Castellane s/n Jaboticabal, SP Brasil

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1 SELEÇÃO DE LINHGENS DE Trichogramma pretiosum Riley PR O CONTROLE DE nticarsia gemmatalis Hübner Carolina de Oliveira ernardes 1, Ricardo ntonio Polanczyk n 1 Universidade Federal do Espírito Santo/Produção Vegetal, lto Universitário, s/nº - Cx Postal 16, Guararema legre-es, carolina.bernard@hotmail.com. n Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho/Entomologia grícola, Via de cesso Prof. Paulo Castellane s/n Jaboticabal, SP rasil Resumo- Dentre as pragas mais importantes na cultura da soja, destaca-se nticarsia gemmatalis Hübner, Este trabalho avalia as características biológicas de onze linhagens de Trichogramma pretiosum criados em ovos de nticarsia gemmatalis, visando selecionar aquela com melhor desempenho, para utilização em programas de controle biológico da praga. Foram individualizadas 15 fêmeas de cada linhagem em tubos de vidro. Cartelas com ovos de. gemmatalis, foram oferecidas às fêmeas do parasitoide por 24 horas. s cartelas foram acondicionadas em sacolas plásticas. Os parâmetros biológicos parasitismo, viabilidade, razão sexual e número de insetos por ovo foram avaliados. porcentagem de parasitismo variou entre 5,3 a 53,5%, sendo o maior valor observado para o T. pretiosum, linhagem 12; e o menor, para T. pretiosum, linhagem 8. O parâmetro porcentagem de viabilidade foi satisfatório para todas as linhagens (acima de 85%). Para a razão sexual, as médias obtidas ficaram acima de 0,5, o que é essencial para criação massal do parasitoide. O número de parasitoides por ovo variou de 0,87 a 2,04. T. pretiosum 12 foi a linhagem de melhor desempenho em laboratório, quando criada sobre ovos de. gemmatalis. Palavras-chave: Controle biológico, parasitoide de ovos, lagarta-da-soja. Área do Conhecimento: Ciências grárias (gronomia) Introdução soja é uma cultura de grande interesse sócioeconômico, em função dos teores elevados de proteína, da produtividade de grãos e da possibilidade de adaptação a ambientes diversos (ROCH et. al., 2002). Dentre os fatores que contribuem para limitar o aumento da produtividade da soja no país, destacam-se os insetos-praga, que podem atacar as folhas, as hastes ou as raízes. (MOSCRDI et al., 1999). Dentre as pragas mais importantes na cultura da soja, temos a nticarsia gemmatalis Hübner, 1818 (Lepidoptera: Noctuidae), que causa desfolha e acarreta os maiores prejuízos para a cultura (HOFFMNN-CMPO et al., 2000). O controle biológico é uma das táticas que tem mostrado bons resultados no controle de pragas, apresentando alto potencial de sucesso, pois se pode reduzir a população das pragas para um nível inferior ao nível de dano econômico, de forma análoga ao uso de agrotóxicos (PRR; ZUCCHI; SILVEIR NETO, 1987). Os parasitoides do gênero Trichogramma (Hymenoptera: Trichogrammatidae) todo ano são liberados em mais de 16 milhões de hectares em plantações anuais (em sua maior parte) e perenes (HSSN 1997). Esses parasitoides têm sido amplamente utilizados, devido à facilidade de sua criação em hospedeiros alternativos, sua facilidade de multiplicação, além de sua agressividade no parasitismo de ovos de insetos-praga (HJI et al., 1998). Em algumas regiões no rasil, o parasitismo de ovos de. gemmatalis por Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera:Trichogrammatidae) é algumas vezes superior a 90% (ZCHRISSON, 1997). No entanto, diversos trabalhos mostram que, a despeito da aparente inespecificidade de Trichogramma, existem espécies ou mesmo linhagens que são mais adequadas para determinados hospedeiros, culturas e condições climáticas. Portanto, estudos que antecedam a liberação dos parasitoides devem ser realizados, para definição de espécies e/ou linhagens a serem liberadas, em função de seus parâmetros biológicos e comportamentais (UENO, 2008). Portanto, este trabalho desenvolve estudos biológicos com diferentes linhagens de T. pretiosum, visando selecionar aquela com melhores características biológicas e maior potencial de controle, para utilização em programas de manejo integrado de. gemmatalis, na cultura da soja. XV Encontro Latino mericano de Iniciação Científica e XI Encontro Latino mericano de Pós-Graduação Universidade do Vale do Paraíba 1

2 Metodologia O experimento foi realizado no Laboratório de Entomologia do Núcleo de Desenvolvimento Científico e Tecnológico em Manejo Fitossanitário de Pragas e Doenças (NUDEMFI), do Centro de Ciências grárias da Universidade Federal do Espírito Santo (CC-UFES) em legre, Espírito Santo, em câmaras climatizadas a 25 ± 1 ºC, 70 ± 10% UR e fotofase de 12 horas. Criação e manutenção das linhagens de Trichogramma pretiosum e do hospedeiro alternativo nagasta kuehniella. Foram utilizadas as onze linhagens de T. pretiosum da coleção do NUDEMFI, em que são mantidas com ovos do hospedeiro alternativo nagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae), criadas com dieta à base de farinha de trigo integral (60%) e de milho (37%) e levedura de cerveja (3%). criação de. kuehniella foi realizada em caixas plásticas (30 x 25 x 10 cm), em cujo interior foram colocadas fitas de papelão corrugado (25 x 2 cm). dieta, previamente homogeneizada, foi distribuída sobre essas fitas e os ovos de. kuehniella colocados aleatoriamente sobre a dieta. Os adultos de. kuenhiella foram coletados, diariamente, com aspirador de pó adaptado e transferidos para tubos de PVC (150 mm de diâmetro por 25 cm de altura) com tiras de tela de náilon, dobradas em zig-zag no seu interior para oviposição. Os adultos das linhagens de T. pretiosum foram mantidos em recipientes de vidro (3 x 9 cm) e alimentados, com gotículas de mel depositadas na parede interna dos mesmos. Ovos do hospedeiro alternativo foram colados com goma arábica a 5%, em cartelas de cartolina azul celeste (2,5 x 8 cm), inviabilizados por exposição a lâmpada germicida por 50 minutos e então oferecidos aos parasitoides para sua manutenção. Os frascos foram fechados com filme plástico de PVC para que não ocorresse a fuga dos adultos. Criação e manutenção de nticarsia gemmatalis. criação stoque de. gemmatalis foi mantida em sala climatizada a uma temperatura de 25 ± 1 C. Ovos de. gemmatalis foram obtidos da criação para o processo de seleção das linhagens de T. pretiosum. Os ovos foram acondicionados em potes plásticos de ml com a tampa furada e vedada com tecido organza, para aumentar a aeração e alimentá-los com dieta artificial (Tabela 1). dultos foram criados em gaiolas de madeira (40 x 40 x 40 cm), com as laterais teladas e com tampa de vidro em salas climatizadas a 25 ± 2 C e fotofase de 12h. Esses adultos foram alimentados com dois chumaços de algodão contidos em duas placas de Petri (15 x 1,5 cm) embebidos em solução nutritiva (mel 10,5 g, água destilada 1,05 L, cerveja 350 ml, sacarose 60 g, nipagin 1,05 g, acido ascórbico 1,05 g) localizados no interior da gaiola (GREENE et al., 1976). s posturas foram coletadas em folhas de papel branco no interior das gaiolas, as quais foram recortadas e colocadas nos potes de criação com a dieta artificial. Tabela 1 - Composição da dieta artificial de nticarsia gemmatalis (GREENE et al., 1976) Componente Feijão Levedo de cerveja Gérmen de trigo Poteína de soja Caseína Nipagin Ácido sórbico Ácido ascórbico Formaldeído (40%) Solução Vitamínica (niacinamida, pantotenato de cálcio, tiamina, riboflavina, piridoxina, ácido fólico, biotina e vitamina 12 Ágar Quantidade 125 g 62,4 g 100 g 100 g 50 g 5 g 3 g 6 g 6 ml 10 ml 35 g Condução do experimento. s linhagens de T. pretiosum utilizadas no experimento estão descritas na Tabela 2. Foram individualizadas quinze fêmeas de cada uma das onze linhagens de T. pretiosum, com até 24 horas de idade, em tubos de vidro (8,5 x 2,5 cm) fechados com filme plástico de PVC e alimentadas com uma gotícula de mel puro na parede interna do tubo. Vinte ovos de. gemmatalis, com no máximo 48 horas de desenvolvimento embrionário foram colados em cartolina azul celeste (2,5 x 8 cm), com auxílio de um pincel umedecido e oferecidos por fêmea do parasitoide. O parasitismo foi permitido por 24 horas, logo após, as fêmeas foram retiradas dos tubos de vidro e as cartelas com os ovos acondicionadas em sacos plásticos (4 x 23 cm). pós a morte dos descendentes, avaliou-se o número de ovos parasitados; ovos com orifício; número de machos e fêmeas. Posteriormente, o número de ovos parasitados e a viabilidade foram expressos em porcentagem; o número total de parasitoides foi dividido pelo número de ovos com orifício, para se determinar o número de parasitoides por ovo e a razão sexual foi determinada através do número de fêmeas em relação ao total de indivíduos na população. O delineamento experimental para os parâmetros biológicos avaliados foi inteiramente casualizado, com 15 repetições. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo XV Encontro Latino mericano de Iniciação Científica e XI Encontro Latino mericano de Pós-Graduação Universidade do Vale do Paraíba 2

3 teste de Scott Knott (P 0,05) utilizando o programa SEG 5.0. Tabela 2 Linhagens de Trichogramma pretiosum utilizadas no experimento de seleção de linhagens, com seus respectivos locais de coleta Espécie Linhagem Local de Coleta T. pretiosum Tp 1 EF, legre ES T. pretiosum Tp 8 fonso Cláudio, ES T. pretiosum Tp 9 Cristalina, GO T. pretiosum Tp 10 Cristalina, GO T. pretiosum Tp 11 Cristalina, GO T. pretiosum Tp 12 Teófilo Otoni, MG T. pretiosum Tp 13 Paraopeba, MG T. pretiosum Tp 14 Pedra Preta, MT T. pretiosum Tp 15 Jaciara, MT T. pretiosum Tp 16 - T. pretiosum Tp 17 Rio Verde, GO Resultados Parasitismo. Houve diferença significativa entre as linhagens de T. pretiosum (Tabela 3). linhagem de T. pretiosum Tp 12 (Tp forma como se refere ao T. pretiosum no NUDEMFI) foi mais agressiva ao hospedeiro, com 53,5 % de parasitismo. s demais linhagens apresentaram diferenças entre si; entretanto, as linhagens que obtiveram menor porcentagem de parasitismo foram Tp17, Tp16 e Tp8 com 8,9; 8,7 e 5,3%, respectivamente. Viabilidade. penas as linhagens Tp 13 e Tp 17 apresentaram as menores taxas de viabilidade. s demais, apresentaram viabilidade variando de 96 a 100%, não diferindo entre si (Tabela 3). Tabela 3 - Parâmetros biológicos de Trichogramma pretiosum criados em ovos de nticarsia gemmatalis. Temp.: 25 ± 1,0 o C; UR: 70 ± 10% e fotofase :12h. T. pretiosum Linhagens Parasitismo (%) Viabilidad e (%) 1 49,1 ± 1,53 97,9 ± 1,42 8 5,3 ± 0,14 E 99,7 ± 0, ,9 ± 1, ± 0,00 D 10 21,5 ± 1,57 98,9 ± C 0, ,2 ± 1, ± 0, ,5 ± 2,12 96,0 ± 1, ,6 ± 2,15 92,1 ± C 3, ,7 ± 1,30 98,5 ± C 1, ,1 ± 1,14 99,9 ± C 0, ,7 ± 0,92 E 97,2 ± 1, ,9 ± 1,37 E 89,1 ± 3,66 Razão Sexual 0,96 ± 0,02 0,98 ± 0,01 0,00 0,00 0,90 ± 0,02 0,90 ± 0,02 0,00 0,00 0,00 0,98 ± 0,01 0,98 ± 0,01 Indivíduos por ovo 1,84 ± 0,11 1,22 ± 0,09 1,54 ± 0,12 1,74 ± 0,13 1,70 ± 0,05 1,40 ± 0,04 0,95 ± 0,06 C 2,04 ± 0,14 1,88 ± 0,18 0,87 ± 0,14 C 0,94 ± 0,08 C Médias seguidas de mesma letra não diferem entre si pelo teste de Scott-Knott (P 0,05). Razão Sexual. s linhagens Tp1, Tp14, Tp13, Tp15, Tp10, Tp9, Tp17, Tp16 e Tp8 apresentaram razão sexual de 0,96 a 1,0, sem diferenças significativas entre si. s linhagens Tp12 e Tp11 apresentaram os menores valores com 0,90 para cada. Indivíduos por ovo. Houve diferença significativa para o número de indivíduos por ovo, sendo que as linhagens 14, 15, 1, 10, 11 e 9 não diferiram entre si, apresentando os maiores valores, que variaram de 1,54 a 2,04. s linhagens 13, 17 e 16, não diferiram significativamente entre si e apresentaram os menores valores, que variaram de 0,87 a 0,95 Discussão Parasitismo. O percentual de parasitismo pode ser o parâmetro de maior importância, visto que esse percentual é que efetivamente determina a eficiência do controle biológico no campo (UENO, 2008). Diferenças no potencial de parasitismo entre espécies e/ou linhagens têm sido relatadas (PRTISSOLI et al., 2008) e podem estar relacionadas com a espécie ou linhagem do parasitoide e, principalmente, ao hospedeiro utilizado (PRTISSOLI et al., 2004b). Vianna (2009), nas mesmas condições experimentais, verificou que T. pretiosum parasitou 60% dos ovos de. gemmatalis, o que reforça seu potencial no controle dessa praga. Para a seleção de XV Encontro Latino mericano de Iniciação Científica e XI Encontro Latino mericano de Pós-Graduação Universidade do Vale do Paraíba 3

4 linhagens de T. pretiosum em ovos de Spodoptera frugiperda Smith (Lepidoptera: Noctuidae), o percentual de parasitismo variou de 27,50 a 89,33, permitindo discriminar as melhores linhagens (ESERR; DIS; PRR, 2003). percentagem de parasitismo de T. pretiosum foi de 53%, quando ovos de Trichoplusia ni Hübner (Lepidoptera: Noctuidae) foram parasitados (MILNEZ, 2009). Viabilidade. Todos os resultados são satisfatórios, pois taxas superiores a 85% de viabilidade são consideradas ideais para produção massal de espécies de Trichogramma (NVRRO, 1999). Dados semelhantes foram obtidos para H. zea, quando seus ovos foram parasitados por T. pretiosum com 91,6% de viabilidade (PRTISSOLI & OLIVEIR, 1999). Gonçalves et al., (2003) avaliaram a qualidade de T. pretiosum criadas em ovos de Sitotroga cerealella Oliver (Lepidoptera: Gelechiidae) e observaram níveis superiores a 89% de viabilidade. ueno (2008) encontrou valores de viabilidade de 81,73 a 100%, quando testou diferentes linhagens de T. pretiosum em ovos de Pseudoplusia includens Walker (Lepidoptera: Noctuidae). Razão Sexual. razão sexual ideal deve ser superior a 0,5, para criação massal de espécies de Trichogramma que representa a emergência de, pelo menos, um indivíduo fêmea por macho emergido (NV et al., 2007; DIS et al., 2008). Em programas de controle biológico, quanto maior o número de fêmeas maior o potencial de controle (WKEIL et al., 2008). Com relação ao parasitismo natural em ovos de. gemmatalis por T. pretiosum, experimentos em campo mostraram uma razão sexual de 0,69 (MRION, FOERSTER, CÑETE, 2005). Indivíduos por ovo.. Estudos mostram que é desejável a emergência de menor número de parasitoides por ovo, pois maior quantidade de nutrientes estará disponível para o seu desenvolvimento, gerando indivíduos mais fortes e competitivos. O aumento no número de adultos por ovo pode reduzir a eficiência de controle, com uma menor quantidade de ovos parasitados por fêmea do parasitoide que, ao invés de usar sua capacidade de parasitismo em diferentes ovos do hospedeiro, acaba por parasitar repetitivamente o mesmo ovo (ESERR 2003). O desenvolvimento de um grande número de Trichogramma em um único ovo do hospedeiro resulta em indivíduos de menor tamanho e de baixa qualidade, devido à competição intraespecífica (SUZUKI et al., 1984). Vianna (2009) encontrou de 1,53 a 2,29 adultos de diferentes linhagens de T. pretiosum emergidos de ovos de. gemmatalis. Milanez (2009) encontrou de 1,5 a 2,4 adultos de T. pretiosum emergidos de ovos de T. ni. Valores inferiores foram encontrados para emergência de adultos de T. pretiosum de ovos de P. includens (UENO, 2008). fecundidade de Trichogramma pode está ligada ao seu tamanho, e este irá depender do número de parasitoides por ovo e do tamanho do hospedeiro (VINSON 1997). Elevadas taxas de parasitismo observadas em trabalho realizado por Marion et al. (2005) mostraram que T. pretiosum pode ter um impacto significante no controle biológico de. gemmatalis, considerada uma das espécies mais promissoras em programas de criação massal para o controle biológico dessa praga. linhagem Tp12 apresentou melhor desempenho em ovos de. gemmatalis; porém, as outras linhagens que também se demonstraram satisfatórias em certos parâmetros analisados não podem ser desprezadas. Este trabalho mostra a importância em se avaliar linhagens de espécies de Trichogramma devido às variações que estas apresentam entre si. Conclusão linhagem Tp12 foi a mais promissora para o controle de. gemmatalis. Referências - ESERR E.., DIS C.T.S., PRR J.R.P. Características biológicas de linhagens de Trichogramma pretiosum desenvolvidas em ovos de Spodoptera frugiperda. cta Scientiarum gronomy 25: UENO, R.C.O. de F. ases biológicas para utilização de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) para controle de Pseudoplusia includens (Walker, 1857) e nticarsia gemmatalis Hübner, 1818 (Lepidoptera: Noctuidae) em soja Tese (Doutorado em Entomologia) - Escola Superior de gricultura Luiz de Queiroz, Universidade de São Paulo, Piracicaba, DIS, N.S.; PRR, J.R.P.; LIM, T.C.C. Seleção de hospedeiro alternativo para três espécies de tricogramatídeos neotropicais. Pesquisa gropecuária rasileira. v.43, p , GONÇLVES, J.R.,.M. HOLTZ, D. PRTISSOLI & R.N.C. GUEDES. valiação da qualidade de Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae) em ovos de Sitotroga cerealella (Lepidoptera: Gelechiidae). cta Scientiarum gronomy. 25: XV Encontro Latino mericano de Iniciação Científica e XI Encontro Latino mericano de Pós-Graduação Universidade do Vale do Paraíba 4

5 - GREENE, G.L.; LEPPL, N.C.; DICKERSON, W.. Velvetbean caterpillar: a rearing procedure and artificial medium. Journal of Economic Entomology, v.69, p , HJI, F.N.D.; JIMENEZ VELSQUEZ, J.; LEICHER, E.; LENCR, J..; HJI,.T.; DINIZ, R.S. Tecnologia de produção massal de Trichogramma spp. Petrolina: EMRP CPTS, 24 p HSSN, S.. Seleção de espécies de Trichogramma para o uso em programas de controle biológico. In: PRR, J.R.P.; ZUCCHI, R.. eds. Trichogramma e o Controle iológico plicado. Piracicaba: FELQ, p HOFFMNN-CMPO, C..; MOSCRDI, F.; CORRÊ-FERREIR,.S.; OLIVEIR, L.J.; SOS-GOMEZ, D.R.; PNIZZI,.R.; CORSO, I.C.; GZZONI, D.L.; OLIVEIR, E.. Pragas da soja no rasil e seu manejo integrado. Londrina: Embrapa Soja. 70p. (Circular Técnica/EMRP Soja, n. 30) MRION, R.F..; FOERSTER, L..; CÑETE, C.L. Natural parasitism in eggs of nticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera, Noctuidae) by Trichogramma spp. (Hymenoptera, Trichogrammatidae) in razil. Revista rasileira de Entomologia 49(1): , MILNEZ,.M. Caracterização de parâmetros biológicos e seleção de espécies e /ou linhagens de Trichogramma WEST. (Hymenoptera: Trichogrammatidae) visando o Manejo Fitossanitário de Trichoplusia ni (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) Dissertação (Mestrado em Entomologia grícola) Programa de Pós-Graduação em Entomologia grícola, Universidade Federal Rural de Pernambuco, MOSCRDI, F.; SOS-GÓMEZ, D.R.; CORRÊ- FERREIR,.S. Soybean IPM in razil, with emphasis on biological control tactics. In: World soybean research conference VI. Chicago, Illinois, US NV, D.E.; TKHSHI, K.M.; PRR, J.R.P. Linhagens de Trichogramma e Trichogrammatoidea para o controle de Stenoma catenifer. Pesquisa gropecuária rasileira, v.42, p.9-16, NVRRO R. & MRCNO, R. Preferência de Trichogramma pretiosum Riley y T. atopovirilia Oatman y Platner por huevos de Helicoverpa zea (oddie) de diferentes edades. ol. Entomol. Venez. 14: PRR, J.R.P.; ZUCCHI, R..; SILVEIR NETO, S. iological control of pests through egg parasitoids of the genera Trichogramma and/or Trichogrammatoidea. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, v. 82, p , PRTISSOLI, D.; OLIVEIR, H. N. Influência da idade do ovos de Helicoverpa zea (oddie) no parasitismo de Trichogramma pretiosum Riley. Pesquisa gropecuária rasileira, rasília, v. 34, n. 5, p , PRTISSOLI, D.; OLIVEIR, H.N.; GONÇLVES, J.R.; ZNUNCIO, J.C.; HOLTZ,.M. Changes in biological characteristics of Trichogramma pretiosum (Hym.: Trichogrammatidae) reared on eggs of nagasta kuehniella (Lep.: Pyralidae) for 23 generations. iocontrol Science and Technology, v.14, p , 2004b. - PRTISSOLI, D.; POLNCZYK, R..; HOLTZ,.M.; DLVI, L.P.; SILV,.F.; SILV, L.N. Selection of Trichogramma species for controlling the diamondback moth. Horticultura rasileira, v.26, p , ROCH, M. M. de; VELLO, N..; MI, M.C.C.; LOPES,.C.. de. Revista rasileira de Oleaginosas e Fibrosas, Campina Grande, v.6, n.3, p , SUZUKI, Y.; H. TSUJI & M. SSKW Sex allocation and effects of superparasitism on secondary sex ratios in the gregarious parasitoid, Trichogramma chilonis (Hymenoptera: Trichogrammatidae). nimal ehaviour. 32: VINN, U.R. Interação de técnicas para o manejo fitossanitário de nticarsia gemmatalis (LEPIDOPTER: NOCTUIDE) Tese (Doutorado em Entomologia) Programa de Pósgraduação em Entomologia, Universidade Federal de Viçosa Viçosa VINSON, S.. Comportamento de seleção hospedeira de parasitoides de ovos, com ênfase na família Trichogrammatidae. In PRR, J.R.P.; ZUCCHI, R.. Trichogramma e o controle biológico aplicado. Piracicaba: FELQ, cap. 4, p XV Encontro Latino mericano de Iniciação Científica e XI Encontro Latino mericano de Pós-Graduação Universidade do Vale do Paraíba 5

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