Genética de Bactérias Descrição de mutantes Mecanismos de recombinação Mapeamento de genes
Considerações iniciais Microrganismos no contexto da Genética 1940 com Beadle & Tatum mutantes auxotróficos em Neurospora crassa 1946 com Lederberg & Tatum comprovação da transferência de genes por conjugação bacteriana
Pré-requisitos para estudos de Genética possibilidade de obtenção e detecção de mutantes mutantes auxotróficos mutantes morfológicos mutantes resistentes a agentes inibidores de crescimento antibióticos bacteriófagos
Pré-requisitos para estudos de Genética II Ocorrência de eventos de recombinação transformação bacteriana conjugação bacteriana sexodução transdução generalizada restrita
Mutantes bacterianos auxotróficos incapazes de crescimento em meio mínimo meio mínimo 1 fonte de carbono (energia) e sais minerais ex: thr -, lys -, arg -, etc morfológicos coloração de colônias formato das colônias,etc
Mutantes bacterianos II temperatura sensíveis (t s ) inativação de enzimas quando expostos a 37º ou 42º C, etc resistentes a agentes inibidores de crescimento antibióticos Ap r, Kan r, St r, Cm r (plasmideos) bacteriófagos - λ, P22, etc
Crescimento bacteriano típica curva de crescimento
Diluição em série 10-3 10-4 10-5
Clones bacterianos
Transformação bacteriana Griffith (1928) D. pneumoniae principio transformante termo-resistente Avery et al. (1944) D. pneumoniae uso de enzimas (DNAse, RNAse, etc) DNA fator de transformação material genético das células
Transformação bacteriana
Posicionamento de genes genes E e F E e F curva A ou B E F curva C
Conjugação bacteriana mutantes auxotróficos analisados em meio mínimo recombinantes prototróficos
Davis tubo em U necessidade de contato físico entre as bactérias presença do filtro impede o surgimento de recombinantes
Bactérias em conjugação
Transferência de material genético células F + células F -
Plasmideos bacterianos plasmideos autônomos X integrativos (epissomos) conjugativos X não conjugativos operon tra
Situação especial Hayes (1953) HFR (AFR) epissomo conjugativo
Consequências genéticas mobilização de genes cromossomais para hospedeiras especiais mapeamento de genes da doadora sexodução transferência específica de determinados genes
Exemplo de mapeamento transferência dos genes azi ton lac gal ton
localização dos genes azi ton lac gal
Generalizando Mapa genético do cromossomo da E. coli
Transdução eventos de recombinação envolvendo a transferência de material genético entre bactérias via bacteriófagos
Ciclo vital de um bacteriófago
Colônias de fagos (Placas de Lise)
Tipos de transdução generalizada fagos comuns Ex: M13, φ X174, etc restrita fagos específicos Ex; fago λ em E. coli abortiva situação anormal em que o cromossomo do fago é impedido de agir normalmente
Transdução generalizada
Transdução restrita
Mapeamento por transdução os eventos de recombinação genética via transferência por fagos restringem-se às vizinhaças dos sítios de inserção do profago
Mapeamento de regiões muito específicas próximas ao ponto de inserção dos profagos nos cromossomos das bactérias receptoras