diogo Antônio pelo imensurável apoio, dedicação, amizade, carinho e atenção, importantíssimos para a caminhada na reta final desse curso. À nossa incrível secretária do PPGO e amiga, Angélica, pela amizade e amor por todos os alunos do programa. v
6 ÍNDICE RESUMO ABSTRACT LISTA DE FIGURAS LISTA DE TABELAS LISTA DE ABREVIATURAS vii viii ix x xii 1 INTRODUÇÃO 1 2 REVISÃO DA LITERATURA 3 3 JUSTIFICATIVA 15 4 HIPÓTESE 16 5 OBJETIVO 17 6 MATERIAIS E MÉTODOS 18 7 RESULTADOS 23 8 DISCUSSÃO 31 9 CONCLUSÕES REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ANEXOS 38 vi
7 RESUMO Objetivo: Analisar de forma comparativa a expressão do fator de crescimento epidérmico (EGF), a presença de células natural killer (células CD57+), a proliferação epitelial (Ki-67) e a expressão de bcl-2 em lesões perirradiculares inflamatórias (LP) em diferentes momentos evolutivos em componentes inflamatórios distintos. Materiais e Métodos: A amostra foi composta por 52 LP, incluindo 22 granulomas perirradiculares (GP) e 30 cistos perirradiculares (CP), divididos em 3 grupos: GP, CP iniciais e CP avançados. Foi realizada a análise histológica e imunoistoquímica de todos os casos e a correlação destes resultados com cada grupo estudado. Resultados: Não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas quanto a expressão de bcl-2, a presença de células CD57+ e a expressão de ki-67 quando foram comparados os grupos estudados. A expressão de EGF foi mais frequente em CP que em GP e células CD57+ foram mais encontradas em LP permeadas por infiltrado inflamatório intenso. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas quando foram comparadas a presença de células CD57+, a expressão de bcl-2 e a expressão de EGF de acordo com o tipo de infiltrado inflamatório e com o tipo de epitélio de revestimento dos CP. Conclusões: Os resultados do presente estudo mostraram que a expressão de EGF foi maior em CP do que em GP e que células CD57+ foram mais encontradas em LP permeadas por infiltrado inflamatório intenso. Palavras-chave: Cisto Periapical: Granuloma Periapical; imunoistoquímica; CD57; bcl-2, ki-67; EGF. vii
8 ABSTRACT Objective: to comparatively analyze the expression of epidermal growth factor (EGF), the presence of natural killer cells (CD57+ cells), epithelial proliferation (Ki-67) and bcl-2 expression in inflammatory periapical lesions (IPL) in different evolutive stages and showing different inflammatory profiles. Materials and Methods: the sample was composed by 52 IPL, including 22 periapical granulomas (PG) and 30 periapical cysts (PC), divided in three groups: PG, initial PC and advanced PC. Histological and immunohistochemical analysys of all cases was performed and the results were compared among the three studied groups. Results: there were no statistically significant differences regarding the expression of bcl-2, the presence of CD57+ cells and the expression of ki-67 comparing the three groups. The expression of EGF was more frequent in PC than in PG and the presence of CD57+ cells was more frequent in IPL with intense inflammatory infiltrate. There were no statistically significant differences when comparing the presence of CD57+ cells, the expression of bcl-2 and the expression of EGF according with the type of inflammatory infiltrate and the type of epithelial lining from the PC. Conclusions: the results of the present study showed that the expression of EGF was more frequent in PC comparing with PG and that CD57+ cells were more frequent in IPL showing an intense inflammatory infiltrate. Key-words: Periapical cyst; periapical granuloma; immunohistochemistry; CD57; bcl-2, ki-67; EGF. viii
9 LISTA DE FIGURAS Página Figura 1. Expressão de Ki-67 no revestimento epitelial de CP 25 (Imunoperoxidase 1000x). Figura 2. Presença de células CD57+ em LP permeada por infiltrado inflamatório crônico (A, Imunoperoxidase 1000x) e misto (B, Imunoperoxidase 1000x); Expressão de bcl-2 no epitélio (C, Imunoperoxidase 1000x) e no tecido conjuntivo mostrando inflamação crônica (D, Imunoperoxidase 1000x) de um CP; Expressão de EGF no epitélio de um CP inicial (E, Imunoperoxidase 200x) e no epitélio hiperplásico de um CP avançado (F, Imunoperoxidase 200x). 30 ix
10 LISTA DE TABELAS Página Tabela 1. Anticorpos primários utilizados no estudo com seus respectivos clones, fabricantes e diluições. 20 Tabela 2. Distribuição da presença de células CD57+ de acordo com o diagnóstico final. 25 Tabela 3. Distribuição da expressão de bcl-2 de acordo com o diagnóstico final. 26 Tabela 4. Distribuição da expressão de EGF de acordo com o diagnóstico final. 26 Tabela 5. Distribuição da presença de células CD57+ e da expressão de bcl-2 de acordo com a intensidade do infiltrado inflamatório. 27 Tabela 6. Distribuição da expressão de EGF de acordo com a intensidade do infiltrado inflamatório. 27 Tabela 7. Distribuição da presença de células CD57+ e da expressão de bcl-2 de acordo com o tipo de infiltrado inflamatório. 28 Tabela 8. Distribuição da expressão de EGF de acordo com o tipo de infiltrado inflamatório. 28 Tabela 9. Distribuição da presença de células CD57+ e da expressão de bcl-2 de acordo com o tipo de epitélio de revestimento dos CP. 28 x
11 Tabela 10. Distribuição da expressão de EGF de acordo com o tipo de epitélio de revestimento dos CP. 29 Tabela 11. Média do tamanho macroscópico dos espécimes de acordo com a presença de células CD57+ e com a expressão de bcl-2 e de EGF. 29 xi
12 LISTA DE ABREVIATURAS CP: Cisto perirradicular inflamatório GP: Granuloma perirradicular inflamatório EGF: Fator de crescimento epidérmico CD57: Células NK (natural killer) IL: Interleucina LP: Lesão perirradicular inflamatória PBS: Solução salina tamponada com fosfato TNF α: Fator de necrose tumoral α TGF ß: Fator transformante de crescimento ß DP: Desvio padrão xii
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