EVENTOS CO e PÓS TRADUCIONAIS
EVENTOS CO e PÓS TRADUCIONAIS Enovelamento natural e assistido (Chaperonas e HSPs) Ubiquitinação e degradação via proteassomo de proteínas não enoveladas Endereçamento (peptídeo sinal e glicosilação) Digestão de pró-proteínas Hidroxilação Fosforilação
O Paradoxo de Levinthal (1968) Uma proteína não pode experimentar todas as possíveis conformações entre o estado desenovelado e o estado nativo. Imagine uma proteína com 150 aa que experimentam apenas as 3 conformações previstas no plote de Ramachandran. Cada conformação se interconverteria na outra em picoseg (10-12 s). Essa proteína, então, possuiria 3 150 possíveis conformações (= 10 68 ). Para experimentar todas essas conformações seriam necessários 10 68 x 10-12 seg = 10 56 seg = 10 48 anos!!! O enovelamento demora de 0.1 a 1000 seg in vivo e in vitro. O enovelamento é, portanto, dirigido passando por rotas cinéticas e intermediários bem definidos escapando de conformações irrelevantes.
Gráfico de Ramachandran
Os três mecanismos clássicos de enovelamento A. Fersht and V. Daggett, 2002, Cell
Enovelamento co-traducional
Opções de Enovelamento
Chaperoninas (HSP60): Caixa de Enovelamento
HSP70 ligação à áreas hidrofóbicas
Caminhos de Enovelamento
Degradação de Proteínas não Enoveladas Ubiquitinação Created by Roger B. Dodd
Degradação de Proteínas não Enolveladas Proteassomo
Via secretora Endereçamento e Peptídeo Sinal (eucariotos) CIT RE H 2 N-Met-Met-Ser-Phe-Val-Ser-Leu-Leu-Leu-Val-Gly-Ile-Leu-Phe-Trp- Ala-Thr-Glu-Ala-Glu-Gln-Leu-Thr-Lys-Cys-Glu-Val-Phe-Gln-Protein Golgi RE Protein -Lys-Asp-Glu-Leu-COOH Via Celular CIT Nucleo CIT MIT H 2 N-(...)-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-Protein H 2 N-Met-Leu-Ser-Leu-Arg-Gln-Ser-Ile-Arg-Phe-Phe-Lys-Pro-Ala-Thr- Arg-Thr-Leu-Cys-Ser-Ser-Arg-Tyr-Leu-Leu-Protein CIT Perox CIT Perox Protein -Ser-Lys-Leu-COOH H 2 N-(...)-Arg-Leu-X 5 -His-Leu-Protein
Endereçamento de Proteínas (eucariotos) Via secretória Retículo endoplasmático Endereçamento de proteínas sintetizadas em ribossomos aderidos ao retículo endoplasmático As proteínas da via secretória possuem uma sequência sinal (peptídeo sinal) que direciona os ribossomos que as estão sintetizando para a membrana do retículo endoplasmático
Endereçamento de Proteínas Via secretória > Retículo endoplasmático
Endereçamento de Proteínas Via secretória : Proteínas de Membrana Proteína unipasso
Endereçamento de Proteínas Via secretória : Proteínas de Membrana Proteína multipasso
Endereçamento de Proteínas (eucariotos) Via secretória : 1ª destino : Proteínas do RE Toda as proteínas residentes no reticulo endoplasmático possuem na região C-terminal uma sequência sinal extra denominada KDEL (LYS-ASP-GLU-LEU).
Endereçamento de Proteínas (eucariotos) Via secretória : outros destinos No Complexo de Golgi, as proteínas podem ser: - reencaminhadas para o retículo endoplasmático (sinal extra KDEL) - retidas no Complexo de Golgi (sinal extra desconhecido) - enviadas para os lisossomos (Sinal extra = manose-6-fosfato) - encaminhadas para vesículas de secreção (sinal extra desconhecido) - encaminhadas para membrana plasmática ou meio extracelular (SEM SINAL extra)
Endereçamento de Proteínas (eucariotos) Via secretória : Glicosilação no RE - Após Golgi => Enviadas para os lisossomos (Sinal extra = manose-6-fosfato)
Endereçamento de Proteínas (eucariotos) Via celular Citosol e organelas Proteína citosólica madura Mitocôndria Ribossomos livres no citoplasma Proteínas citosólicas não possuem nenhum tipo de sinal de endereçamento Cloroplasto Núcleo Peroxissomo
Endereçamento de Proteínas em Eucariotos 2) Ribossomos livres Proteína citosólica madura Mitocôndria 1) Ribossomos aderidos ao RE Retículo endoplasmático Cloroplasto Complexo de Golgi Superfície celular (secretada) Lisossomos VIA SECRETORA Membrana citoplasmático Núcleo Peroxissomo
Endereçamento de Proteínas em Procariotos - Citoplasma: sem sinal - Membrana plasmática ou espaço intermembranar: com sinal Poteínas da membrana e espaço intermembranar são sintetizadas em ribossomos aderidos à membrana
Ativação Proteolítica de Proteínas Digestão da Insulina
Hidroxilação de Proteínas Exemplo do Colágeno
Fosforilação de Proteínas Enzimas responsáveis pela adição de um grupamento fosfato em radicais Ser, Thr e Tyr de proteínas. ATP Proteína Kinases Fosfatases Proteína PO 4-3 PO 4-3
Fosforilação de Proteínas Exemplo das Lipases