O valor de testes pré-natais não invasivos (TPNI). Um suplemente ao livreto do Conselheiro Genético
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- Alícia Mascarenhas Brás
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1 O valor de testes pré-natais não invasivos (TPNI). Um suplemente ao livreto do Conselheiro Genético
2 TPNIs usam DNA livre de células. Amostra de sangue materno cfdna materno cfdna fetal
3 TPNIs usam DNA livre de células. A amostra do sangue materno contém uma mistura de ambos cfdna materno e fetal. Fragmentos materno e fetal são contados e analisados no TPNI. Aneuploidias são detectadas comparando a quantidade de material cromossômico contra um conjunto de referências de cromossomos.
4 SPM uma abordagem mais profunda do sequenciamento. cfdna materno e fetal Alinhamento e contagem Gravidez não afetada Gravidez afetada cfdna sequenciado via Sequenciamento Paralelo Maciço (SPM)
5 SPM uma abordagem mais profunda do sequenciamento. A amostra do sangue materno contém uma mistura de ambos cfdna materno e fetal. SPM ou Sequenciamento Paralelo Maciço, analisa fragmentos do cfdna da amostra sanguínea materna. Sequências são alinhadas ao genoma para identificar a origem do cromossomo do fragmento. Aneuploidias são detectadas comparando a quantidade de material cromossômico de um cromossomo específico em uma amostra de uma paciente, contra um conjunto de cromossomos de referência.
6 Detecção de anomalias cromossômicas fetais. Cromossomos Trissomia ou Trissomia XX-mulher XY-homem Trissomia 21
7 Detecção de anomalias cromossômicas fetais. O teste pré-natal verifi detecta a trissomia 21, 18 e 13 tanto em gestações unifetais como de gêmeos.
8 Detecção de anomalias relacionadas aos cromossomos sexuais. Cromossomos o XX-mulher XY-homen XXX Monossomia X XXY XYY
9 Detecção de anomalias relacionadas aos cromossomos sexuais. Em gestações unifetais, as aneuploidias dos cromossomos sexuais também podem ser detectadas. O teste é opcional baseado na preferência da paciente e do médico. As aneuploidias dos cromossomos sexuais detectadas incluem 45,X, 47,XXX, 47,XXY, 47,XYY. Em gestações de gêmeos, a presença ou ausência do Y é detectada. O teste é opcional baseado na preferência da paciente e do médico.
10 Como o teste verifi é relatado. Resultados Aneuploidia detectada Aneuploidia suspeita Aneuploidia não detectada
11 Resultados do teste. Existem três resultados possíveis para os autossomos: Aneuploidia detectada, Aneuploidia suspeita (valor limítrofe), Aneuploidia não detectada. Existem dois resultados possíveis para cromossomos sexuais em unifetais: Aneuploidia detectada e aneuploidia não detectada. Caso a aneuploidia não seja detectada, o sexo do feto será relatado. Para gravidez de gêmeos, a presença ou ausência do Y será relatada. Para pacientes que recebem um resultado de aneuploidia detectada ou aneuploidia suspeita, devese oferecer uma discussão dos resultados e opções de testes invasivos (CVS e amniocentese) para confirmação.
12 Sequência normal de teste pré-natal. Pacientes decidem pelo teste pré-natal. NÃO SIM Triagem sérica Diagnóstico TPNI (não invasivo) CVS/Amniocentese (invasivo) SIM O resultado da triagem sérica deu positivo? O resultado do teste verifi deu aneuploidia detectada ou suspeita? SIM NÃO NÃO Continua com o gerenciamento da gravidez de acordo com os protocolos do consultório. Continua com o gerenciamento da gravidez de acordo com os protocolos do consultório. Continua com o gerenciamento da gravidez de acordo com os protocolos do consultório.
13 Sequência normal de teste pré-natal. Considerações de aconselhamento pré-teste O teste de aneuploidia deve ser uma decisão informada. O teste pré-natal verifi testa para aneuploidia dos cromossomos 21, 18 e 13. O teste dos cromossomos sexuais é opcional. Qualquer teste oferecido deve se basear em contexto clínico. CVS e amniocentese continuam a ser opções para todas as mulheres grávidas. Considerações de aconselhamento pós-teste 3 resultados possíveis para cada cromossomo testado. Nenhuma aneuploidia detectada Esse resultado é tranquilizador, mas não garante uma gravidez não afetada. Aneuploidia suspeita/valores limítrofes Esse resultado é sugestivo de aneuploidia. Existe uma pequena possibilidade de que os resultados não reflitam os cromossomos dos fetos, mas podem refletir mudanças na placenta ou no paciente. Aneuploidia detectada Esse resultado é consistente com aneuploidia. Existe uma pequena possibilidade de que os resultados não reflitam os cromossomos dos fetos, mas podem refletir mudanças na placenta ou no paciente. Aconselhamento genético e CVS/amniocentese são recomendados para resultados Suspeitos e Detectados. A triagem de defeito do tubo neural aberto não faz parte do teste TPNI e deve ser oferecida separadamente. Todos os resultados devem ser revistos no contexto do histórico clínico, médico e familiar.
14 Perfil TPNI: o teste verifi por números. 1frasco de sangue 0.1% taxa mais baixa de falhas em testes Nas primeiras 10 semanas de gravidez Testes para as 3 aneuploidias autossômicas mais comuns e aneuploidias sexuais adicionais 2 a 4 Resultados em apenas dias úteis Onde não se pode colocar um número na tranquilidade em saber
15 Em que o teste pré-natal verifi se diferencia? O teste verifi é um exame de sangue fácil feito no consultório - apenas um tubo de sangue é necessário. Pode ser realizado nas primeiras 10 semanas de gravidez. Testa para trissomia 21, 18 e 13 e tem a opção para aneuploidias dos cromossomos sexuais (Monossomia X, XXX, XXY, XYY). Os resultados dos testes geralmente estão disponíveis em 2 4 dias úteis após recebimento da amostra. Tem a menor taxa de falha entre os TPNIs (0,1%). Por esse motivo, o teste verifi é capaz de fornecer respostas confiáveis sobre as anomalias cromossômicas mais comuns.
16 O que é mosaicismo? Divisão de células Tecido mosaico Células normais Células com mutação genética
17 O que é mosaicismo? Mosaicismo é um fenômeno biológico que resulta na presença de células com composição genética diferente, em um mesmo indivíduo. Geralmente ocorre durante o processo de divisão mitótica de células. Mosaicismo pode ser uma causa biológica subjacente de resultados discordantes do TPNI.
18 Tipos de mosaicismo. Dissomia Trissomia Mosaicismo generalizado Mosaicismo Placentário Confinado (CPM) Mosaicismo fetal
19 Tipos de mosaicismo. Existem três tipos de mosaicismo: Mosaicismo generalizado Presença de duas ou mais linhagens de células cariotipicamente diferentes tanto na placenta como no feto. Em casos de mosaicismo generalizado, existe a possibilidade de um resultado positivo falso ou negativo falso do NIPT dependendo da origem do cfdna. Mosaicismo placentário confinado Presença de duas ou mais linhagens de células cariotipicamente diferentes confinadas à placenta e não presentes no feto. Em casos de mosaicismo placentário confinado, existe a possibilidade de um resultado positivo falso do TPNI. Mosaicismo fetal Presença de duas ou mais linhagens de células cariotipicamente diferentes presentes no feto, mas não na placenta. Em casos de mosaicismo fetal, existe a possibilidade de um resultado negativo falso do TPNI.
20 Mosaicismo placentário confinado. Estrutura normal do vilo corial Técnicas laboratoriais usadas para biópsia de vilo corial (CVS) Coluna de células citotrofoblásticas CVS Sinciciotrofoblasto Núcleo mesenquimal Citotrofoblasto Núcleo mesenquimal Suspensão de citotrofoblasto Cultura de vilo Preparação direta
21 Mosaicismo Placentário Confinado (CPM). Mosaicismo placentário confinado (CPM) - Presença de duas ou mais linhagens de células cariotipicamente diferentes confinadas à placenta e não presentes no feto. O cfdna analisado no TPNI vem do citotrofoblasto; por isso o resultado do TPNI é similar ao resultado de preparo direto de uma CVS. CPM Tipo 1 O mosaicismo está confinado a células trofoblásticas. CPM Tipo 2 O mosaicismo está confinado a células do estroma do vilo corial. CPM Tipo 3 O mosaicismo está presente tanto nas células trofoblásticas como no estroma. CPM Tipo 1 e Tipo 3 podem resultar em resultados positivos falsos do TPNI Illumina, Inc. Todos direitos reservados. Illumina e verifi são marcas registradas da Illumina Inc. e/ou de sua(s) afiliada(s) nos EUA e/ou outros países. INTL PRESENTATION-0045 Rev C
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