Fertilização artificial de ovócitos e qualidade das larvas de Jundiá Cinza (Rhamdia quelen) (Quoy & Gaimardm, 1824) provenientes de reprodutores alimentados com diferentes níveis de energia digestível dietética Eduardo Antônio Sanches 1, Ronan Maciel Marcos², Diego Mendes Baggio², Donovan Filipe Henrique Pinto², Renata Marino Sycora², Robie Allan Bombardelli³, Eléxio Vidal 4 1 Acadêmico do Curso de Engenharia de Pesca da Universidade Estadual do Oeste do Paraná UNIOESTE Campus de Toledo, Rua da Faculdade, 2550, Cep 85903-000, C. P. l 520, Toledo-Pr, emaileduanches@hotmail.com ² Acadêmicos do Curso de Engenharia de Pesca da Universidade Estadual do Oeste do Paraná UNIOESTE Campus de Toledo, Rua da Faculdade, 2550, Cep 85903-000, C. P. l 520, Toledo-Pr ³ Professor do Curso de Engenharia de Pesca da Universidade Estadual do Oeste do Paraná UNIOESTE Campus de Toledo, Rua da Faculdade, 2550, Cep 85903-000, C. P. l 520, Toledo-Pr 4 Chefe do Centro de Pesquisa em Aqüicultura Ambiental CPAA/IAP, Linha Mandarina Estrada da Usina Resumo: O trabalho teve o objetivo avaliar os efeitos de diferentes níveis de energia digestível fornecida aos reprodutores de Jundiá Cinza (Rhamdia quelen) sobre a fertilização artificial de ovócitos e na qualidade das larvas. Foram utilizados 90 reprodutores de Jundiá. No período de reprodução os peixes foram induzidos hormonalmente à reprodução conforme metodologia comercial, sendo os ovos fertilizados distribuídos em 15 incubadoras experimentais confeccionadas em PVC, com formato cônico e de volume útil de 2,5L. Os ovos fertilizados foram distribuídos em um delineamento experimental casualizado, composto por cinco tratamentos e três repetições. Foi considerado como uma unidade experimental uma incubadora de volume útil de 2,5L, contendo os 2,0mL de ovos fertilizados. Os tratamentos foram constituídos pela alimentação dos reprodutores com dietas contendo 32% de PB e 2700; 2950; 3200; 3450 e 3700 kcal ED.kg ração -1. As variáveis estudas foram a taxa de fertilização dos ovócitos (FERT), a hora-grau de eclosão das larvas (HGECL) e o tempo de sobrevivência ao jejum das larvas(tsj). Os dados foram submetidos a análise de variância (P=0,07) e à análise de regressão. Observou-se que as variáveis FERT e TSJ não mostraram diferença entre os tratamentos (P>0,07). Apenas HGECL mostrou diferença (P<0,07), obtendo efeito quadrático negativo, com melhor resultado com 3170kcal ED.kg ração -1. Conclui-se que a dieta contendo 32% PB e 3170kcal ED.kg ração -1 apresentou melhores resultados para HGECL. PALAVRA-CHAVE: Reprodução, Nutrição Artificial Fertilização of ovócitos and quality of the larvae of Gray Jundiá Rhamdia quelen (Quoy & Gaimardm, 1824) of reproducers fed with different levels of digestible energy in the diet. ABSTRACT: The work had been objective to evaluate the effect of different levels of digestible energy to Gray Jundiá (Rhamdia quelen) broodfish on the artificial fertilization and larval quality. Had been used 90 Jundiá broodfish. In the reproduction period the fishes had been hormonally induced with the reproduction commercial methodology. The fertilized eggs, were distributed in 15 PVC experimental incubator with conical shape and format and 2.5L. The fertilized eggs had been distributed in an randomly experimental design, composed for five treatments and three replitions. It was considered as an experimental unit a incubator with 2,5L and 2,0mL of fertilized eggs. The treatments had been constituted by the broodfish feeding with diets contend 32% PB and 2700;
2950; 3200; 3450 and 3700 kcal ED.kg ration -1. The studied variable were the eggs fertilization ratio (EFR), the hatching timing (HT) and timing survival of larvae without eat (TSWE). The data had been submitted to variance analysis (P=0,05) and regression analysis. It was observed that EFR and TSWE had not shown difference (P 0,07) between treatment. Only HT showed difference (P<0,07), with negative quadratic effect and better result to 3170kcal.ED.kg ração -1. One conclude that diet with 32%PB and 3170kcal.ED.kg ração -1 presented better result to HT. KEYWORDS: Reproduction, Nutrition, INTRODUÇÃO O Jundiá Cinza (Rhamdia quelen) é uma espécie de peixe que apresenta grande importância econômica na região sul do Brasil, pois é uma espécie nativa aparentemente bem adaptada à diferentes ambientes, amplamente utilizada nos viveiros de piscicultura, e de boa aceitação no mercado consumidor (Marchioro & Baldisserotto, 1999). Além das características de bom desempenho produtivo, outro fator que favoreceu o destaque desta espécie na piscicultura sul brasileira foi o domínio do processo reprodutivo destes animais em cativeiro. Segundo Ferreira et al. (2001) estes animais podem iniciar a maturação gonadal em temperaturas a partir de 17 C, e as desovas apresentam dois picos ao longo do ano, sendo estes na primavera e no verão. Apesar disso, o desenvolvimento na área de nutrição dos reprodutores é pouco conhecida e, apresenta grande importância na atividade produtiva. Isso porque os aspectos nutricionais influenciam diretamente no crescimento gonadal (puberdade e maturação) (Watanabe, 1985) e, na qualidade dos espermatozóides e ovócitos, dos embriões e das larvas (Izquierdo et al. 2001), devido às reservas serem mobilizadas e transportadas para os ovos, onde servirão como fontes de reserva para as larvas, durante os períodos de desenvolvimento iniciais (Mazorra et al. 2003). O presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos de diferentes níveis de energia digestível dietética dos reprodutores sobre a fertilização artificial de ovócitos e na qualidade das larvas de Jundiá Cinza (Rhamdia quelen). MATERIAL e MÉTODOS O experimento foi realizado no Centro de Pesquisa em Aqüicultura Ambiental CPAA. O período experimental teve duração de 300 dias. Foram utilizados 135 reprodutores de Jundiá Cinza (Rhamdia quelen), provenientes de estações comerciais de cultivo, com peso inicial médio de 44g, os quais foram estocados em 15 tanques escavados de área útil de 16m 2. Os animais foram distribuídos em um delineamento experimental inteiramente casualizado, composto por cinco tratamentos e três repetições, totalizando 15 unidades experimentais. Foi considerado como uma unidade experimental, um tanque escavado revestido em alvenaria e com área útil de 16m 2, contendo nove animais, dos quais seis eram fêmeas e três eram machos. Os animais foram induzidos hormonalmente através de uma dose única de extrato de hipófise de carpa e após um período de 240 horas grau ou unidades térmicas acumuladas, as fêmeas e os machos foram extruzados individualmente, a partir de massagem abdominal no sentido encéfalo caudal. As variáveis estudas foram a taxa de fertilização dos ovócitos (FERT), a hora-grau de eclosão das larvas (HGECL) e o tempo de sobrevivência das larvas ao jejum (TSJ). Para os ensaios de fertilização foram utilizados 30mL de ovócitos não hidratados, os quais foram distribuídos em um delineamento experimental inteiramente casualizado, composto por cinco tratamentos e três repetições. Foi considerado como uma unidade experimental uma incubadora de volume útil de 2,5L, contendo os 2,0 ml de ovos fertilizados, provenientes de um único pool de ovócitos gerado do material liberado de todas as fêmeas de uma mesma unidade experimental. Os tratamentos foram constituídos pela alimentação dos reprodutores com dietas contendo 32% de PB e 2700; 2950; 3200; 3450 e 3700 kcal ED.kg -1 de ração. A taxa de fertilização foi mensurada oito horas após o início da hidratação dos ovos, através da avaliação dos ovos em microscópio estereoscópio. A avaliação das horas grau de eclosão das larvas foi realizado a partir
da mensuração da temperatura da água de incubação entre intervalos de uma hora. O teste de sobrevivência das larvas ao jejum foi realizado a partir de 30 larvas de cada unidade experimental, onde estas foram estocadas em recipientes plásticos de volume útil de 300mL. Neste caso, as larvas foram distribuídas em um delineamento experimental inteiramente casualizado, composto por cinco tratamentos e três repetições. Foi considerado como uma unidade experimental um recipiente plástico de volume útil de 300mL de água contendo 30 larvas de jundiá apresentando em torno de dois dias de idade. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de variância e em caso de evidência de efeito entre os tratamentos, foi aplicada a análise de regressão. O software utilizado para a realização das análises estatísticas foi o SAEG) (Sistema de Análises Estatísticas e Genéticas) (UFV, 1997). RESULTADOS e DISCUSSÕES Os resultados médios das taxas de fertilização dos ovócitos, horas-grau de eclosão e tempo de sobrevivência ao jejum das larvas estão expressos na Tabela 1. Os dados de horas-grau de eclosão dos ovos apresentaram efeito entre os tratamentos (P<0,07), apresentando uma relação quadrática negativa (Figura 1), entre HGECL e os níveis crescentes de energia digestível na dieta de reprodutores de Jundiá Cinza (Rhamdia quelen). Esta relação apresentou o ponto de menor tempo teórico de eclosão ao nível de 3170 kcal de ED.kg de ração, com 501 horas grau de eclosão. Considerando o fato de que os resultados de TSJ não apresentaram efeito (P>0,07) entre os tratamentos, pode-se sugerir que a dieta apresentando 32% PB e 3170 kcal de ED.kg ração -1 proporcionou o melhor desenvolvimento embrionário para esta espécie de peixe. As variáveis de taxa de fertilização e tempo de sobrevivência ao jejum (Tabela 1) não mostraram efeito entre os tratamentos (P>0,05). Apesar da inconsistência no efeito dos tratamentos sobre as variáveis estudadas, novos estudos devem ser realizados para que se possam ser maximizados os conhecimentos na área da nutrição de reprodutores de peixes de água doce. CONCLUSÃO Reprodutores de Jundiá Cinza (Rhamdia quelen) alimentados com diferentes níveis de energia digestível sofreram efeito (P<0,07) dos tratamentos apenas para o tempo de eclosão dos ovos, com melhor resultado ao nível de 3170 kcal de ED.kg de ração -1, apresentado 501 horas grau para eclosão. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS FERREIRA, A. A.; NUÑER, A. P. de O.; LUZ, R. K. et al.,. Avaliação qualitativa e quantitativa do sêmen de jundiá, Rhamdia quelen. Boletim do Instituto de Pesca, São Paulo, v. 27, n. 1, p. 57-60, 2001. IZQUIERO, M. S.; FERNÁNDEZ-PALACIOS, H.; TACON, A. G. J. Effect of broodstock nutrition on reproductive performance of fish. Aquaculture, Amsterdam, v. 197, p. 25-42, 2001. MARCHIORO, M. I.; BALDISSEROTTO, B. Sobrevivência de alevinos de jundiá (Rhamdia quelen Quoy & Gaimard, 1824) à variação de salinidade da água. Ciência Rural, Santa Maria, v. 29, n.2, p. 315-318, 1999. MAZORRA, C.; BRUCE, M.; BELL, J. G.et al. Dietary lipid enhancement of broodstock reproductive performance and egg and larval quality in Atlantic halibut (Hippoglossus hipoglossus). Aquaculture, Amsterdam, v. 227, p.21 33, 2003. UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA UFV. SAEG Sistema para análises estatísticas e genéticas. Versão, 7,1. Viçosa: UFV, 1997. 150p. (Manual do usuário).
WATANABE, T. Importance of the study of broodstock nutrition for further development of aquaculture. In: COWEY, C. B.; MACKIE, A. M.; BELL, J. G. editors. Nutritional and feeding in fish. London: ACADEMIC PRESS, p. 395-414. 1985. Tabela 1: Resultados de taxa de fertilização dos ovócito, horas-grau eclosão dos ovos e tempo de sobrevivência das larvas ao jejum, provenientes de reprodutores submetidos à diferentes níveis dietéticos de energia digestível. Tratamentos (kcal de ED.kg de ração -1 ) Variáveis 2700 2950 3200 3450 3700 C.V.(%) FERT (%) 85,15 88,39 72,24 73,17 84,61 21,93 ns HGECL a 545,00 517,39 499,04 527,47 522,83 9,16 * TSJ (dias) 6,99 7,43 7,22 7,34 7,10 5,80 ns ns Dados não significativos; *Dados com diferença à um nível de significância de 0,07; a R²=0,2625 Y=3,1935*10³-1,69854*x+3,0*10-4 x²
640 y = 0,0003x 2-1,6985x + 3193,5 R 2 = 0,2625 HGECL 540 440 2700 2950 3200 3450 3700 Tratamentos (kcal ED.kg de ração -1 ) Figura 1. Relação entre horas grau de eclosão dos ovos e os níveis dietéticos de energia digestível fornecida aos reprodutores de Jundiá Cinza (Rhamdia quelen).