Células Stem Mesenquimais

Transcrição

1 Células Stem Mesenquimais UFRJ Centro de Investigación del Cáncer, Dpto de Medicina y Servicio de Citometría Universidad de Salamanca

2 Fase embrionária

3 Fase embrionária

4 Fase embrionária

5 Fase embrionária

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7 Procedimentos em MO separação de Mononucleares Cultura Cultura Citocentrifuga Caracterização Sorting 0,01 a 0,05% células Diferenciação Estìmulos especificos Imunohistoquímica CFU-F Genes de diferenciação e capacidade Stem

8 Capacidade clonogénica

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10 Integrinas - Positivas Integrinas - Negativas a1 CD49a a4 CD49d a2 CD49b al CD11a a3 CD49c Cb2 CD18 aa CD49e Marcadores Hematopoieticos -Negativos av CD51 T4 CD4 b1 CD29 Mo2 CD14 b3 CD61 CD34 b4 CD104 Antigen Leukocyte CD45

11 Receptores de Citocinas Positivos Receptores de Citocinas - Negativos IL-1R CD121a IL-2R CD25 IL-3Ra CD123 IL-4R CD124 IL-6R CD126 IL-7R CD127 Receptores de Fatores - Positivos Receptores de Fatores - Negativos IFNgR Dw119 EGFR-3 TNFIR CD120a TNFIIR CD120b TGFbIR TGFbIIR bfgfr Fas ligand PDGFR CD140a Transferrin CD71

12 Receptores de Matrix - Positivos Receptores de Matrix - Negativos ICAM-1 CD54 ICAM-3 CD50 ICAM-2 CD102 E-Selectin CD62E VCAM-1 CD106 P-Selectin CD62P L-Selectin CD62L PECAM-1 CD31 LFA-3 CD58 vw Factor ALCAM CD166 Cadherin 5 Hyaluronate CD44 Lewisx CD15 Endoglin CD105 Outros - Positivos CD9 Thy-1 CD90

13 Primeira distinção fenotípica CD 45+ CD 45- Célula Stem Hematopoéticas CD34+ Célula Hematopoéticas Células Stem Mesenquimais Células Progenitoras Endoteliais Células imaturas Eritróides

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15 NOMES MESENCHYMAL STEM CELLS -PITTENGER ET AL. MESODERMAL PROGENITOR CELLS (MPC) - VERFAILLIE S GROUP. MARROW ISOLATED ADULT MULTILINEAGE INDUCIBLE (MIAMI) CELLS - D IPPOLITO ET AL Emer Clark, 2003

16 Clonal mesenchymal progenitors from human bone marrow differentiate in vitro according to a hierarchical model Anita Muraglia, Ranieri Cancedda and Rodolfo Quarto

17 1- Chamar de Célula Stem Mesenquimal (CSM) somente aquelas isoladas de medula óssea, tecido adiposo e de outros tecidos que tenham a capacidade de aderir ao plastico; 2- Chamar de Célula Stem Mesenquimal(SM) que tenha capacidade de diferenciação in vitro, caso não, denominar apenas de Célula mesenquimal estromal multipotente (CMEM). 3- Não considerar células Stem hematopoiéticas CD34+ que demostra capacidade de sobreviver em cultura de longa duração como CSM ou CMEM. POSITIVOS CD73, CD90, CD105, CD106, CD146, MHC Classe I. NEGATIVOS CD45, CD34, MHC Classe II.

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19 Em que tecidos podemos encontrar células Stem mesenquimais?

20 Células Mesenquimais Origens múltiplas - Aderentes ao plástico ADULTO Medula Óssea Veia safena Tecido Adiposo Veia do cordão umbilical Artéria do cordão umbilical Sengue de cordão umbilical FETO Carótida Músculo da fáscia Testículos Fígado Pulmão Timo Pele Peritônio Cartilagem costal Rim Utero Ovario Pâncreas Baço Coração Pulmão Pericárdio Covas et al, 2008

21 Pericitos Origem Célula Mesenquimal Fibroblastos C. Musc. lisas C S Mesenquimal Semelhanças morfológicas e funcionais Células Estreladas Hepáticas Presença no espaço peri-vascular

22 Clusterização: MSC Pericytes Fibroblasts C. Estreladas hepáticas Covas et al 2008 Exp. Hematol.

23 Células Mesenquimais - Caracterização Mesenchymal stromal cells Biology of adult mesenchymal stem cells: regulation of niche, self-renewal and differentiation Catherine M Kolf*, Elizabeth Cho* and Rocky S Tuan- 2007

24 Quais as aplicações clínicas?

25 Centro de Investigación del Cáncer, Dpto de Medicina y Servicio de Citometría Universidad de Salamanca

26 Células Stem Mesenquimais Células-Tronco Mesenquimais da Veia Umbilical

27 Atividades imunomoulatórias das SCM Células Stem Mesenquimais Nauta & Fibbe, 2007

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29 Fenótipo Centro de Investigación del Cáncer, Dpto de Medicina y Servicio de Citometría Universidad de Salamanca

30 Células Mesenquimais - MO POSITIVOS CD73,CD90, CD105 NEGATIVOS CD45, CD34,

31 Células Mesenquimais MO Fenótipo

32 Qual a sua localização anatômica em cada tecido? Qual a função destas células nos diferentes tecidos e na MO? Qual a relação com as neoplasias hematológicas?

33 Obrigado! Centro de Investigación del Cáncer, Dpto de Medicina y Servicio de Citometría Universidad de Salamanca

34 Centro de Investigación del Cáncer, Dpto de Medicina y Servicio de Citometría Universidad de Salamanca

35 Centro de Investigación del Cáncer, Dpto de Medicina y Servicio de Citometría Universidad de Salamanca

36 Centro de Investigación del Cáncer, Dpto de Medicina y Servicio de Citometría Universidad de Salamanca

37 Centro de Investigación del Cáncer, Dpto de Medicina y Servicio de Citometría Universidad de Salamanca

38 Centro de Investigación del Cáncer, Dpto de Medicina y Servicio de Citometría Universidad de Salamanca

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