EFEITO ANTIFÚNGICO DE ÓLEO ESSENCIAL DE FOLHAS E SEMENTES DE JAMBOLÃO (Syzygium cumini)

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1 EFEITO ANTIFÚNGICO DE ÓLEO ESSENCIAL DE FOLHAS E SEMENTES DE JAMBOLÃO (Syzygium cumini) C. D. L. Ucker¹, E. J. Dierings², N. R. Carvalho³, C. D. Borges 4, F. N. Victoria 5, E. A. Gandra Programa de Pós-graduação em Nutrição e Alimentos - Universidade Federal de Pelotas, Faculdade de Nutrição, Campus Porto, rua Gomes Carneiro, nº 1- CEP: Pelotas RS Brasil, Telefone: (53) carlaucker@hotmail.com. 2 Programa de Pós-graduação em Ciência e Tecnologia de Alimentos Universidade Federal de Pelotas, Campus Capão do Leão, Campus Universitário, S/N CEP: Capão do Leão RS Brasil, Telefone: (53) estefaniajulia.dierings@gmail.com. 3 - Curso Bacharelado em Química de Alimentos Universidade Federal de Pelotas, Campus Capão do Leão, Campus Universitário, S/N CEP: Capão do Leão RS Brasil, Telefone: (53) e- mail: naty_pel@yahoo.com.br. 4 - Curso Bacharelado em Química de Alimentos Universidade Federal de Pelotas, Campus Capão do Leão, Campus Universitário, S/N CEP: Capão do Leão RS Brasil, Telefone: (53) e- mail: caroldellin@hotmail.com 5 - Curso Bacharelado em Química de Alimentos Universidade Federal de Pelotas, Campus Capão do Leão, Campus Universitário, S/N CEP: Capão do Leão RS Brasil, Telefone: (53) e- mail: francinevictoria@yahoo.com.br 6 - Programa de Pós Graduação em Nutrição e Alimentos Universidade Federal de Pelotas, Campus Porto, rua Gomes Carneiro, nº 1- CEP: Pelotas RS Brasil, Telefone: (53) gandraea@hotmail.com RESUMO O Jambolão (Syzygium cumini) é um fruto carnoso tipo baga, em formato oval, alcançando de 3 a 4 centímetros de comprimento e 2 centímetros de diâmetro. Possui diversos aproveitamentos, entre eles o óleo essencial proveniente das sementes e das folhas pode ser obtido e utilizado por apresentarem efeitos tais como antibacteriano e antifúngico. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi verificar o efeito antifúngico do óleo essencial das folhas e sementes de jambolão. Para isso foi utilizada a técnica de difusão em ágar e foram utilizadas cepas de fungos Trichoderma spp e Rizophus spp. Verificou-se a formação de halos menores que 10 mm, o que significa que o óleo possui uma fraca inibição, porém a presença de halos demonstra que os óleos de folhas e sementes de jambolão possuem potencial antifúngico. ABSTRACT The jambolan (Syzygium cumini) is a fleshy fruit like berry, oval-shaped, reaching 3 to 4 cm long and 2 cm in diameter. It has many utilizations, including the essential oil from the seeds and leaves can be obtained and used for having effects such as an antibacterial and antifungal. Thus, the aim of this study is to test the antifungal effect of essential oils from leaves and seeds jambolan. For this we used the diffusion technique in agar and fungal strains were used Trichoderma spp and Rizophus spp. It is the formation of smaller halos than 10 mm, which means that the oil has a weak inhibition, however the presence of halos show that the sheet oils and jambolan seeds have antifungal potential. PALAVRAS-CHAVE: jambolão; óleo essencial; antifúngico. KEYWORDS: jambolan; essential oil; antifungal.

2 1.INTRODUÇÃO O Jambolão (Syzygium cumini) é um fruto carnoso tipo baga, em formato oval, alcançando de 3 a 4 centímetros de comprimento e 2 centímetros de diâmetro. É oriundo de uma árvore que pode chegar até 10 metros de altura com uma copa que alcança de 3 a 4,5 metros de largura, possuindo uma folhagem farta, ramos cor acinzentada-claro e caule reto tipo lenhoso (MIGLIATO, et al, 2006). É também conhecido no Brasil como ameixa-roxa, azeitona-do-nordeste, guapê, jalão, jambuí e jamelão (BRASIL, 2015), pertence a família Myrtaceae e é originário da Índia (MORTON, 1987). Possui diversos aproveitamentos, além de seus frutos poderem ser consumidos, a madeira da árvore pode ser utilizada comercialmente, e o óleo essencial proveniente das sementes e das folhas pode ser obtido e utilizado por apresentarem efeitos, tais como, antioxidante, hipoglicemiante, antialérgico, anti-inflamatório, antiviral, antibacteriano e antifúngico (CARVALHO, 2013). Os óleos essenciais são compostos naturais, complexos e voláteis, sendo sua principal característica o odor intenso que possuem. A principal forma de obter óleo essencial é através do processo de hidrodestilação (BAKKALI et al., 2006). Podem ser obtidos de folhas, flores e frutos, podendo ter várias aplicações em medicamentos e alimentos (SILVA-SANTOS, 2006). Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi verificar o efeito antifúngico do óleo essencial das folhas e sementes de jambolão. 2. MATERIAL E MÉTODOS Para a obtenção do óleo essencial das folhas primeiramente estas foram maceradas utilizando nitrogênio líquido com o auxílio de grau e pistilo, em seguida foi utilizada a técnica de hidrodestilação usando o equipamento clevenger, obtendo assim o óleo essencial. Já as sementes foram maceradas utilizando nitrogênio líquido em moinho de bolas, após esse processo procedeu-se a hidrodestilação em clevenger, obtendo óleo essencial das sementes. Para verificar se o óleo essencial de folhas e sementes de jambolão possui efeito antifúngico, foi utilizada a técnica de difusão em ágar, para isso foi necessário preparar meios de cultura ágar potato dextrose (BDA) e Brain Heart Infusion (BHI). O teste de difusão em ágar foi realizado conforme metodologias descritas por Gurgel et al. (2005) e Fontenelle et al. (2007). Foram utilizadas cepas de Trichoderma spp. e Rizophus spp. Primeiramente as culturas dos fungos (que estavam em tubos com ágar inclinado) separadamente foram estriadas com auxílio de uma alça na superfície de placas de petri contendo 22 ml de ágar dextrose batata e incubadas a 25º C por 5 dias. Esta etapa foi realizada usando três placas para cada fungo (triplicata). Após esse período de cinco dias de incubação, os cultivos fúngicos foram cobertos com 2 ml de solução salina estéril (foi usada pipeta para transferir a solução salina dos tubos para a superfície das placas) e com auxílio de alça microbiológica, foram realizadas raspagens da superfície de cada cultura, a fim de obter uma suspensão livre de fragmentos do meio de cultura. As suspensões foram transferidas com auxílio de micropipeta para tubos de ensaio estéreis vazios e, em seguida, deixados em repouso a 28 C por 5 minutos. O sobrenadante destas suspensões foi padronizado através de uma comparação com a escala de MCFarland, para isso o inóculo foi padronizado em concentração 0,5 na escala de McFarland (que equivale 1,5 x 10 8 UFC.ml -1 ) usando comparação visual e diluição com solução salina estéril. Após essa etapa, deu-se início a técnica de difusão em ágar. Em paralelo os óleos essenciais foram submetidos a teste para certificação da qualidade através da adição de 10 µl do óleo essencial em 2 ml de caldo BHI e incubado por 24 horas a 28 e 37º C para verificar se houve crescimento microbiano, o qual não foi observado em nenhuma das amostras. Cada inóculo fúngico padronizado presente nos tubos de ensaio foi estriado com o auxílio de um swab estéril na superfície placas de Petri contendo 22 ml de ágar dextrose batata (BDA) estéril (3

3 para cada cultura fúngica triplicata). Quatro pequenos poços eqüidistantes (diâmetro 6 mm) foram feitos no centro da placa, para isso flambou-se um instrumento de metal para fazer os furos e 60 µl do dos óleos essenciais foram adicionados aos poços. As placas foram incubadas a 28 C e as leituras foram feitas após 3, 5 e 8 dias de incubação. O diâmetro da zona de inibição do crescimento ao redor do poço foi medido em milímetros com uso de régua e registrado nas quatro direções radiais diferentes. Como controle foi utilizado solução salina estéril. 3. RESULTADOS E DISCUSSÃO Verificou-se a formação de halos quando utilizado óleo essencial de folhas e sementes de jambolão para Trichoderma spp. conforme Tabela 1 abaixo. Tabela 1. Atividade antifúngica dos óleos de folha e semente de jambolão (Syzygium cumini) frente a Trichoderma spp. Óleos Essenciais Halo de inibição (mm) 1ª Leitura 2ª Leitura 3ª Leitura 8,50 6,50 3,25 Folhas 5,00 4,25 2,50 6,50 3,00 2,50 2,00 1,00 0,75 Sementes 0,00 0,00 0,00 4,75 4,25 3,00 Fonte: Próprio autor (2016). Para Rizhopus spp. houve formação de halos conforme Tabela 2 abaixo.

4 Tabela 2. Atividade antifúngica dos óleos de folha e semente de jambolão (Syzygium cumini) frente a Rizhopus spp. Halo de inibição (mm) Óleos 1ª Leitura 2ª Leitura 3ª Leitura Essenciais 5,75 3,75 2,75 Folhas 1,75 1,12 1,50 6,50 4,50 2,50 0,00 0,00 0,00 Sementes 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Fonte: Próprio autor (2016). Pode se verificar nas tabelas que os tamanhos dos halos nas triplicatas foram inferiores a 10 mm, para ser considerada uma atividade antifúngica satisfatória, os halos devem ser maiores ou iguais a 10 mm (Portilho et al, 2013), dessa forma a atividade dos óleos essenciais de jambolão pode ser considerada fraca em relação aos fungos testados. Garcia et al (2012) também verificaram que o extrato aquoso de folhas de jambolão apresentou uma baixa inibição do crescimento micelial de Sclerotinia sclerotiorum, sendo abaixo de 20%. Já Cartaxo-Furtado et al (2015) observaram que o extrato etanólico da casca da árvore de jambolão foi um forte inibidor do crescimento de Candida albicans. 4. CONCLUSÃO Os óleos essenciais de folhas e sementes apresentaram halos de inibição inferiores a 10 mm, sendo assim considerada uma fraca inibição, porém a presença de halos demonstra que estes possuem potencial antifúngico. 5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS Bakkali, F., Averbeck, S., Averbeck, D., Idaomar, M. (2006). Biological Effects of Essential oils Review. Food and Chemical Toxicology, 46, BRASIL, Ministério da Saúde. (2015). Alimentos Regionais Brasileiros (2. ed.). Brasília: Ministério da Saúde. Cartaxo-Furtado, N.A.D.E.O.; Sampaio, T.O.; Xavier, M.A.; Medeiros, A.D.D.E.; Pereira, J.V. (2015). Perfil fitoquímico e determinação da atividade antimicrobiana de Syzygium cumini (L.) Skeels (Myrtaceae) frente a microrganismos bucais. Revista Brasileira de Plantas Medicinais, 17 (4), Carvalho, C. R. D. (2013). Relação entre Parâmetros Ecofisiológicos e a Produção de Óleo Essencial em Espécies Arbóreas (Dissertação de Mestrado). Universidade Federal de Sergipe, Sergipe. Fontenelle, R. O. S., Morais, S. M., Brito, E. H.S., Brilhante, R. S. N., Cordeiro, R. A., Nascimento, N. R. F., Kerntopf, M. R., Sidrim, J. J. C., Rocha, M.F.G. (2007). Antifungal activity of essential oils Croton species from the Brazilian Caatinga biome. Journal of Applied Microbiology, 104 (5),

5 Garcia, R. A., Juliatti, F. C., Barbosa, K. A. G., Cassemiro, T. A. (2012). Atividade Antifúngica de Óleo e Extratos Vegetais Sobre Sclerotinia sclerotiorum. Bioscience Journal, 28 (1), Gurgel, L.A., Sidrim, J.J.C., Martins, D.T., Cechinel-Filho, V., Rao, V.S. (2005). In vitro antifungal activity of dragon s blood from Croton urucurana against dermatophytes. Journal Ethnopharmacol, 97, Migliato, K. F., Baby, A. R., Zague, V., Velasco, M. V. R., Corrêa, M. A., Sacramento, L. V. S., Salgado, H. R. N. (2006). Ação Farmacológica de Syzygium cumini (L.) Skeels. Acta Farm. Bonaerense, 25, Morton, J. F. (1987). Fruits of warm climates. Miami: Universidade de Michigan. Portilho, D. R., Melo, I. A., Guerra, R. C., Batista, H. L., Fernandes, C. H. C. (2013). Avaliação da Atividade Antibacteriana e Antifúngica da Própolis Produzida no Estado do Tocantins. Revista Científica do ITPAC, 6 (2). Silva-Santos, A., Antunes, A. M. S.; Bizzo, H. R.; D Avila, L. A. (2006). Análise Técnica, Econômica e de Tendências da Indústria Brasileira de Óleos Essenciais. Revista Brasileira Plantas Medicinais Papel Virtual, 8 (14).