Seletividade de Bacillus thuringiensis para Telenomus remus no manejo de Spodoptera frugiperda

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1 Seletividade de Bacillus thuringiensis para Telenomus remus no manejo de Spodoptera frugiperda João Rafael D.C.C. de Alencar 1 ;Ricardo A. Polanczyk 1 ; Diego F. Fraga 1 ; Marina Funichello 1 ; Sergio A. De Bortoli 1 ; Marina A. Viana 1 ; Alessandra M. Vacari 1 ; Thiago T. Agostini 1 1 Unesp - Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Departamento de Fitossanidade. Via de acesso Paulo Donatto Castellane, s/n, Jaboticabal SP. jralencar@gmail.com, rapolanc@fcav.unesp.br, diegoffraga@hotmail.com, marinaagro2@gmail.com, bortoli@fcav.unesp.br, vianama@yahoo.com.br, amvacari@gmail.com, ttrevisoli@gmail.com RESUMO A lagarta do cartucho do milho Spodoptera frugiperda é a uma praga de grande importância econômica para várias culturas e o principal método de controle desta praga é a aplicação de pesticidas. A bactéria entomopatogênica Bacillus thuringiensis (Bt) e o parasitóide de ovos Telenomus remus são alternativas promissoras ao controle convencional da lagarta do cartucho do milho. Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Controle Microbiano de Artrópodes Praga (LCMAP) situado na Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias da Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (FCAV/UNESP). Massas de ovos foram pulverizadas com Bt e oferecidas ao parasitóide. Os parâmetros porcentagem de parasitismo, razão sexual e viabilidade dos ovos parasitados foram avaliados e submetidos à análise de variância e teste de Tukey. Não houve interferência nos aspectos biológicos avaliados, indicando que estes dois agentes de controle biológico podem ser utilizados concomitantemente no manejo da lagarta do cartucho do milho. PALAVRAS-CHAVE: Zea mays L. var. saccharata., controle biológico, seletividade. ABSTRACT Selectivity of Bacillus thuringiensis for Telenomus remus the management of Spodoptera frugiperda. The fall armyworm Spodoptera frugiperda is a pest of great economic importance for several culturesand the main method of controlling this pest is pesticides application. The entomopathogenic bacterium Bacillus Anais 51 o Congresso Brasileiro de Olericultura, julho

2 thuringiensis and the egg parasitoid Telenomus remus, are a good alternative to conventional control fall armyworm in maize. The experiments were conducted at the Laboratory of Arthropod Pests Microbial Control (LCMAP) located in the College of Agriculture and Veterinary Sciencis of Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho FCAV/UNESP). Egg masses were sprayed with Bt and offered to the parasitoid. The parameters evaluated were percentage of parasitism, sex ratio and viability of eggs parasitized, and data were submitted to ANOVA and Tukey test. There was no effects of the treatments on the evaluated parameters, allowing the use of these two control agents in the fall armyworm corn management. Keywords: Zea mays L. var. saccharata, biological control, selectivity. INTRODUÇÃO A lagarta do cartucho do milho Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797), (Lepidoptera: Noctuidae) é a uma praga de grande importância econômica para várias culturas (FARIA, 2001), sendo a principal praga do milho no Brasil (DEQUECH et al., 2007), incluindo a variedade do milho doce que é muito susceptível ao ataque de pragas (KWIATKOWSKI e CLEMENTE, 2007).O principal método de controle desta praga empregado na cultura do milho, é o químico (ZANUNCIO et al., 1998). Porém, devido aos impactos negativos gerados pelos inseticidas químicos e a evolução da resistência de populações de S. frugiperda a estes produtos, cada vez mais são empregados métodos de controle biológico para esta praga (CRUZ e PEREIRA FILHO, 2002). A bactéria entomopatogênica Bacillus thuringiensis Berliner, 1911 (Eubacteriales: Bacilaceae) e o parasitóide de ovos Telenomus remus Nixon, 1937 (Hymenoptera: Scelionidae), são agentes de controle biológico eficientes e são uma boa alternativa ao controle convencional da lagarta do cartucho do milho. Entretanto pouco se sabe a respeito da interferência que produtos formulados com esta bactéria podem ocasionar aos aspectos biológicos do parasitóide. Alguns estudos já foram realizados envolvendo a interação de B. thuringiensis e parasitóides (HILL e FOSTER, 2000; BRUNNER et al., 2001), mostrando que Trichogramma platneri Kagarkatti, 1975 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) teve seus aspectos biológicos afetados, enquanto Diadegma Anais 51 o Congresso Brasileiro de Olericultura, julho

3 insulare (Cresson, 1865) (Hymenoptera: Ichneumonidae) não apresentou alterações em sua biologia. Este trabalho objetivou estudar a influência de B. thuringiensis nos parâmetros biológicos de T. remus, visando o controle de S. frugiperda em cultivo de milho doce. MATERIAL E MÉTODOS Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Controle Microbiano de Artrópodes Praga (LCMAP) situado na Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias da Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (FCAV/UNESP), localizada na cidade de Jaboticabal São Paulo. Tanto as massas de ovos da lagarta do cartucho de milho, quanto os parasitóides foram provenientes das populações estoque do Laboratório de Ecologia Aplicada (APECOLAB) também localizado na FCAV/UNESP. A criação estoque da praga é mantida com dieta artificial desenvolvida pela Embrapa Sete Lagoas para as lagartas e mel a 10% para os adultos, adultos e lagartas são mantidos em sala climatizada a 25 ± 1ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de 12 horas. A criação estoque do parasitóide é mantida em massas de ovos de S. frugiperda em potes de vidro cilíndricos 12 x 6cm, mantidos em câmaras climatizadas a 25 ± 1ºC, 70 ± 10% de umidade relativa com fotofase de 12 horas. Fêmeas de T. remus recém emergidas foram individualizadas para posterior oferta dos ovos, sendo utilizadas massas de ovos com aproximadamente 120 ovos/massa coladas em cartela de cor branca, seguindo o padrão: massas de ovos de até 24 horas de idade, viáveis e cobertos por escamas da praga. Os tratamentos foram constituídos das massas de ovos pulverizadas com os tratamentos em Torre de Potter.Foram utilizados os produtos formulados a base de B. Thuringiensis Dipel e Bac-Control nas doses recomendadas pelos fabricantes (AGROFIT, 2011). Além destes produtos, também foi utilizado o isolado HD1 na concentração de 3x10 8 esporos.ml -1, proveniente do banco de entomopatógenos do Laboratório de Biologia e Criação de Insetos (LBCI). O tratamento controle foi constituído de água deionizada e autoclavada. Em todos os tratamentos foi adicionado espalhante adesivo (Tween 80). Foi utilizado um volume de 3,2 ml nos tratamentos, com Bac-Control, HD1 e testemunha e 2,8 ml no tratamento Dipel, estes valores garantiram uma deposição média de 1,75mg.cm², de acordo com a recomendação da International Organization of Anais 51 o Congresso Brasileiro de Olericultura, julho

4 Biological Control of Noxious Animals and Plants (IOBC) (OVERMEER & VAN ZON 1982, HASSAN et al. 1985). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, sendo 8 tratamentos com 8 repetições. Cada repetição foi acondicionada em tubo de vidro de fundo chato (8,5 x 2,5cm) e vedado com filme plástico PVC. O período de parasitismo foi de 24 horas, sendo avaliados os parâmetros porcentagem de parasitismo, razão sexual e viabilidade dos ovos parasitados. Para análise dos dados foi utilizado o programa SAS System 9.1 (SAS Institute, 2005). RESULTADOS E DISCUSSÃO Não houve diferença entre os tratamentos em nenhum dos parâmetros de parasitismo quando se pulverizou B. thuringiensis sobre os ovos de S. frugiperda (Tabela 1). A porcentagem de parasitismo e razão sexual estão de acordo com a estimativa dos dados publicados por Carneiro et al. (2010) e Bueno et al. (2010), quando avaliaram respectivamente a resposta funcional e capacidade de parasitismo desse mesmo parasitóide em ovos da lagarta do cartucho do milho. Portanto, os dados obtidos indicam a não interferência do agente de controle microbiano tanto no parasitismo quanto na razão sexual de T. remus. A viabilidade dos ovos parasitados foi similar a de Bueno et al. (2008), que verificou excelente viabilidade de emergência do parasitóide em seu estudo. Mais uma vez foi possível constatar que os resultados não foram afetados pela interação de Bt. Os aspectos biológicos avaliados não foram afetados, possivelmente porque as proteínas da bactéria entomopatogênica não foram ingeridas e/ou ativadas por uma condição de ph básico do mesêntero das larvas do parasitóide que ainda tem que possuir sítios de ligação para as proteínas Cry, possivelmente a bactéria não tem ação de profundidade não penetrando através do córion. Mesmo que tiver ocorrido uma possível alimentação das fêmeas de T. remus pela gema extravasada pós-parasitismo e se misturar ao cristal da bactéria como ocorre com as fêmeas de Trichogramma spp. (KNUTSON, 1998), não afetou os parasitóides pelas mesmas razões descritas para as larvas. Outro efeito esperado seria a repelência dos ovos pulverizados pelo Bt por parte do parasitóide, mas o parasitismo não foi afetado pela presença da bactéria (Tabela 1) demonstrando que este parasitóide não discrimina ovos sem e com o entomopatógeno durante o parasitismo ao contrário do que foi verificado por Pratissoli et al. (2006). Anais 51 o Congresso Brasileiro de Olericultura, julho

5 De acordo com este trabalho é possível recomendar o uso da bactéria entomopatogênica B. thuringiensis e do parasitóide de ovos T. remus para o controle da principal praga do milho doce S. frugiperda. Porém é necessário que se realizem mais estudos como a infecção direta de larvas do parasitóide estudar a bioquímica do mesêntero e proteínas diferentes que possam causar patologia ao himenóptero. AGRADECIMENTOS Ao Professor Dr. Odair Aparecido Fernandes (APECOLAB), por ceder o parasitóide (T. remus) e o hospedeiro (S. frugiperda) para a realização deste trabalho, a Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e à Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) pela concessão de bolsas. REFERÊNCIAS AGROFIT Sistema de Agrotóxicos Fitossanitários. 2011, 9 de maio. Spodoptera frugiperda.disponível BARBIERI VHB; LUZ JMQ; BRITO CH de; DUARTE JM; GOMES LS; SANTANA DG Produtividade e rendimento industrial de híbridos de milho doce em função de espaçamento e populações de plantas. Horticultura Brasileira 23: BRUNNER JF; DUNLEY JE; DOERR MD; BEERS EH Effect of pesticides on Colpoclypeus florus (Walker) (Hymenoptera: Eulophidae) and Trichogramma platneri, potential parasitoids of leafrollers in Washington. Journal of Economic Entomology 94: BUENO RCOF; CARNEIRO TR; BUENO AF, PRATISSOLI D; FERNANDES AO; VIERA SS Parasitism Capacity of Telenomus remus Nixon (Hymenoptera: Scelionidae) on Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) Eggs. Brazilian archives of Biology and Technology 53: BUENO RCOF; CARNEIRO TR; PRATISSOLI D; BUENO AF; FERNANDES AO Biology and thermal requirements of Telenomus remus reared on fall armyworm Spodoptera frugiperda eggs. Ciência Rural 38: 1-6. CARNEIRO TR; FERNANDES AO; CRUZ I; BUENO RCOF Functional response of Telenomus remus Nixon (Hymenoptera, Scelionidae) to Spodoptera em Anais 51 o Congresso Brasileiro de Olericultura, julho

6 frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera, Noctuidae) eggs: effect of female age. Revista Brasileira de Entomologia 54: CRUZ JC; PEREIRA FILHO IA Manejo e tratos culturais para o cultivo do milho verde. Brasília: Embrapa Milho e Sorgo. (Circular técnica n.16). 9p. DEQUECH STB; FIUZA LM; SILVA RFP; ZUMBA RC Histopathology of larvae of Spodoptera frugiperda (Lep., Noctuidae) infected by Bacillus thuringiensis aizawai and with eggs of Campoletis flavicincta (Hym., Ichneumonidae). Ciência Rural 37: FARIA CA de Resposta de Telenomus remus Nixon (Hymenoptera: Scelionidae) e Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner (Hymenoptera: Trichogrammatidae) a voláteis de plantas e ovos de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae). Viçosa: Universidade Federal de Viçosa. 50p (Dissertação de Mestrado). HASSAN SA Standard methods to test side-effects of pesticides on natural enemies of insects and mites developed by the IOBC/WRPS Working Group: pesticides and beneficial organisms. EPPO Bulletin 15: HILL TA; FOSTER RE Effect of insecticides on the Diamondback Moth (Lepidoptera: Plutellidae) and its parasitoid Diadegma insulare (Hymenoptera: Ichneumonidae). Journal of Economic Entomology 93: KNUTSON A The Trichogramma Manual. College Station: The Texas A & M University System KWIATKOWSKI A; CLEMENTE E Características do milho doce (Zea mays L.) para industrialização. Revista Brasileira de Tecnologia Agroindustrial 1: OVERMEER WPJ; VAN ZON AQ A standardized method for testing the side effect of pesticides on the predaceous mite, Amblyseius potentillae (Acari: Phytoseiidae). Entomophaga 27: PRATISSOLI D; POLANCZYK RA; VIANA UR; ANDRADE GS; OLIVEIRA RGS Desempenho de Trichogramma pratissolii Querino & Zucchi (Hymenoptera, Trichogrammatidae) em ovos de Anagasta kuehniella (Zeller) (Lepidoptera, Pyralidae) sob efeito de Bacillus thuringiensis Berliner. Ciencia Rural 36: SAS Institute INC The SAS-system for windows: release 9.1(software). Cary: SAS Institute. Anais 51 o Congresso Brasileiro de Olericultura, julho

7 ZANUNCIO JC; BATALHA VC; GUEDES RNC; PICANÇO M Insecticide selectivity to Supputius cincticeps (Stal) (Het.: Pentatomidae) and its prey Spodoptera frugiperada (J.E. Smith) (Lep.: Noctuidae).. Journal of Applied Entomology 122: Tabela 1. Parâmetros biológicos do parasitismo de T. remus em ovos de S. frugiperda pulverizados com B. thuringiensis. Biological parameters of the parasitism of T. remus in S.frugiperda eggs sprayed with B. thuringiensis. Jaboticabal/SP, UNESP, Tratamento Média ± Erro Padrão¹ Parasitismo Razão Sexual Viabilidade Bac-Control 90,79 ± 1,55 a 0,61 ± 0,02 a 0,99 ± 0,002 a Dipel 91,69 ± 1,81 a 0,62 ± 0,02 a 0,99 ± 0,003 a HD1 91,42 ± 1,30 a 0,61 ± 0,02 a 0,99 ± 0,001 a Testemunha 91,90 ± 1,81 a 0,62 ± 0,02 a 0,99 ± 0,001 a ¹Médias (em porcentagem) seguidas da mesma letra na coluna não diferem pelo teste de Tukey (α=0,05). Means (in percentage ) followed by same letter in columns do not differ by Tukey test (α=0,05). Anais 51 o Congresso Brasileiro de Olericultura, julho