Protocolos Curtos em Progaramas de IATF em Novilhas Bos Taurus e Bos indicus
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- Denílson Felgueiras Vieira
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1 Protocolos Curtos em Progaramas de IATF em Novilhas Bos Taurus e Bos indicus Lucas C. Peres 1 e Gabriel A. Bó 23 1 Clivar Reprodução Bovina, Tocantins - Brasil 2 Instituto de Reproducción Animal Córdoba (IRAC), Zona Rural General Paz, (5145) Córdoba, Argentina. 3 Instituto A.P. de Ciencias Básicas y Aplicadas, Medicina Veterinaria, Universidad Nacional de Villa Maria, Villa del Rosario, Córdoba
2
3 RESULTADOS DA IATF (2016) Número de doses de sêmen (ASBIA)* Número de protocolos de IATF % de IATF/IA Cresciment o da IATF (EV 15-16) ,7% 5,1% *Correção para 100% do mercado (INDEX ASBIA 2016 representa 90% do mercado de sêmen no Brasil) OBS: o mercado de sêmen registrou em 2016 queda de 7% na comercialização de doses de sêmen (INDEX ASBIA 2016)
4 Número de eventos Mercado da IATF no Brasil % IATF/IA Número de IA (ASBIA) Detecção de Cio + IA Número de IATF * % % 67% 70% 77% 85% 90% 80% 70% % 55% 32% 35% 25% 19% 11% 7% 4% 1% % 50% 40% 30% 20% 10% 0% Pietro S Baruselli Departamento de Reprodução Animal/FMVZ/USP *Estimativa levando em consideração a venda de produtos para sincronização
5 As Novilhas são o futuro!!! Por tanto devemos fazer: Uma boa cría e recria Uma seleção eficiente por precocidade sexual, fenotipo e genotipo Obter altas taxas de prenhez em um curto periodo de tempo
6 Vantagens da IATF em Novilhas? - Indução da Ciclicidade - Melhoramento genético da progênies - Diminuir distocias touros com DEP baixo peso ao nascimento
7 NUTRIÇÃO PASTAGEM BOA QUALIDADE Baixa Taxa de novilhas com Maturidade sexual aos 24 meses.
8 Taxa de Concepção Novilhas tratadas no Tocantins/município Município/Fazenda TO total Prenhas IATF Taxa Concepção Miranorte ,00% Miranorte ,35% Barrolândia ,03% Miranorte ,89% Barrolândia ,20% Barrolândia ,45% Miranorte ,54% Monte Santo ,81% Cristalândia ,20% Cristalândia ,84% Cristalândia ,98% Cristalândia ,56% Cristalândia ,15% TOTAL ,13%
9 Taxa Concepção Novilhas x número vezes Foram IATF (Miranorte TO) número vezes IATF total Prenhas IATF Taxa Concepção/novilhas 4 IATF ,00% 3 IATF ,35% 2 IATF ,89% 1 IATF ,54% TOTAL ,62%
10 INFLUENCIA DEL DIAMETRO UTERINO, TAMANO DE LOS OVARIOS Y ESTRUCTURAS OVARICAS SOBRE LA FERTILIDAD EN VAQUILLONAS 15 MESES DE EDAD IATF Cutaia, L. 123, Peres, L. 12, Pincinato, D. 12, Bó, G.A Instituto de Reproducción Animal Córdoba (IRAC), 2 Universidad Nacional de Córdoba, 3 Syntex
11 Materiales y Métodos Se determinaron las ESTRUCTURAS OVARICAS de la siguiente manera: Cuerpo Luteo Foliculos Sin Estructura
12 Materiales y Metodos Se determino el tamaño del UTERO de la siguiente manera:
13 Materiales y Métodos Se clasifico el tamaño del útero y ovarios de la siguiente manera: Útero 1: < 1 cm Ø Útero 2: 1 a 1,5 cm Ø Útero 3: > 1,5 cm Ø Ovario 1: < 1 cm Ø Ovario 2: 1 a 1,5 cm Ø Ovario 3: > 1,5 cm Ø
14 Porcentajes de Preñez en función de la clasificación del útero, ovarios y estructuras ováricas. Estructura Ovario Preñez CL 24/68 (35,2%) Fol 11/31 (34,7%) SE 4/8 (50,0%) Preñez 1 1/3 (33,3%) 2 11/30 (36,7%) 3 27/74 (36,05%) ab P<0,1 Útero Preñez 1 5/15 (33,3%) a 2 22/69 (31,8%) a 3 12/23 (51,2%) b Cutaia et a., 2006
15 IATF EM NOVILHAS PUBERDADE PRÉ PÓS MATURIDADE SEXUAL CONSTÂNCIA BAIXAS TAXAS DE CONCEPÇÃ O VARIÁVEIS TAXAS DE CONCEPÇÃO NOS RESULTADOS
16 Taxas de prenhez à IATF em fêmeas bovinas de acordo com a categoria (n=25.043). Categoria Taxa de Prenhez à IATF Novilhas 45,16% (1144/2533) Desafio Primíparas 34,83% (1322/3796) Multíparas 50,24% (9401/18714)
17 Protocolos de IATF mais utilizados na atualidade para gado de corte BE PGF +ecg +ECP IATF Dispositivo P h Tasas de preñez logradas ~ 50 % (Cutaia et al. 2012) E2 + P4 : > 90 % de animales sincronizados, emergencia de nueva onda folicular Día 3 a 5 desde su administración (Bó et al., 1995; Caccia y Bó, 1995; Martínez et al., 2000; Moreno et al., 2001)
18 Em geral se obtem taxas de prenhez inferior as multíparas Há outros fatores importantes para melhorar a fertilidade nas novilhas? Existem!!!
19 Tamanho do proestro e maturação folicular Tasa de Conception (%) Diámetro del folículo a la ovulación (mm) Edad del folículo (dias) ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± 0.2 Duración del proestro (dias) Mussard et al., 2003a, 2003b, 2007, Bridges et al., 2009
20 5-day Co-Synch n = 616 Vacas GnRH Standard 7 d P4 Proestrus curto 59.9 % 5 d P4 Proestrus longo 70.4 % Bridges et al., 2008
21 Concentraciones séricas de estradiol pre-ovulatorio hasta la inducción de la ovulación con GnRH (Bridges et al. 2010) Long proestrus (2,25 d) Short proestrus (1,25 d)
22 Relação duração do proestro e probabilidade de prenhez aos 28 dias en novilhas holandesas Predicción probabilística: Máximo de 80,1% a los 28 días post IATF cuando la duración del proestro fue de 3 días. Colazo et. al 2011
23 0 7 J-Synch (2011) 9 Standard 7 d P4 Proestrus curto 2 mg EB PGF + ECP IATF 2 mg EB PGF GnRH+IATF 6 d P4 Proestrus longo De la Mata & Bó, 2012
24 J-Synch Protocolos 2 mg EB 500 µg PGF GnRH + IATF Disp. 0,5 g Convencional mg EB 500 µg PGF+0,5 mg ECP IATF Disp. 0,5 g 0 7 9
25 Resultados E J-SYNCH CONVENCIONAL Preñadas n % de Preñez Preñadas n % de Preñez P ,7% ,4% 0, ,0% ,0% >0, ,5% ,1% >0, ,9% ,6% <0,05 TOTAL ,6% ,9% 0,004
26 Asociación entre la duración del proestro, características foliculares y tasas de preñez Richard Núñez-Olivera, Gabriel Bó and Alejo Menchaca Montevideo - URUGUAY
27 Experimental design EB DIB P4 0.5g Tail-painted PGF2α ecg GnRH IATF Pregnancy rate J-Synch 48 h n=308 Day 0 AM Day 6 AM Day 8 - AM 30 d post-ftai EB DIB P4 0.5g Tail-painted PGF2α ecg GnRH IATF Pregnancy rate J-Synch 60 h n=290 Day 0 AM Day 6 AM Day 8 - PM 30 d post-ftai EB DIB P4 0.5g Tail-painted PGF2α ecg GnRH IATF Pregnancy rate J-Synch 72 h n=313 Day 0 AM Day 6 AM Day 9 - AM 30 d post-ftai
28 Results Follicular diameter at FTAI (mm) Tail-paint rubbed off (%) GnRH 48 h 12.2±0.1 a 68.2% a (122/179) GnRH 60 h 12.8±0.1 b 71.4% a (120/168) GnRH 72 h 12.9±0.2 b 77.0% a (137/178) Ovulated heifers at FTAI (%) 1.7% a (3/179) 1.2% a (2/168) 10.7% b (19/178) Pregnancy rate (%) 63.6% c (196/308) 63.1% c (183/290) 70.0% d (219/313) a vs. b; P<0.05. c vs. d; P<0.1.
29 Pregnancy rate Treatment*CL 71.3% P< % 60% 68% 68% 77% 59% 58.9% 57% 61% 40% 20% 0% a a b a a a n=158 n=161 n=173 n=150 n=129 n= h 60 h 72 h 48 h 60 h 72 h Cyclic heifers Heifers with CL a vs. b; P< Non-cyclic heifers Heifers without CL P=NS.
30 Novilhas com baixa CC Perdendo Peso (Provincia de La Pampa) Novilhas entre 18 e 24 meses de idade Semen de probada fertilidad (Angus) Perdendo 1 ponto na CC entre a IATF e a US
31 Réplica nº Convencional J-Synch P 1 UNLPam 56,6 % (34/60) 45 % (27/60) 0,2 2 La Paz 44,4 % (16/36) 19,4 % (7/36) 0,02 3 El 80 41,1 % (14/34) 31,1 % (9/29) 0,4 4 El Oasis 49,3 % (74/150) 40,6 % (61/150) 0,1 TOTAL 49,3 % (138/280) 37,8 % (104/275) 0,008 La suplementación de CPE durante el período preovulatorio incrementó los pocentajes de preñez en vacas inducidas a ovular folículos pequeños (Jinks et al., 2012)
32 J-Synch vs Convencional + ecg J-Synch 2 mg EB 500µg cloprostenol IATF + GnRH 300 UI ecg Disp. 0.5 g P4 0 PM 6 PM 9 AM & PM Convencional 2 mg EB 0.5 mg CE 500µg cloprostenol 300 UI ecg Disp. 0.5 g P4 IATF 0 AM 7 AM 9 AM & PM
33 J-Synch Vs Convencional + ecg J-Synch (+ 300 IU ecg) J-Synch (+ 300 IU ecg) J-Synch (No ecg) IATF Día 9 AM 57.9% (368/636) 56.3% (381/677) 0.56 IATF Día 9 PM 56.3% (371/659) 49.7% (311/626) 0.02 P Total (n=2.598) 57.1% (739/1295) 53.1% (692/1303) 0.04 Convencional (+300 IU ecg) IATF Día 9 AM 57.1% (335/587) 53.4% (324/607) 0.20 IATF Día 9 PM 55.0% (296/538) 48.0% (296/617) 0.02 P Total (n=2.349) 56.1% (631/1,125) 50.7% (620/1,224) 0.01 P Bó et al. ICAR, 2016
34 ecg vs No ecg -Tasas de Preñez Tratamiento n Preñadas Porcentaje Con ecg % a Sin ecg % b ab.- Porcentajes con superíndice distintos difieren significativamente (P>0,05)
35 J-Synch Vs Convencional no Brasil Nelore (n=211) Cruzadas (n=574) Total (n=785) J-Synch (+200 IU ecg) Convencional (+200 IU ecg) Total 47,1% (48/102) 48,6% (53/109) 47,9% (101/211) 55,0% (159/289) 55,4% (158/285) 55,2% (317/574 52,9% (207/391) 53,6% (211/394) J-Synch vs Convencional- P=0,8 Nelore vs Cruzadas- P=0,07 Motta et al., SBTE 2016
36 J-Synch em Receptoras de Embriões 945 embriões produzidos in vitro. Sêmen sexado Holstein. Receptoras Hereford. 5 replicas.
37 Embriones in vitro Semen sexado Holstein 945 blastocistos producidos in vitro Receptoras Hereford DIB 0,5 g EB 2 mg ECP 0,5 mg ecg 400 UI PGF2 500 µg cloprostenol TETF Día 0 Día 7 Día n= 481 DIB 0,5 g EB 2 mg ecg 400 UI PGF2 500 µg cloprostenol 72 h GnRH TETF n= 464 Día 0 Día 6 Día 9 Día Menchaca et al., 2015
38 Tasa de preñez Embriones in vitro Semen sexado Holstein 945 blastocistos producidos in vitro Receptoras Hereford 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% -10% +5% +14% +4% +9% +8% +8,4% P<0,01 48% 43% 52% 38% 45% 41% 44% 35% 59% 51% 49,3% 40,9% 6d 7d 6d 7d 6d 7d 6d 7d 6d 7d 6d 7d n=201 n=182 n=197 n=215 n=150 X TOTAL n=945
39 J-Synch in recipients for IVF embryos (n=3893). Menchaca et al., 2016 ICAR, Tours.
40 J-Synch in recipients for IVF embryos (n=3893). Menchaca et al., 2016 ICAR, Tours.
41 Porque ha uma maior taxa de Prenhez?
42 Follicular dynamics EB PGF GnRH P4 (0,5 g) OVULATION EB PGF + ECP P4 (0,5 g) OVULATION US US am am am am am am US pm pm pm pm pm pm BS BS BS BS BS BS
43 Variable Results Treatment J -SYNCH 7-day Conventional N DF diametro foliculo dominate na retirada implante (mm) 8.3 ± 1.2 a 10.0 ± 2.4 b DF diametro foliculo dominate pré ovulatório (mm) 13.0 ± ± 0.9 Taxa ovulação 21/24 (87.5%) 24/24 (100%) Intervalo entre a retirada implante e a ovulaçao (h) 93.7 ± 12.9 a 65.0 ± 13.7 b Taxa crescim. folic. (mm/day) 1.3 ± 0.4 c 1.0 ± 0.4 d ab (P < 0.05); cd (P = 0.059) 28 h
44 7-Day Conventional J-Synch Treatment, P < 0.05 Time, P < 0.05 Interaction treatment x time, P < 0.1
45 * * * * * * * 7-Day Conventional J-Synch Treatment, P = 0.05 Time, P < 0.05 Interaction treatment x time, P < 0.05
46 Foto: J. de la Mata
47 Progesterona sérica (ng/ml) Progesterona sérica ARNm IGF-1 ARNm ER 1 ARNm PR Receptores uterinos Día 6 postovulación Área de tinción PR 12 3 Expresión génica real time PCR Presencia de receptores IHQ J-Synch (n=10) Convencional (n=12) P< Días post-ovulación 2,5 2 1,5 1 0,5 0 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 1,5 1 a Convencional a Convencional b J-Synch a J-Synch Convencional a a EPILTELIO LUMINAL b c ESTROMA J-Synch a a EPITELIO GLANDULAR de la Mata et al. NO PUBLICADO 0,5 0 a Convencional b J-Synch
48 J-Synch + ecg + detección de Celos con Pintura y GnRH vacas AA dpp. Con desmame Precoz UI ecg 2 mg EB 500 µg cloprostenol 9 AM (60-66 h) IATF +GnRH Disp. 0.5 g P4 0 PM 6 PM IATF + GnRH 9 PM (70-74 h)
49 Tasa de preñez Hora de IATF, Pintura, GnRH? 90% 80% 70% 60% 67% AM 66% 65% 65% PM 63% 61% AM 54% IATF AM IATF PM PM 55% IATF AM IATF PM 50% 40% 30% 20% 10% 80% (1.516/1.900) 20% (384/1.900) 0% n= Despintadas Con Pintura IATF AM vs. IATF PM: NS. CON GnRH vs. SIN GnRH: NS. Despintadas vs. Pintadas: P<0,05.
50 Conclusão: O tratamento J-Synch foi eficiente para sincronizar a ovulação. As Novilhas do grupo J-Synch tiveram um proestro de maior duração que as do tratamento Convencional, com um horario de ovulação medio de aprox. 28 horas mais tarde (Proestro prolongado). Em condições favoraveis de nutrição, CC, o protocolo J-Synch obteve maiores taxas de prenhez em Novilhas de corte quando comparamos com o tratamento tradicional. A adição de 300 UI de ecg no momento da remoção do dispositivo aumentou as taxas de prenhez em novilhas Bos Taurus e cruza Bos Indicus.
51 Conclusiones finales O uso de pintura como método para ajudar na detecção de cio poderia ser uma alternativa para realizar a IATF em grupos grandes e a economia de uma dose de GnRH nos animais em cio que são IATF a las 60 h. As taxas de prenhez aumentadas em receptoras de embriones in vitro foram maiores nos animais sincronizados com o protocolo J-Synch que nos tratamentos Convencionais. É necessário provar o protocolo em animais zebuinos puros, vacas paridas e vacas leiteiras.
52 Pregnancy Rates 562 Holstein Heifers P=0.2 58,5 EB 7 days (n=188) 64,9 64,6 Cosynch 5 Days (n=185) J Synch (n=189) EB 7 days (n=188) Cosynch 5 Days (n=185) J Synch (n=189) Re, de la Mata & Bó, 2014
53 Tasa de preñez por réplica Convencional J-Synch Diferencia Réplica 1 31/58 (53,4%) 37/59 (62,7%) +9,3 Réplica 2 47/70 (67,1%) 50/70 (71,4%) +4,3 Réplica 3 32/60 (53,3%) 35/60 (58,3%) +5.0 TOTAL 110/188 (58,5%) 122/189 (64,6%) +6,1
54 J-Synch y SEMEN SEXADO 100 Novillas Holstein Sincronizadas con J-Synch. Despintadas al día de la IATF: 70 novillas, tasa de preñez: 50% Pintadas: 30 novillas, se inseminaron 25 con sexado mediante DC por 48 h: tasa de preñez: 60% 5 vaq no se inseminaron. De 100 Novillas sincronizadas se preñaron 50 (50%) 200 Novillas IATF con semen convencional 58% Relacion Sexado/convencional: 86%
55 Agradecimientos Javier de la Mata, Martin Ré y Andres Vera Cedeño (Maestría IRAC-UNC, Córdoba, Argentina) Alejo Menchaca (IRAUy, Montevideo, Uruguay) Richard Núñez, Federico Cuadro, Pedro Dos Santos, Diego Bosolasco (IRAUy, Uruguay) Ana Meikle (Lab. Técnicas Nucleares UNR, Uruguay) Arturo de la Mata (La Pampa, Argentina) Diego Racca, Luis Filippi y Guillermo Veneranda (Est. La Sibila y El Embrujo, Argentina) Federico Rubio (Uruguay) Flia. Teso ( Anguil LP, Argentina) Flia. Macagno (E. Castex, LP, Argentina) Cabaña La Rubeta (Lezama, Bs As) Oscar Goitia (Actividad Privada, La Plata, Bs As, Argentina) Alberto Frene (Establecimiento El Oasis Toay, LP, El Faro SA, Junín, Bs As) Regourd Investissement Argentina SA (Establecimiento La Carita, Toay, LP, Argentina) Estancia El Mangrullo (Santiago del Estero, Argentina)
56 Obrigado! 61
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