Comunicado Técnico. Predição do Teor de Carbono Total em Solos de Áreas Experimentais de Integração Lavoura- Pecuária por Meio da Espectroscopia NIR
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1 Comunicado Técnico 201 ISSN Sete Lagoas, MG Dezembro, 2012 Foto: Marina Torres Pessoa Predição do Teor de Carbono Total em Solos de Áreas Experimentais de Integração Lavoura- Pecuária por Meio da Espectroscopia NIR Miguel Marques Gontijo Neto 1 Maria Lúcia Ferreira Simeone 2 Cristiane de Carvalho Guimarães 3 Hosana Maria Andrade 4 Luciano Rodrigues Queiroz 5 Eduardo de Paula Simão 6 Introdução Um dos recursos naturais fundamentais para a sustentabilidade da produção de alimentos é o solo, pois neste estão armazenados todos os nutrientes necessários ao desenvolvimento das plantas. Além desta função, o solo é o maior reservatório de carbono da superfície terrestre, o que ressalta ainda mais a sua importância no contexto das mudanças climáticas globais. Atualmente, o governo tem incentivado a organização de políticas públicas que fomentem projetos agropecuários onde as técnicas de produção utilizadas favoreçam o sequestro de carbono no solo, de modo a reduzir a emissão de gases de efeito estufa que atualmente compõem os inventários nacionais. Para estimular a adoção dessa prática, em 2010 o governo federal implementou o Programa Agricultura de Baixo Carbono (Plano ABC), que tem como diretrizes, entre outras, o plantio direto na palha, que dispensa o revolvimento do solo e evita a erosão com a semeadura direta na palha da cultura anterior; a recuperação de pastos degradados, transformando terras desgastadas em áreas produtivas para a produção de alimentos, fibras, carne e florestas; e a integração Lavoura- Pecuária-Floresta, com alternância de pastagem com agricultura e floresta em uma mesma área. Nesse contexto, uma das grandes demandas da pesquisa nesse tema é realizar a determinação de carbono total no solo para verificar se houve acúmulo de carbono e, em caso afirmativo, quanto foi o adicional do acúmulo de carbono no período avaliado. Métodos de análises convencionais de carbono do solo como combustão por via seca (NELSON; SOMMERS, 1996) demandam tempo, possuem baixa frequência analítica e ainda necessitam de equipamentos que exigem altos investimentos iniciais. As técnicas químicas secas referemse à quantificação do carbono total presente na amostra e podem ser divididas em duas fases: combustão da amostra e quantificação da amostra. A técnica de combustão da amostra consiste na queima em fornos a 1 Eng.-Agr., D.Sc. em Forragicultura e Pastagem, Pesquisador da Embrapa Milho e Sorgo, Sete Lagoas, MG, miguel.gontijo@embrapa.br 2 Química, D.Sc. em Química Orgânica, Pesquisadora da Embrapa Milho e Sorgo, Sete Lagoas, MG, marialucia.simeone@embrapa.br 3 Química, M.Sc. em Departamento de Química, Analista da Embrapa Milho e Sorgo, Sete Lagoas, MG, cristiane.guimaraes@embrapa.br 4 Graduanda em Química pela UFJF, Assistente da Embrapa Milho e Sorgo, Sete Lagoas, MG, hosana.andrade@embrapa.br 5 Eng.-Agr., Bolsista pós-doutor CAPES- PNPD/Embrapa Milho e Sorgo, lrodqueiroz@yahoo.com.br 6 Estudante de Engenharia Agronômica pela FEAD-BH, Bolsista Embrapa. eduardosimao.agro@yahoo.com.br
2 2 Predição do Teor de Carbono Total em Solos de Áreas Experimentais de Integração Lavoura-Pecuária por Meio da Espectroscopia NIR elevadas temperaturas. O produto final da combustão é o CO 2 que é quantificado, como, por exemplo, por espectrofotometria ou técnicas de cromatografia gasosa. Portanto, torna-se importante desenvolver métodos rápidos, fáceis, de baixo custo e alta acurácia e precisão para a determinação de carbono total em solos. Uma técnica espectroscópica que vem ganhando importância na análise de solos e que é bastante utilizada para a realização da análise de alimentos é a espectroscopia no infravermelho próximo (NIR). Essa técnica tem sido aplicada em recentes estudos quantitativos de diferentes propriedades dos solos (CHANG et al., 2001; COZZOLINO; MÓRON, 2006; MADARI et al., 2006, VENDRAME et al., 2012) e vem substituindo as técnicas de análise química por via úmida em função não apenas de sua praticidade e acuracidade, mas também por requerer mínima preparação das amostras, rapidez na obtenção dos resultados, não necessitar de reagentes e por não destruir a amostra quando analisada. A espectroscopia NIR, quando usada em conjunto com dados de análises multivariadas, tem se apresentado como uma alternativa para a predição do teor de carbono total no solo. Os resultados são obtidos de forma rápida e com um custo acessível para os projetos que demandam a realização de um grande número de análises nas várias épocas do ano. O objetivo desse trabalho foi desenvolver um modelo de calibração multivariada para a predição do teor de carbono total em solos de uma área de pesquisa de experimento de longo prazo avaliando diferentes sequências de culturas em sistemas de integração Lavoura- Pecuária. Materiais e Métodos Preparo das amostras de solos e análise do teor de carbono total Em uma área de 3 ha localizada na Embrapa Milho e Sorgo, município de Sete Lagoas- MG, foram alocadas 57 parcelas experimentais de 120 m 2 (10 x 12 m) onde foram distribuídos tratamentos avaliando diferentes sequências de rotação e consorciação de culturas (soja, milho e pastagem de braquiária Piatã). O solo da área foi classificado como Latossolo Vermelho Escuro, textura argilosa. O ensaio foi implantado na safra 2010/11 e a coleta das amostras do solo utilizadas neste trabalho foi realizada em jun/2012. Nas parcelas experimentais foram abertas trincheiras com 50 cm de profundidade e coletadas, em anéis volumétricos de 100 cm 3, amostras nas profundidades de 0-10, e cm. Entre as amostras coletadas foram selecionadas 108 amostras representativas dos tratamentos e das profundidades de amostragem para a realização das análises do teor de carbono total (CT) e posterior utilização em espectroscopia NIR (combustão via seca). As amostras de solos selecionadas foram secas em estufa a 105 ºC e o teor de CT foi determinado por combustão total (CUNNIFF, 1997) utilizando o equipamento Analytika Jena, modelo EA4000 (Analytika Jena, Jena, Germany), com carbonato de cálcio P.A. como padrão. O método tem por base a combustão total do carbono presente na amostra em câmara cerâmica, na presença de oxigênio 99,9995% e temperatura em torno de ºC durante, aproximadamente, dois minutos. A partir da combustão da amostra, o fluxo de CO 2 resultante é medido através de um detector de infravermelho, que identifica a queima completa da amostra e informa o teor de carbono total, em valores percentuais. Análise das amostras de solos por espectroscopia no infravermelho próximo As amostras de solos foram trituradas em graal até a passagem em peneira de 80 mesh (0,177 mm) e seus espectros obtidos em equipamento BUCHI, modelo NIRFlex 500 (BUCHI) equipado com detector de InGaAs, utilizando como portaamostra uma placa de Petri de vidro borossilicato. O equipamento foi calibrado usando o padrão Spectralon. Os espectros das amostras de solos foram obtidos em triplicata, na região nm (4.000 a cm -1 ), com resolução de 8 cm -1 e 32 varreduras por espectro. Os valores de CT obtidos pelo método de combustão seca foram utilizados para desenvolver o modelo de calibração multivariada. Nesse processo utilizou-se o software Unscrambler versão 10.2, (CAMO PROCESS AS, OSLO, NORWAY). As amostras foram dividas em dois conjuntos: 72 para calibração e 36 para validação externa, após análise exploratória (PCA). Como pré-tratamento dos espectros, estes foram
3 Predição do Teor de Carbono Total em Solos de Áreas Experimentais de Integração Lavoura-Pecuária por Meio da Espectroscopia NIR 3 convertidos em logaritmo (log 10 = 1/R, sendo R o valor obtido para cada comprimento de onda), centrados na média. Em seguida aplicou-se o modelo de calibração multivariada por mínimos quadrados parciais (PLS). Os indicadores estatísticos utilizados para estimar a qualidade dos modelos foram: RMSEC, RMSECV, RMSEP, SEP, BIAS e R 2. Resultados e Discussão Os resultados obtidos para o teor de carbono total utilizando o método de combustão seca variaram entre 1,66 a 4,24%, com valores médios de 2,93%, cujos valores representaram a faixa de amostragem para o desenvolvimento do modelo de calibração multivariada. É importante ressaltar que a área estudada apresenta homogeneidade da textura do solo, sendo esta um fator crítico para o sucesso no desenvolvimento de modelos de calibração NIR, conforme estudo apresentado por Madari et al. (2006) e Vendrame et al. (2012). A sensibilidade do método de referência foi avaliada pela análise de uma amostra controle repetida 5 vezes, obtendo-se desvio padrão 0,06 e CV 0,02%. As amostras de solo foram secas em estufa a 105 ºC antes da realização das análises de combustão total e obtenção dos espectros NIR, para remover o efeito da umidade nos espectros de refletância. De acordo com o trabalho de Minasny et al. (2011), a diminuição da umidade melhora a qualidade das correlações quimiométricas para a determinação de carbono em solos. A Figura 1 apresenta os espectros NIR das amostras de solos sem pré-processamento. A calibração multivariada foi desenvolvida utilizando-se o método PLS e validação cruzada. A escolha do número de variáveis latentes foi feita por meio da resposta de maior variância e o menor valor de RMSECV. Os escores e o peso de cada modelo também foram avaliados, sendo que o melhor resultado foi encontrado com 6 variáveis latentes. Pode-se observar que o modelo PLS (Figura 2) apresentou as amostras distribuídas de forma aleatória em torno da reta linear, indicando ser adequado aos dados. 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 C1 C33 C70 C112 C159 C206 C253 C300 C347 C394 C441 C487 C534 C581 C628 C675 C722 C769 C816 C862 C909 C956 C1008 C1064 C1120 C1177 C1233 C1289 C1345 C1402 C1458 Figura 1. Espectros NIR de 108 amostras de Latossolo Vermelho Escuro, textura argilosa, de tratamentos avaliando diferentes sequências de rotação e consorciação de culturas (soja, milho e pastagem de braquiária Piatã), em Sete Lagoas, MG.
4 4 Predição do Teor de Carbono Total em Solos de Áreas Experimentais de Integração Lavoura-Pecuária por Meio da Espectroscopia NIR Predicted Y (CT, Factor-6) Figura 2. Gráfico de calibração e validação cruzada dos teores de carbono total (CT) pelo método de referência e teores estimados pelo modelo ajustado para as amostras de solo. Na Tabela 1, pode-se observar os parâmetros de qualidade obtidos na calibração e validação cruzada utilizando o modelo PLS. O coeficiente de determinação (R 2 ) obtido foi 0,9508 indicando que o modelo possui alta correlação entre os dados preditos e de referência. valores são muito próximos para as duas, mostrando a eficiência do emprego da técnica de espectroscopia no infravermelho próximo para a determinação de CT no solo. Tabela 1. Parâmetros de qualidade do modelo de calibração para amostras de solo. Parâmetro RMSEC R 2 RMSECV R 2 CT 0,1354 0,9508 0,1802 0,9159 Pela Tabela 2, verifica-se que o valor de RMSEP foi muito próximo do valor encontrado para o RMSEC do modelo de calibração, demonstrando que o modelo é robusto para o parâmetro carbono total no solo. A sensibilidade do método NIR foi avaliada pela análise de uma amostra aleatória repetida 5 vezes, obtendo-se desvio padrão 0,07 e CV 0,03%. Tabela 2. Parâmetros de qualidade da validação externa (previsão) O resultado obtido situa-se dentro das faixas reportadas em outros trabalhos descritos na literatura (COZZOLINO; MÓRON, 2006; VELASQUEZ et al., 2006; ZORNOZA et al., 2008; FERNANDES, et al., 2010; MINASNY et al., 2011). Parâmetro RMSEP R 2 SEP BIAS CT 0,1615 0,9166 0,1732 0,0138 Ao comparar as técnicas de referência e NIR, pode-se observar que a técnica de referência apresentou SD 0,06 e CV 0,02% e a técnica NIR apresentou SD 0,07 e CV 0,03%. Estes Conclusões O modelo de calibração multivariada NIR obtido para a análise do teor de carbono total no
5 Predição do Teor de Carbono Total em Solos de Áreas Experimentais de Integração Lavoura-Pecuária por Meio da Espectroscopia NIR 5 solo foi considerado adequado, podendo ser adotado como método de rotina de análise, em substituição ao método de combustão seca para as amostras de solo oriundas do ensaio de longa duração de avaliação de sistemas de integração Lavoura-Pecuária-Floresta. A análise de carbono total utilizando a técnica de espectroscopia NIR permite que um maior número de amostras possa ser analisado a um custo menor quando comparada ao método de combustão seca, possibilitando que a área experimental possa ser monitorada com maior número de repetições por parcelas e/ou frequência. Agradecimentos Os autores agradecem à CAPES pela bolsa do Programa Nacional de Pós-Doutorado (PNPD) e pelo financiamento parcial do projeto. Lista de Abreviaturas e Siglas BIAS Erro sistemático CV Coeficiente de variação NIR - Espectroscopia no Infravermelho Próximo (do inglês, Near Infrared Spectroscopy) PCA Análise de Componentes Principais (do inglês, Principal Component) PLS Mínimos Quadrados Parciais (do inglês, Partial Least Squares) R 2 Coeficiente de determinação RMSEC Raiz Quadrada do Erro Médio Quadrático de Calibração (do inglês, Root Mean Square Error of Calibration) RMSECV - Raiz Quadrada do Erro Médio Quadrático de Validação Cruzada(do inglês, Root Mean Square Error of Cross Validation) RMSEP - Raiz Quadrada do Erro Médio Quadrático de Previsão (do inglês, Root Mean Square Error of Prediction) SEP Erro Padrão de Predição (do inglês, Standard Error of Prediction) SD Desvio Padrão (do inglês, Standard Deviation) Referências CHANG, C. W.; LAIRD, D. A.; MAUSBACH, M. J.; HURBURGH JR, C. R. Near-infrared reflectance spectroscopy: principal components regression analyses of soil properties. Soil Science Society of America Journal, Madison, v. 65, p , COZZOLINO, D.; MÓRON, A. Potential of nearinfrared reflectance spectroscopy and chemometrics to predict soil organic carbon fractions. Soil and Tillage Research, Amsterdam, v. 85, p , CUNNIFF, P. Microchemical determination of carbon, hydrogen, and nitrogen, automated method. In: CUNNIFF, P. Official methods of analysis of AOAC international. 16. ed. Gaithersburg: AOAC International, cap. 12, p FERNANDES, F. A.; FERNANDES, A. H. B. M.; BUENO SOBRINHO, A. A.; MONTEIRO, H. de C.; SILVA, A. C. G. e. Uso de espectrometria de refletância no infravermelho próximo (NIRS) na análise de carbono de Neossolos do Pantanal. Corumbá: Embrapa Pantanal, p. (Embrapa Pantanal. Comunicado Técnico, 86). Disponível em: < download.php?arq_pdf=cot86>. Acesso em: 31 dez MADARI, B. E.; REEVES, J. B. III; MACHADO, P. L. O. A.; GUIMARÃES, C. M.; TORRES, E.; McCARTY, G.W. Mid- and nearinfrared spectroscopic assessment of soil compositional parameters and structural indices in two Ferralsols. Geoderma, Amsterdam, v. 136, n. 1/2, p , Dec NELSON, D. W.; SOMMERS, L. E. Total carbon, organic carbon, and organic matter. In: SPARKS, D. L.; PAGE, A. L.; HELMIKE, P. A.; LOEPPERT, R. H.; SOFTANPOUR, P. N.; TABATABAI, M. A.; JOHNSTON, C. T.; SUMMER, M. E. (Ed.). Methods of soil analysis. Madison: Soil Science Society of America, v. 3, p MINASNY, B.; McBRATNEY, A. B.; MAUREL, V. B.; ROGER, J. M.; GOBRECHT, A.; FERRAND, L.; JOALLAND, S. Removing the effect of soil
6 6 Predição do Teor de Carbono Total em Solos de Áreas Experimentais de Integração Lavoura-Pecuária por Meio da Espectroscopia NIR moisture from NIR diffuse reflectance spectra for the prediction of soil organic carbon. Geoderma, Amsterdam, v , p , VELASQUEZ, E.; LAVELLE, P.; BARRIOS, E.; JOFFRE, R.; REVERSAT, F. Evaluating soil quality in tropical agroecosystems of Colombia using NIRS. Soil Biology and Biochemistry, Oxford, v. 37, p , VENDRAME, P. R. S.; MARCHÃO, R. L.; BRUNET, D.; BECQUER, T. The potential of NIR spectroscopy to predict soil texture and mineralogy in Cerrado Latosols. European Journal of Soil Science, Oxford, v. 63, p , ZORNOZA, R.; GUERRERO, C.; MATAIX- SOLERA, J.; SCOW, K. M.; ARCENEGUI, V.; MATAIX-BENEYTO, J. Near infrared spectroscopy for determination of various physical, chemical ands biochemical properties in Mediterranean soils. Soil Biology and Biochemistry, Oxford, v. 40, p , Comunicado Técnico, 201 Exemplares desta edição podem ser adquiridos na: Embrapa Milho e Sorgo Endereço: Rod. MG 424 km 45 Caixa Postal 151 CEP Sete Lagoas, MG Fone: (31) Fax: (31) sac@cnpms.embrapa.br 1 a edição 1 a impressão (2012): on line Comitê de publicações Expediente Presidente: Presidente: Sidney Netto Parentoni. Secretário-Executivo: Elena Charlotte Landau. Membros: Flávia Cristina dos Santos Flávio Dessaune Tardin, Eliane Aparecida Gomes, Paulo Afonso Viana, Guilherme Ferreira Viana e Rosângela Lacerda de Castro. Revisão de texto: Antonio Claudio da Silva Barros. Normalização bibliográfica: Rosângela Lacerda de Castro. Tratamento das ilustrações: Tânia Mara A. Barbosa. Editoração eletrônica: Tânia Mara A. Barbosa.
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