AULA PRÁTICA SOBRE CARIÓTIPO - Pg 1
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- Leila Molinari Anjos
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1 AULA PRÁTICA SOBRE CARIÓTIPO - Pg 1 Cada célula humana possui 46 cromossomos, que são iguais dois a dois, existindo na verdade 23 pares de cromossomos. Destes 23 pares, 22 são chamados de cromossomos autossômicos e são semelhantes no homem e na mulher, sendo designados por números de 1 a 22. Além destes cromossomos existem mais dois que são chamados cromossomos sexuais, e são designados pelas letras X e Y. A mulher tem dois cromossomos X e o homem um cromossomo X e um Y. Deste modo, podemos representar os cromossomos da célula de uma mulher por 46,XX, ou seja, 46 cromossomos sendo que dois deles são os cromossomos sexuais XX; e os cromossomos da célula de um homem por 46,XY, ou seja, 46 cromossomos os dois cromossomos sexuais X e Y. Todo o material genético das células é absolutamente indispensável para o seu funcionamento normal. Qualquer perda ou acréscimo deste material muda completamente o seu funcionamento. Por isto, em alguns casos, é importante fazer o estudo e a análise dos cromossomos a fim de verificar a presença de Aberrações Cromossômicas que possam ser utilizadas no diagnóstico de determinada síndrome. Os cromossomos só são visíveis ao microscópio comum durante uma determinada fase da divisão celular. Portanto, as células que serão analisadas precisam estar vivas e se multiplicando. No estudo dos cromossomos, geralmente utilizam-se células sanguíneas, porém, o uso de fibroblastos, células da medula óssea e da pele também é comum. É possível ainda a utilização de células obtidas antes mesmo do nascimento do indivíduo. Isto se dá por meio da amniocentese, que consiste na punção da parede uterina com uma agulha para obtenção do fluido amniótico, que é analisado para determinar o sexo do feto ou se ele possui alguma aberração cromossômica. Depois de colhidas, estas células são cultivadas em laboratório e preparadas para a análise de seus cromossomos. Na fase exata da divisão celular, as células são tratadas com colchicina, uma substância que bloqueia a formação dos microtúbulos do fuso, o que interrompe a divisão celular durante a metáfase. Os cromossomos nesta fase encontramse individualizados e no maior nível de condensação, podendo ser fotografados ao microscópio. Finalmente, a partir da fotomicrografia, cada cromossomo é recortado e alinhado com o seu homólogo em uma ordem decrescente de tamanho num arranjo denominado CARIÓTIPO. A classificação e a ordenação dos pares cromossômicos em cariótipo é facilitada pela
2 AULA PRÁTICA SOBRE CARIÓTIPO - Pg 2 determinação do índice centromérico, razão entre os comprimentos dos braços longos e curtos do cromossomo. Com base nesta razão, os cromossomos são classificados em metacêntricos, submetacêntricos, acrocêntricos e telocêntricos, conforme representado na Figura 1. Além disso, técnicas de bandamento cromossômico podem por exemplo, diferenciar regiões de hetero e eucromatina ao longo dos braços dos cromossomos, em um padrão comum aos dois homólogos, facilitando assim a correta identificação e o pareamento dos mesmos. Para a construção do cariótipo humano, os cromossomos além de receberem números ou letras, são separados de acordo com suas características em sete grupos conforme descrição a seguir: GRUPO A - Os seis maiores cromossomos. O par 1 é metacêntrico, o 2 é submetacêntrico e o par 3 é metacêntrico. GRUPO B - Pares 4 e 5, submetacêntricos. O tamanho de seus braços curtos equivale a 1/3 de seus braços longos. Os dois pares não são distinguíveis morfologicamente. GRUPO C - 15 cromossomos no Homem e 16 na mulher. O cromossomo X pertence a este grupo. É impossível a identificação individual dos cromossomos pela análise morfológica. Devem ser distribuídos em ordem decrescente de tamanho. GRUPO D - Pares 13,14 e 15. São acrocêntricos, de tamanho médio com satélites nem sempre visíveis nos braços curtos. Não são distinguíveis entre si pela análise morfológica. GRUPO E - 3 pares de cromossomos. O par 16 é metacêntrico. Os pares 17 e 18 são submetacêntricos. O par 17 tem braços curtos ligeiramente maiores que os do par 18. GRUPO F - Pares 19 e 20, os menores metacêntricos. Identificação individual impossível pela análise morfológica. GRUPO G - 4 cromossomos na mulher e 5 no homem devido à presença do
3 AULA PRÁTICA SOBRE CARIÓTIPO - Pg 3 cromossomo Y. Os pares 21, 22 e o Y são os menores acrocêntricos. Os pares 21 e 22 apresentam satélites nem sempre visíveis nos braços curtos. Não é possível a distinção destes dois pares. O Y é identificável em muitos casos, pela posição paralela dos braços longos, pela ausência de satélites e localização preferencial na periferia da placa metafásica. A Figura 2 representa um cariótipo com a distribuição dos pares de autossomos homólogos conforme descrito anteriormente e que pode ser utilizado como referência para as atividades práticas propostas a seguir. Observe que foram omitidos os cromossomos sexuais neste cariótipo. 2.1 Atividade Prática 1. Escolha uma dentre as quatro metáfases obtidas do sangue de diferentes pacientes (denominados A, B, C e D) e com o auxílio de tesoura e cola, recorte os cromossomos, identifique os pares homólogos e monte o cariótipo utilizando o formulário apresentado no final deste roteiro. OBS: Para a montagem do cariótipo é importante seguir as normas de organização descritas na introdução teórica. Caso seja necessário, pode-se consultar o livro texto. 2. Com base no número e distribuição dos cromossomos no cariótipo obtido, determine o sexo do paciente e, consultando a literatura, identifique a presença de aberração cromossômica e diagnostique a síndrome apresentada pelo paciente examinado. 3. Com base em sua pesquisa bibliográfica, faça uma descrição das características da doença ou síndrome apresentada pelo paciente em questão.
4 4 PACIENTE A PACIENTE B
5 5 PACIENTE C PACIENTE D
6 6 FORMULÁRIO PARA MONTAGEM DO CARIÓTIPO NOME: TURMA: PACIENTE ESCOLHIDO: A ( ) B ( ) C ( ) D ( ) SEXO DO PACIENTE: MASCULINO ( ) FEMININO ( ) DIAGNÓSTICO DO PACIENTE: Grupo A Grupo B Grupo C Grupo C (cont.) Grupo D Grupo E Grupo F Grupo G
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