Granulopoese. Profa Elvira Shinohara

Granulopoese Profa Elvira Shinohara

Granulopoese = formação de neutrófilos, eosinófilos e basófilos Neutrófilos Eosinófilos Meia vida de 7 horas no sangue Basófilos

NÚMERO TOTAL DE CÉLULAS NUCLEADAS NA MEDULA HEMATOPOIÉTICA DO ADULTO É DE 200 X 10 3 CÉLULAS/ L 120 X 10 3 células/ L de linhagem mielóide (60%); 40 X 10 3 células/ L de linhagem eritróide (20%); 40 X 10 3 células/ L de linhagem linfocitária (20%). A contagem de megacariócitos é de 100/ L

Fonte: slide da aula Prof Ricardo

Granulopoese é regulada: IL3, GM-CSF M-CSF: produção de monócitos G-CSF: granulopoese (neutrófilos, eosinófilos e basófilos)

Fonte: Greer e cols. Wintrobe s Clinical Hematology, 2004

Formação de neutrófilos Mieloblasto Prómielócito Mielócito Metamielócito Neutrófilo Bastonete Neutrófilo Segmentado

Formação de eosinófilos Eosinófilo Mielócito Metamielócito Bastonete

Forrmação de basófilos

LK Ligante kit CFC = CFU-GEMM FNT fator de necrose tumoral Cecil Tratado de Medicina Interna

Leucopoese As células endoteliais e os fibroblastos liberam quantidades basais de GM-CSF e G-CSF em condições normais

Maturação dos neutrófilos Mieloblastos Promielócitos Mielocítos Metamielócitos Neutrófilos bastonetes Neutrófilos segmentados TECIDOS FONTE: HOFFBRAND ET AL, 2004 FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGIA

Maturação dos granulócitos Color Texbook of Histology. Leslie e cols, 1997.

Granulopoese Wintrobe s Clinical Hematology, 2004

Precursores granulocíticos mieloblasto promielócito mielócito metamielócito bastonete segmentado

Granulopoese

Células da medula óssea Mielócito eosinófilo plasmócito Mielócito neutrófilo

promielócito Neutrófilo bastonete

mielócito

Com base nos estudos de cinética, são geralmente reconhecidos quatro compartimentos celulares contendo células mielóides: COMPARTIMENTOS Mitótico medular Pós-mitótico medular e de armazenamento Vascular (circulante e marginado) Teciduais

Neutrófilos COMPARTIMENTOS Mitótico medular Pós-mitótico medular ou de armazenamento Vascular neutrófilos marginados neutrófilos circulantes Extravascular (diversos tecidos)

Neutrófilos

Constituintes dos grânulos dos neutrófilos GRÂNULOS PRIMÁRIOS ou Grânulos Azurófilos MPO (mieloperoxidase) Lizozimas Elastase Colagenase Catepsina G GRÂNULOS SECUNDÁRIOS ou Grânulos específicos Lactoferrina Lizozima Fosfatase alcalina Colagenase tipo IV

Neutrófilos Grânulos: Primários ou azurófilos Secundários ou específicos

Cinética dos neutrófilos MEDULA ÓSSEA Pool mitótico Quatro ou cinco divisões Pool mitótico (2 a 3 dias) Célula tronco, mieloblastos, promielócitos e mielócitos Maturação e estoque (5 a 7 dias) Metamielócitos, bastonetes e neutrófilos segmentados

Compartimentos compartimento mitótico compartimento de armazenamento compartimento circulante compartimento marginal compartimento extravascular Fonte: Cecil Tratado de Medicina interna

Quando as células alcançam o estágio de maturação intermediário, conhecido como metamielócito, param de proliferar, mas continuam a sofrer diferenciação em bastões e neutrófilos segmentados Embora estas células sejam capazes de abandonar a medula óssea, quando necessário, elas permanecem na medula por cerca de cinco dias (COMPARTIMENTO DE ARMAZENAMENTO)

Compartimento circulante células não marginadas Compartimento marginal Cerca de metade dos neutrófilos circulantes aderem as células endoteliais

Compartimento extravascular depois de breve permanência no sangue periférico, os neutrófilos invadem os compartimentos extravasculares da maioria dos orgãos, onde são utilizados como defensores quanto como sistemas de eliminação de detritos, ou morrem dentro de um ou dois dias

Cinética dos neutrófilos Os neutrófilos circulam no sangue periférico cerca de 6 a 10 horas Aproximadamente a metade da quantidade de neutrófilos presentes no sangue periférico estão marginados Mudanças na posição de marginados para circulantes podem ocorrer em condições de estresse, exercícios físicos ou após a administração de adrenalina, levando a leucocitose transitória A taxa de produção de neutrófilos é de 1,63 x 10 9 células/ kg de peso corpóreo Esta produção pode aumentar dramaticamente frente a um estímulo inflamatório

Cinética dos neutrófilos e monócitos Cecil Tratado de Medicina Interna

Eosinófilos

EOSINÓFILOS

Eosinófilos célula de 10-15µm granular, com afinidade por eosina originada a partir de cél. hematopoética CD34+ IL3, IL5 e GM-CSF são críticas para a estimulação da MO para a sua produção essas citocinas também são produzidas por linfócitos T, CD4 e CD 8+

VALORES DE REFERÊNCIA PARA EOSINÓFILOS Eosinófilos: Valores da normalidade no sangue periférico 50-500/µL Eosinofilia: Leve: 500-1500/µL Moderada: 1500-5000/µL Severa: > 5000/µL

Grânulos presentes nos eosinófilos

Cinética dos neutrófilos no processo reacional

Cinética dos neutrófilos Em condições de estresse e em processos reacionais O tempo de maturação pode ser diminuído O número de divisões podem ser abolidas As células podem ser liberadas no sangue periférico precocemente EM PROCESSO INFECCIOSOS O tempo decorrido do estágio de mielócito a neutrófilo segmentado no sangue periférico pode ser reduzido a 48 horas.

Neutrófilos Os neutrófilos e seus precursores respondem a infecções de modo altamente regulado. As respostas dos neutrófilos à infecção são determinadas por inúmeros fatores tais como: moléculas de adesão fator estimulador de colônias de granulócitos-macrófagos (CSF-GM), fator de estimulador de colônias de granulócitos (CSF-G) fator quimiotático - a interleucina 8.

Neutrófilos Esses fatores (GM-CSF, G-CSF, IL8), juntamente com IL-1, uma citocina que induz a expressão de muitas moléculas efetoras da inflamação, são responsáveis por: 1- aumento imediato na produção de neutrófilos no compartimento mitótico, uma resposta mediada por uma complexa rede de interações reguladoras celulares e humorais; 2- liberação precoce dos neutrófilos do compartimento de armazenamento medular para o compartimento do sangue periférico; 3- aumento na velocidade de saída dos neutrófilos do compartimento do sangue periférico para o tecido ou tecidos invadidos; 4- aumento da atividade fagocítica e bactericida dos neutrófilos.

Citocinas São polipeptídeos produzidos em resposta a microorganismos e outros antígenos, que medeiam e regulam reações imunes e inflamatórias Ação da citocina pode ser Autócrina: agem na mesma célula que a secreta Parácrina: agem em célula próxima Endócrina: entram na circulação e atua à distância do local de produção

Imunidade inata Células: Macrófagos, neutrófilos e células NK Citocinas que: controlam infecções virais (IFN- e IFN- ) medeiam a inflamação (TNF, IL-1 e quimiocinas) estimulam a proliferação e a atividade das células NK servem para limitar a ativação do macrófago (IL-10) IL-6 aumenta a produção de neutrófilos na medula óssea e a síntese de várias proteínas envolvidas na defesa do hospedeiro, tais como proteína-c

Leucopoese A liberação destes fatores é potencializada pelas monocinas TNF e IL-1 liberadas em resposta à infecção

Citocinas TNF- e IL 1 Liberadas por macrófagos ativados após contato com agente infeccioso Aumento de produção de neutrófilos compartimento mitótico da MO e aceleração na liberação de células do pool de compartimento Efeito indireto, estimulam os fibroblastos estromais da MO e linfócitos T e B PRODUZIREM MAIOR QUANTIDADE DE GM-CSF E G-CSF DO QUE NÍVEIS BASAIS NORMALMENTE PRODUZIDOS Efeito direto, aumentar permeabilidade vascular de capilares e promover a expressão de integrinas na membrana das células endoteliais e de neutrófilos = aumentar diapedese

Funções das citocinas na defesa de hospedeiros Fonte: Abbas & Lichtman Imunologia Celular e Molecular, 2005

Eosinopenia acompanhada de neutrofilia Quadro reacional (por exemplo em processo infeccioso por bactérias gram positivas) 1- Liberação de cortisol pela glândula suprarenal atua na MO inibindo a produção e liberação de eosinófilos do compartimento maturativo medular para o compartimento circulante 2- No processo infeccioso há ativação da resposta Th1 levando a eosinopenia devido ausência de liberação de IL 5 no sistema A produção de eosinófilos e sua saída para circulação periférica é estimulada pela IL 5, a qual é produzidas por linfócitos ativados Th2

IL 6 Atua na imunidade inata e na adaptativa É sintetizada por fagócitos mononucleares, células do endotélio vascular, fibroblastos e outras células, em resposta a microrganismos e a outras citocinas (Il 1 e TNF) Imunidade inata - estimula a síntese de proteínas agudas - estimula a produção de neutrófilos Imunidade adaptativa - estimula a proliferação de linfócitos B e sua diferenciação para produção de anticorpos

Ações biológicas do TNF Fonte: Abbas & Lichtman Imunologia Celular e Molecular, 2005