DETERMINATION PROFILE OF RESISTANCE STRAINS OF ANTIMICROBIAL Staphylococcus aureus ISOLATED FROM A CLINICAL DENTAL LOCATED IN THE BARRETOS-SP CITY

Transcrição

1 DETERMINAÇÃO DO PERFIL DE RESISTÊNCIA AOS ANTIMICROBIANOS DE CEPAS DE Staphylococcus aureus ISOLADAS DE UMA CLÍNICA ODONTOLÓGICA LOCALIZADA NO MUNICÍPIO DE BARRETOS-SP DETERMINATION PROFILE OF RESISTANCE STRAINS OF ANTIMICROBIAL Staphylococcus aureus ISOLATED FROM A CLINICAL DENTAL LOCATED IN THE BARRETOS-SP CITY Resumo Costa, V. P. B. (1) Amoroso, P. (2) Ferreira, L. M. (3) Trevizan, M. F. F. (4) Staphylococcus aureus é um dos principais causadores de infecções nosocomiais, e a transmissão ocorre por contato direto, por isso é fundamental seu isolamento, descrição e demonstração da resistência em relação aos antibióticos, sendo também essencial para a parte clínica. O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de resistência de Staphylococcus aureus, a partir do isolamento de amostras de uma Clínica Odontológica de Barretos. Foram coletadas 14 amostras (equipo, bancada e aerossol) do ambiente da clínica odontológica e isoladas 22 cepas de S. aureus. A identificação das amostras foi realizada pela coloração de Gram, provas da coagulase, de coagulação em lâmina e em tubo, da catalase, da fermentação do manitol,e da desoxiribonuclease (DNase) e foi realizado o teste de sensibilidade a antimicrobianos pelo método Kirby-Bauer. Foram obtidos dois perfis de resistência aos antimicrobianos testados, dos quais o perfil 1 representou 90,0% (n=9) das amostras, sendo resistente à oxacilina (Oxa), enquanto que o perfil 2 representou apenas 10,0% (n=1) das cepas resistentes. Este trabalho é de crucial importância, pois, a colonização do ambiente clínico por S. aureus pode ser um risco potencial de transmissão desse micro-organismo para os pacientes, com isso, há necessidade de medidas de prevenção para inibir a transmissão e disseminação desses microorganismos como higienização das mãos, racionalização no uso de antimicrobianos e orientação para a equipe de saúde. Palavras-chave: Antibiograma. Bactéria. Micro-organismo. Oxacilina. Abstract Staphylococcus aureus is a major cause of nosocomial infections, and transmission occurs by direct contact, so it is critical isolation, description and demonstration of resistance in relation to antibiotics and is also essential for clinical part. The aim of this study was to evaluate Staphylococcus aureus resistance profile, from the isolation of samples from a Dental Clinic of Barretos. There were collected 14 samples (Equipo, bench and aerosol) of dental clinic environment and were isolated 22 strains of S. aureus. The identification of 1 Graduando em Ciências Biológicas pela UNIFEB. Endereço eletrônico: valbenevidescosta@gmail.com 2 Doutora em Microbiologia pela UNESP -FCAVJ. Docente da UNIFEB. Endereço eletrônico: patamoroso@uol.com.br 3 Doutor em Microbiologia pela UNESP -FCAVJ. Docente da UNIFEB. Endereço eletrônico: ferreira_lm@yahoo.com.br 4 Graduando em Ciências Biológicas pela UNIFEB. Endereço eletrônico: marina_fft@hotmail.com

2 samples was performed by Gram staining, evidence of coagulase, clotting in blade and tube, catalase, the mannitol fermentation, and deoxyribonuclease (DNase) and was conducted susceptibility testing to antibiotics by Kirby- Bauer method. Two of antimicrobial resistance patterns obtained were tested, of which the profile 1 represented 90.0% (9) of the samples being resistant oxacillin (Oxa), whereas the profile 2 represented only 10.0% (1) strains resistant. This work is of crucial importance, since the colonization of the environment clinical by S. aureus may be a potential risk of transmission of this microorganism for patients, thus, it is need preventive measures to inhibit the transmission and dissemination of these micro-organisms such as hand hygiene, rational use of antimicrobials and guidelines health team. Keywords: Antibiogram. Bacteria. Micro-organism. Oxacillin. 1 Introdução As pessoas podem apresentar micro-organismos oportunistas emergentes, especialmente pacientes hospitalizados, imunocomprometidos, prematuros e com dispositivos implantados (CANDIDO e BERNARDI, 2016). Segundo Bezerra Neto e Maciel (2009), para determinar a resistência de Staphylococcus aureus em relação aos antibióticos são feitos antibiogramas para observar identificar e caracterizar cepas. A resistência é um reflexo dos hábitos de uso dos antimicrobianos em cada comunidade e desta forma é relevante conhecer o padrão de resistência de cada um dos grupos de pacientes atendidos (TODA, 2003). Na clínica, pode ocorrer infecção cruzada sendo a transmissão do agente infeccioso entre paciente e equipe, podendo ser resultado do contato pessoa-pessoa ou também do contato com objeto contaminado (GUIMARÃES Jr., 2001). 2 Material e Métodos Foram realizadas coletas de amostras ambientais (bancada de trabalho, equipo, equipo + aerossol) da clínica odontológica, sendo que, três placas de Brain Heart Infusione três de Baird Parker para cada coleta. Foram expostas em pontos estratégicos da clínica por dez minutos, (foram isoladas 22 cepas de S. aureus). Em seguida foram transferidas para a estufa em temperatura de 36,2 C por 48 horas. Após este período, foi feito o repique das supostas colônias do gênero Staphylococcus aureus. Colônias suspeitas de pertencerem ao gênero Staphylococcus, com pigmentação branca ou amarela e brilhantes, formadas sobre o meio de culturas foram coradas pelo método de Gram, para observação de suas características morfotintoriais. As colônias, com características morfotintoriais positivas para o gênero Staphylococcus foram submetidas a testes de identificação bioquímica por meio das provas de

3 coagulação, catalase, fermentação do manitol, DNase e, foi realizado também o teste de sensibilidade a antimicrobianos, para os isolados S. aureus, pelo método Kirby-Bauer. 3 Resultados e Discussão No presente trabalho foram isoladas 22 cepas positivas para Staphylococcus aureus no equipo do dentista, no aerossol produzido pela alta rotação e na bancada de trabalho, e 120 isolados negativos (Staphylococcus ssp). Noro et al. (1998), afirmaram que a contaminação se agrava nos consultórios pelo uso de equipamentos que produzem aerossóis, através dos quais os micro-organismos podem ser lançados e espalhados até, aproximadamente, um metro do campo operatório. Assim, equipamentos odontológicos e acessórios dentro e ao redor da zona operatória podem tornar-se contaminados. O aerossol salivar é considerado um importante veículo na transmissão de doenças infecciosas em consultórios odontológicos (SIGNORETTO, CANEPARI E URBANI, 1994). Neste sentido, torna-se importante verificar a resistência desses micro-organismos, encontrados no ambiente clínico odontológico, frente a diferentes antibióticos (GILBERT, MOELLERING e SANDE, 2003). De acordo com a tabela 1, das 22 cepas de Staphylococcus aureus isoladas do ambiente e de equipamento odontológico, 10 amostras (45,5%) foram resistentes a pelo menos um princípio ativo testado, sendo uma amostra (4,6%) isolada do equipo e nove amostras (40,9%) de aerossol. No entanto, na bancada foram isoladas apenas cepas sensíveis (quatro amostras, ou seja, 18,2%). Conforme pode ser observado na Tabela 2, foram obtidos dois perfis de resistência aos antimicrobianos testados, dos quais o perfil 1 reapresentou 90,0% das amostras (9), sendo resistente à Oxacilina (Oxa), enquanto que o perfil 2 apresentou apenas uma cepa (10,0%) resistente. No entanto, o perfil 2 representa resistência a todos os princípios ativos testados, essa amostra foi isolada do aerossol e é considerada multirresistente, resistente inclusive à Vancomicina (Van), um dos antibióticos de melhor resultado no tratamento de S.aureus resistentes a meticilina (MRSA) (LUNA et al., 2010). York e colaboradores (1996), encontraram aproximadamente, 75,0% dos isolados de Staphylococcus spp resistentes à oxacilina na urina, sangue, fluido cerebrospinal e osso, outros tecidos, fluidos e feridas. Resultado muito alto quando comparado com o presente trabalho, com 45,45% de S.aureus resistentes à oxacilina. Segundo Aires et al. (2003) e Miragaia et al. (2003) a escolha da oxacilina, como tratamento primário, em pacientes hospitalizados, é recomendada nos casos de infecções causadas por Staphylococcus spp, como endocardite infecciosa, sepse e para pacientes com próteses.

4 TABELA 1. Resultado do antibiograma das cepas de Staphylococcus aureus isoladas de uma clínica odontológica de acordo com os locais de isolamento, Barretos-SP, Locais de isolamento Resultado do Bancada Equipo Aerossol TOTAL antibiograma N % N % N % N % Sensível 4 18,2 5 22,7 3 13, ,5 Resistente ,6 9 40, ,5 Total 4 18,2 6 27, , Muitos estudos de vigilância têm mostrado aumento da prevalência de S. aureus resistentes à oxacilina (SARO) (CHANG et al., 2003). O SARO é reconhecido como um dos principais causadores de surtos nosocomiais, embora com grande variação em diversos hospitais do país, em proporção de 26,6 a 71,0% (MIRAGAIA et al., 2003; CHANG et al., 2003). A letalidade atribuída às infecções causadas por SARO é na ordem de 4,5 a 50% (CHANG et al., 2003). TABELA 2. Perfis de resistência aos antimicrobianos apresentados pelas cepas de Staphylococcus aureus isoladas de uma clínica odontológica de acordo com os locais de isolamento, Barretos-SP, Locais de isolamento Equipo Aerossol TOTAL Perfil Fenótipo de resistência aos antimicrobrianos* N % N % N % 1 Oxa 1 10,0 8 80,0 9 90,0 2 Cpm/Cip/Cli/Clo/Eri/Gen/Oxa/Pen/Rif/Sut/Tet/Van ,0 1 10,0 Total 1 10,0 9 90, ,0 * Cefepime (Cpm), Ciprofloxacina (Cip), Clindamicina (Cli), Cloranfenicol (Clo), Eritromicina (Eri), Gentamicina (Gen), Oxacilina (Oxa), Penicilina (Pen), Rifampicina (Rif), Sulfazotrim (Sut), Tetraciclina (Tet), Vancomicina (Van). Com os resultados deste trabalho verifica-se a necessidade de adotar medidas para impedir a contaminação do ambiente odontológico para se evitar uma possível infecção cruzada. Teixeira e Santos (1999) mostram que para que a disseminação de agentes infecciosos seja reduzida, é dever do cirurgião dentista cobrir as superfícies que podem ser contaminadas, principalmente aquelas de difícil desinfecção e, desinfetar superfícies descobertas que serão contaminadas. Superfícies devem ser cobertas com papel impermeável, folha de alumínio ou plástico. Superfícies a serem desinfetadas devem passar por processo de limpeza (água e sabão líquido, neutro, biodegradável e com ação antimicrobiana ou com desincrostante) e desinfecção (hipoclorito de sódio a 1% ou álcool etílico a 70%) a cada paciente.

5 4 Conclusão A colonização do ambiente clínico por S. aureus pode ser um risco potencial de transmissão desse micro-organismo para os pacientes. Há necessidade de medidas de prevenção para inibir a transmissão e disseminação desses micro-organismos como higienização das mãos, racionalização no uso de antimicrobianos e orientações para a equipe de saúde. Em relação à virulência e resistência bacteriana, os índices de mortalidade são mais altos em pacientes que desenvolvem bacteremia por S. aureus multirresistentes, portanto, é um patógeno de interesse para a saúde pública. A adoção de protocolos clínicos para o uso de antimicrobianos, tanto na atenção individual quanto na saúde pública, da política restritiva associada às boas práticas de seleção, prescrição e dispensação de antimicrobianos, são importantes medidas no controle de infecções por S. aureus multirresistentes. É necessária a incorporação de práticas educativas aos acadêmicos da área da saúde, para que o paciente possa receber cuidados de saúde de qualidade. 5 Agradecimentos/ Apoio financeiro Agradecimento à bolsa de Iniciação Científica concedida pelo PIBIC - UNIFEB. 6 Referências AIRES DE SOUSA, M.; CRISOSTOMO, M.I.; SANTOS SANCHES, I.; WU, J.S.; FUZHONG, J.; TOMAS Z, A. Frequent Recovery of a Single Clonal Type of Multidrug Resistant Staphylococcus aureus from Patients in Two Hospitals in Taiwan and China. Journal of Clinical Microbiology, v.41, p , BEZERRA NETO, A. M. B.; MACIEL, M. A. V. Detecção presuntiva do GENE erm através de teste D em amostras de Staphylococcus spp. Do hospital das clínicas de Pernambuco. Disponivel em: < 0/ SCPO.pdf>. Acesso em: fev CANDIDO, T. S. BERNARDI, A. C. A. Avaliação da Resistência a Antimicrobianos de Staphylococcus Coagulase Negativa. J Health Sci., v. 18, n. 1, p.33-6, CHANG, M. R.; CARVALHO, N. C. P.; OLIVEIRA, A. L. L.; MONCADA, P. M. F.; MORAES, B. A.; ASENSI, M. D. Surveillance of pediatric infections in a teaching hospital in Mato Grosso do Sul, Brazil. Braz. J. Infect. Dis, v.7, n.2, p , GILBERT, D. N.; MOELLERING Jr., R. C.; SANDE, M. A. The Sanford: Guia para terapia antimicrobiana. 33a ed. Rio de Janeiro: EPUC, p.

6 GUIMARÃES JÚNIOR, J. Biossegurança e controle de infecção cruzada em consultórios odontológicos. São Paulo: Santos, p. Disponível em: < taction=lnk&exprsearch=313056&indexsearch=id#top>. Acesso em: fev LUNA, C.M. et al. Tratamento de Staphylococcus aureus resistente à meticilina na América Latina. Braz. J. Infect. Dis., vol. 14, MIRAGAIA, M.; COUTO, I.; PEREIRA, S. F. F.; KRISTINSSON, K. G.; WESTH, H.; JARLOV, J. O. Molecular Characterization of Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Clones: Evidence of Geographic Dissemination. J Clin. Microbiol, v.40, p , NORO A., SUYAMA, Y.; TAKAHASHI, E.; CHATTIN, B.R.; HIRAI Y.; TAKAHASHI, K. The effectiveness of the clean-area-system for infection control in the dental clinic. Bull Tokyo Dent Coll, v.39, p.15-14, SIGNORETTO, C.; CANEPARI, P.; URBANI, G. Línquinament microbiológico nell ambulatorio odontoiatrico ed il suo possible abbttimento. Min Stomatol, v.43, p , TEIXEIRA, M.; SANTOS, M. V. Responsabilidade no controle de infecção. Rev. Assoc. Paulista Cirurgiões-Dentistas. v. 53, n. 3, p , TODA E.N. Estudo da susceptibilidade do Staphylococcus aureus isolado no Laboratório Central da Santa Casa de São Paulo, no período de setembro/2000 a março/2002 [dissertation]. São Paulo: Faculdade de Ciências Médicas da Santa Casa de São Paulo; p. YORK, M. K.; GIBBS, L.; CHEHAB, F.; BROOKS, G.F. Comparison of PCR detection of mec A with standard susceptibility testing methods to determine methicillin resistance in coagulase-negative staphylococci. J. Clin. Microbiol. v.34, n.2, p