AVALIAÇÃO DO EFEITO ANTIMUTAGÊNICO DE Zingiber officinale EM CÉLULAS MERISTEMÁTICAS DE Allium cepa CASINI, J. V. M 1.; VOGLER, D. C. F.; FERREIRA, T. T. L. 1 ; FIORI, B.C 1 ; SILVA, C. V. da 2 1 Discentes do Curso de Ciências Biológicas da FAP 2 Docente da Faculdade de Apucarana RESUMO Muitas plantas são mundialmente usadas para os mais diversos tratamentos nas formas de infusão. Entre estas espécies destaca-se o gengibre com suas características fitoterapêuticas. As células de raízes de cebola, Allium cepa, são muito utilizadas para identificar alterações nas divisões celulares, uma vez que esta região tem alto poder de divisão mitótica. Os testes realizados demonstraram uma diminuição da mitose nestas células o que pode indicar uma ação antimutagênica. Palavras chave: extratos naturais, toxinas, mutagênese. ABSTRACT Many plants are universally used for the most diverse range of treatments in the form of infusion. Among these species stands out the ginger with its characteristics phytotherapeutic. The root cells of onion, Allium cepa, are used to identify changes in cell divisions, in this region possess high power of mitotic division. The tests showed a decrease of mitosis in these cells, which may indicate an antimutagenic action. Key words: natural extracts, toxins, mutagenic. INTRODUÇÃO
A fitoterapia consiste no conjunto das técnicas de utilização dos vegetais no tratamento de doenças. Como método terapêutico, a fitoterapia faz parte dos recursos da medicina natural. Entre as espécies mais estudadas que possui várias propriedades medicinais é o gengibre (Zingiber officinale). Suas ações já foram comprovadas através de estudos científicos, citando-se as atividades: antiinflamatória, antiemética, antináusea, antiúlcera, hipoglicêmica, antibacteriana, entre outras (WHO, 1999). Culturalmente o gengibre apresenta importância econômica relevante na forma in natura (UTPALENDU, 1999). O uso dos rizomas para a obtenção de óleos essenciais, extratos e concentrados de gengibre tem despertado interesse da indústria farmacêutica e cosmética devido à presença dos constituintes químicos (SACCHETTI, 2004). Diante do grande interesse principalmente para a indústria farmacêutica, sobre as propriedades farmacológicas do gengibre este estudo teve o intuito de avaliar a atividade antimutagênica de Zingiber officinale em células meristemáticas de Allium cepa. REFERÊNCIAS TEÓRICO-METODOLÓGICOS Diante da necessidade de saber a capacidade mutagênica de extratos naturais o teste de alterações mitóticas da raiz de Allium cepa pode ser utilizado de maneira efetiva. Bagatini (2007) afirma que o sistema de teste de A. cepa é bem aceito para o estudo de efeitos de citotoxicidade de plantas medicinais, porque as suas raízes ficam em contato direto com a substância testada, permitindo a avaliação de concentrações diferentes. O método de avaliação de alterações cromossômicas em raízes de A. cepa é validado pelo Programa Internacional de Segurança Química (IPCS, OMS) e o Programa Ambiental das Nações Unidas (UNEP) como um eficiente teste para análise e monitoramento in situ da genotoxicidade de substâncias ambientais (Cabrera; Rodriguez, 1999). Para os procedimentos realizados devem ser utilizadas cebolas de tamanho uniforme adquiridas em uma fonte comercial, os bulbos das cebolas
devem ser colocadas para enraizarem em um Becker com água por 4 dias, período suficiente para atingirem 1,5 cm de comprimento. As unidades de A. cepa devem ser divididas em 2 grupos (controle e tratamento) em seguida colocadas para germinar sobre frascos de 50 ml. No grupo controle (Co) a parte inferior esteve mergulhada em água destilada, já o grupo tratamento (Tr) a parte inferior permaneceu submersa em soluções contendo chá de gengibre. O Chá foi elaborado com 200 ml de água em ebulição e 8g de rizoma de gengibre. Por volta de 72h depois do início do teste, os meristemas foram coletados com aproximadamente um cm de comprimento, lavados em água destilada e hidrolisados em solução de HCL 1 N por 10 minutos em banho-maria a 60 Cº, o resfriamento dos tubos sucedeu-se em água corrente. Em seguida, os meristemas foram colocados sobre a lamina e corados com o kit Panótico Rápido LB que é composto por três soluções: triarilmetano a 0,1%, xantenos a 0,1% e tiazinas a 0,1%, foram adicionadas 3 gotas de cada solução seguindo a sequência descrita acima com um intervalo de 2 minutos entre um e outro (MENEGUETTI et. al. 2011). Em seguida as laminas foram feitas e inseridas as lamínulas, foi feito o esmagamento com o polegar e cobertos com papel filtro. O microscópio de luz com as lentes objetivas focadas em 100 vezes deve então ser utilizado para o cálculo do índice mitótico (IM). CONCLUSÃO Os testes citados no trabalho foram realizados no laboratório de Biologia Celular da Faculdade de Apucarana. Os experimentos preliminares com o chá de gengibre tem demonstrado uma diminuição do índice mitótico. No grupo controle o índice foi de 42,8, enquanto que no grupo tratado com o chá o I.M foi de 23,9. (Figura 1).
Figura 1. Células meristemáticas da raíz de Allium cepa. A maioria das células observadas não se encontravam em divisão celular. Esses resultados demonstram que o chá feito com rizoma de Zingiber officinale, popularmente conhecido como gengibre, pode atuar na diminuição da proliferação celular e com isso, ter efeito antimutagênico. REFERÊNCIAS BAGATINI, Margarete Dulce; SILVA, Antonio Carlos Ferreira da; TEDESCO, Solange Bosio. Uso do sistema teste de Allium cepa como bioindicador de genotoxicidade de infusões de plantas medicinais. Rev. bras. farmacogn., João Pessoa, v. 17, n. 3, Sept. 2007. CABRERA, G. L. and RODRIGUEZ, D. M. G. Genotoxicity of soil from farmland irrigated with wastewater using three plant bioassays. Mutation Research/Fundamental and Molecular Mechanisms of Mutagenesis 426.2, 211-214, 2009. MENEGUETTI, D. U. O.; SILVA, F. C.; A.; POLETTO, P. O.; J. Adaptação da Técnica de Micronúcleo em Allium cepa, para Futuras Análises de Mutagenicidade dos Rios da Região do Vale do Jamari, Rondônia, Amazônia Ocidental. Revista Pesquisa & Criação, v. 10, N. 02, p. 181-187, 2011. SACCHETTI, G. Comparative evaluation of 11 essential oils of different origin as functional antioxidants, antiradicals and antimicrobials in foods. Food Chemistry, v. 91, n. 03, p. 621-632, 2004. SILVA, F.G. et al. Influência do processamento pós-colheita e armazenamento na composição química da droga vegetal e do óleo essencial de carqueja (Baccharis trimera) (Less.) DC.]. Rev. bras. plantas med., Botucatu, v. 12, n. 4, Dec. 2010.
UTPALENDU, J.; CHATTOPADHYAY, R.N.; PRASAD, S.B. Preliminary studies on anti-inflammatory activity of Zingiber officinale Roscoe, Vitex negundo Linn. and Tinospora cordifolia (Willid) Miers in albino rats. Indian Journal of Pharmacology, v.31, n.3. p.232-233, 1999. WHO. WORLD HEALTH ORGANIZATION..Monographs on selected medicinal plants. v.1. Geneva, p.277-287, 1999.