1 PERFIL DE SENSIBILIDADE ANTIMICROBIANA E PRODUÇÃO DE BETALACTAMASES EM CEPAS DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS ISOLADAS DE MASTITE BOVINA SILVIA SOUSA AQUINO¹, LAYZE CILMARA ALVES DA SILVA¹, RODRIGO ANTÔNIO TORRES MATOS¹, JULIE HEIDE NUNES PAZ ¹, DANIELLE ALUSKA DO NASCIMENTO PESSOA, FELICIO GARINO JUNIOR¹ 1-Laboratório de Microbiologia, Universidade Federal de Campina Grande, Centro de Saúde e Tecnologia Rural, Patos/Paraíba. RESUMO O objetivo deste trabalho foi avaliar a susceptibilidade antimicrobiana in vitro de 46 cepas de Staphylococus aureus isolados a partir de 100 amostras de mastite bovina, verificando sua produção de betalactamases. Os maiores índices de sensibilidade aos antimicrobianos foram observados para cefalotina (100,00%) e ceftiofur (100,00%). As bactérias apresentaram altos índices de resistência à penicilina (78,30%). Do total das amostras isoladas, 27 (67,50%) produziram betalactamases. Conclui-se que há um alto índice percentual nos mecanismos de resistência apresentados por S. aureus utilizados no presente estudo, podendo acarretar diminuição da efetividade dos tratamentos das infecções ocasionadas por este agente. Desse modo, o monitoramento desta bactéria através da aplicação de antibiograma e de testes fenotípicos para verificar o grau de resistência desse agente em afecções que acometem animais é de extrema importância. Palavras-chave: antimicrobianos; bactéria; resistência 1369
2 PROFILE OF SENSITIVITY AND ANTIMICROBIAL BETALACTAMASES PRODUCTION IN STAPHYLOCOCCUS AUREUS STRAINS ISOLATED FROM BOVINE MASTITIS ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the in vitro antimicrobial susceptibility of Staphylococcus aureus strains 46 isolated from 100 samples of bovine mastitis by checking its production of beta-lactamase. The greatest sensitivity to antimicrobial rates were observed for cephalothin (100,00%) and ceftiofur (100,00%). The bacteria showed high penicillin resistance rates (78,30%). Of total isolates, 27 (67,50%) produced beta-lactamase. We conclude that there is a high percentage rate in the resistance mechanisms presented by S. aureus used in this study and may result in decreased effectiveness of treatment of infections caused by this agent. Thus, the monitoring of these bacteria by applying antibiotic susceptibility and phenotypic tests to check the degree of resistance of this agent in diseases that affect animals is of utmost importance. Key-word: antimicrobial; bacteria; resistance INTRODUÇÃO A mastite bovina é a inflamação da glândula mamária que frequentemente acomete animais de aptidões leiteiras, podendo ocasionar uma série de prejuízos econômicos, além de comprometer as características físicas e organolépticas do leite (Radostitis, 2002). Bactérias do gênero Staphylococcus apresentam uma distribuição mundial, colonizando a pele de animais e seres humanos. Nos processos inflamatórios da glândula mamária o Staphylococcus aureus é o principal agente causador desta infecção (Quinn et al., 2005). 1370
3 Staphylococcus ssp. são os principais patógenos a desenvolver mecanismos de resistência antimicrobiana, como a produção de betalactamases, enzimas capazes de inativar esses fármacos (Leonard e Markey, 2008). Na avaliação da susceptibilidade in vitro dos agentes etiológicos da mastite bovina frente a antimicrobianos tem-se observado um aumento no número de cepas mais resistentes, dificultando seu controle. Desta forma, objetivou-se com este estudo traçar o perfil de sensibilidade antimicrobiana de S. aureus frente a antimicrobianos, observando seus índices de produção de betalactamases. MATERIAL E METÓDOS Foram utilizadas 46 cepas de S. aureus isoladas a partir de 100 amostras de mastite bovina, pertencentes à coleção de microrganismos do Laboratório de Microbiologia da Universidade Federal de Campina Grande - Campus de Patos/PB. S. aureus foram submetidos ao teste de produção de betalactamases, usando o método da cefalosporina cromogênica em disco (Cefinase - BD- Becton, Dickinson and Company, Maryland USA). Para a avaliação da susceptibilidade in vitro, foi realizado o teste de disco difusão pelo método de Kirby-Bauer, em Ágar Müller Hinton, utilizandose 10 diferentes antimicrobianos: Amicacina, cefalotina, cefalexina, ceftiofur, gentamicina, neomicina, norfloxacina, oxacilina, penicilina e tetraciclina. RESULTADOS Os maiores índices de sensibilidade apresentados por S. aureus frente aos antimicrobianos foram observados para cefalotina (100,00%) e ceftioufur (100,00%), seguidos de cefalexina (97,80%), gentamicina (89,10%), tetraciclina (86,90%), neomicina (80,50%), norfloxacina 1371
4 (80,50%) e amicacina (71,70%). As bactérias demonstraram altos índices de resistência à penicilina (78,30%). Das 46 amostras, 27 (67,50%) foram positivas para produção de betalactamases. DISCUSSÃO O elevado índice de sensibilidade demonstrado às cefalosporinas, no presente estudo, é semelhante ao observado por Costa et al., (2013). O alto grau de resistência apresentado por S. aureus a penicilina, corrobora com os resultados expostos por Moron et al., (2006), que semelhante ao presente estudo, utilizou amostras de S. aureus provenientes de mastite verificando uma resistência de 69,10% das amostras a penicilina. Os dados de produção de betalactamases observados neste estudo alertam para a importância do monitoramento da resistência de S. aureus a diversos antimicrobianos, uma vez que mais da metade dos isolados apresentaram capacidade de produção de enzimas capazes de torna-los resistentes a esses fármacos, isso ocorre possivelmente devido ao uso indiscriminado de antibióticos no tratamento da mastite bovina. CONCLUSÃO Conclui-se que S. aureus utilizados no presente estudo apresentaram altos índices de sensibilidade às cefalosporinas com resistência a ampicilina, demonstrando elevada produção de betalactamases, o que pode influenciar no sucesso terapêutico das infecções ocasionadas por este agente. Com isso se faz necessário o monitoramento desta bactéria através da análise do perfil de sensibilidade antimicrobiana e da execução de testes fenotípicos, para que os resultados possam auxiliar 1372
5 na escolha adequada dos antibióticos, evitando assim a formação de bactérias multirresistentes. REFERÊNCIAS COSTA, G.M. et al. Resistência a antimicrobianos em Staphylococcus aureus isolados de mastite em bovinos leiteiros de Minas Gerais, Brasil. Arq. Inst. Biol. [online]. 2013, vol.80, n.3, pp. 297-302. ISSN 1808-1657. LEONARD, F.C., MARKEY, B.K. Meticillin-resistant (Staphylococcus aureus) in animals: A review. The Veterinary Journal, v.175, p.27-36, 2008. MORONI, P.; PISONI, G.; ANTONINI, M.; VILLA, R.; BOETTCHER, P. and CARLI, S. Short Communication: Susceptibility to antimicrobial drugs of Staphylococcus aureus derived from bovine subclinical mastitis in Italy. J. Dairy Sci. v. 89, p.2973 2976, American Dairy Science Association, 2006. RADOSTITIS O.M., GAY C.C., BLOOD D.C. & HINCHCLIFF K.W. Clínica Veterinária Um tratado de doenças dos bovinos, ovinos, suínos, caprinos e eqüinos. 9 ed. Guanabara: Rio de Janeiro, 2002. 1373