Ciências Moleculares e Celulares

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1 Ciências Moleculares e Celulares RECOMENTAÇÕES SOBRE AS AULAS PRÁTICAS Para melhor aproveitamento das aulas práticas, as seguintes normas serão adotadas: 1. Comparecer pontualmente, munido do jaleco e do manual de laboratório; 2. Ler cuidadosamente o roteiro, antes da execução da aula prática; 3. Dividir os trabalhos eqüitativamente com os companheiros do grupo; 4. Realizar os trabalhos com calma e organização, mantendo silêncio no laboratório; 5. Tomar notas das observações e resultados, levando em consideração todos os pormenores relevantes ao estudo posterior; 6. Discutir com o professor ou com o monitor, todos os pontos em dúvida; 7. Usar apenas o material estritamente necessário, evitando desperdícios e danos; 8. Antes de retirar-se, limpar o balcão de trabalho, colocando o lixo sólido e líquido nos locais designados; 9. Ao final de cada aula, colocar as vidrarias e os aparelhos em locais previamente designados; 10. As práticas serão consideradas como terminadas, desde que seus resultados tenham sido aprovados pelo professor; 11. As notas referentes às aulas práticas somente podem ser obtidas perante a apresentação do relatório e comprovada sua presença no dia da aula prática, com exceção de justificativa de falta aprovada pelo colegiado do curso, não dispensando nesse caso, a apresentação do relatório e revisão bibliográfica sobre o assunto abordado. 1. Instruções para o uso do laborátorio de Biologia Celular 1. Antes de iniciar a aula prática de Biologia Celular, verifique se o microscópio está ligado à corrente elétrica. 2. Antes de colocar a lâmina sobre a platina, verifique se a laminula não esta voltada para baixo, pois com a objetiva de 40X não é possivel o ajuste do foco nessa situação 3. Ao iniciar sua observação, focalize primeiro com a objetiva de menor aumento (10X). 4. Após observar com a objetiva de 10x, passe para a de a proxima de maior aumento 5. Para a observação mais detalhada passe para a objetiva de 40x. Nesta objetiva o foco deve ser ajustado somente com o micrométrico. 6. Caso necessite utilizar a objetiva de 100x, proceda da seguinte maneira: a) após obtido o foco com a objetiva de 40x, gire o revolver, sem contudo encaixar a objetiva de 100x.

2 b) pingue uma gota de óleo de imersão sobre a lâmina no ponto onde incide a luz. c) encaixe a objetiva de 100x e ajuste o foco com o auxilio do micrométrico. d) após a observação, limpe a lâmina e a objetiva com auxílio de um lenço de papel ou papel higienico. 2. Algumas Dicas sobre o uso e cuidado com o microscópio a) Verifique se as objetivas estão encaixadas, caso contrário você verá o campo completamente escuro ou parcialmente iluminada. b) Algumas estruturas podem ser melhor, observadas com o auxílio do diafragma. Caso seja esse dispositivo em seu microscópio, experimente usá-lo. c) Se após tomar todos esses cuidados você ainda não obtiver o foco, limpe os oculares e lâmina com o auxílio de papel higiênico. d) Não coloque os dedos e nem apoie qualquer parte do corpo sobre o micrscópio. 3. Normas gerais para o trabalho diário nos laboratórios da FAG - É obrigatório o uso de jalecos dentro do laboratório para assistir as aulas práticas em todos os laboratórios; - É obrigatório o uso de proteção individual, como luvas, calçado fechado, máscaras e óculos de segurança, quando necessário; - É proibido beber, comer e fumar dentro do laboratório; - Não é permitida entrada ou permanência de pessoas estranhas ao laboratório; - O aluno é responsável por possíveis perdas causadas pela falta de cuidado ou mau comportamento no laboratório; - Ao utilizar as vidrarias, proceda com cuidado para evitar danos e cortes perigosos; - Não circule no laboratório com frascos de produtos voláteis e inflamáveis, quando a chama do bico de Bunsen estiver acesa; - Não ligue o bico de Bunsen, se não for necessário, você poderá causar um incêndio; - Não jogue material sólido na pia; - Procure não desperdiçar reagentes; - Utilizar somente o material que está a sua disposição na bancada de trabalho; - Não pipetar material tóxico, ácidos concentrados ou outras substâncias perigosas com a boca; - Não colocar materiais quentes diretamente sobre superfícies frias, evitandose acidentes; - Ao término de cada aula deixar sua bancada em ordem e fechar todos os bicos de gás; - O trabalho em grupo deve ser encarado com seriedade e não como oportunidade para brincadeiras; - Em caso de acidente comunicar imediatamente ao professor ou responsável pelo laboratório;

3 - Seguir o regulamento geral e normas específicas de cada laboratório. PRÁTICA 1 MICROSCÓPIO Introdução: Descrição do microscópio fotônico A palavra microscópio é de origem grega (micros =pequeno, scopein =observar, olhar com atenção). É um instrumento óptico que amplia a imagem de um pequeno objeto utilizando um sistema de lentes e fontes de iluminação. Todo microscópio é composto de partes mecânicas e partes ópticas, que juntas nos permitem a observação detalhada de materiais em estudo. Material: Microscópio Partes mecânicas: Base ou pé: é o suporte do microscópio, peça que sustenta todas as outras partes do aparelho. Braço ou coluna: peça que liga o pé à parte superior do microscópio. Mesa ou platina: peça de apoio da lâmina contendo o material para estudo, no centro da mesa existe um orifício para a passagem da luz. Charriot: peça ligada à platina que permite movimentar a lâmina no plano horizontal da esquerda para a direita e vice-versa, e de trás para frente e vice-versa. Parafuso macrométrico: localiza-se em ambos os lados do braço, serve para ajustar o foco grosseiramente através de avanço ou recuo da mesa em relação à objetiva. Parafuso micrométrico: ajusta o foco finamente através de pequenos avanços ou recuos da mesa. Canhão: parte superior do microscópio constituída por um tubo contendo um prisma. Sustenta lentes objetivas e oculares, e serve para focalização do material. Revolver: peça onde se encaixam as lentes objetivas. É composto por um disco de ranhuras que permite a mudança das objetivas. Partes ópticas: Condensador: conjunto de lentes situado abaixo da platina que

4 concentra a luz e fornece iluminação uniforme à preparação biológica. Botão do condensador: permite a movimentação do condensador. Diafragma: regula a intensidade de luz que atinge a preparação através de uma alavanca para sua abertura ou fechamento. Objetivas: conjunto de 4 ou mais lentes superpostas que proporcionam aumentos diferentes para observação do material. O valor do aumento está gravado na objetiva. Oculares: possui 2 lentes convergentes que ampliam e corrigem os defeitos da imagem. O valor do aumento proporcionado está gravado na ocular. MICROSCÓPIO ÓPTICO

5 Identificação dos componentes do microscópio: Materiais: Microscópio óptico comum; Letras recortadas do jornal; Pinça; Lâminas e lamínulas; Descarte. Procedimento: Lâminas com letras: Coloque sobre a lâmina uma letra que você recortou do jornal; Coloque esta lâmina sobre a platina do microscópio, de modo a manter a letra na posição em que é lida por você; Focalize a letra, conforme o procedimento descrito anteriormente; Observe a posição da letra, na imagem formada pelo microscópio com a objetiva de 4X e 10X; Desenhe o observado. 1. Que diferenças você observou entre a posição da letra a olho nu e no MO? 2. Nas objetivas de diferentes aumentos, o que você notou quanto ao tamanho da imagem e quanto à área do campo de observação? 3. Por que a lamínula deve estar sempre voltada para cima quando se observa ao microscópio? 4. Por que é necessário o óleo de imersão quando se observa na objetiva de 100x?

6 PRÁTICA 02 CARACTERIZAÇÃO DE CÉLULA VEGETAL Objetivo: Observar Célula vegetal; Materiais: Microscópio; Lâmina; Lamínula; Descarte; Solução de azul de metileno; Elodea. Preparação a fresco de Elodea sp. Destaque uma folha de Elodea sp. Coloque-a sobre uma lâmina limpa e sobre ela uma gota de água. Cubra o material com a lamínula sem que se formem bolhas de ar. Retire o excesso de água com papel filtro. Observe ao MO com objetiva de 4X e desenhe o material. Passe para os aumentos seguintes e esquematize de novo com a objetiva de 40X. 1. Esquematize as células observadas e identifique os componentes. Pesquisa para Revisão Bibliográfica: Microscópio Ótico Célula Vegetal (organelas que podem ser observadas no microscópio ótico)

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