Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia FMVZ/USP, Pirassununga/São Paulo - SP Contato: mabrunetto@usp.br

Transcrição

1 Aditivos nutricionais empregados no controle e na melhora da saúde oral de cães e gatos Patricia M. Oba 1, João Paulo F. Santos 1, Laura F. Matheus 1, Mariane C. Ernandes 1, Fabio A. Teixeira 1, Eduardo Z. Braghirolli 1, Livia R. Folconi 1, Dóris P. Halfen 1, Marcio A. Brunetto 1 1 Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia FMVZ/USP, Pirassununga/São Paulo - SP Contato: mabrunetto@usp.br RESUMO A doença periodontal é o problema de saúde oral mais comum nos gatos adultos, cuja prevalência está estimada em até 85% dos animais. Esta afecção pode levar ao comprometimento sistêmico, redução da expectativa de vida e queda da imunidade. A placa bacteriana é uma entidade estrutural específica, mas altamente variável que resulta da colonização e do crescimento de microrganismos sobre a superfície dos dentes e tecidos moles. Trata-se de uma comunidade de microrganismos organizados num biofilme dentário, embebidos numa matriz orgânica constituída por película aderida de células descamadas, leucócitos, bactérias, glicoproteinas da saliva, substrato alimentar e minerais como cálcio, fósforo e magnésio. A microbiota bucal é diversa e está constituída, predominantemente, por bactérias anaeróbias Gram negativas, que possuem a capacidade de colonizar, invadir, produzir compostos tóxicos e gerar resposta imunológica contra os tecidos do hospedeiro. A introdução de vários alimentos comercias no mercado com o intuito de melhorar a saúde bucal ocorreu ao longo dos últimos anos. O emprego da ação mecânica de raspagem para limpar os dentes compõe a estratégia padrão nesses alimentos, efeito obtido por modificações na textura e no tamanho dos kibbles. Mais recentemente, estudos com o uso dos ômegas-3, polifenóis, polifosfatos e imunoglobulinas estão sendo realizados com o propósito de auxiliar no controle e tratamento da doença periodontal. Palavras-chave: doença periodontal, cálculo dentário, dieta, canino, felino. INTRODUÇÃO A doença periodontal e inflamação da gengiva são distúrbios comuns em cães e gatos (Reichart et al., 1984), com prevalência de até 85% dos animais (Watson, 2006). A gengivite é causada pela formação e persistência da placa na superfície do dente. Sem tratamento, pode evoluir para a doença periodontal, a qual afeta gengiva, ligamento periodontal, cemento e osso alveolar. A doença periodontal esta associada à dor, halitose, ulceração, perda de osso 1

2 alveolar e dentes. Sendo progressiva com a idade, promove alterações sistêmicas e afeta preferencialmente animais alimentados com dietas úmida (Gawor et al., 2006). Outros fatores contribuem para o desenvolvimento desta afecção, destaca-se o apinhamento dentário, que ocorre muitas vezes devido a alterações da maxila/mandíbula, como o prognatismo e o braquignatismo, ou a persistência de dentes decíduos, o que aumenta as áreas de retenção de placa bacteriana e predispõe à alterações periodontais (Penman & Harvey, 1992; Klein, 2000; Gioso, 2007). Além disso, outras afecções orais, tais como as neoplasias ou a hiperplasia gengival provocam alterações locais no ambiente do dente e da gengiva, como a formação de pseudobolsas e de massas, situações que culminam em aumento do acúmulo de placa e dificultam a limpeza, predispondo também à doença periodontal (Klein, 2000). Em felinos é importante destacar que as lesões reabsortivas acometem 60,8% dos gatos (Lommer & Verstrate, 2000). Nesta doença, os odontoclastos funcionam de forma anômala reabsorvendo os dentes sem necessidade, cuja disfunção resulta em perda óssea e dor. MICROBIOTA ORAL E DOENÇA PERIODONTAL A placa bacteriana é uma entidade estrutural específica, mas altamente variável que resulta da colonização e do crescimento de microrganismos sobre a superfície dos dentes e tecidos moles. Trata-se de uma comunidade de microrganismos organizados num biofilme dentário, embebidos numa matriz orgânica constituída por película aderida de células descamadas, leucócitos, bactérias, glicoproteinas da saliva, substrato alimentar e minerais como cálcio, fósforo e magnésio. A microbiota bucal é diversa e está constituída, predominantemente, por bactérias anaeróbias Gram negativas, que possuem a capacidade de colonizar, invadir, produzir produtos tóxicos e gerar resposta imunológica com consequente agressão aos tecidos do hospedeiro (Feng & Weinberg, 2006). A formação da placa bacteriana é um processo complexo, que envolve a interação entre diversos gêneros e espécies de bactérias. Em estudo que objetivou caracterizar a microbiota oral na doença periodontal de seres humanos, Socransky et al. (1998) revelaram a presença de grupos bacterianos intimamente relacionados com a afecção, de forma geral os autores citam cinco grupos relevantes, dentre eles o complexo vermelho (P. gingivalis, T. forsythia e T. denticola), laranja (F. nucleatum, P. intermedia, P. nigrescens, P. micros, C. showae, C. rectus, C. gracillis, E. nodatum e S. constellatus), verde (E. corrodens, C. gingivalis, C. ochracea, C. sputigena, C. concisus e A. actinomycetemcomitans), amarelo (S. sanguis, S. gordonii, S. intermedius, S. oralis e S. mitis) e roxo (V. parvula e A. odontolyticus). Os autores observaram que tais complexos interagem entre si, sendo que o complexo amarelo 2

3 parece ser um colonizador primário, seguido pelos complexos verde e roxo, que posteriormente criam condições para colonização do complexo laranja e finalmente pelo complexo vermelho, o qual está bastante relacionado a patogênese da periodontite. Os autores salientam ainda que o complexo laranja e vermelho apresentam forte relação, sendo que com o aumento da colonização pelo complexo laranja há maior colonização pelo complexo vermelho. De acordo com Kolenbrander & London (1993) os colonizadores primários se ligam a película adquirira, formada por glicoproteínas, lipoproteínas, mucina e enzimas na superfície do dente, para posterior colonização pelos colonizadores secundários. No entanto, entre os colonizadores primários e tardios, destaca-se o papel do gênero Fusobacterium, que atua como uma ponte entre os colonizadores, sendo que os primários agregam ente si e com o Fusobacterium e este por sua vez se coagrega com os secundários, conforme apresentado na Figura 2. Figura 2. Diagrama de aderência bacteriana na superfície dental Fonte: Kolenbrander & London (1993) Os estudos que caracterizam a microbiota oral em animais de companhia saudáveis e acometidos por afecções clínicas são escassos. Dentre as principais bactérias subgengivais associadas à periodontite são citadas a Porphyromonas spp, Prevotella spp, 3

4 Peptostreptococcus spp e Fusobacterium spp (Harvey & Emily, 1993; Braga et al., 2005; Carvalho & Cabral, 2007). Em um levantamento realizado na cidade de Jaboticabal, no Estado de São Paulo, Domingues et al. (1999) observaram que os principais gêneros bacterianos associados a doença periodontal espontânea em cães foram Prevotella spp., Bacteroides spp., Propionibacterium spp., Gemella ssp., Actinomyces spp., Eubacterium spp. e Porphyromonas spp. No entanto, apesar da complexa relação existente entre as bactérias, atenção especial tem sido dada a Porphyromonas spp., (Hardham et al., 2005), conforme demonstrado por Socransky et al. (1998) que citam que a P. gingivalis apresenta especial importância na profundidade da bolsa, bem como a T. forsythia e T. denticola que também exibiram forte associação com o sangramento a sondagem. Um estudo avaliou 109 gatos adultos e constatou que a doença periodontal era comum em 81,6% dos animas, sendo agressiva em 12,8%, onde 98,2% dos felinos apresentaram algum tipo de perda óssea periodontal e, apenas 4% dos animais não apresentaram inflamação gengival (Girard et al., 2009). Ainda que existam muitos fatores que influenciem o desenvolvimento da doença periodontal, o agente etiológico primário é a placa bacteriana (Gorrel, 2004). A microbiota oral dos gatos saudáveis é formada por bactérias anaeróbias, principalmente dos gêneros Bacteroides e Fusobacterium (Love et al., 1990). As bactérias do gênero Porphyromonas spp. foram isoladas a partir da placa dental em gatos com periodontite (Harvey & Emilly, 1993; Norris & Love, 1999, 2000). Em estudo realizado recentemente, 97% dos gatos saudáveis eram positivos para Porphyromonas gingivalis. (Booij-Vrieling et al., 2010). Com relação às bactérias presentes em abcessos subcutâneos, 15 gatos foram avaliados e constatou-se que 80% eram positivos para o gênero Porphyromonas, sendo Porphyromonas gingivalis mais frequentemente isolada em comparação com P. salivosa e P. circumdentaria, também sendo encontrada com maior frequência sem a presença das outras espécies e, em quantidade numericamente superior, o que sugere papel mais ativo no desenvolvimento de abcessos subcutâneos (Norris & Love, 1999). Os mesmos pesquisadores avaliaram outros 40 gatos e observaram a presença do gênero Porphyromonas em 95% dos animais e a Porphyromonas gingivalis foi isolada em 92,5% dos casos. Neste estudo foi realizada análise de regressão das unidades formadoras de colônia (UFC) com a doença periodontal e o mesmo demonstrou que a Porphyromonas gingivalis é um indicador importante do grau de doença periodontal (Norris &; Love, 1999). Um estudo avaliou a presença de Porphyromonas spp em 50 cães acometidos pela doença periodontal e 50 saudáveis, espécies de Porphyromonas foram encontradas em cães com e sem periodontite, respectivamente, em 92 % e 56 % dos cães (Senhorinho et al., 2011). 4

5 O papel de bactérias específicas, especialmente Porphyromonas gingivalis nas doenças periodontais tem sido extensivamente estudado. Concentrações elevadas destes microrganismos foram observadas em pessoas com doença periodontal agressiva generalizada em comparação a indivíduos com doença periodontal agressiva localizada e doença periodontal crônica (Ramiro, 2010). Porphyromonas giginvalis é uma bacteria anaeróbica, Gram negativa, de ocorrência natural na cavidade oral (Léon et al., 2007). Também pode ser encontrada em outros sistemas como trato gastrintestinal, respiratório e cardiovascular, responsável por vários danos. Ressalta-se que apesar da importância que têm se dando a P. gingivalis na odontologia humana e veterinária, estudos recentes demonstram que em cães a P. gulae, espécie geneticamente semelhante a P. gingivalis merece atenção e mais estudos de sua prevalência e mecanismos de controle (Senhorinho et al., 2011). CLÍNICA DA DOENÇA PERIODONTAL Os mecanismos patogênicos envolvidos na doença periodontal incluem a influência direta das bactérias da placa e a influência indireta dessas bactérias no processo inflamatório (Gorrel, 2004). A maioria dos animais com idade superior a dois anos apresenta algum grau de doença periodontal. No entanto, muitos proprietários não percebem qualquer alteração a não ser nos estágios avançados da doença. O sinal mais comum detectado pelo proprietário é a halitose, resultante da necrose dos tecidos e da fermentação bacteriana no sulco gengival ou na bolsa periodontal (Penman & Harvey, 1992; Gorrel, 2004). A identificação clínica da doença periodontal grave se dá através de sinais clínicos como halitose intensa, salivação espessa, sangramento oral, mobilidade dental, cálculo e gengivite, achados que podem proporcionar suporte para que o clínico veterinário decida encaminhar o paciente para o tratamento adequado junto a um médico veterinário especializado (Gioso, 2003). Esta crescente preocupação com a saúde oral é estimulada pelo fato de que as enfermidades orais interferem na saúde do paciente e estão relacionadas à redução da expectativa de vida (Kowalesky, 2005). As alterações da cavidade oral dos cães e gatos têm sido abordadas com o intuito de promover a redução do incômodo que tais doenças ocasionam aos animais e consequentemente a seus proprietários (Telhado et al., 2004). A odontologia veterinária encontra-se em evolução na medida em que os proprietários procuram cada vez mais manter ou melhorar a saúde oral de seus animais de estimação. Estes cuidados associados à nutrição ótima, entre outros, contribuem para melhorar e prolongar a qualidade de vida (Colmery, 2005). 5

6 DIETA E DOENÇA PERIODONTAL A introdução de vários alimentos comercias no mercado com o intuito de melhorar a saúde bucal ocorreu ao longo dos últimos anos. O emprego da ação mecânica de raspagem para limpar os dentes compõe a estratégia padrão nesses alimentos, efeito obtido por modificações na textura e no tamanho dos kibbles. O alimento seco é potencialmente benéfico para a saúde oral se a forma e a textura dos kibbles forem especialmente formuladas para cães e gatos de raças e tamanhos específicos, sendo que para uma adequada ação mecânica de raspagem da superfície dentária durante a mastigação, os dentes devem penetrar no kibble antes de quebra-lo, com isso fatores relacionados ao animal são importantes e influenciam a pressão exercida sobre o kibble no momento da apreensão. Neste sentido, mecanismos tem sido estudados para determinar o limiar de penetração dos dentes antes da fragmentação, o que permite a comparação entre diferentes alimentos (Hennet, 2006 citado por Pinto, 2007). Neste sentido, Hennet et al. (2007) observaram que o aumento de 50% do tamanho do kibble reduziu em 42% o acúmulo de cálculo dentário em cães da raça beagle. No entanto, esta prática pode resultar em benefícios somente nos dentes utilizados durante a mastigação (Cox et al., 2003). Portanto, apesar da possível remoção de placa e cálculo por estes produtos, há limitações nesta estratégia, pois a abrasão mecânica proveniente de alimentos duros, produtos de mastigação e alimentos especializados ocorrerá somente nos pontos em que o alimento entrar em contato efetivo com a superfície do dente. Nos animais com má oclusão, resultados uniformes não serão obtidos em todos os dentes e, esse mecanismo pode particularmente não trazer benefícios. A estratégia de ação mecânica também apresenta eficácia reduzida em cães que tendem a deglutir com pouca ou nenhuma mastigação (Cox et al., 2003). Paiva et al. (2007) avaliaram a utilização de coadjuvantes na diminuição da placa bacteriana e formação do cálculo dentário em cães e determinaram que os que apresentavam apenas ação mecânica, apresentaram baixo desempenho, o que se deve provavelmente ao fato destes apresentarem ação apenas nos dentes em que houve contato. Em relação à terapia periodontal, a assistência domiciliar é uma parte muito importante, já que bolsas periodontais são reinfectadas dentro de duas semanas após profilaxia, caso essa prática não seja realizada (Brook, 2008). Um levantamento norte americano realizado com cães e 9074 gatos, constatou que 22,5% dos cães e 33,7% dos gatos recebiam dieta seca; 57,7% e 57,4% recebiam dieta seca adicionada de úmida e 19,8% e 8,9% recebiam somente dieta úmida. Linfoadenopatia, depósitos dentais e a doença periodontal apresentaram frequências significativamente inferiores em gatos alimentados somente com dieta seca em comparação às 6

7 úmidas. A diferença também foi significativa entre animais alimentados com dieta seca adicionada de úmida e somente dieta úmida. Linfoadenopatia (81,9% contra 54,8%), depósitos dentais (44,3% contra 17,2%) e a doença periodontal (77,8% contra 45,3%) (Gawor et al., 2006). Isso pode ser explicado pelo fato da saliva conter peptídeos que se ligam a hidroxiapatita e assim, inibir Candida albicans, Streptococcus mutans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella romonas, e Bacteroides spp. Além de conter IgA e leucócitos, agentes que causam inibição da ligação de bactérias aos tecidos gengivais (Paquette et al., 1997). Animais alimentados com dietas úmidas desenvolveram atrofia das glândulas salivares em poucos dias (Scott et al., 1990). Esta atrofia pode ser rapidamente reversível assim que uma dieta seca é reintroduzida. A saliva secretada por esses animais apresentou redução de 50% no teor de proteína (Johnson, 1984). Outro estudo empregou cães e 6371 gatos e constatou que os animais alimentados com dieta seca apresentaram menor incidência de depósitos dentais, alterações dos linfonodos mandibulares e gengivite. O risco de alterações na saúde oral apresentou aumento de 41% para cães e 56% para gatos quando alimentados com dieta caseira em comparação aos 22% e 24% na dieta seca, sendo que 45% e 55% com mais de 02 anos apresentaram alterações significativas nos três índices avaliados. Também foi avaliada a influência da escovação e petiscos voltados à manutenção da saúde oral: os animais que recebiam escovação ou petiscos diariamente, ou a combinação dos dois algumas vezes por semana, apresentaram redução do risco de periodontite em comparação aos animais que recebiam petiscos voltados à saúde oral esporadicamente ou que não recebiam nenhum cuidado com saúde oral em casa. Os animais que recebiam escovação diária apresentaram redução de 16% em cães e 12% em gatos das alterações da saúde oral; os que recebiam petiscos diariamente em 19% e 10% e os gatos que recebiam a combinação dos dois algumas vezes por semana em 14%, quando comparados aos outros dois grupos. Animais que não recebiam nenhum tipo de cuidado com a saúde oral em casa apresentaram aumento de alterações orais de 37% em cães e 44% em gatos (Buckley et al., 2011). ADITIVOS NUTRICIONAIS E A DOENÇA PERIODONTAL Polifenóis Os polifenois possuem atividade antibacteriana contra patógenos orais, sendo estudados por seu efeito no controle da doença periodontal. Polifenóis da Cranberry previnem formação de placa por Porphyromonas gingivalis e Fusobacterium nucleatum, além de inibir 7

8 algumas proteases Porphyromonas gingivalis (Yamanaka et al., 2007). Polifenóis do vinho possuem efeito antimicrobiano contra Porphyromonas gingivalis e Prevotella intermedia (Ho et al., 2001). Polifenóis do chá verde aplicado localmente na bolsa periodontal, reduziram a profundidade da bolsa e proliferação de bactérias Gram negativas anaeróbicas, e possui efeito antibacteriano in vitro contra Porphyromonas gingivalis e Prevotella spp (Hirasawa et al., 2002). Em cães de raças pequenas e grandes Isogai et al. (1997) observaram que uso de extrato de chá verde na dieta por um período de dois meses reduziu significativamente a porcentagem de Porphyromonas na placa, a inflamação gengival e a halitose, contudo o aditivo não apresentou efeito sobre o índice de cálculo dental. Diversos polifenóis inibem a atividade proteolitica da Porphyromonas gingivalis (Inaba et al., 2005). Além disso, derivados de polifenóis reduzem a produção de prostaglandina E2 induzida pela Porphyromonas gingivalis (Inaba et al., 2008). Omegas-3 Os efeitos antinflamatórios dos ômegas-3 estão sendo estudados em doenças crônicas e câncer, recentemente foi demonstrado efeito benéfico na doença periodontal. Um estudo em ratos com doença periodontal avaliou a expressão do mrna mediador de citocina no periodonto infectado por P. gingivalis e demonstrou que os ômegas-3 modulam a inflamação causada por citocinas e reduzem a reabsorção do osso alveolar (Kesavalu et al., 2007). Ratos inoculados com P. gingivalis ou com a combinaçao de F. nucleatum e P. gingivalis e alimentados com óleo de atum, exibiram redução da absorção do osso alveolar em 72% e 54%, respectivamente, em comparação com os animais alimentados com óleo de canola (BENDYK et al., 2009). Fosfatos A inclusão de fontes minerais nos alimentos de maneira que possam proporcionar benefícios em todas as superfícies dentárias é outra abordagem empregada no controle da formação de cálculos. Os fosfatos formam complexos solúveis com o cálcio presente na saliva e dessa forma auxiliam na prevenção da mineralização da placa e consequente formação do cálculo dentário. Estes agentes possuem ação em toda a cavidade bucal, inclusive nas superfícies não envolvidas na mastigação. Quando adicionados ao alimento, e com a mastigação, o hexametafostato de sódio é incorporado na placa dentária e forma complexos solúveis com o cálcio, os quais se difundem na saliva, prevenindo a formação de cálculo dental. O hexametafosfato de sódio é convertido a ortofosfato por meio de ácidos presentes no 8

9 estômago, sendo então assimilado de forma semelhante a outros fosfatos da dieta (Stookey et al.,1996). Os efeitos do tripolifosfato de sódio e hexametafosfato de sódio empregados como cobertura do croquete extrusado e no interior da massa foram avaliados na prevenção do desenvolvimento de cálculo dentário em 25 cães. Os resultados demonstraram que o hexametafosfato de sódio incorporado à dieta seca, tanto na sua cobertura como em seu interior, reduziu o acúmulo de calculo dentário, quando comparado à dieta sem adição de fosfatos (Pinto et al., 2008). O tripolifosfato de sódio incorporado à dieta seca em cobertura foi efetivo quando comparado à dieta sem adição de fosfatos (24,2% de redução). No entanto, quando incorporado no interior da massa da dieta não influenciou o desenvolvimento de cálculo se comparado à dieta sem adição de fosfatos. Neste estudo, o hexametafosfato de sódio foi mais eficiente que o tripolifosfato de sódio na prevenção do desenvolvimento de calculo, pois reduziu seu acúmulo em 34,2% e 47,6% em massa e cobertura, respectivamente (Pinto et al., 2008). O recobrimento dos croquetes com tripolifosfato de sódio levou a redução de 55% de cálculo, porém o efeito diferiu de acordo com a localização dos dentes, sendo mais evidente nos dentes da região caudal utilizados para esmagar o alimento em comparação com incisivos e caninos (Hennet et al., 2007). Outro estudo avaliou a incorporação de polifosfatos na dieta comercial e obteve a redução de 58% dos cálculos e 9,0% da placa bacteriana (COX; LEPINE, 2002). Imunoglobulinas A utilização de imunoglobulinas contra as gingipaínas surge como uma nova e promissora alternativa contra a doença periodontal. As gingipaínas são proteases secretadas pela Porphyromonas gingivalis e promovem interrupção da adesão celular e diferenciação dos osteoclastos, levam a perda de osso e ligamentos alveolares, além de bloquear a resposta imune do hospedeiro, contribuindo para destruição de tecido e consequente progressão da doença periodontal. Seu mecanismo de ação ocorre por meio da indução da permeabilidade vascular, ao ativar o sistema da calicreína-cinina, que leva ao aumento do fluxo sanguíneo gengival e progressão da inflamação. Também ativa o sistema de coagulação: a trombina converte o fibrinogênio em fibrina e por consequência gera trombos e consequente perda tecidual. Além de tudo isso, são responsáveis pela estimulação da reabsorção óssea e ativação da liberação de bradicinina que promove a dor. Possui potente ação degradante de fibrinogênio e fibrina, leva a hemorragias na gengiva. Causam degradação de macrófagos e 9

10 inibem a ativação dos leucócitos, fatores que favorecem a multiplicação e adesão da P. gingivalis (Imamura, 2003). Dentre as principais vantagens do emprego de IgY obtidas de ovos de galinhas, destacam-se a questão do bem estar aos animais, pois sua obtenção é realizada por um método não invasivo, baseado no simples ato de coletar ovos. O custo de manutenção das poedeiras é reduzido, se comparado a outras espécies animais, sendo mais econômico. Além disso, os anticorpos de galinhas não oferecem nenhuma reatividade cruzada com os anticorpos de mamíferos (Schade et al.,, 2007). A imunoterapia com anticorpos específicos de galinha (IgY) tem sido utilizada com sucesso contra doenças infecciosas de origem viral, bacteriana e origem fúngica em humanos e animais (Larsson & Carlander, 2003). O uso oral de IgY é uma abordagem atrativa por não ativar o complemento de mamíferos ou interagir com seus receptores, que podem mediar resposta inflamatória no trato gastrintestinal (Carlander et al., 2000). Recentes estudos relatam que seu uso é efetivo na prevenção de periodontite em pacientes humanos (Yokoyama et al., 2007). Sua eficácia in vitro e in vivo foi comprovada por alguns estudos. Um deles realizado in vitro demonstrou que na presença de IgY-PG, a adição de 62,5; 125 e 250µg/mL reduziu em 60,5; 59,6 e 47,1 ± 1,8% a atividade da protease das gingipaínas, respectivamente. Sendo que as células incubadas com gingipaínas demonstraram relação dose-dependente na perda da atividade de adesão (Yokoyama et al., 2007). Outro estudo empregou IgY contra as hemaglutininas responsáveis pela adesão da PG à mucosa do hospedeiro e constatou que houve neutralização da atividade das hemaglutininas, cujo efeito foi dose dependente (Tezuka, 2006). Outro estudo realizado com ratos comprovou a eficácia da utilização das IgY para prevenir perda de osso alveolar. Os animais foram divididos em três grupos, todos infectados por PG: o primeiro grupo não recebeu nenhum tipo de IgY (grupo Pg.), o segundo grupo recebeu IgY contra as gengipans da PG (grupo Pg. + IgY-PG) e o terceiro grupo recebeu IgY proveniente de animais não inoculados com PG (grupo Pg. + IgY controle). Os animais que não receberam IgY apresentaram crescimento bacteriano e atividade da tripsina elevados (próximos de 100%); os animais do grupo Pg. + IgY-PG apresentaram crescimento bacteriano de 32,4% e atividade de tripsina de 40,8%, os animais do grupo Pg. + IgY-controle apresentaram crescimento bacteriano de 82,2% e atividade de tripsina de 91,6%. Em relação à perda óssea, os animais do grupo Pg. + IgY-PG apresentaram perda menor em comparação ao grupo Pg., e o grupo Pg. e Pg. + IgY-controle apresentaram perda óssea sem diferença estatística (Hamada & Watanabe, 2010). 10

11 Em cães, um estudo conseguiu comprovar a eficácia da utilização de IgY contra as gingipaínas. Este foi dividido em três fases, sendo realizado primeiro in vitro e posteriormente dois estudos in vivo. Os resultados in vitro demonstraram que as IgY-PG reagiram fortemente com P. gingivalis e P.gulae, mas demonstraram fraca atividade cruzada com P. salivosa e não reagiram de forma cruzada com P. circumdentaria e isolados clínicos de P. endodontalis F2 e F5. Foram utilizados três grupos, grupo controle sem IgY, gurpo controle com IgY controle, a qual não reagia com nenhuma das Porphyromonas spp e o grupo IgY-PG. A IgY-PG inibiu a atividade proteolítica das preparações de gingipaínas de P. gulae e P. gingivalis em 50% e 60%, respectivamente, levando ao menor dano às células e aumento da sua sobrevivência em comparação ao grupo controle não tratado e o controle que recebeu IgY controle (Shofiqur et al., 2011). No estudo in vivo com cães, os animais foram divididos em três grupos com cinco cães cada, um controle, sem administração de IgY, um teste que recebeu 35mg de IgY-PG por kg de peso corporal uma vez ao dia e outro que recebeu 17,5 de IgY-PG por kg de peso corporal duas vezes ao dia, sendo o IgY PG administrado sobre a alimentação comercial. A média de todos os parâmetros analisados, incluindo gengivite, periodontite, índice de saúde bucal, e sangramento à sonda, foram significativamente menores após 08 semanas, em comparação com a linha de base. Não houve mudança significativa em todos os parâmetros do grupo controle. Não houve diferenças notáveis entre os dois grupos teste (Teste 1: 35mg de IgY-PG/kg de peso corporal, uma vez ao dia; Teste 2: 17,5mg de IgY-PG/kg de peso corporal, duas vezes ao dia). Houve diferença significativa na remoção do cálculo dentário entre o grupo Teste 1 e o controle (Shofiqur et al., 2011). Na segunda parte do estudo foram utilizados cinco cães e selecionados dois pares de dentes pré-molares contralaterais em cada animal, todos com inflamação gengival clara e profundidade de bolsa 5mm, um dente de cada contralateral foi tratado com 20% de IgY-PG misturada com pomada odontológica (um gel neutro contendo gel de hidrocarboneto, ésteres de sacarose e hidroxipropilmetilcelulose) e os outros dentes foram tratados somente com a pomada odontológica. A pomada foi administrada quatro vezes na semana (200mg/bolsa periodontal/hora) dentro da bolsa periodontal com auxilio de uma seringa. Os parâmetros clínicos foram avaliados semanalmente e a profundidade da bolsa foi avaliada na segunda e quarta semana. Os animais que receberam IgY-PG demonstraram redução significativa da profundidade da bolsa periodontal e o grupo controle não apresentou alteração significativa (Shofiqur et al., 2011). 11

12 Não foram localizados estudos publicados que tenham avaliado o efeito de IgY-PG sobre a saúde oral de gatos. Devido a falta de informação, foi conduzida pesquisa que objetivou avaliar os efeitos deste aditivo nutricional na espécie felina, pelo grupo de Estudos em Nutrição de Cães e Gatos do Departamento de Nutrição e Produção Animal da FMVZ- USP, conforme apresentado na Tabela 1. Tabela 1. Resultados da inclusão de IgY-PG em alimento para gatos. Tratamentos experimentais Índice de placa Índice de cálculo Índice de gengivite Porphyromonas gingivalis (%) Grupo controle 10,69 3,92 1,17 0,80 Grupo IgY-PG 9,42 3,59 1,10 0,64 Valor de p 0,0554 0,0660 0,4271 0,4144 Fonte: Oba et al. (2014) Nota-se que os resultados do estudo evidenciam efeito positivo do aditivo na espécie felina. No entanto mais pesquisas são necessárias com avaliação profunda de sua relação com a microbiota oral, dosagens e manejo alimentar dos animais. Ao se comparar os resultado da utilização da IgY-PG com os verificados pelo uso de outros aditivos para melhoria da saúde oral presentes no mercado (Tabela 2), verifica-se que os sais de fósforo conseguem reduzir significativamente o cálculo dentário, porém não apresentam outros efeitos na profilaxia da doença periodontal, sendo inadequados para prevenir a periodontite, a longo prazo, apesar de reduzir significativamente o cálculo (Cave, 2012). As imunoglobulinas parecem agir tanto na formação da placa como do cálculo, assumindo assim melhor efetividade. No entanto, deve-se ter cautela na interpretação destes resultados, pois todos os estudos listados foram realizados com cães e a maioria com biscoitos, não alimentos completos. Assim, são necessários mais estudos para entender melhor a ação destes aditivos na saúde oral. Tabela 2. Compilado de estudos disponíveis na literatura que avaliaram diferentes aditivos coadjuvantes da saúde oral em cães e gatos. Aditivos Utilizados Tripolifosfato de sódio no biscoito, em cães (Pinto et al., 2008) Hexametafosfato de sódio no biscoito, em cães (Pinto et al., 2008) Redução Redução Redução de de Cálculo de Placa Gengivite 24,2% ,6%

13 Pirofosfato de sódio no biscoito, em cães (Carciofi et al., 2007) Tripolifosfato de sódio na dieta, em cães (Hennet et al.,2005) Hexametafosfato de Sódio na dieta, em cães (Hennet et al.,2005) Hexametafosfato de sódio na dieta, em cães (Cox e Lepine, 2002) Hexametafosfato de sódio na dieta, em cães (Stookey et al., 1995) Pirofosfato solúvel na dieta, em cães (Stookey et al., 1995) Hexametafosfato de sódio no biscoito, em cães (Stookey et al., 1996) IgY-PG na dieta - 35mg/kg PC SID, em cães (Shofiqur et al., 2011) IgY-PG na dieta 17,5mg/kg PC BID, em cães (Shofiqur et al., 2011) IgY PG 46,55mg/kg PC por 16 horas, em gatos (Oba et al., 2014) 20,0% % % % 9,0% - 76,8% ,2% % % % ,56% 35,55% - CONSIDERAÇÕES FINAIS A saúde oral trata-se de uma preocupação de médicos veterinários, nutricionistas e proprietários de cães e gatos, no entanto poucos estudos são localizados na literatura com o objetivo de avaliar a relação existente entre potenciais aditivos nutricionais e saúde oral, sendo que a maioria dos estudos foi conduzido em cães. Com base nas informações disponíveis na literatura, pode-se observar que polifenóis, fosfatos, ômega 3, imunoglobulinas parecem apresentar positivos efeitos sobre a saúde oral, sendo que os polifosfatos e imunoglobulinas podem apresentar efeito complementar. No entanto, novos estudos são necessários especialmente em felinos, dosagens dos aditivos, métodos de aplicação, manejo alimentar e sua inter-relação com a microbiota oral. REFERÊNCIAS AMERICAN SOCIETY FOR MICROBIOLOGY. Genes discovered that allow gum disease bacterium to invade arteries. Rockville, MD: ScienceDaily, ASHUMOTO, A.; CHEN, C.; BAKKER, I.; SLOTS, J. Polymerase chain reaction detection of 8 putative periodontal pathogens in subgingival plaque of gingivitis and advanced periodontitis lesions. Oral Microbiol Immunol, v. 11, p ,

14 BENDYK, A.; MARINA, V.; ZILM, P. S.; HOWE, P.; BARTOLD, P. M. Effect of dietary omega-3 polyunsaturated fatty acids on experimental periodontitis in mouse. J Periodontal Res, n. 44, p , BOOIJI-VRIELING, H. E.; VAN DER REIJDEN, W. A.; HOUWERS, D. J.; DE WIT, W. E.; BOSCH-TIJHOF, C. J.; PENNING, L. C.; VAN WINKELHOFF, A. J.; HAZEWINKEL, H. A. Comparison of periodontal pathogens between cats and their owners. Veterinary Microbiology, v. 29, n.144, p , BOYECE, E. N.; LOGAN, E. I. Oral health assessment in dogs: study design and results. Journal of Veterinary Dentistry, v. 11, n. 2, p , BRAGA, C. A. S. B.; RESENDE,C.M.F.; PESTANA, A.C.N.R.; CARMO, L.S.; COSTA, J.E.; SILVA, L.A.F.; ASSIS, L.N.L.; LIMA, L.A.; FARIAS, L.M.; CARVALHO, M.A.R. Isolamento e identificação da microbiota periodontal de cães da raça Pastor Alemão. Ciência Rural, v. 35, n. 2, p , BROOK, A. N. Periodontal therapy. Topics in Companion Animal Medicine, San Diego, v. 23, n. 2, p , BUCKLEY, C.; COLYER, A.; SKRZYWANEK, M.; JODKOWSKA, K.; KURSKI, G.; GAWOR, J.; CEREGRZYN, M. The impact of home-prepared diets and home oral hygiene on oral health in cats and dogs. British Journal of Nutrition, v. 106, p. S124-S127, CARCIOFI, A.C.; BAZOLLI, R.S.; BARBUDO, G.R. et al. Efeito de um biscoito extrusado com cobertura de pirofosfato de sódio sobre o cálculo e a placa dentária pré-existentes em cães. ARS Veterinária, vol.23, pg.47-53, CAFFESSE, R. G.; DE LA ROSA, M.; MOTA, L. F. Regeneration of soft and hard tissue periodontal defects. American Journal of Dentistry, v. 15, n. 5, p , CARLANDER, D.; KOLLBERG, H.; WEJAKER, P. E.; LARSSON, A. Peroral immunotherapy with yolk antibodies for the prevention and treatment of enteric infections. Immunologic Research, v. 21, p. 1-6, CARVALHO, C.; CABRAL, C. Papel da Porphyromonas gingivalis na doença periodontal. Revista Portuguesa de Estomatologia, Medicina Dentária e Cirurgia Maxilofacial, Lisboa, v. 48, n. 1, p , CAVE, N.; Nutritional Management of Gastrointestinal Diseases. In: FASCETTI, A.J.; DELANEY, S.J., editors. Applied Veterinary Clinical Nutrition. Hoboken: Wiley- Blackwell, ed.1. p CLELAND, W. P. Nonsurgical periodontal therapy. Clinical Techniques in Small Animal Practice, Philadelphia, v. 15, n. 4, p ,

15 COLMERY, B. The gold standard of veterinary oral health care. The Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice, Philadelphia, v. 35, n. 4, p , COX, E. R.; LEPINE, A. J.; CAREY, D. P. Influencias nutricionales en la salud dental del perro. Revista de Medicina Veterinária, Buenos Aires, v. 83, p , COX, E. R.; LEPINE, A. J. Use of polyphosphates in canine diets to control tartar Journal of Dental Research, v. 81, n. 1, p. Trabalho apresentada no 80th GENERAL SESSION OF THE IADR, 80., 2002, San Diego, California. Abstracts DOMINGUES, L. M.; ALESSI, A. C.; SCHOKEN-ITURRINO, R. P.; DUTRA, L. S. Microbiota saprófita associada à doença periodontal em cães. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Belo Horizonte, v. 51, n. 4. p , EURIDES, D.; GONÇALVES, G. F.; MAZZANTI, A.; BUSO, A. M. Placa bacteriana dentária em cães. Ciência Rural, Santa Maria, v. 26, n. 3, p , es o de reabsor o den ria dos felinos spe os e iol i os e dia n s i o., n.63, pg.6-8, FENG, Z.; WEINBERG, A. Role of bacteria in health and disease of periodontal tissues. Periodontol. 2000, v. 40, p , FORD, R.B.;. MAZZAFERRO, E.M. emergencial segundo Kirk e Bistner. ed o aulo; Roca. pg , GAWOR, J. P.; REITER, A. M.; JODKOWSKA, K.; KURSKI, G.; WOJTACKI, M. P.; KUREK, A. Influence of diet on oral health in cats and dogs. Journal of Nutrition, v. 136, n. 7, p. 2021S-2023S, GIOSO, M. A. Odontologia veterinária para o clínico de pequenos animais. São Paulo: Ieditora, p GIOSO, M. A. Odontologia para o clínico de pequenos animais. 2. ed. São Paulo: Manole, p GIRARD, N.; SERVET, E.; BIOURGE, V.; HENNET, P. Periodontal health status in a colony of 109 cats. Journal of Veterinary Dentistry, v. 26, n. 3, p , GORREL, C. Veterinary dentistry for the general practitioner. Philadelphia: W.B. Saunders, p. 240, GORREL, C.; WAARRICK, J.; BIERER, T. L. Effect of a new hygiene chew on periodontal health in dogs. Journal of Veterinary Dentistry, v. 16, n. 2, p , HAJISHENGALLIS, G.; DARVEAU, R.P.; CURIS, M.A. The keystone-pathogen hypothesis. Nature Reviews Microbiology, vol. 10, p ,

16 HAMADA, N.; WATANABE, K. The egg yolk antibody against gingipains protects Porphyromonas gingivalis induced bone loss in rat. Veterinary Science Development vol.1, ed.2, p , HARDHAM, J.; DREIER, K.; SFINTESCU, C.; EVANS, R. T. Pigmentedanaerobic bacteria associated with canine periodontitis. Veterinary Microbiology, Amsterdam, v. 106, n. 1-2, p , HARVEY, C. E.; EMILY, P. P. Small animal dentistry. St. Louis: Mosby, p HENNET, P. Canine nutrition and oral health. In: PIBOT, P.; BIOURGE, V.; ELLIOTE, D. Encyclopedia of canine clinical nutrition. Paris: Difomedia, P HENNET, P.; SERVET, E.; SOULARD, Y.; BIOURGE, V. Effect of Pellet food size and polyphosphates in preventing calculus accumulation in dogs. Journal Veterinary Dendistry, v. 24, n. 4, p HENNET, P.; SERVET, E.; SOULARD, Y.; BIOURGE,V. Effects of a two kibbles size and two different phosphate salts in preventing calculus accumulation in dogs. In: EUROPEAN CONGRESS OF VETERINARY DENTISTRY, 14., 2005, Ljubljana. P g Ljubjana, HIRASAWA M, TAKADA K, MAKIMURA M, OTAKE S. Improvement of periodontal status by green tea catechin using a local delivery system: a clinical pilot study. Journal of Periodontal Research, v. 37 p , HO KY, TSAI CC, HUANG JS, CHEN CP, LIN TC, LIN CC. Antimicrobial activity of tannin components from Vaccinium vitis-idaea L. Journal of Pharmacy and Pharmacology, v. 53, p , IMAMURA, T. The Role of gingipains in the pathogenesis of periodontal disease. Journal of Periodontology, v. 74, n. 1, p , INABA H, TAGASHIRA M, KANDA T, OHNO T, KAWAI S, Amano A. Apple- and hoppolyphenols protect periodontal ligament cells stimulated with enamel matrix derivative from Porphyromonas gingivalis. Journal of Periodontology, v. 76, p , INABA H, TAGASHIRA M, HONMA D, KANDA T, KOU Y, OHTAKE Y, ET AL. Identification of hop polyphenolic components which inhibit prostaglandin E2 production by gingival epithelial cells stimulated with periodontal pathogen. Biological and Pharmaceutical Bulletin, v. 31, p527 30, INGHAM, K. E.; GORREL, C.; BIERER, T. L. Effect of a dental chew on substrates and gingivitis in cats. Journal Veterinary Dentistry, v. 19, n. 4, p ,

17 INGHAM, K. E.; GORREL, C.; BLACKBURN, J. M.; FARNSWORTH, W. Prevalence of odontoclastic resorptive lesions in a population of clinically healthy cat. Journal of Small Animal Practice, v. 42, p , ISOGIA, E.; ISAGOI, H.; KIMURA, K.; NISHIKAWA, T.; FUJI, N.; BENNO, Y. Effect of Japanese green tea extract on canine periodontal diseases. Microbial Ecology in Health and Disease, v. 8, p , JOHNSON, D.A. Changes in rat parotid salivary proteins associated with liquid diet-induced gland atrophy and isoproterenol-induced gland enlargement. Archives of Oral Biology, v.29, n.3, p ,1984. KESAVALU, L., BAKTHAVATCHALU, V., RAGMAN, M. M., SU, J., RAGHU, B., DAWSON, D., FERNANDES, G., EBERSOLE, J. L. Omega-3 fatty acid regulates inflammatory cytokine/mediator messenger RNA expression in Porphyromonas gingivalisinduced experimental periodontal disease. Oral Microbiol Immunol, n.22, p , KLEIN, T. Predisposing factors and gross examination findings in peridontal disease. Clinical Techniques in Small Animall Practice, v. 15, n. 4, p , KOLENBRANDER, P. E.; LONDON, J. Adhere today, here tomorrow: Oral bacterial adherence. Journal Bacteriology, v. 175, n. 11, p , KOWALESKY, J. Anatomia dental de cães (Canis familiaris) e gatos (Felis catus). Considerações cirúrgicas, f. Dissertação (Mestrado em Medicina Veterinária) - Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo, São Paulo, LAFLAMME, D. Development and validation of a body condition score system for cats: a clinical tool. Feline Practice, v. 25, n. 5/6, p , LARSSON, A.; CARLANDER, A. D. Oral immunotherapy with yolk antibodies to prevent infections in humans and animals. Upsala Journal of Medical Sciences, v.108, p , LEON, R.; SILVA, N.; OVALLE, A., CHAPARRO, A., AHUMADA, A.; GAJARDO, M.; MARTINEZ, M.; GAMONAL, J. Detection of Porphyromonas gingivalis in the amniotic fluid in pregnant women with a diagnosis of threatened premature labor. Journal Periodontol., v.78 p , LÖE, H. The gingival index, the plaque index and the retention index systems. Journal of Periodontology, v. 38, p ,

18 LOGAN, E. I.; BOYCE, E. N. Oral health assessment in dogs: study design and results. Journal of Veterinary Dentistry, v. 11, n. 2, p , LOMMER, M. J.; VERSTRAETE, F. J. M. Prevalence of odontoclastic resorption lesions and periapical radiographic lucencies in cats: 265 cases ( ). Journal of the American Veterinary Medical Association, v. 217, n. 12, p , LOVE, D. N.; VEKSELSTEIN, R.; COLLINGS, S. The obligate and facultatively anaerobic bacterial flora of the normal feline gingival margin. Veterinary Microbiology, v. 22, p , NADKARNI, M. A.; MARTIN, F. E.; JACQUES, N. A.; HUNTER, N. Determination of bacterial load by real-time PCR using a broad-range (universal) probe and primers set. Microbiology, v. 148, p , NRC - National Research Council. Nutrient Requirements of Dogs and Cats. Washington, DC: National Academy Press, NORRIS, J. M.; LOVE, D. N. The isolation and enumeration of three feline oral Porphyromonas species from subcutaneous abscesses in cats. Veterinary Microbiology, v. 65, n. 2, p , NORRIS, J. M.; LOVE, D. N. Associations amongst three feline Porphyromonas species from the gingival margin of cats during periodontalhealth and disease. Veterinary Microbiology, v. 65, n. 3, p , OBA, P. M. ; SANTOS, J.P.F. ; DEVITO, F.C. ; STIPP, R.N ; GOMES, M.O. ; CARCIOFI, A.C. ; BRUNETTO, M.A. Adição de IgY anti Porphyromonas gingivalis na dieta e saúde oral de gatos adultos VI Congresso Internacional e XIII Simpósio Sobre Nutrição de Animais de Estimação, Colégio Brasileiro de Nutrição Animal, PAIVA, A. C.; SAAD, F. M. O. B.; LEITE, C. A.; DUARTE, L. A.; PEREIRA, D. A. R.; JARDIM, C. A. C. Eficácia dos coadjuvantes de higiene bucal utilizados na alimentação de cães. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Belo Horizonte, v. 59, n. 5, p , PAQUETTE, D.W.; WATERS, G.S.; STEFANIDOU, V.L.; LAWRENCE, H.P.; FRIDEN, P.M.; O'CONNOR, S.M.; SPERATI, J.D.; OPPENHEIM, F.G.; HUTCHENS, L.H.; WILLIAMS, R.C nhibi ion of experimen al in ivi is in bea le do s wi h opi al salivary his a ins Journal of Clinical Periodontology, vol. 24, n. 4, p ,

19 PENMAN, S.; HARVEY, C. E. Manual of small dentistry. Chetenhan: British Small Animal Veterinary Association, p. 37. PINTO, A. B. F. Tripolifosfato de sódio e hexametafosfato de sódio na prevenção de odontólitos em cães f. Dissertação (Mestrado em Zootecnia) Curso de Pósgraduação em Zootecnia, Universidade Federal de Lavras. PINTO, A. B. F.; SAAD, F. M. O. B.; LEITE, C. A. L.; AQUINO, A. A.; ALVES, M. P.; D. A. R.; PEREIRA, D. A. R. Tripolifosfato de sódio e hexametafosfato de sódio na prevenção do cálculo dentário em cães. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 60, n. 6, p , RAMIRO, F. S. Alterações na prevalência de Porphyromonas gingivalis FimA II e IV em indivíduos com doença periodontal agressiva generalizada submetidos a terapia periodontal. In: JORNADA DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA, 9., 2010, Guarulhos, RAWLINGS, J. M.; GORREL, C.; MARKWELL, P. J. Effecct os two dietary regimens on gingivitis in the dog. Journal of Small Animal Practice, v. 38, p , REICHART, P. A.; DURR, U. M.; TRIADAN, H.; VICKENDEY, G. Periodontal disease in the domestic cat. A histopathologic study. Journal of Periodontology, v. 19, p , SAS Institute Inc., SAS Help and Documentation, Cary, NC: SAS Institute Inc., SCHADE, R.; ZHANG, X. Y.; TERZOLO, H. R. Use of IgY Antibodies in Human and Veterinary Medicine. [S.l]: Bioactive Egg Compounds, p SCOTT, J.; BERRY, M.R.; GUNN, D.L.; WOODS, K. The effects of a liquid diet on initial and sustained, stimulated parotid salivary secretion and on parotid structure in the rat. Archives of Oral Biology, v. 35, n.7, p , SOCRANSKY, S. S.; HAFFAIEE, A. D.; CUGINI, M. A.; SMITH, C.; KENT Jr. R. L. Microbial complexes in subgingival plaque. Journal of Clinical Periodontology, v. 25, n. 2, p , STOOKEY G. K.; WARRICK, J. M.; MILLER, L. L. Effect of sodium hexametaphosphate on dental calculus formation in dogs. American journal of veterinary research, v. 56, p , STOOKEY, G. K.; WARRIK, J. M.; MILLER, L. L.; MILLER, L.L.; KATZ, B.P. Hexametaphosphate-coated snacks biscuits significantly reduce calculus formation in dogs. Journal of Veterinary Dentistry, v. 13, p , SENHORINHO, G. N.; NAKANO, V.; LIU, C.; SONG, Y.; FINEGOLD, S. M.; AVILA- CAMPOS, M. J. Detection of Porphyromonas gulae from subgingival biofilms of dogs with 19

20 and without periodontitis. Anaerobe, v. 17, p , 2011 SOFIQUR, R. A. K. M.; IBRAHIM, E. M.; ISODA, R.; UMEDA, K.; NGUYEN, V. S.; KODAMA, K. Effect of passive immunization by anti-gingipain IgY on periodontal health of dogs. Veterinary Science Development.vol 1, ed.8, p , TELHADO, J.; MAGANIN JUNIOR, A.; DIELE, C. A.; MARINHO, M. S. Incidência de cálculo dentário e doença periodontal em cães da raça pastor alemão. Ciência Animal Brasileira, Rio de Janeiro, v. 5, n. 2, p , TEZUKA, A.; HAMAJIMA, S.; HATTA, H.; ABIKO, Y. Inibition of Porphyromonas gingivalis hemagglutinating activity by IgY against a truncated HagA. Jornal of Oral Science, v. 48, n. 4, p , TROMP, J. A.; VAN RIJIN, L. J.; JANSEN, J. Experimental gingivitis and frequency of toothbrushing in the beagle dog model: clinical findings. Journal of Clinical Periodontology, v. 13, p , 1986 TURESKY, S.; GILMORE, N. D.; GLICKMAN, I. Reduced plaque formation by Chloromethyl analogue of vitamin C. Journal of Periodontology, v. 41, p , VAN WESSUM, R.; HARVEY, C. E.; HENNET, P. Feline dental resorptive lesions. Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice, v. 22, p , YOKOYAMA, K.; SUGANO, N.; SHIMADA, T.; SHOFIQUR, R.A.; IBRAHIM, EL- S.M.; ISODA, R.; UMEDA, K.; SA, N.V.; KODAMA, Y.; ITO, K. Effects of egg yolk antibody against Porphyromonas gingivalis gingipains in periodontitis patients. Journal of Oral Science, v. 49, p , YOKOYAMA, K.; SUGANO, N.; RAHMAN, A. K. M. S.; OSHIKAWA, M.; ITO, K. Activity of anti-porphyromonas gingivalis egg yolk antibody against gingipains in vitro. Oral Microbiol Immunol, v. 22, p , WATSON, A. D. J. Diet and periodontal disease in dogs and cats. Australian Veterinary Journal, v. 71, p , WELSH, J. M. C.; CLELLAND, M. Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers. Nucleic Acids Research, v. 18, p , WIGGS, R. B.; LOBPRISE, H. B. Veterinary dentistry. Principles & pratice. Nova Iorque: Ed. Lippincott-Raven, p WONG, M. L.; MEDRANO, J. F. Real-time PCR for mrna quantitation. Biotechniques, v. 39, p ,