MetroAlimentos Aspectos da Produção de Materiais de Referência para Ensaios de Proficiência em Microbiologia de Alimentos
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- Maria Luiza Barroso Jardim
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1 MetroAlimentos 2010 Aspectos da Produção de Materiais de Referência para Ensaios de Proficiência em Microbiologia de Alimentos Carla de Oliveira Rosas INCQS/FIOCRUZ São Paulo, 20 de outubro de 2010
2 Laboratórios de Ensaio São de grande importância para o desempenho do setor produtivo, na avaliação da qualidade e segurança de produtos e serviços.
3 Laboratórios que realizam o controle de qualidade microbiológico de alimentos Avaliam alimentos para o consumo humano seguindo critérios baseados em leis Constante verificação da competência em produzir resultados tecnicamente precisos e confiáveis
4 Resultados Inadequados podem induzir clientes e autoridades a decisões erradas; desperdícios financeiros; danos à saúde.
5 Comprovação da Qualidade Analítica - Exigência do consumidor interno e externo; - Barreiras técnicas de exportação.
6 Laboratórios envolvidos no controle sanitário de alimentos LACEN Universidades e Instituições de Pesquisa Controle Sanitário dos Alimentos MAPA LANAGROS - Laboratórios privados; - Empresas; - Entre outros.
7 Sistemas da Qualidade Norma ISO/IEC 17025:2005 Utilização de métodos validados, uso de materiais de referência para o controle interno e a participação em ensaios de proficiência ou comparações interlaboratoriais
8 Norma ISO/GUIA 30:2000 Definição de Material de Referência Material ou substância que tem um ou mais valores de propriedades que são suficientemente homogêneos e bem estabelecidos, para ser usado na calibração de um aparelho, na avaliação de um método de medição ou atribuição de valores materiais.
9 Norma ISO/GUIA 30:2000 Definição de Material de Referência Certificado (MRC) Material de referência, acompanhado por um certificado, com um ou mais valores de propriedade certificado por um procedimento que estabelece sua rastreabilidade à obtenção exata da unidade na qual os valores da propriedade são expressos, com cada valor certificado acompanhado da sua incerteza para um nível de confiança estabelecido. ISO/GUIA 30:2000, aditivo 2008 Indicação de uso para apenas uma finalidade.
10 Características dos Materiais de Referência: Homogeneidade; Estabilidade em longo e curto prazo; Propriedades qualitativas ou quantitativas (MR e MRC); Matriz tipo e quantidade compatível com o uso; MR X MRC (produção + complexa)
11 MATERIAIS DE REFERÊNCIA Controle Interno Controle Externo Utilizado para o controle das análises de rotina, na validação de métodos, rastreabilidade e em calibrações de equipamentos. Participação em Ensaios de Proficiência
12 Ensaio de Proficiência para Laboratórios Analíticos Ferramentas da garantia da qualidade utilizadas na avaliação da habilidade de um laboratório em obter resultados precisos; Avaliação da performance laboratorial a partir da comparação dos resultados dos outros laboratórios participantes; Demonstração de competência para órgãos de acreditação. A realização de EP no País, é fundamental para o aumento da credibilidade dos resultados das medições e, consequentemente, contribui para facilitar o comércio internacional e prevenir barreiras técnicas (Inmetro, 2010).
13 Ensaio de Proficiência para Laboratórios Analíticos Laboratórios participantes analisam os MR com conteúdos conhecidos, porém não divulgados, específicos para uma determinada área de análise; Orientações sobre a manutenção dos MR e o prazo da análise ; Enviam os resultados para o organizador com datas pré-estabelecidas; Resultados relatórios de análise - caráter confidencial; Resultados insatisfatórios procedimentos laboratoriais. melhoria da qualidade dos
14 Provedores de Ensaios de Proficiência na Área de Microbiologia de Alimentos Nacionais Internacionais PEP-SENAI MAPA FEPAS (GB) QMS - LGC (GB) PTS (Dinamarca) EQUASE 2000 (Espanha) AOAC (EUA) Fonte: National Food Administration (Suécia) DRRR (Alemanha) D
15 Dificuldades na participação de ensaios de proficiência: Custos elevados (laboratórios governamentais); Poucos provedores nacionais; Participação em EP internacionais: Transporte demorado; Morosidade na liberação alfandegária; Exigências burocráticas na liberação de material biológico.
16 A utilização de materiais importados Fragilidade do país na produção de MR Divulgação dos resultados obtidos em laboratórios brasileiros para provedores de ensaios de proficiência internacionais
17 Normas, Guias e Protocolo Relacionados a Produção e ao Controle de Materiais de Referência para Ensaios de Proficiência ABNT ISO GUIA 30: Termos e definições relacionados com materiais de referência. (ISO GUIDE 30:1992 Atual. 2008, em revisão); ABNT ISO GUIA 31:2004 Materiais de referência Conteúdo de certificados e rótulos. (ISO GUIDE 31:2000); ABNT ISO GUIA 34:2004 Requisitos gerais para a competência de produtores de material de referência. (ISO GUIDE 34:2000 Atual. 2009); ISO GUIDE 35:2006 Reference materials General and statistical principles for certification;
18 Normas, Guias e Protocolo Relacionados a Produção e ao Controle de Materiais de Referência para Ensaios de Proficiência ISO/IEC 17043:2010 Conformity assessment General requirements for proficiency testing; ILAC G13:08/ Guidelines for the requirements for the competence of providers of proficiency testing schemes; ISO/IEC 13528:2005 Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory compararisons; NBR ISO/IEC 17025: Requisitos gerais para a competência de laboratórios de ensaio e calibração; THOMPSON, M.; ELLISON, S.L.R.; WOOD, R. International harmonized protocol for proficiency testing of (chemical) analytical chemistry laboratories. Pure Appl. Chem. v. 78(1), p , 2006.
19 Produtor de Materiais de Referência Planejamento, desenvolvimento e certificação
20 Resolução da Assembléia Geral do ILAC: 2004 para a acreditação de produtores de materiais de referência ISO GUIA 34 Requisitos gerais para a competência de produtores de material de referência ISO/IEC Requisitos gerais para a competência de laboratórios de ensaio e calibração Inmetro (2009) Programa piloto para acreditação de produtores e provedores de materiais de referência certificados, baseado na ISO GUIA 34 e na ISO/IEC Duração de 2 anos (5 instituições estão sendo avaliadas).
21 Materiais de Referência utilizados em ensaios de proficiência em laboratórios de microbiologia de alimentos Matriz do Material de Referência (alimento) + micro-organismo(s) Simulando uma amostra Realização das etapas de análise empregadas na rotina do laboratório
22 Tipos de Materiais de Referência Disponibilizados para EP em Microbiologia de Alimentos Matriz contendo o microorganismo (s) alvo : Matriz livre de contaminação + micro-organismo (s) alvo Lentilhas; Cápsulas contendo o MR preparado por spraydryer; Frascos contendo o MR preparado por liofilização ou por spraydryer. Frasco contendo micro- organismo liofilizado + matriz simulando amostra de alimento livre de contaminação em embalagem separada.
23 Matrizes de MR Disponibilizados para EP em Microbiologia de Alimentos Carnes: bovina, frango e peixe; Farinhas; Chocolate; Pimenta; Salada; Aveia; Coco; Sucos de frutas; Arroz; Ovos; Queijo; Leite em pó; Leite em pó para bebês; Águas; Entre outros.
24 Problemas Identificados na Produção de Materiais de Referência para Ensaios de Proficiência em Microbiologia de Alimentos: Escassez de dados bibliográficos relativos às etapas de produção e de controle dos MR; Sensibilidade dos micro-organismos frente às variações de temperatura e dessecação no período de preparo; Instabilidade das células microbianas durante a estocagem e o transporte; Dificuldade da adequação da produção de MR com volumes de matrizes utilizados nos ensaios de microbiologia de alimentos.
25 Métodos de Preservação de Micro-organismos Água molecular reações das células. componente crítico nos mecanismos de Métodos de dessecação Cessar ou retardar o metabolismo celular Micro-organismos viáveis e estáveis Técnicas descritas na literatura : Spray-dryer - Injeção de uma solução contaminada em forma de spray em contra corrente a um jato de ar a temperatura superior a 200ºC para a obtenção de grânulos secos. Estabilização bacteriana é rápida. Liofilização - Sublimação da água celular, sob vácuo por ciclos prolongados.
26 Variação das perdas de viabilidade entre as espécies bacterianas, durante o processo de dessecação: Bactérias formadoras de esporos Gram-positivas Gram-negativas
27 Literatura Específica para Dessecação e Preservação de micro-organismos Agentes protetores, específicos, adicionados durante o crescimento do micro-organismo ou antes do processo de congelamento e dessecação Aumento da viabilidade das células bacterianas
28 HISTÓRICO DA PARTICIPAÇÃO DO INCQS COMO PRODUTOR E PROVEDOR DE MR PARA ENSAIOS DE PROFICIÊNCIA INCQS Programa de Ensaio de Proficiência (Produtos sujeitos ao regime de Vigilância Sanitária) Material de Referência (Análise qualitativa de pesticidas em frutas)
29 INCQS COMO PRODUTOR E PROVEDOR DE MR PARA ENSAIOS DE PROFICIÊNCIA EM MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS 1º Ensaio de Proficiência em Microbiologia de Alimentos (Parceria com o Inmetro) Projeto CIMICROAL (FINEP): INCQS, CIENTEC, UFV e Inmetro Detecção de Salmonella spp. em leite em pó
30 PROJETOS EM ANDAMENTO: Produção de MR para contagem de coliformes termotolerantes e de bactérias mesófilas em leite em pó (FINEP); Produção de MR para detecção de Salmonella spp. em carne bovina; Produção de MR para detecção de Salmonella spp. em carne de frango.
31 PERSPECTIVAS FUTURAS: Produção de Produção de MR para detecção de L. monocytogenes e para contagem de Estafilococos coagulase positiva em queijo Minas.
32 Importância de novos produtores de materiais de referência e provedores de ensaios de proficiência em microbiologia de alimentos Novas ofertas de EP com qualidade reconhecida e preços mais baixos que os disponíveis no mercado poderão contribuir para a harmonização técnica dos laboratórios brasileiros e consequentemente no aprimoramento da qualidade analítica.
33 AGRADEÇO PELA ATENÇÃO!!!
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