Primeira aula Apresentação da Disciplina Características do sangue Coleta de sangue Extensão sanguínea e coloração Hemograma Profa Elvira Shinohara
Tecido líquido e renovável Plasma Células sanguíneas Eritrócitos Leucócitos Plaquetas Tipos de leucócitos Neutrófilos Eosinófilos Basófilos Linfócitos Monócitos Características do sangue
Função do sangue Transporte (O 2, CO 2, nutrientes, metabólitos, etc) Defesa (fagocitose) Homeostase (temperatura, controle eletrolítico, etc)
Disciplina de Fisiologia do Sistema Hematopoético, integral 2012 Células sanguíneas Eritrócitos ou Hemácias ou Glóbulos vermelhos Leucócitos Neutrófilos Eosinofilos Basófilos Linfocitos Monócitos Granulócitos Agranulócitos Plaquetas
Como visualizamos estas células? Extensão sanguínea Coloração da extensão sanguínea
Células sanguíneas
Células sanguíneas Hemácias Eosinófilo Neutrófilo Segmentado Linfócito Plaquetas
Células sanguíneas Monócito Linfócito Plaquetas Hemácias
Células sanguíneas Basófilos Fonte: Hoffbrand & Pettit, 1991
Células sanguíneas
Células sanguíneas
Volume sanguíneo nas mulheres Volume de sangue nas mulheres 61,9 ml/kg Exemplo: Mulher de 55 kg (peso corpóreo) Logo: Volume de sangue 3.404 ml O volume total de eritrócitos corresponde a 24,8 ml/kg de peso, ou 1.362 ml (usou o Ht=40% para este cálculo)
Volume sanguíneo nos homens Volume de sangue nos homens = 62,4 ml/kg Exemplo: Homem de 75 kg (peso corpóreo) Logo: Volume de sangue 4.680 ml O volume total de eritrócitos corresponde a 28,1 ml/kg de peso, ou 2.106 ml (usou o Ht=45% para este cálculo)
Coleta do sangue
Locais de coleta de sangue
Punção venosa
Tubos à vacuo para coleta A cor da tampa indica qual anticoagulante está sendo utilizado Cor roxa = EDTA Cor cinza = fluoreto de sódio Cor azul = citrato de sódio Cor verde = heparina Cor vermelha/marrom = sem anticoagulante
Anticoagulantes utilizados em hematologia EDTA K 3 EDTA e K 2 EDTA são os anticoagulantes mais adequados para a rotina hematológica (hemograma) EDTA quela o cálcio do sangue É utilizado na seguinte proporção: 10 µl de anticoagulante/1ml de sangue. Vantagens: não altera a morfologia das células (desde que a proporção anticoagulante/sangue seja mantida) não dilui o sangue e impede a agregação plaquetária
Anticoagulantes utilizados em hematologia CITRATO DE SÓDIO É o anticoagulante de escolha para os testes de coagulação e prova de agregação plaquetária. O citrato de sódio reage com o cálcio formando um composto insolúvel. É utilizado na seguinte proporção: 1 ml de anticoagulante/ 9 ml de sangue. ou 0,5 ml de anticoagulante/ 4,5 ml de sangue Desvantagem: altera a morfologia das células e dilui o sangue (uma parte de anticoagulante para 9 partes de sangue).
Anticoagulantes utilizados em hematologia HEPARINA A heparina age pela formação de um complexo com a antitrombina III plasmática, que inibe a trombina e outros estágios dos fatores de coagulação Vantagens não altera a morfologia das células e não dilui o sangue Desvantagem: o preço do anticoagulante é maior do que o EDTA
EXTENSÃO SANGUÍNEA análise da morfologia é essencial para o diagnóstico
Plasma Células sanguíneas
Células sanguíneas
Extensão Sanguínea
COLORAÇÃO SANGUÍNEA
Corantes do Tipo Romanovsky São misturas que contem eosina e azul de metileno dissolvidos em metanol Na solução envelhecida (após dias do preparo do corante), o azul de metileno se oxida em gradações diferentes, originando os azures de metileno
Coloração do tipo Romanowsky O corante de Romanowsky (neutros) é uma solução alcoólica de um complexo de eosinato de azul e azures de metileno A diferença entre os vários corantes derivados do corante primitivo de Romanowsky acha-se na proporção que se emprega de azul-de-metileno e de eosina, ou no método de tratamento do azul-de-metileno, antes de sua combinação com a eosina
Princípio da coloração Os componentes Azures em sua forma de dímeros ligamse a moléculas aniônicas, exemplo os grupos fosfato do DNA Os grupamentos ácidos dos ácidos nucleicos e proteínas do núcleo celular e do citoplasma tem afinidade pelo corante básico Azul- de -Metileno
Princípio da coloração A eosina na forma de monômero se liga aos sítios catiônicos das proteínas A presença de grupamentos básicos na molécula de Hb resulta na afinidade por corantes ácidos, corando-se pela eosina
Principio da coloração CORANTE CÉLULA Azul de Metileno cora Núcleo (DNA) (básico) (ácido) Eosina cora Hb (ácido) (básico)
Nomenclatura usual Coloração Ortocromática: a célula cora-se com a mesma cor do corante Coloração Metacromática: a célula toma uma cor diferente daquela do corante
Nomenclatura usual Estruturas celulares que se coram em pelo Azul de Metileno são chamadas de basófilas (corando-se de azul) Estruturas celulares que se coram pela Eosina são chamadas de acidófilas (corando-se em rosa)
Tipos de corantes de Romanovsky May-Grunwald ou Jenner, Giemsa Leishman Wright (Podem ser encontrados, no comércio, na forma de reagentes ou em soluções já preparadas pelo fornecedor)
Células sanguíneas
Contagem relativa dos leucócitos É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula. Campo muito grosso Campo adequado Campo muito fino
Contagem relativa dos leucócitos É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula. Campo muito grosso Campo adequado Campo muito fino
Campos de leitura na extensão sanguínea Corpo da extensão sanguínea
Região grossa da extensão (cabeça) Não deve ser feito contagem das células nesta região da extensão sanguínea
Região da cauda (muito fina) Não deve ser feito contagem das células nesta região da extensão sanguínea
Campos que NÃO devem ser analisados na extensão sanguínea Região muito fina Cauda da extensão Região muito grossa Cabeça da extensão sanguínea
Contagem relativa dos leucócitos É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula. A B A A Cerca de 25 células B- Cerca de 50 células
Contagem relativa dos leucócitos As células não tem distribuição uniforme na extensão sanguínea Cabeça Corpo Cauda Os linfócitos predominam no meio da extensão Neutrófilos e monócitos predominam nas margens e na cauda
Problemas na coloração Presença de precipitados do corante na extensão sanguínea corada Uso de lâminas sujas com gordura Secagem durante o período de coloração Lavagem inadequada ao término da coloração Filtração inadequada dos corantes (vai aparecer os precipitados de corante)
Precipitados de corante
Coloração inapropriada
HEMOGRAMA Plasma células
HEMOGRAMA Exame hematológico mais solicitado Consiste na análise qualitativa e quantitativa das células sanguíneas Fornece parâmetros para controle e auxílio no diagnóstico das anemias, de vários processos infecciosos e de alterações no número das plaquetas
Hemograma Eritrograma (avalia série vermelha) Leucograma (avalia série branca) Contagem de plaquetas
Exemplo de um laudo de hemograma eritrograma leucograma Contagem de plaquetas
Bibliografia recomendada. Dacie & Lewis. Practical Haematology. 8a Edition. Churchill Livingstone. Stiene-Martin EA, Lotspeich-Steininger, Koepke JA Clinical Hematology- Principles, Procedures, Correlations. Editora Lippincott, 2edição, 1998. Lorenzi TF, D Amico E, Daniel MM, Silveira PAA, Buccheri V Manual de Hematologia Propedêutica e Clínica. Editora Medsi 3 edição, 2003.