DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MOLECULAR

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Antônio Conceição Affonso
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1 FACULDADE DE MEDICINA DE SÃO JOSÉ DO RIO PRETO AUTARQUIA ESTADUAL LEI Nº 8899 de 27/09/94 (Reconhecida pelo Decreto Federal nº de 14/06/74) Av. Brigadeiro Faria Lima, 5416 CEP Fone: São José do Rio Preto São Paulo Brasil Curso de MEDICINA DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Disciplinas de BIOLOGIA CELULAR e HISTOLOGIA Professor Responsável: PROF. DR. JÚLIO CÉSAR ANDRÉ Docentes: PROFA. DRA. ANA CLÁUDIA POLLI LOPES PROF. DR. JÚLIO CÉSAR ANDRÉ FAMERP: Medicina

5700 São José do Rio Preto São Paulo Brasil Curso de MEDICINA DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Disciplinas de BIOLOGIA

2 ROTEIRO PARA O BOM APROVEITAMENTO NAS AULAS PRATICAS Chegue no horário das aulas, pois há necessidade que o trabalho seja executado com calma e paciência. No início de cada aula, lave as mãos. Observe cuidadosamente as instruções a respeito do assunto a ser abordado. A aula pratica será de pouco valor, se o aluno não entender claramente o objetivo, não utilizar os conhecimentos teóricos adquiridos nas aulas teóricas e não aproveitar ao máximo o tempo disponível para o estudo. O aluno é responsável pelo material que usar durante as aulas práticas, devendo zelar pela boa manutenção dos materiais e equipamentos. Não esqueça que o avental ou jaleco, roteiro de aulas práticas, atlas e a entrega dos relatórios são indispensáveis. A falta destes impossibilitará o aluno de participar da aula e conseqüentemente não terá freqüência na mesma. FAVOR DESLIGAR OS TELEFONES CELULARES E ENTREGAR AO FUNCIONÁRIO NO INÍCIO DA AULA!!! Notifique qualquer acidente o mais breve possível, não importa o quão trivial possa parecer. Nunca coma ou beba (refrigerantes, cafés, etc.) ou fume no laboratório. Mantenha o laboratório limpo. Não sente nas bancadas do laboratório. Durante as aulas, o diálogo deve ser em voz baixa. Ande, não corra no laboratório. Os relatórios devem ser entregues rigorosamente na data combinada pelo professor. Não haverá prorrogação para o prazo de entrega, independente de imprevistos que possam acontecer. Ao deixar o laboratório o aluno deve retirar a lâmina do microscópio, apagar a luz do mesmo e cobri-lo com a respectiva capa. FAMERP: Medicina

A aula pratica será de pouco valor, se o aluno não entender claramente o objetivo, não utilizar os conhecimentos teóricos adquiridos nas aulas teóricas e não aproveitar ao máximo o tempo disponível

3 CUIDADOS BÁSICOS NO USO DO MICROSCÓPIO O microscópio é um instrumento de precisão feito de material valioso. Havendo cuidado por parte de quem o usa, ele durará longo tempo. Um pouco de negligência poderá danificá-lo permanentemente. É sempre aconselhável manter a mesa do laboratório livre de tudo o que não seja absolutamente necessário. Não deixe a lâmpada do microscópio acesa quando você não estiver observando pois ela tem um tempo de vida curto. Habitue-se a diminuir a intensidade luminosa. Evite ligar e desligar a lâmpada porque este procedimento queima o filamento da mesma. Não passe os dedos nas lentes para limpá-las. O vidro das lentes é facilmente arranhável (mais que o vidro comum), por isso só devemos usar um papel bem macio (lenço de papel), para limpá-las. Você pode proceder da mesma forma com as lâminas permanentes, retirando impressões digitais e o pó que fica sobre elas. Não gire o botão micrométrico indefinidamente, pois poderá estragar o seu delicado mecanismo. Use-o somente para ajustar o foco e para observações de profundidade. Não force o parafuso macrométrico. Não tente desmontar qualquer parte do microscópio. È um instrumento caro e todo o cuidado é pouco. Quando terminar o trabalho com o aparelho, retire a lâmina da platina, coloque a objetiva de menor aumento. Desligue o sistema de iluminação, cubra o aparelho com a respectiva capa de proteção, evitando-se assim o acúmulo de poeira. O QUE NUNCA DEVE SER FEITO 1 - NUNCA mergulhe as objetivas em líquidos para limpá-las. Isto pode danificálas permanentemente. 2 - NUNCA focalize utilizando primeiramente as objetivas de maior aumento (10X e 40X) a fim de evitar que a lâmina ou lamínula sejam quebradas. FAMERP: Medicina

Não deixe a lâmpada do microscópio acesa quando você não estiver observando pois ela tem um tempo de vida curto. Habitue-se a diminuir a intensidade luminosa.

4 3 - NUNCA tente fazer consertos em seu microscópio. Isto exige pessoa qualificada. 4 - NUNCA mova o microscópio de um lugar para outro dentro do laboratório. Caso seja necessário transportar o microscópio chame o técnico que usará as duas mãos, uma segurando o braço do aparelho e a outra o sustentando pela base. 5 - NUNCA tente desmontar as oculares ou objetivas. 6 - NUNCA saia do laboratório sem desligar e sem colocar a capa em seu microscópio. 7 - NUNCA troque peças de seu microscópio por outras de outro microscópio. PROCEDIMENTOS PARA O USO ADEQUADO DO MICROSCÓPIO Usando o parafuso macrométrico abaixe a platina do microscópio de maneira que as objetivas não a toquem quando girar o revólver. Gire o revólver de modo que a objetiva de menor aumento fique em linha com a abertura da platina. Ligue o interruptor localizado na base do microscópio sem fornecer luz demasiadamente. Coloque a lâmina na platina (com a lamínula voltada para cima) fixando-as com as presilhas ou pinça. Movimente o "charriot" de maneira que o material a ser observado fique no centro da platina, ou seja, sobre o orifício da platina. Inicie sempre a focalização pela objetiva de menor aumento. Para isso use o botão macrométrico, sempre com as duas mãos. Acerte a iluminação do microscópio de acordo com a objetiva a ser utilizada. Lembre-se sempre que quanto maior for a incidência de luz sobre o material analisado, melhor será a sua visualização. Olhando a lâmina diretamente (por fora da ocular) e movendo o parafuso macrométrico, eleve vagarosamente a platina, até que a objetiva fique a 1mm de distância da lamínula. Esta não deve ser tocada pela objetiva. Olhando agora pela ocular e movendo o parafuso macrométrico, abaixe a platina vagarosamente, até que o material a lâmina se torne visível e nítido (focalizado). Ajuste a intensidade de luz, girando o botão da base do microscópio para a direita ou esquerda. FAMERP: Medicina

5 - NUNCA tente desmontar as oculares ou objetivas. 6 - NUNCA saia do laboratório sem desligar e sem colocar a capa em seu microscópio.

5 ATENÇÃO: (1) Após focalizar, gire lentamente o parafuso micrométrico localizado sob a platina, para a direita ou a esquerda, a fim de obter a melhor focalização possível. Olhando pela ocular, desloque toda a lâmina vagarosamente para poder explorar todo o campo da preparação. IMPORTANTE: Coloque o detalhe que quiser examinar com maior aumento no meio do campo, com a objetiva de menor aumento. (2) Gire o revólver e passe para a objetiva de 10X e depois 40X. Nessa situação somente o botão micrométrico é utilizado para ajustar a focalização. Caso você não consiga focalizar volte para a objetiva menor e repita toda a operação. Como as objetivas secas são parafocais, o espécime (objeto) focalizado com uma objetiva estará muito perto de sê-lo com as outras. (3) Quando necessário, abaixe ou eleve o condensador, abra ou feche o diafragma para a obtenção da melhor imagem. Existe um parafuso para regular a distância entre o condensador e a platina e um dispositivo para aumentar ou diminuir a abertura do diagrama. (4) Se você não dispõe do óleo de imersão, não utilize em hipótese nenhuma a objetiva 100X. Evite acidentes e preserve o material didático. Em caso de dúvidas, chame o professor ou o técnico responsável. Uso da objetiva de imersão: (quando for determinado) A - Realize os procedimentos citados anteriomente. B - Passe para a objetiva de imersão (100X) mas não a desloque até o fim. C - Coloque sobre a lâmina uma gota de óleo de cedro. D - Tocar a gota com a objetiva de imersão olhando diretamente e com muita cautela. E - Procure o foco com o parafuso micrométrico. Após o uso: Limpar a objetiva com pano macio ou lenço de papel. Atenção: Cuidado para não girar o revólver e sujar de óleo a objetiva de 40X. FAMERP: Medicina

IMPORTANTE: Coloque o detalhe que quiser examinar com maior aumento no meio do campo, com a objetiva de menor aumento. (2) Gire o revólver e passe para a objetiva de 10X e depois 40X.

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