Caracterizar a estrutura e o funcionamento de um laboratório de microbiologia; Executar técnicas de preparo e montagem para esterilização.
Uma laboratório de microbiologia destina-se principalmente em isolar, identificar, caracterizar, quantificar e conservar os microrganismos. No estudo de microbiologia são indispensáveis: Execução de preparações microscópicas Esterilização de vidrarias Preparo de meio de cultura e de materiais diversos Técnicas de cultivo Isolamento e outros ensaios microbiológicos Para o bom desempenho dessas tarefas é necessário dependências adequadas como: Sala de microscopia Câmara asséptica ou fluxo laminar Sala de lavagem, montagem e esterilização... Biotério
As condições de limpeza e higiene devem sempre prevalecer e são de fundamental importância em um laboratório de microbiologia. Uma das soluções mais usadas para a lavagem de vidraria é a solução sulfocrômica. Ácido sulfúrico concentrado comercial...1000g Bicromato de sódio comercial...500g Água q.s.p...10000g Dissolver o Bicromato em água. Em seguida, adicionar lentamente o ácido sulfúrico, com o recipiente de Bicromato, imersa em água com gelo Material novo: Água com sabão, água corrente, água destilada. Material em uso Contaminado autoclavação em baldes, água e sabão, enxaguar em água corrente, solução sulfocrômica (se necessário), água corrente, água destilada. Não contaminados semelhante ao anterior sem autoclavação A vidraria lavada deverá ser posta em estufa a cerca de 70 C e posteriormente, se for o caso, será preparada, montada e esterilizada.
Montagem consiste na preparação do material para a esterilização Todo o material deve ser protegido após a esterilização para que não ocorra risco de contaminação. Pipetas lavadas e secas, deve-se colocar um pequeno tufo de algodão na extremidade de aspiração. A montagem das pipetas consiste me sua colocação em recipientes metálico (cânulas), com a parte de aspirar para cima ou enrolá-las em papel, uma a uma. Placas de Petri são esterilizadas em um recipiente metálico ou envolvidas em papel em grupos de 2, 3 ou até 10 unidades. Tubos de ensaio com ou sem meio de cultura são geralmente tampados com algodão hidrófobo, colocados em recipientes (lata, Becker...) fechados com papel ou alumínio.
Água fervente: a água em ebulição mata microrganismos (bactérias na forma vegetativa) pela coagulação das proteínas. Mas, não destrói esporos. Esse método é raramente utilizado em trabalhos de laboratório. Vapor de água a 100 C (conhecido como vapor fluente ): Uma maneira de se conseguir vapor fluente de modo prático é através da autoclave com a válvula aberta, cerca de 30 a 60 minutos. Esse método é utilizado para meio ou substâncias termolábeis. V a p o r d e á g u a a c i m a d e 1 0 0 C : o m é t o d o m a i s u t i l i z a d o é d a a u t o c l a v a g e m. A calibragem do manômetro deve ser observada (121 C ou 1 atm). C u i d a d o s n e c e s s á r i o s : O nível da água dentro da autoclave tem que estar cobrindo a resistência elétrica. O nível da água não deve entrar dentro do cesto onde vai o material a ser esterilizado. A tampa deve ser bem fechada A válvula de segurança tem que estar aberta, somente após a observação do,vapor fluente (por 5 minutos) ela deve ser fechada para atingir a temperatura e pressão desejadas e contar de 20 a 30 minutos para desligar a autoclave.. Esperara a o manômetro voltar ao ponto zero, abre-se a válvula de vapor; em seguida a tampada da autoclave é levantada.
Calor ao rubro: é usado para alças e agulhas inoculadoras, as quais são esterilizadas mantendo-as expostas à chama do bico de Bunsen. Estufa ou forno elétrico: esse processo é usado principalmente para esterilizar vidraria não volumétrica.
É amplamente utilizada para esterilização de soluções termolábeis. Os filtros mais satisfatórios são os filtros de membrana, feitos de acetato de celulose. O filtro é comumente adaptado a um frasco de sucção ou Kitasato. A solução é, então despejada no filtro e aspirada por sucção. A solução filtrada é transferida para um frasco ou tubo de ensaio previamente esterilizado, munido de tampão de algodão, ou outro tipo de protetor