94 REB Volume 6 (1): 94-101, 2013 ISSN 1983-7682. Revista Eletrônica de Biologia Presença de larva migrans em áreas de lazer nas creches, escolas infantis municipais e praças públicas de Salto de Pirapora, SP Presence of migrans grubs in nursery, nursery school and public places of Salto de Pirapora, São Paulo, Brazil Amanda Dantas Borges¹; Ghislain Mwamba Tshibangu¹; Carolina Guilherme Prestes Beyrodt²; Walter Barrella³ ¹Graduandos do 2º ano de Ciências Biológicas, Faculdade de Ciências Médicas e Biológicas, Pontifícia Universidade Católica de São Paulo PUCSP. ²Departamento de Morfologia e Patologia, Faculdade de Ciências Médicas e Biológicas, Pontifícia Universidade Católica de São Paulo PUCSP. ³Departamento de Ciências do Ambiente, Faculdade de Ciências Médicas e Biológicas, Pontifícia Universidade Católica de São Paulo PUCSP. Email contato: ghistshibangu@hotmail.com Resumo Neste estudo, o objetivo foi avaliar o solo de creches, escolas infantis municipais e praças públicas de Salto de Pirapora, para verificar se nesses ambientes havia presença de ovos e larvas de Ancylostoma spp. e Toxocara spp., agentes etiológicos da larva migrans cutânea e larva migrans visceral, respectivamente. As amostras foram coletadas em sete escolas e duas praças públicas, com um total de 27 amostras, e levadas à PUC-SP (Campus de Sorocaba) para análise no Laboratório de Parasitologia. Uma parte do material foi processada pelo método Rugai modificado e a outra pela técnica de flutuação de Willis. Nenhuma das amostras recolhidas (n=27) - tanto nas escolas quanto nas praças - apresentou os agentes causadores de larva migrans, nem tampouco de qualquer nematóide parasita. Foram encontras larvas de vida livre, o que demonstra que a técnica laboratorial realizada é eficaz, porventura se houvesse os nematóides desse estudo nas amostras coletadas, eles seriam encontrados. O período de coleta ocorreu no mês de maio, o que influenciou numa quantidade menor de indivíduos, devido ao clima seco e frio desse mês. Palavras-chave: Toxocara spp., creches, praças, contaminação, Ancylostoma spp, larva.
95 Abstract The purpose of this research was to analyze nursery grounds, nursery schools and public places of Salto de Pirapora - SP, in order to confirm the existence of eggs and grubs of Ancylostoma spp. and Toxocara spp., which are etiologically agent of respectively migrans deep-rooted grubs. The samples have been collected in seven schools and two public places. From these places 27 samples have been collected and analyze at the parasite laboratory. Two methods have been used to treat the material, the modified method of Rugai and the flotation method of Willis. Both methods have treated parts of the material. No sample from schools as well as public places revealed sign of migrans grubs or other parasites. Free living grubs were found and constitute a proof that the laboratory technique used is effective. However, if there were grubs or eggs, there would have been found. The collection of samples has taken place in May. This had a considerable depleting impact on the number of people because of the dry and cold climate of that month. KEYWORDS: Toxocara spp., nurseries, public places, contamination, Ancylostoma spp, grub. 1. Introdução A infecção por larva migrans no ser humano é decorrente do parasitismo de helmintos nematóides, os quais são enteroparasitos comuns de cães e gatos. Os ovos desses parasitos são eliminados nas fezes dos seus hospedeiros, e o contágio dá-se pelo contato direto com areia contaminada contendo larvas de terceiro estágio ou pela ingestão de água ou alimentos com grãos de areia possuindo ovos larvados (SOUZA et al., 2007; BRENER et al., 2008). Clima quente, solo úmido e sombreado são condições favoráveis ao desenvolvimento embrionário desses ovos, que podem permanecer no solo por meses. Vários estudos no Brasil comprovam que áreas de recreação infantil, como bancos de areia em praças públicas e em creches, têm índices relevantes de contaminação pelos agentes de larva migrans (COELHO et al. 2001; SANTOS et al. 2003; GUIMARÃES et al., 2005;ALMEIDA et al., 2007). Assim, esse tipo de zoonoses é mais frequente em crianças, em razão de seus hábitos geofágicos (BERENGUER et al., 2006; SOUZA et al., 2007).
96 A larva migrans visceral (LMV) tem como agente causal formas larvárias de Toxocara spp. Esse tipo de infecção ocorre quando há a ingestão de ovos embrionados contendo larvas no terceiro estágio (REY et al., 2001). Ao eclodirem, esses ovos libertam as larvas no intestino, as quais se deslocam pela via linfática ou circulação portal para diversos órgãos como o fígado e pulmões. As lesões mais graves ocorrem quando as larvas migram para órgãos vitais como coração, cérebro ou globo ocular, com capacidade de provocar distúrbios neurológicos ou perda da visão (SANTARÉM et al.,1998; BERENGUER et al., 2006;). Por sua vez, a larva migrans cutânea (LMC) possui como agentes etiológicos alguns helmintos, porém nesse estudo nos deteremos nas larvas de Ancylostoma spp. O quadro clínico da infecção por LMC são dermatites chamadas serpiginosas ou linear serpiginosas, pois ao perfurar a pele as larvas de Ancylostoma spp. ficam vagando entre a epiderme e a derme, abrindo túneis de trajetos tortuosos. Por essa razão, popularmente são conhecidas no Brasil como bicho geográfico (REY et al., 2001; CIMERMAN et al., 2006). A infecção por larva migrans é de importância zoonótica e a ocorrência dessas larvas em áreas de recreação infantil pode caracterizar um problema relevante de saúde pública (BERENGUER et al., 2006). Assim, esse projeto de pesquisa objetivou determinar a possível presença de formas larvárias e ovos dos helmintos causadores de larva migrans em creches e escolas de educação infantil (EMEI e EMEIEF), assim como, em praças públicas que possuem áreas de recreação infantil no município de Salto de Pirapora. 2. Materiais e métodos A coleta das amostras foi feita no mês de maio em sete escolas e duas praças infantis. Em áreas de recreação infantil o solo coletado com pá de jardim teve profundidade de cinco a oito cm, num total de 50 g por amostra. As amostras foram retiradas de três pontos diferentes e preferencialmente em locais úmidos e sombreados. O solo coletado foi mantido em embalagens plásticas devidamente etiquetadas, acondicionados em caixas isotérmicas e
97 encaminhados no mesmo dia ao Laboratório de Parasitologia da PUC-SP (Campus de Sorocaba). O total de amostras foi de 27. Para identificação dos pontos de coleta adotou-se o uso de siglas Es para escolas, Pr para praças e Cr para creches - seguidas de seu respectivo número de acordo com a ordem da coleta (Es1 e Pr2, por exemplo). Como cada ponto teve três amostras, para estas adotou-se o uso da letra A seguida do número da amostra (A1, A2 e A3). Dos 50 gramas coletados, 25 gramas foram usados no método de Rugai (REY, 2001) para determinação de larvas. Nesse processo as larvas migram para o fundo do cálice por causa da temperatura da água quente. No segundo processo o primeiro método usado foi o de Hoffman (REY, 2001), houve uma emulsão em água de duas gramas, em seguida a amostra foi filtrada em gaze de seis dobras. O resíduo coletado foi colocado num cálice de sedimentação completando o volume com água. Após a sedimentação o sobrenadante foi descartado e o sedimento passou pela técnica de flutuação de Willis (REY, 2001) Após, no microscópio óptico foram observadas as lâminas para examinar a presença de ovos. As lupas foram usadas para examinar as larvas. Cada amostra teve uma lâmina e as observações foram no microscópio óptico em aumentos de 100x e 400x com lâmina e lamínula coradas com lugol. Os resultados das observações foram analisados e tabulados no mesmo dia. 3. Resultados Das duas praças analisadas, nenhuma apresenta grades ou mureta em toda sua extensão, já em grande parte das escolas há algum método para restringir o acesso de animais, seja por muros ou grades. A análise microscópica do material demonstrou negatividade para ovos e larvas de nematóides parasitas (Tabela 1). Na creche dois foi encontrada uma larva, porém por estar danificada não pôde ser identificada. A técnica permitiu encontrar 10 larvas de vida livre sem relevância sanitária, - e por isso não foram identificadas.
98 Tabela 1. Resultados obtidos após coleta de amostras LARVAS DE VIDA LIVRE Positivo Negativo LOCAL N de N de amostras % amostras % com larvas sem larvas Creche 1 0 0 3 100 Creche 2 1 33,33 2 66,66 Creche 3 1 33,66 2 66,66 Creche 4 2 66,66 1 33,33 Escola 1 1 33,33 2 66,66 Escola 2 1 33,33 2 66,66 Escola 3 1 33,33 2 66,66 Praça 1 0 0 3 100 Praça 2 0 0 3 100 4. Discussão A ausência de larvas e ovos de Ancylostoma spp. e Toxocara ssp. não elimina qualquer chance de contaminação. Nos locais de coleta, foram observados fezes e pegadas de gatos, provas irrefutáveis de freqüentação dos animais. Vários fatores, possivelmente, influenciaram o resultado desse trabalho. Essa redução pode ser explicada pela baixa umidade e temperatura do mês de coleta, já que esses nematóides têm preferência por clima úmido e quente, esse fator também é discutido por Santarém (1998). Além disso, a maioria das escolas possui grades e muros ao redor. Esse fator já limita a entrada de cães nesses locais, sendo assim, os gatos são os únicos animais com acesso às escolas. Já nas praças públicas cães e gatos têm livre acesso. Por outro lado, a dureza do solo encontrado nas praças e em algumas escolas dificulta a
99 defecação dos gatos, pois eles costumam enterrar suas fezes. Portanto, a visitação de gatos em alguns locais provavelmente é baixa. Sobre o acesso somente de gatos, Nunes et al. (2000) argumenta que a ausência de ovos de Toxocara ssp. pode ser explicada porque os gatos apresentam baixa infecção. Outros autores também relatam a ausência de ovos de Toxocara ssp. como Nunes et al. (2000) em Araçatuba - estado de São Paulo - e Santarém (2004) em Taciba, Minas Gerais. Resultados de contaminação por esses nematóides são relatados por diversos autores, o que corrobora os resultados obtidos nesse estudo. Souza (2007) que verificou ovos de Toxocara ssp. em todas as praças analisadas e menor frequência nos ovos de Ancilostomídeos; Capuano (2005) encontrou ovos de Toxocara ssp. em 16 praças das 78 analisadas; Araújo (2008) coletou amostras em 28 creches, nos climas secos e chuvosos os resultados apresentaram 42% e 9% de frequência respectivamente para larvas de Ancilostomídeos. Há também estudos realizados fora do Brasil como o de Wiwanitkit (2004), em sua pesquisa em parques públicos de Bangkok, Tailândia, verificou a presença de larvas de Toxocara ssp. em 10 amostras das 175 coletadas. A técnica utilizada não influenciou na ausência de resultados, pois permitiu encontrar larvas de vida livre e um ovo sem relevância sanitária e de difícil identificação (comunicação pessoal do Professor Doutor Pedro Luiz da Silva Pinto do laboratório de parasitologia da PUC-SP Campus Sorocaba), Portanto, se os nematóides pesquisados estivessem presentes nas amostras, esses seriam detectados. Contudo, medidas preventivas podem ser tomadas, como por exemplo, a cobertura dos tanques de areia das escolas com lona quando em desuso. 5. Conclusão Os resultados não demonstraram a presença de ovos e larvas de Toxocara ssp. e Ancylostoma ssp. em áreas de recreação do município de Salto de Pirapora..
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