VII-029 -QUALIDADE SANITÁRIA DE AREIAS DE CONTATO PRIMÁRIO EM ESCOLAS E LOGRADOUROS PÚBLICOS DA CIDADE DE VITÓRIA ESPÍRITO SANTO

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1 22º Congresso Brasileiro de Engenharia Sanitária e Ambiental 14 a 19 de Setembro Joinville - Santa Catarina VII-029 -QUALIDADE SANITÁRIA DE AREIAS DE CONTATO PRIMÁRIO EM ESCOLAS E LOGRADOUROS PÚBLICOS DA CIDADE DE VITÓRIA ESPÍRITO SANTO Laila De Oliveira Vaz Bióloga formada pela Universidade Federal do Espírito Santo - pesquisadora do Laboratório de Saneamento Ambiental da UFES Vitória ES. Hallan Nunes C. do Carmo Aluno do curso de ciências Biológicas da Universidade Federal do Espírito Santo e pesquisador voluntário do laboratório de Saneamento Ambiental da Universidade Federal do Espírito Santo Vitória ES. Marjorye Boldrini da Silva Aluna do curso de ciências Biológicas da Universidade Federal do Espírito Santo e bolsista de iniciação científica do laboratório de Saneamento Ambiental da Universidade Federal do Espírito Santo Vitória ES. Aparecida Demoner Ramos Bióloga formada pela Universidade Federal do Espírito Santo - pesquisadora do Laboratório de Saneamento Ambiental da UFES Vitória ES. Ricardo Franci Gonçalves Engenheiro Civil e Sanitarista UERJ (1984), Pós-graduado em Enga de Saúde Pública - ENSP/RJ (1985), DEA - Ciências do Meio Ambiente - Univ. Paris XII, ENGREF, ENPC,

2 Paris (1990), Doutor em Engenharia do Tratamento e Depuração de Água INSA de Toulouse, França (1993), Prof. Adjunto do DHS e do PMEA - UFES. Sérvio Túlio Alves Cassini (1) Pós - doutorado em Biologia molecular UTK USA, PhD Microbiologia Agrícola MCSU-USA, MS Microbiologia Agrícola ESALQ-USP, BS. Ciências Biológicas UFMG e Prof. Adjunto Centro Tecnológico-Departamento de Hidráulica e Saneamento da Universidade Federal do Espírito Santo. Endereço (1) Departamento de Hidráulica e saneamento CT /UFES caixa postal CEP: Vitória E. Santo. Tel: / scassini@npd.ufes.br RESUMO Nos últimos anos, devido a incidência de micoses e infecções bacterianas contraídas por crianças que freqüentam locais de recreação, tem surgido uma preocupação das autoridades públicas com a contaminação das areias. O presente trabalho tem por objetivo o monitoramento microbiológico de areias de contato primário em escolas e logradouros públicos de Vitória-ES. Até o momento todas as praças e parques de escola monitorados estão impróprios para uso de acordo com os limites propostos em Portugal para areia. PALAVRAS-CHAVE: parques públicos, contaminação do solo, coliformes fecais, E.coli, Candida. INTRODUÇÂO Os parques de areia de escolas e logradouros públicos são espaços de significativa importância para a recreação e desenvolvimento das crianças. As areias podem sofrer diversos tipos de contaminação que podem causar várias doenças por contato direto. Nos últimos anos, devido a incidência de micoses e infecções bacterianas contraídas por crianças que freqüentam estes locais de recreação, tem surgido uma preocupação das autoridades públicas com a contaminação das areias. Essas areias, assim como as areias de praias, quando expostas a lixo, fezes e urina de animais, secreções do corpo de crianças e adultos podem ocasionar a proliferação de bactérias, fungos, vírus e parasitas patogênicos. A detecção e enumeração de organismos indicadores são de grande importância para verificar a presença desses microorganismos. Esse critério de qualidade é usado para medir o risco de se contrair várias doenças associadas ao contato com areia (Cabelli et al, 1983 apud Ghinsberg 1994) e propor soluções para evitar contaminação de adultos e crianças. Entre os bioindicadores de qualidade de areia, podemos citar: E.coli, coliformes totais, leveduras do gênero Candida e outros microorganismos como helmintos que embora não

3 sejam considerados como bioindicadores tem seu estudo recomendado em programas de monitoramento ambiental, visando minimizar a sua disseminação no meio ambiente. A resolução CONAMA 274/2000 em ser Art.80, "recomenda-se aos órgãos ambientais a avaliação das condições parasitológicas e microbiológicas da areia, para futuras padronizações", como não são disponíveis padrões ou valores limites estabelecidos pela legislação brasileira para areias, o que se tem usado atualmente são valores propostos por pesquisadores portugueses, no Guideline for microbiological Quality of Sands (Mendes et al 1993), cujos valores são mostrados na tabela 1. Tabela 1: Número microrganismos microbiológicos propostos por pesquisadores portugueses para areias de praias usando metodologia de membrana filtrante (MF) ou tubos múltiplos (NMP)/100g de areia. Parâmetros Valor Proposto pelo "Guideline for Microbiological Quality of Sand" (NMP/100g de areia) Coliformes Totais 106 Coliformes Fecais 105 Candida sp 103 Fonte: Mendes et al (1993) modificado. O presente trabalho tem por objetivo a análise microbiológica de areias de parques de escolas e logradouros públicos, utilizando bioindicadores de poluição antrópica, visando a detecção de níveis de contaminação das areias. MATERIAIS E MÉTODOS Coleta e armazenamento Amostras de areia, provenientes de escolas públicas do município de Vitória, foram coletadas um dia antes da sua desinfecção e periodicamente até a próxima data da desinfecção. Amostras de areias de praças públicas, sendo de área aberta e de área fechada, foram coletadas de 15 em 15 dias. Todas as amostras serão coletadas pelo método de

4 quarteamento (MBR 10007) da ABNT. A área para coleta de areia foi delimitada em 1m2 com ajuda de uma trena. Foram coletadas aproximadamente 300g de areia a uma profundidade de 5 a 10cm a partir da superfície. Após as coletas as amostras eram armazenadas em sacola estéril e a guardadas em isopor com gelo até chegarem ao laboratório sendo processadas em seguida (figura 1). Figura 1: Seqüência de operações de amostragem e avaliação quantitativa de Coliformes Legenda: 1- coleta da amostra de areia; 2- material estéril utilizado; 3- pesagem da areia; 4- lavagem da areia; 5 transferência do sobrenadante para o frasco de diluição; 6- diluição; 7- adição do meio cromogênico; 8- incubação na cartela; 9- incubação da cartela. Análises microbiológicas Os procedimentos realizados para análise da areia foram realizados de acordo com Nolasco (2002). Assim, 30g de areia foram retirados dos sacos plásticos e colocados em becker de 1000ml e ressuspendida com 300ml de água fosfatada autoclavada. Em seguida as amostras foram agitadas em "shaker" por 10min com rotação de 200rpm; após este tempo, o sobrenadante foi retirado e colocado em frascos de diluição estéril e realizadas as diluições necessárias. Os parâmetros analisados foram Coliformes totais (CT), E. coli, Candida e ovos de helmintos. Para a realização dos testes de Coliformes totais e E.coli foi utilizada a metodologia de substrato cromogênico conforme Standard Methods (1995). O meio comercial empregado para a detecção de CT e E.coli foi o Colilert composto de meio desidratado em dose unitária para volume de 100ml e de cartela de 97 células onde a amostra é incubada. Os resultados são considerados positivos para CT quando o conteúdo dos poços tem coloração amarela à luz ambiente, sendo negativo quando permanece incolor. Para E.coli o resultado positivo é dado com reação positiva de fluorescência para os poços positivos de CT (figura 2). A reação é negativa para E.coli quando não se observa fluorescência. A contagem dos poços é feita para ambos os microorganismos separadamente e o resultado final expresso em NMP/100ml com o auxílio de uma tabela estatística com 95% de confiança fornecida pelo fabricante. Figura2: Cartelas do teste colilert evidenciando a reação para coliformes totais (esquerda) e E.coli (direita)

5 Para avaliação de leveduras de Candida foi utilizada a técnica de membrana filtrante (CETESB-adaptada) com plaqueamento em meio CHROMagar Cândida (figura 3). Para ovos de helmintos utilizou-se o método de centrifugo flutuação (CETESB) Figura 3: Análise de Cândida evidenciando as colônias formadas em membrana filtrante sob meio Chromagar. RESULTADOS Os resultados de Coliformes Totais (CT), E.coli e candida foram expressos em termos de médias geométricas por 100g de areia seca. Os valores encontrados para coliformes totais ultrapassaram os valores propostos por Portugal de 104 CT/ g areia seca (figura 4) Para E.coli não há ainda nenhum padrão e valor estabelecido pela legislação brasileira e internacional para areia, a avaliação foi realizada através da comparação entre os valores obtidos nos pontos monitorados (figura 5). Nos pontos de coleta de escolas, no ponto E1, o valor de contaminação mais elevado foi de 2,0 x 102 E.coli/100g areia seca, no ponto E2, o valor mais elevado foi o de 6,0 x 104 E.coli/ g areia seca, no ponto E3 o valor de contaminação mais elevado foi de 5,6 x 103 E.coli/100g areia seca e E4, os valores observados se situaram em torno de 103 bactéria/grama de areia seca. Os valores de E.coli observados para os pontos de praças públicas, apresentaram índices altos nos pontos P2 e P5 105 E.coli/100 g areia seca, nos pontos P1, P3 e P4 os valores observados se situaram em torno de 103 E.coli/100 g areia seca. Os resultados de E.coli para o ponto P2 e P5, provavelmente seja reflexo do trânsito constante de animais no local. Os resultados obtidos utilizando-se leveduras do gênero Candida estão apresentados na figura 6, todos expressos em 100 g de areia seca. As densidades de leveduras do gênero Candida em praticamente todos os pontos amostrados apresentaram valores acima de 1,0 x 103 UFC candida/100 g areia seca, que é o Limite Proposto em Portugal (LPP) para areia. Nos pontos relativos a escolas, apenas nos pontos E3 e E4, em algumas coletas, os valores observados foram de 103 UFC Candida/100 g areia seca, nos demais pontos e coletas realizadas em escolas, os valores ficaram em 105 UFC Candida/100 g areia seca. Os valores observados para leveduras do gênero Candida em coletas realizadas em escolas produziram 02 resultados inferiores ao Limite proposto por Portugal (LPP) enquanto nas praças públicas todos os valores encontrados ultrapassaram o LPP de 103 UFC Candida/100g areia seca, conforme apresentado na figura 6.

6 Quanto a presença de parasitas intestinais, não foram identificados ovos e larvas de helmintos nas amostras processadas. Figura 4 : Média geométrica de ColiformesTotais (CT) resultante do monitoramento de escolas (E) e praças (P) da região da grande Vitória ES. A linha vermelha representa o limite de CT proposto em Portugal. Número de semanas de monitoramento:17 Figura 5 : Média geométrica de E.coli resultante do monitoramento de escolas (E) e praças (P) da região da grande Vitória ES. CONCLUSÕES 1- Considerando os indicadores Coliformes total e Candida sp e baseando-se nos padrões estabelecidos em outros países (Portugal) de 106 e 103 respectivamente como impróprio, podemos inferir que os parques das praças e escolas analisadas apresentam um elevado nível de contaminação por Coliformes totais e Candida. Nesta condição estariam impróprias para utilização. 2- O número de resultados obtidos neste trabalho é insuficiente para realizar uma comparação da qualidade microbiológica das areias de praças e escolas, recomenda-se o prolongamento deste estudo, para obtenção de maior número de dados. 3- Considerando que estudos para se determinar a contaminação existente em areias de parques de recreação, são de significativa importância, torna-se necessário estabelecer uma efetiva legislação de qualidade sanitária de areias. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION, AMERICAN WATER WORKS ASSOCIATION, WATER POLLUTION CONTROL FEDERATION Standard

7 Methods for The Examination of Water and Wastwater Analysis. 19 ed. Washington, D.C American Public Health Association CABELLI, V.J; DUFOUR, A.P.; McCABE, L. J.; AND LEVIN, M.A A marine recreational water quality criterion consistent with indicator concepts and risk analysis. J. Water Poll. Contr. Fedn, v.55, p COMPANHIA ESTADUAL DE SANEAMENTO E MEIO AMBIENTE DE SÃO PAULO, CETESB Coliformes Fecais. Determinação pela técnica de Membrana Filtrante. L São Paulo, COMPANHIA ESTADUAL DE SANEAMENTO E MEIO AMBIENTE DE SÃO PAULO. CETESB Helmintos e protozoários patogênicos contagem de ovos e cistos em amostras ambientais. L5.550 São Paulo, GHINSBERG, R.C., BAR DOV, L., ROGOL, M., SHEINSBERG, Y., AND NITZAN, Y Monitoring of selected bacteria and fungi in sand and sea water along the Tel Aviv coast. Microbios, v. 77, p , MENDES B, NASCIMENTO MJ, OLIVEIRA JS, (1993) Preliminary characterisation and proposal of microbiological qualit standart of sand beachs. Water Science and Tecnology. 27 ( 3-4 ) NOLASCO, R; 2002 Avaliação de indicadores microbianos de balneabilidade em ambientes costeiros de Vitória Tese de mestrado Engenharia Ambiental UFES,p.20-40,