Palavra-Chave: Infravermelho Próximo, madeira, método não-destrutivo, quimiornetria.
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- Valentina Dreer Garrau
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1 Rornullo Luiz Simão (rlsirnaoéàklanbin.com.br) Klabin S.A. Palavra-Chave: Infravermelho Próximo, madeira, método não-destrutivo, quimiornetria. RESUMO: O setor madeireiro e de celulose e papel necessitam uniformizar e aperfeiçoar seus produtos. e o controle da qualidade da madeira usada como matéria-prima é uma exigência cada vez maior. A espectroscopia na região do infravermelho próximo vem se difundindo como método de análise devido a sua rapidez, a pouca preparação de amostras. nenhum uso de reagentes químicos e nenhuma influência do operador. Este trabalho objetiva correlacionar os espectros de NIR com as dimensões de fibras de amostras de madeira de Pinus greggíí Engelm.. A técnica envolve a aquisição de espectros de reflectância difusa na faixa do NIR de amostras que são também submetidas às análises convencionais. A seguir é feita uma análise estatística multivariada para construir um modelo de predição das propriedades. As medidas convencionais foram feitas usando-se microscopia óptica em lâmina de macerado. Nas análises anatômicas,
2 verificou-se uma variação de comprimento de traqueídeos entre 4100 m e 2300 m, diâmetro entre 71 m e 50 m e espessuras de parede entre 10 m e O equipamento utilizado para obtenção dos espectros foi um espectrofotômetro FemWin900. Os cálculos matemáticos foram realizados utilizando o software Unscrambler" 9.2. Conseguiu-se uma correlação média para as propriedades de comprimento e diâmetro dos traqueidcos, já para as outras propriedades não houve uma boa correlação. Keywords: Near infrared specrroscopy.wood: Non-destructive methods: Chemornetrics.
3 1. lntroduçao A densidade tem sido a característica usada por alguns programas de melhoramento com o intuito de aumentar o rendimento de polpa. a resistência e a rigidez de tábuas. Todavia. na maioria das vezes 0'5 programas focalizam suas ações nas características fenotípicas mais facilmente mensuráveis, como o volume. retidão de fuste, forma. altura, resistência a doenças e ângulo de grão Muito embora existam muitas pesquisas em morfologia das fibras, poucos são os programas que têm usado outras características tecnológicas internas como o comprimento de fibra, espessura de parede, "coarseness" ou rendimento de polpa. Algumas poucas empresas começam a introduzir essas características nos seus programas inclusive com a utilização do ângulo microfibrilar. Para avaliação das fibras, aqui no Brasil não é usual usar-se o "coarseness", que pode ser definido como a massa total de uma amostra de fibras dividida pelo comprimento total das fibras (SYKES et ai., 2005). O comprimento de fibra é importante para a resistência mecânica dos produtos obtidos a partir da madeira. As propriedades de fibra (KELLOGG et al., 1975) e a composição química da madeira são reconhecidas como sendo de grande importância para as indústrias de papel e celulose. Entretanto, as correlações entre as propriedades básicas da madeira e a qualidade dos produtos finais nem sempre são bem conhecidas (POT et al., 2002). Estudos com Pinus taeda mostraram urna grande variação das propriedades rendimento de celulose, comprimento de fibra e "coarseness' (CHANG et al., 2(05). Assim, é recomendável que para urna população já previamente selecionada por sua densidade seja, num passo seguinte, melhorada quanto ao comprimento de seus traqueideos (VIA et al., 2004). Atualmente existe muito interesse no desenvolvimento de métodos rápidos e não-destrutivos para a determinação de propriedades de madeira oriunda de árvores plantadas e de rápido crescimento. Essas propriedades são importantes para a indústria em termos de avaliação de seus recursos e também para ajudar nos trabalhos de melhoramento da qualidade da madeira das árvores de seus plantios (TSUCHIKAWA, 2007; SO et ai ). Schimleck e Evans (2002a, 2002b, 20(4): Schimleck et al. (2003, 2005a, 200Sb): Jones et al. (2005a, 2005b) estimaram o ângulo microfibrilar, rigidez, densidade aparente e características morfológicas em rolos de incremento de F'íIlUS através da espectroscopia na região do NIR usando como valor de referência medidas realizadas com a metodologia SilvScan desenvolvida no csmo da Austrália. O uso de espectroscopia para a predição do comprimento de fibras tem recebido pouca atenção dos programas de melhoramento florestais devido à escassez de estudos.
4 Alguns trabalhos mostram que o uso de certas técnicas para tratamento prévio dos espectros, como a correção ortogonal do sinal (asc), pode melhorar o poder de predição das técnicas quimiométricas aplicadas em propriedades anatômicas e físicas de madeira, do papel e da polpa (WOLD.et al., 1998:MARKLUND; HAUKSSON, 1999; HAUKSSON er a1., 2001). Em todos os trabalhos encontrados na literatura internacional que desenvolveram metodologia para uso dos espectros na faixa do NIR para predizer os comprimentos de fibras, as medições dos valores de referência usaram médias ponderadas (comprimento ou peso) obtidas nos equipamentos ópticos acima citados. A chamada média do comprimento de traqueideo é a média aritmética dos comprimentos dos traqueideos dado pela fórmula abaixo:
5 médias ponderadas dos comprimentos de fibras conforme as equações (1 ) e (2) acima descritas de 0,722 e 0,840, com erros de predição externa de 2,13 e 0,63 mm.respectivamente. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a técnica de espectroscopia de infravermelho próximo para a predição de comprimento de fibras da madeira, utilizou-se tratamento estatístico multi vanado para desenvolver lima curva de calibração correlacionando os espectros no infravermelho próximo e a técnica convencional de análise das propriedades anatômicas da madeira. 2. MATERIAIS EMÉTüDÜS Para a análise convencional e para obtenção dos espectros, foram estudados anatomicamente as amostras de Pinus greggii, provenientes de florestas com 13 anos da Klabin-SC, analisou-se 20 árvores, das quais foram retirados discos ao longo da altura do tronco a cada 2,30 m (cerca de sete em média por árvore nas seguintes alturas: 2,3 m, 4,6 m, 6,9 m, 9,2 m, 11,5 m, 13,8 m, 16, I m). Desses discos foram retiradas cunhas para a maceração e para serem moídas. O equipamento empregado foi o espectrofotômetro FenWin900 ~FEMTO) de fabricação nacional. Os espectros foram coletados em um intervalo com comprimento de onda variando de 1100 a 2500 nm e de 1 em 1 nm. O equipamento utiliza um corpo de teflon como referência e foi operado em modo de reflectância difusa (log l/r). Foram coletados 101 espectros de 20 árvores de P. greggii. Os dados foram analisados com o software Unscrambler 9.2, utilizando calibração multi variada feita por uma regressão pela técnica dos mínimos quadrados parciais (PLS), em média com o total de 5 fatores (varáveis latentes), com validação cruzada ("full cross validation"). Cerca de 70%) das amostras foram usadas para a construção das curvas de calibração e as restantes 30% foram usadas para a validação externa do modelo construído. O erro padrão de predição refere-se à validação externa realizada com tais amostras que não participaram da construção da curva de
6 calibração. Para maiores detalhes das técnicas quimiométricas usadas ver Esbensen (2002), Naes et al. (2004) e Martens e Naes (2002). A avaliação de como a calibração ajusta os dados é fornecido pelo erro padrão de calibração. O erro padrão de predição (SEP) fornece uma avaliação da qualidade da predição feita pela curva de calibração para um conjunto de amostras diferentes daquelas usadas na calibração. O desvio da razão de desempenho (RDP), calculado como a razão entre o desvio padrão dos valores de referência e o SEP, foi usado para determinar a habilidade de predição da calibração (SCHIMLECK: EVANS, 2004). Um valor de RDP maior que 2.5 é considerado satisfatório para seleção, todavia Schimleck et al. (2003) consideraram que um RDP de aproximadamente 1.5 pode ser usado como uma ferramenta inicial para o melhoramento. 3. RESULTADOS E DISCUssAo Os valores mínimos, médios e máximos das dimensões dos traqueídeos medidos convencionalmente são mostrados na Tabela 1, assim como a média dos desvios padrão de cada amostra. Tabela I - Dimensões dos traqueídeos de Pinus greggii obtidos de árvores com 13 anos de idades. Tab1e 1. Pinus greggí tracheid dimensions from trees wirh 13 years old, Pode-se observar que as propriedades analisadas possuem uma considerável variância dentro das amostras. devido o material ser heterogêneo e de origem natural. As fibras (traqueídeos) podem variar muito de dimensões conforme a posição no tronco em que se coleta a amostra. bem como a que condições a árvore é submetida. alterando assim sua composição e formação. O desvio padrão das médias não é tão elevado quanto o desvio padrão dentro de uma mesma amostra. Isso mostra que existe uma variação maior dentro de uma mesma árvore no sentido medula casca que entre árvores, ao menos no lote estudado. A Figura 1 mostra espectros sem tratamento prévio por reflectância difusa na faixa de comprimento de onda do NIR para amostras de madeira de Pinus com grande variação das
7 dimensões de fibras. Os espectros são típicos de madeira e similares aos reportados na literatura internacional. Tabela 2. Coeficientes de correlação e erros padrão do modelo e da validação externa para as propriedades anatômicas de P. greggii pelo programa Unscrambler 9.2 usando o método PLS. Table 2. Correlation coefficients and standard errors of the model and the externai validation for anatomícal properties of P. greggü using PLS in the Unscrumbler 9.2 software.
8 Observa-seque a propriedade anatômica diâmetro interno não obteve correlação com os espectros de NIR e que para a espessura de parede, embora se tenha conseguido uma boa calibração e validação cruzada, o modelo não apresentou uma boa capacidade de predição. A Figura 2 mostra os valores preditos pela regressão PLS comparados com os valores de referência medidos convencionalmente para o comprimento dos traqueídeos. Os eltos padrão encontrados para a calibração e a validação cruzada foram, respectivamente, 200 J..Lme 263 um, que são valores menores que a metade do desvio padrão da medida convencional. As correlações encontradas para a calibração e a validação cruzada foram, respectivamente, 82 IVo e 67 %. Figura 2. Relação entre média aritmética de valores medidos para comprimento dos traqueideos de P. greggii e os valores preditos pelo modelo. Os círculos azuis foram usados para determinação dos coeficientes de calibração e os vermelhos para a validação cruzada no mesmo conjunto de amostras. Figure 2. Relationship between arithrnetic mean of measured tracheid length ofp. greggii and the predicted values by the model. The blue circles were used for evaluation of the correlation coefficients for calíbration and the red one for cross validation in the sarne set of samples.
9 Nisgoski (2005) relatou coeficientes de correlação para a calibração e a validação cruzada de 73 % e 63 % para amostras de P. taeda usando a mesma técnica, porém com amostras de madeira maciça. A discrepância entre os resultados deste trabalho e o da literatura pode ser decorrente da diferença de metodologia de amostragem além da diferença de espécies. Neste trabalho foi usada serragem e no trabalho de Nisgoski (2005) foram empregados cubos de madeira, além disso. as análises realizadas nas amostras de serragem compreenderam uma porção de um disco do tronco. já os cubos de madeira continham a variação de uns poucos anéis de crescimento. A Figura 3 mostra a relação entre os valores medidos convencionalmente e os preditos para a propriedade comprimento dos traqueídeos usando o modelo construído anteriormente para o restante das amostras. As amostras usadas não fizeram parte da construção da curva de calibração. Figura 3. Relação entre os valores medidos convencionalmente e os preditos pelo modelo de calibração usando espectros de NIR de 30 amostras externas para a propriedade comprimento dos traqueídeos. Figure 3. Relationship between values conventionally measured and predicted by the model using NIR spectra of 30 external samples for rracheid length property. Na validação externa o valor obtido para o coeficiente de correlação foi de 66 % sendo que as amostras foram diferentes das usadas para a calibração e o erro padrão de predição foi de 226 um. A despeito do baixo valor para o coeficiente de correlação o erro padrão está muito abaixo da média dos desvios padrão dos valores medidos convencionalmente. Assim, o valor para o RDP encontrado foi de 2,88. o que habilita a técnica para ser usada em seleção em
10 programas de melhoramento genético florestal. Todavia, se for usado para cálculo do RDP o desvio padrão das médias, este valor cai para 1,59. Isso mostra que as medidas convencionais para comprimento de fibra usando médias de medidas feitas em disco nem sempre são adequadas para distinguir árvores. A Figura 4 mostra os valores preditos pela regressão PLS comparados com os valores de referência medidos para o diâmetro externo dos traqueídeos. Os erros padrão encontrados para calibraçào e validação cruzada foram, respectivamente, 2,4 um e 2.8 um. Os valores para os coeficientes de correlação da calibração e validação cruzada foram 0,57 e 0,36, respectivamente. O modelo foi mais bem ajustado que aquele apresentado por Nisgoski (2005) para amostras de madeira maciça que tinham menor variação das dimensões das fibras dentro de uma mesma amostra. Figura 4. Relação entre média aritmética de valores medidos para diâmetro externo dos traqueídeos de P. greggii e os valores preditos pela modelo. Os círculos azuis foram usados para determinação dos coeficientes de calibração e os vermelhos para a validação cruzada no mesmo conjunto de amostras. Figure 4. Relationship between arithmetic mean 01' the tracheid external diameters measured for P. greggii and the predicted by the rnodel. The blue circles were used for evaluation of the correlation coefficients for calibration and the red one for cross validation in the same set 01' samples.
11 A figura 5 mostra a relação entre os valores de diâmetro externo de fibras medidas de forma convencional e os preditos pelo modelo para amostras que não foram usadas para a construção da curva de calibração. Figure 5. Relationship between values conventionally measured and predicted by the model using NIR spectra of 30 externai samples for tracheid externai diameter. o coeficiente de correlação na validação externa foi baixo e por volta de 0,60. Entretanto, o erro padrão de predição (SEP) encontrado foi de 3 um que é menos que a metade da média dos desvios padrão das médias obtidas a partir das medidas convencionais. O desvio da razão de desempenho para este caso foi de 25, indicando que a nova metodologia pode ser usada para seleção em programas de melhoramento genético florestais. Da mesma forma que para o caso anterior, se for usado o desvio padrão das médias o valor do RDP cai para 1.33, o que habilita metodologia apenas para uma seleção preliminar. 6. CONCLUSÃO
12 A variação das propriedades anatômicas dentro de uma mesma árvore é muito maior que a variação entre as árvores usadas neste estudo. Ao avaliar as propriedades anatômicas da madeira de Pinus greggii, conseguiu-se uma correlação baixa para as propriedades de comprimento e diâmetro externo dos traqueídeos, já para as duas outras propriedades não houve uma boa correlação. A baixa correlação pode ser devida a uma amostragem insuficiente. ou pela morfologia da amostra usada na forma de serragem. Outro aspecto a ser observado é uma grande variação natural das dimensões das fibras dentro de urna mesma amostra de madeira, o que permite através do cálculo do desvio da razão de desempenho (ROP), que a técnica seja indicada para seleção preliminar em programas de melhoramento genético para a indústria de base florestal. Este método é econômico e prático, já que não exige preparo elaborado de amostras e nem utiliza reagentes químicos, além de independer da experiência do operador. As análises das propriedades anatômicas da madeira usando-se métodos quimiométricos são realizadas em menos de dois minutos. já na metodologia convencional precisa-se de cerca de um dia. Assim a técnica pode ser usada em escala industrial como uma alternativa a métodos mais precisos, porém muito demorados. 7. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS BARRICHELO. L. E. G.; FOELKEL, C. E. B. Processo nítrico-acético para maceração de madeira. Silvicultura. São PaLIo, v. 8. n.28. p , ESBENSEN, K. H. Multivariate data analysis - in practice: an introduction to multivar iate data analysis and experimental designo Oslo: CAMO, p. With contributions from: Dominique Guyot, Frank Westad, Lars P. Hou111011er. HA1JKSSON,.f. B.; BERGQVlST, o., BERGSTEN. C.; SJÜSTRÜM,M.; ED1.CND, C. Prediction ofbasic wood properties for Norway spruce. lnterpretation of near infrared spectroscopy data using partial least squares regression. Wood Science and Technology, v. 35, p , fONES. P. D.; SCHlMLECK, L R.; PETER, G. F.; DANlELS, R. F.; CLAK UL A. Nondestructive estimation of Pinus taeda L tracheid morphological characteristics of sites in Georgía. Wood Science and Technology, v. 39, p , 2005b.
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