UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARÁ PRÓ-REITORIA DE PESQUISA E PÓS-GRADUAÇÃO DIRETORIA DE PESQUISA PROGRAMA INSTITUCIONAL DE BOLSAS DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA PIBIC : CNPq, CNPq/AF, UFPA, UFPA/AF, PIBIC/INTERIOR, PRODOUTOR, INTERDISCIPLINAR, ACERVO, PIBIT, EBTT E FAPESPA Período : Março/2016 a Agosto/2016 ( X ) PARCIAL ( ) FINAL RELATÓRIO TÉCNICO - CIENTÍFICO IDENTIFICAÇÃO DO PROJETO Título do Projeto de Pesquisa (ao qual está vinculado o Plano de Trabalho): Obtenção e caracterização de produtos fitoterápicos para prevenção e controle da cárie dentária Nome do Orientador: Danielle Tupinambá Emmi Titulação do Orientador: Doutorado Faculdade: Faculdade de Odontologia Instituto/Núcleo: Instituto de Ciências da Saúde (ICS) Laboratório: Laboratório de Operações de Separação (LAOS) UFPA/ Laboratório de Pesquisa e Desenvolvimento Farmacêutico e Cosmético UFPA/ Clínicas da Faculdade de Odontologia - UFPA. Título do Plano de Trabalho: Estudo clínico da eficácia de enxaguante bucal contendo óleos vegetais para o controle do biofilme dental. Nome do Bolsista: Thayane Gabrielle Monteiro de Araújo. Tipo de Bolsa: ( ) PIBIC/CNPq ( ) PIBIC/CNPq AF ( ) PIBIC/CNPq- Cota do pesquisador ( ) PIBIC/UFPA ( ) PIBIC/UFPA AF ( ) PIBIC/INTERIOR ( ) PIBIC/PRODOUTOR ( ) PIBIC/PRODOUTOR RENOVAÇÃO ( x ) PIBIC/FAPESPA ( ) PIBIC/ACERVO ( ) PIBIC/PE-INTERDISCIPLINAR ( ) PIBIC/VOLUNTÁRIO ( ) PIBIC/PIBIT 1
INTRODUÇÃO O biofilme dental é o fator de maior importância na etiologia da cárie e das doenças periodontais e há uma relação muito grande com a higiene bucal deficiente (Beikler; Flemmig, 2011). A remoção mecânica constitui o método mais aceito para o seu controle, mas o uso de coadjuvantes químicos é bastante valioso (Jardim-Júnior et al., 1998). O uso de antimicrobianos e antissépticos como métodos auxiliares tem demonstrado eficiência na diminuição de certas enfermidades periodontais, levando a uma melhoria nos parâmetros clínicos e microbiológicos, objetivando a supressão ou erradicação de bactérias (Newman et al., 2007). As bactérias presentes no biofilme, quando não controladas podem causar irritação no tecido gengival, podendo ocorrer sangramentos espontâneos, caracterizando um processo inflamatório, cuja evolução pode levar a destruição das fibras periodontais e do tecido ósseo, o que pode levar a perda dental (Casati et al., 1996). Apesar de ainda pouco explorados, estudos estão sendo realizadas em busca de fitoterápicos que auxiliem no controle, tratamento e prevenção das doenças mais prevalentes da cavidade oral. Os fitoterápicos são considerados uma modalidade de terapia complementar ou alternativa em saúde e o seu uso tem sido crescente. O uso de plantas com finalidade terapêutica tem ampla aceitação popular e apoio da Organização Mundial de Saúde, motivando pesquisas científicas (Santos; Amorim, 2002). A procura de novas estratégias de controle do biofilme dentário tem sido constante, e os produtos naturais passam a ser empregados com frequência em pesquisas na área odontológica, devido a sua biocompatibilidade, baixa toxicidade e risco reduzido de resistência bacteriana, constituindo fonte promissora para o desenvolvimento de novas tecnologias e produtos (Emmi, 2013). JUSTIFICATIVA: A fitoterapia está crescendo mundialmente entre os programas preventivos e curativos e tem estimulado na odontologia, a avaliação de extratos de plantas com potencial para o controle antimicrobiano, antifúngico e antiinflamatório. Os estudos com produtos naturais para saúde bucal têm aumentado devido à busca por novos produtos com atividade farmacológica maior, menor toxicidade, maior biocompatibilidade e economicamente, maior acessibilidade da população. Óleos vegetais são fontes de ácidos graxos mono e poliinsaturados, que são considerados efetivos para promoção de saúde (De Lorgeril; Salen, 2006). Podem ser obtidos 2
de plantas oleaginosas ou sementes e tem diversidade de usos em muitas culturas ao longo dos séculos. Sua incorporação já ocorreu em diversos ramos do conhecimento, como indústria de cosméticos, alimentos, produtos para saúde e novas tecnologias (Kensche et al., 2013). Emmi (2013) testou in situ os óleos extraídos dos frutos de tucumã (Astrocaryum vulgare) e pupunha (Bactris gasipae) na composição do biofilme dental e dinâmica de formação de cárie em esmalte e observou que ambos reduziram a agregação bacteriana e a perda mineral do esmalte, sendo que o óleo de tucumã apresentou efeito tardio, enquanto que o óleo da pupunha mostrou resultado mais imediato. Mota et al. (2004) realizaram estudo clínico com oito voluntários para comparar a eficácia de dois enxaguatórios bucais comerciais, o Listerine (composto ativo: óleos essenciais) e o Cepacol (composto ativo: cloreto de cetilperidínio) na redução da formação do biofilme dental supragengival. Observaram que o Listerine apresentou melhor performance de redução do biofilme quando comparado ao Cepacol. Estudo clínico conduzido por Lucena et al. (2009) avaliou o efeito anti-inflamatório gengival e de redução do biofilme, de bochechos com solução de camomila (Matricaria recutita). Os resultados do referido estudo mostraram que a solução de camomila foi capaz de reduzir os índices de placa e de sangramento gengival, apresentando eficácia comparável à clorexidina. A clorexidina está bem caracterizada como um excelente agente antiplaca utilizado no tratamento e na prevenção da gengivite, sendo também usada como referência em estudos de teste de eficiência de outros antimicrobianos (Gunsolley, 2006). Lins et al. (2013) avaliaram clinicamente a eficácia de bochechos com aroeira (Schinus terebinthifolius) e camomila (Matricaria recutita) sobre o biofilme dental e a gengivite e concluíram que ambas as soluções reduziram o quadro de inflamação gengival, contudo, a solução de bochecho com a camomila apresentou melhor desempenho na redução do índice de placa bacteriana. OBJETIVO GERAL: Avaliar a eficácia clínica da redução do biofilme dental supragengival, de enxaguante bucal contendo óleos vegetais amazônicos extraídos de frutos de tucumã (Astrocaryum vulgare) e pupunha (Bactris gasipae). OBJETIVO ESPECÍFICO: Avaliar o quantitativo de biofilme dental por meio do índice de O'Leary e determinar comparativamente a eficácia de redução do biofilme 3
dental supragengival entre um enxaguante bucal comercial a base de cloreto de cetilperidínio e o digluconato de clorexidina (gold standard). MATERIAIS E MÉTODOS: Por envolver a participação de seres humanos, a pesquisa foi submetida à Plataforma Brasil, com CAAE 57602216.7.0000.0018 sendo conduzida de acordo com a Resolução 466/2012 no sentido de garantir exposição mínima a riscos e proteção à integridade dos indivíduos. Todos os indivíduos envolvidos na pesquisa foram esclarecidos e deram seu livre consentimento por escrito através do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. A amostra foi constituída por 16 adultos jovens, graduandos da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal do Pará, que atenderam aos critérios de inclusão: ter idade entre 18 e 26 anos, presença de no mínimo 70% de dentes nas arcadas, ausência de patologias bucais não relacionadas ao biofilme dental e apresentar no mínimo, 50% de biofilme nas faces dentais evidenciadas no exame inicial (Nunes et al., 2009). Para mensurar a redução do biofilme, foi utilizado o índice de O'Leary, que corresponde a avaliação do quantitativo de biofilme presente nas superfícies vestibular, lingual/ palatina, mesial e distal de todos os dentes, com exceção dos terceiros molares. Para avaliação deste índice foi utilizado bochecho com 2 ml de evidenciador de biofilme dental a base de fucsina básica. Este índice estima o percentual de superfícies que encontram-se comprometidas pelo biofilme dental (O'Leary et al., 1972). Os 16 voluntários selecionados, foram distribuídos aleatoriamente em 4 grupos. Sendo: Grupo 1 (controle positivo) - n=4: Utilizando enxaguante bucal a base de digluconato de clorexidina 0,12% (manipulado na Farmácia A Fórmula, Belém); Grupo 2 - n=4: Utilizando enxaguante bucal fluoretado com 5% dos óleos do tucumã e da pupunha associados; Grupo 3 - n=4: Utilizando enxaguante bucal fluoretado com princípio ativo cloreto de cetilperidínio a 0,05% (Sensodyne, GlaxoSmithKline) Grupo 4 - n=4: Não fez uso de enxaguante bucal, apenas escovação com creme dental comum (Sorriso Tripla Limpeza Completa, Colgate-Palmolive) (controle negativo). Os participantes da pesquisa receberam orientações de higiene oral, como forma de padronização da técnica de escovação a ser utilizada em todos os grupos durante o período experimental, assim como, escova dental macia (Condor Top Plus, Condor Indústria e Comércio) e creme dental comum, sem a presença de ativo antimicrobiano em sua composição 4
Índice de placa (%) (Sorriso Tripla Limpeza Completa, Colgate-Palmolive). Além disso, cada grupo recebeu o frasco com o enxaguante bucal referente a seu grupo e um copo dosador equivalente a medida de utilização do enxaguante bucal. Os frascos do enxaguante foram codificados para que não fossem identificados pelos participantes, para evitar tendenciosidade. Os voluntários foram orientados a escovar os dentes e utilizar como bochecho, 5 ml do enxaguante bucal correspondente a seu grupo, duas vezes ao dia, com intervalo de 12 horas entre elas, durante 1 minuto (Lins et al., 2013). Os enxaguantes bucais correspondente a cada grupo foram utilizados durante 21 dias consecutivos, sendo a verificação do índice de O'Leary feita nos tempos clínicos de 0, 7, 14 e 21 dias (Nunes et al., 2006). Nos dias de tomada do índice de O'Leary os voluntários realizaram a escovação pela manhã, após a ingestão do café da manhã e, somente após a mensuração do índice realizaram as demais escovações de forma rotineira. As avaliações foram feitas sempre ao final da manhã, nas clínicas da Faculdade de Odontologia, após a finalização das atividades didáticas dos voluntários. RESULTADOS: Os resultados da pesquisa até o momento são parciais, visto que ainda não foi obtida a amostra total para avaliação da eficácia clínica dos enxaguantes bucais com óleos vegetais. 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% Inicial 7 dias 14 dias 21 dias Tempo G1 G2 G3 G4 Gráfico 1: Índice de placa segundo tempo de observação nos diferentes grupos experimentais. Belém, 2016. De acordo com o Gráfico 1 observa-se que houve redução do índice de placa entre o tempo inicial e o final, nos 4 grupos experimentais, sendo que o maior percentual de redução (38%) ocorreu no grupo G2 (escovação+enxaguante com óleos da pupunha+tucumã), 5
Índice de placa (%) enquanto que o grupo G4 (apenas escovação sem o uso do enxaguante) mostrou o menor percentual de redução do índice de placa (8%) (Gráfico 2). 40% 35% 30% 25% 20% 15% 10% 5% 0% G1 G2 G3 G4 Grupos experimetais Gráfico 2: Percentual de redução do biofilme dental nos grupos experimentais após 21 dias de observação. Belém, 2016. No gráfico 2 pode ser observada comparativamente a eficácia de redução do biofilme dental supragengival entre o enxaguante bucal de digluconato de clorexidina e o enxaguante a base de cloreto de cetilperidínio (CCP), respectivamente, G1 e G3, onde o grupo experimental que utilizou clorexidina, mostrou aproximadamente 5% a mais na diminuição do biofilme dental do que o grupo que fez uso de CCP. PUBLICAÇÕES: Até o momento, como os resultados são parciais e a pesquisa ainda está em andamento, não houve publicações. ATIVIDADES A SEREM DESENVOLVIDAS NOS PRÓXIMOS MESES Nos próximos meses serão feitas novas avaliações clinicas, com objetivo de aumentar a amostra clínica, para que se possa ter grupos com maior representatividade. Dessa forma, com dados obtidos de uma amostra mais representativa, também deverão ser aplicados os testes estatísticos adequados. 6
ATIVIDADE MESES Revisão bibliográfica Março/ 2016 a Fevereiro/ 2017 Testes dos enxaguantes bucais Agosto a Novembro/ 2016 Análise de resultados Janeiro/ 2017 Elaboração de artigo e submissão para publicação Janeiro e Fevereiro/ 2017 Elaboração e entrega de relatório final Março/ 2017 Participação no Seminário de Iniciação Científica Setembro/2017 CONCLUSÃO: Os resultados obtidos até o momento são satisfatórios e vem ratificando a eficácia dos óleos vegetais no controle do biofilme dental. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS Beikler, T.; Flemmig T. F. Oral biofilm-associated diseases: trends and implications for quality of life, systemic health and expenditures. Periodontology. 2011; 55(1):87-103. Casati MZ, Nociti-Junior FH, Sallum EA, Toledo S, Sallum AW. Avaliação dos agentes antimicrobianos no tratamento das doenças periodontais. Rev Periodontia. 1996; 5(4): 335-340. De Lorgeril M, Salen P. The Mediterranean-style diet for the prevention of cardiovascular diseases. Public Health Nutr. 2006; 9:118-23 Emmi DT. Influência dos óleos de tucumã (Astrocaryum vulgare) e da pupunha (Bactris gasipae) na composição do biofilme dental e dinâmica do processo de cárie em esmalte: um estudo in sito [tese]. São Paulo: Universidade de São Paulo, 2013. 96p. Gunsolley JC. A meta-analysis of six-month studies of antiplaque and antigingivities agents. J Am Dent Ass 2006; 137(12): 1649-1657. Jardim-Júnior, EG et al. Eficácia do Listerine sobre a placa. Rev Gaúcha Odontol. 1998; 46(1): 70-78. 7
Kensche A, Reich M, Kummerer K, Hanning M, Hanning C. Lipids in preventive dentistry. Clin Oral Invest. 2013; 17:669-85 Lins, R, Vasconcelos FHP, Leite RB, Coelho-Soares RS, Barbosa DN. Avaliação clínica de bochechos com extrato de aroeira (Schinus terebinthifolius) e camomila (Matricaria recutita) sobre a placa e gengivite. Rev Bras Pl Med 2013; 15(1): 112-120. Lucena RN, Lins RDAU, Ramos INC, Cavalcanti AL, Gomes RCB, Maciel MAS. Estudo clínico comparativo do efeito anti-inflamatório da Matricaria recutita e da clorexidina em pacientes com gengivite crônica. Rev Bras Pesq Saúde 2009; 11(3): 31-36. Mota MVA, Pinto MOC, Martins GB, Campos EJ. Estudo comparativo in vivo da eficácia de dois enxaguatórios bucais sobre a formação da placa bacteriana supragengival - plano piloto. Rev Odontol Univ Cid São Paulo 2004; 16(3): 247-254. Newman MG, Takei HH, Klokkevold PR, Carranza JR. Periodontia Clínica. 10 ed. Rio de Janeiro: Elsevier; 2007. Nunes RS, Lira AAM, Lacerda CM, Silva DOB, Silva JA, Santana DP. Obtenção e avaliação clínica de dentifrícios à base do extrato hidroalcólico da Lippia sidoides Cham (Verbenaceae) sobre o biofilme dentário. Rev Odontol UNESP 2006; 35(4): 275-283. O'Leary TJ, Drake RB, Naylor JE. The plaque control record. J Periodontol. 1972; 43(1): 38. Santos, L.C.; Amorim, M.M.R. Uso da Aroeira (Schinus terebinthifolius raddi) para tratamento de infecções vaginais. Femina. 2002; 30(6): 339-342. DIFICULDADES - Disponibilidade dos laboratórios para execução dos testes prévios de estabilidade dos óleos e enxaguante, necessários para o início da etapa clínica, causando atraso no cronograma de testes clínicos. - Por tratar-se de um estudo clínico, outra grande dificuldade é encontrar voluntários que se sensibilizem com os objetivos da pesquisa e se comprometam em colaborar nas fases necessárias. 8
propostos. Apesar disso, a pesquisa está em andamento na fase clínica, para atingir os objetivos PARECER DO ORIENTADOR: A aluna Thayane Gabrielle Monteiro de Araújo tem demonstrado crescimento científico e apresenta grande interesse, perseverança diante das dificuldades, responsabilidade e compromisso no desenvolvimento do seu plano de trabalho. DATA: 15/08/2016 ASSINATURA DO ORIENTADOR 9