CONTAGEM DE OVOS DE NEMATÓDEOS GASTRINTESTINAIS EM OVELHAS SANTA INÊS NO PERÍODO PERIPARTO, NO DISTRITO FEDERAL.

UNIVERSIDADE DE BRASILIA FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINÁRIA CONTAGEM DE OVOS DE NEMATÓDEOS GASTRINTESTINAIS EM OVELHAS SANTA INÊS NO PERÍODO PERIPARTO, NO DISTRITO FEDERAL. LUIS ALBERTO LINHARES RUFINO DISSERTAÇÃO DE MESTRADO EM CIÊNCIAS AGRÁRIAS BRASÍLIA / DF ABRIL / 2007

UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINÁRIA CONTAGEM DE OVOS DE NEMATÓDEOS GASTRINTESTINAIS EM OVELHAS SANTA INÊS NO PERÍODO PERIPARTO, NO DISTRITO FEDERAL. LUIS ALBERTO LINHARES RUFINO ORIENTADORA : ARLETE DELL PORTO DISSERTAÇÃO DE MESTRADO EM CIÊNCIAS AGRÁRIAS PUBLICAÇÃO : 261 / 2007 BRASÍLIA / DF MARÇO / 2007

UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINÁRIA CONTAGEM DE OVOS DE NEMATÓDEOS GASTRINSTESTINAIS EM OVELHAS SANTA INÊS NO PERÍODO PERIPARTO, NO DISTRITO FEDERAL. LUIS ALBERTO LINHARES RUFINO DISSERTAÇAO DE MESTRADO SUBMETIDO À FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINÁRIA DA UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA, COMO PARTE DOS REQUISITOS NECESSÁRIOS À OBTENÇÃO DO GRAU DE MESTRE EM CIÊNCIAS AGRÁRIAS NA ÁREA DE CONCENTRAÇÃO DE PRODUÇAO ANIMAL. APROVADA POR: ARLETE DELL PORTO, Doutor. / Universidade de Brasília (ORIENTADOR) CPF 799460898-15 E-mail: arletedp@unb.br GUILHERME SOARES FILHO, Doutor. (EXAMINADOREXTERNO) CPF262593114-00 E-mail : guilhermeanalise@gmail.com GIANE REGINA PALUDO, Doutor. / Universidade de Brasília (EXAMINADOR INTERNO) CPF 618131689-20 E-mail : giane@unb.br Brasília, 26 de fevereiro de 2007.

FICHA CATALOGRÁFICA Rufino, Luis Alberto Linhares Contagem de ovos de nematódeos gastrintestinais em ovelhas Santa Inês no período peri-parto, no Distrito Federal./ Luis Alberto Linhares Rufino; orientação de Arlete Dell Porto Brasília, 2007. 40p.: il. Dissertação de Mestrado (M) Universidade de Brasília/Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2007. 1. Ovelhas. 2. Peri-parto. 3.OPGF. 4.Distrito Federal. I. Dell Porto, A. II. Drª. REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA RUFINO, L.A.L. Contagem de ovos de nematódeos gastrintestinais em ovelhas Santa Inês no período peri-parto, no Distrito Federal. Brasília: Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, 2007, 40p. Dissertação de mestrado. CESSÃO DE DIREITOS NOME DO AUTOR: LUIS ALBERTO LINHARES RUFINO TÍTULO DA DISSERTAÇÃO DE MESTRADO: Contagem de ovos de nematódeos gastrintestinais em ovelhas Santa Inês no período peri-parto, no Distrito Federal. GRAU : MESTRE ANO: 2007 É concedida à Universidade de Brasília permissão para reproduzir cópias desta dissertação de mestrado e para emprestar ou vender tais cópias somente para propósitos acadêmicos e científicos. O autor reserva-se a outros direitos de publicação e nenhuma parte desta dissertação de mestrado pode ser reproduzida sem a autorização por escrito do autor. Luis Alberto Linhares Rufino 289.180-81 SHIN CA 05 CONJ. D BLOCO 1 LAGO NORTE 70505-503 Brasília/D.F. Brasil (61) 9970-0860 - uadnum@yahoo.com.br ii

Aos meus pais Luiz e Rita de Cássia e familiares pelo apoio, Ana Alice e a todos os demais que direta ou indiretamente contribuíram para realização desta pesquisa. Dedico. iii

AGRADECIMENTOS À Universidade de Brasília por permitir utilizar suas instalações, equipamentos e Técnicos; A Sra. Miriam Amorim (ASA ALIMENTOS) por disponibilizar sua propriedade e seus animais para realização do experimento; À Dr.ª Arlete Dell Porto pela orientação, compreensão, paciência, boa vontade, profissionalismo no encaminhamento e resoluções das dificuldades; Aos funcionários da ASA ALIMENTOS OVINOS: Francisco Lins, Jânio, Sr. Antonio, Messias, André, Cícero, Dê, Valteir; À colega Denise e à amiga Salvina, técnicas do Laboratório de Parasitologia, que foram imprescindíveis na execução, processamento e diagnóstico dos dados da pesquisa. Também a colega Eliandra por sua ajuda imprescindível na analise estatística. Aos colegas do Hospital de Grandes Animais UnB, sob coordenação do Prof. José Renato; A todos aqueles que possibilitaram o desenvolvimento da pesquisa; Aos novos amigos e colegas que conheci nesta Universidade. iv

ÍNDICE Capítulos Página INTRODUÇÃO GERAL 01 Ovinocultura no Brasil 02 Helmintoses gastrintestinais em ovinos 02 Eliminação de ovos de helmintos gastrintestinais 04 OBJETIVO 10 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 11 CAPÍTULO ÚNICO 18 CONTAGEM DE OVOS DE NEMATÓDEOS GASTRINTESTINAIS EM OVELHAS SANTA INÊS NO PERÍODO PERIPARTO, NO DISTRITO FEDERAL 19 INTRODUÇÃO 21 OBJETIVO 24 MATERIAL E MÉTODOS 25 Locais de execução, Animais e Manejo 25 Técnicas Parasitológicas 26 RESULTADOS E DISCUSSÃO 27 OPGF MÉDIO 30 TIPO DE PARTO 33 CONCLUSÃO 38 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 39 v

ÍNDICE DE FIGURAS Tabela Página Capítulo Único 1 Valores médios das contagens de ovos de nematódeos de matrizes Santa Inês. Antes do Parto, na Lactação e depois do Desmame. 30 2 - Valores médios das contagens de ovos de nematódeos nas Matrizes Santa Inês. Antes do Parto (AP), Lactação - 1 mês (1ML), Lactação 2 mês (2ML), Desmame 1 mês (1MD), Desmame 2 mês 2MD). 31 3 - Valores médios das contagens de ovos de nematódeos de matrizes em relação ao tipo de parto (Gemelar x Simples) Antes do Parto (AP), Lactação - 1 mês (1ML), Lactação 2 mês (2ML), Desmame 1 mês (1MD), Desmame 2 mês (2MD) 34 vi

Contagem de ovos de nematódeos gastrintestinais em ovelhas Santa Inês no período periparto, no Distrito Federal. RESUMO GERAL A presente pesquisa teve por objetivo avaliar a variação na quantidade de ovos de nematódeos gastrintestinais eliminados nas fezes de ovinos da raça Santa Inês no período do peri-parto numa propriedade próxima a cidade de Samambaia, no Distrito Federal. O grupo experimental foi composto por dezenove matrizes em período peri-parto, com idade entre 2 e 3,5 anos, mantidas em regime semi-intensivo, sendo sete nativas e doze adicionadas ao rebanho um ano antes do início do experimento. Foram realizadas colheitas quinzenais individuais, totalizando quatrocentas amostras. As fezes foram obtidas diretamente da ampola retal em sacos plásticos individuais e mantidas a 4ºC até o processamento. O número de ovos foi determinado utilizando-se a técnica de GORDON e WHITLOCK (1939) modificada. Os animais não foram desverminadas durante o experimento. Foram observadas diferenças nas quantidades de ovos eliminados nas fezes desses animais tanto nas três fases do peri-parto (pré-parto, lactação e desmame), quanto em relação à origem dos animais e ao tipo de parto. Palavras-chave: ovelhas Santa Inês, OPGF, peri-parto, nematódeos, Distrito Federal. vii

Counting of gastrintestinal nematode eggs in Santa Inês sheep during the periparturition period, in the Distrito Federal. ABSTRACT The present research was carried out to evaluate the variation on eggs output ing by gastrintestinal nematodes in Santa Inês sheep during the periparturient period. The experimental group were composed by nineteen ewes, aged between 2 to 3.5 years old, maintained in semi-intensive system in a farm near Samambaia district, in the Distrito Federal. The ewes were from different origins: seven were natives and twelve were introduced to the flock one year before the beginning of the experiment. Individual samples were collected each fifteen days, totalizing four hundred samples. Rectal faecal samples were collected in plastic bags and stored at 4ºC for later analysis. The number of eggs was determined for each sample using the modified GORDON & WHITLOCK technique. There were differences in amount of eliminated eggs quantities related to the three stages of the periparturient period (pré-parturient, lactation and weaning), as well as considering the origin of the animals and related to the number of borned lambs per ewe. Key-words: sheep, Santa Inês breed, EPGF, periparturient, nematodes, Distrito Federal. viii

INTRODUÇÃO GERAL Praticamente a maioria dos ruminantes domésticos, incluindo os ovinos, alberga uma ou mais espécies de endoparasitas, sendo os do trato gastrintestinal os de ocorrência mais freqüente. Esses parasitas infectam o hospedeiro quando ainda muito jovem ocasião em que seu sistema imune não está completamente desenvolvido, impedindo-o de ter um bom desempenho em termos de desenvolvimento. Em geral, essas infecções são de caráter misto com várias espécies atuando de maneiras diversas sobre o organismo hospedeiro. O maior ou menor sucesso desse último para controlar essas infecções depende de fatores, tais como: a tensão de infestação do ambiente onde esse hospedeiro se encontra e, dos gêneros de parasitas aí presentes, a carga genética herdada; o grau de nutrição das fêmeas durante a gestação, e o momento fisiológico do animal (DONALD et al., 1982; COOP & KYRIAZAKIS, 2001; HOUDJIK et al, 2001 e KHAN et al., 2003). No Distrito Federal (DF) tem-se observado que os gêneros de helmintos gastrintestinais mais freqüentes são: Trichostrongylus colubriformis, Haemonchus contortus, Oesophagostomum columbianum, Trichuris globulosa e Moniezia expansa; embora tenha sido registrada também a presença de Cooperia spp., Strongyloides papillosus e Trichostrongylus axei (VELOSO et al., 2004 e CENCI et al., 2005). No Brasil, as condições climáticas são favoráveis à ocorrência dessas parasitoses durante o ano todo, permitindo um bom nível de desenvolvimento dos ovos e de eclosão das larvas que infestarão as pastagens (ECHEVARRIA et al., 1996). Os helmintos resultantes dessas infestações levam as perdas econômicas devido às altas taxas de mortalidade, baixos desempenhos corporal e reprodutivo (HOLMES, 1987). O Distrito Federal caracteriza-se por apresentar um clima peculiar, com duas estações do ano bem definidas: a estação das chuvas, que vai de outubro a fevereiro; e a estação da seca, de março a setembro (MCMANUS & MIRANDA, 1996). A temperatura varia pouco no decorrer do ano, oscilando em média entre 17 e 28ºC. Essas condições mostram-se ideais à manutenção de infestação das pastagens. 1

1.1. Ovinocultura no Brasil A ovinocaprinocultura no Brasil vem tomando impulso cada vez maior, sendo que de um rebanho de 22.722.000 cabeças, 63% são de ovinos (IBGE, 2003). A região Centro-Oeste comporta 4,9% do rebanho nacional de corte (CENCI, 2006), e o Distrito Federal contribui com 0,48 cabeças/km 2 desse efetivo (MCMANUS et al., 1999). Embora a demanda por produtos de ovinos e caprinos tenha um futuro cada vez mais promissor no cenário brasileiro, e a criação de ovinos deslanados venha crescendo em função de sua rusticidade e facilidade de adaptação às diferentes condições climáticas (VASCONCELOS & VIEIRA, 2004) ainda existem fatores que dificultam esse desenvolvimento. Entretanto, há que se ressaltar que um dos entraves no crescimento desse setor é a sanidade, e essa envolve fatores genéticos, nutricionais e reprodutivos; todos eles diretamente relacionados, de alguma forma e com alguma intensidade, às infecções por endoparasitas. 1.2. Helmintoses gastrintestinais em ovinos O controle das parasitoses gastrintestinais pode ser feito com sucesso desde que se conheça sua epidemiologia na região em que se está trabalhando. Esses dados podem ser obtidos por exames laboratoriais periódicos, pela utilização de forma correta dos produtos presentes no mercado e, principalmente por adoção de medidas adequadas de manejo visando a redução da contaminação ambiental pelos estágios de vida-livre dos parasitas (AMARANTE & BARBOSA, 1995). Esse manejo deve ser feito de acordo com a faixa etária e estado fisiológico dos animais, o que implica em melhor conhecimento dos mecanismos que influenciam o comportamento desses parasitas e sua relação com o hospedeiro. Um dos helmintos que causa maior preocupação é o Haemonchus contortus, dada sua alta prevalência no território nacional e pela grande patogenicidade (AMARANTE, 2004). Este helminto parasita o abomaso sendo 2

hematófago, tanto na fase adulta quanto na L4. Nos casos de infecções crônicas (mais comum) observa-se anemia, edema submandibular, diarréia, anorexia progressiva, perda de peso. Os animais portadores de carga parasitária muito elevada (hemoncose aguda) podem ir a óbito em poucos dias com acentuado quadro de anemia e desidratação (SOULSBY, 1971), o que é relativamente comum em ovinos. Considerado de baixa patogenicidade o Trichostrongylus colubriformis, encontrado no intestino delgado (ID) é de ocorrência bastante comum em ovinos do DF (CENCI, 2006). Este parasita penetra na mucosa abaixo do epitélio produzindo descamação do mesmo e com isso diminuindo a absorção de nutrientes. Embora não seja hematófago, pode levar a um quadro de anemia e diarréia quando de infecção muito intensa, ou mesmo a uma redução nos níveis de aminoácidos (SOULSBY, 1971). Infecções por Cooperia spp, nematódeo do ID, têm sido pouco registradas em ovinos no DF (CENCI, 2006), porém esse helminto atua no organismo hospedeiro de forma semelhante ao Trichostrongylus, com o agravante de ser hematófago, e portanto quando de altas infecções causando um quadro de anemia e diarréia sobretudo em animais jovens (SOULSBY, 1971). Via de regra, infecções por Moniezia spp. são assintomáticas, passando despercebidas na maioria das vezes, ou se revelando pelo encontro de proglotes grávidos ou de ovos nas fezes do hospedeiro. Entretanto em animais jovens, ou seja, com menos de 6 meses de idade, altas infecções podem causar obstrução do intestino delgado, anorexia, debilidade e morte (SOULSBY, 1971 e FREITAS, 1977). O Oesophagostomum columbianum é parasita hematófago que tem por habitat o intestino grosso. Depois de ingerida pelo hospedeiro, a L3 (larva infectante) ao chegar no final do ID e início do IG, penetra profundamente na mucosa, atingindo a muscularis mucosae onde causa a formação de nódulos em cujo interior evolui para L4. O primeiro sintoma observado é uma diarréia intensa (saída da L4 dos nódulos para a luz intestinal), de coloração esverdeada ou mesmo com estrias de sangue; o animal mostra-se apático e 3

anorético (FREITAS, 1977). É, portanto, considerado altamente patogênico, sobretudo para ovinos jovens nos qual o encontro de 200 300 vermes adultos é considerada infecção severa. Infecções por Strongyloides papillosus são bastante comuns em animais muito jovens, desde o nascimento até os 4 meses de idade, e em fêmeas gestantes e recém-paridas. Parasita do ID de ovinos, caprinos, bovinos e ruminantes selvagens; promove erosão da mucosa intestinal, traduzindo-se clinicamente por anorexia, perda de peso e diarréia. Ocasionalmente o hospedeiro pode apresentar ligeira anemia (SOULSBY, 1971). Os demais helmintos gastrintestinais passíveis de serem encontrados em ovinos no DF são considerados de baixa patogenicidade, exceto quando em altas infecções (SOULSBY, 1971). 1.3. Eliminação de ovos de helmintos gastrintestinais A quantidade de ovos eliminada pelos parasitas está na dependência de fatores como: quantidade de ovos produzida diariamente, genética do hospedeiro, idade, estado nutricional e fase do ciclo reprodutivo do hospedeiro, dentre outros. No que se refere à quantidade de ovos produzida, esta depende do gênero do nematódeo. Assim tem-se uma estimativa de que uma fêmea de Haemonchus pode produzir até 10.000 ovos/dia; Trichostrongylus e Cooperia produzem ao redor de 150 ovos/dia; Strongyloides papillosus e Oesophagostomum cerca de 3.000 ovos/dia (UENO & GONÇALVES, 1998). A genética do hospedeiro atua de forma a aumentar, ou não, sua resistência às infecções parasitárias, como resultado de maior ou menor estímulo de seu sistema imune (SOULSBY, 1987). A idade também deve ser considerada, uma vez que animais jovens têm seu sistema imune incompetente e, portanto pouco responsivo às infecções por parasitas. Além do que, em se considerando os ruminantes alguns helmintos são próprios de animais jovens sendo-lhes transmitido por via 4

transplacentária ou pelo colostro/leite como é o caso do Toxocara ( Neoascaris) vitulorum e do Strongyloides papillosus. Porém à medida que esses animais se tornam mais velhos e passam a se alimentar no pasto, começam a adquirir novos parasitas que os acompanharão pelo resto de suas vidas (FREITAS, 1977). O estado nutricional de um animal é fator preponderante para que ele responda de maneira satisfatória a uma infecção parasitária. (VELOSO et al, 2004) demonstrou que ovinos da raça Santa Inês submetidos a uma alimentação mais rica em proteínas apresentaram menor número de ovos por grama de fezes e menor número de parasitas adultos quando comparados àqueles sem suplementação protéica. No que diz respeito ao ciclo reprodutivo, tem-se que levar em conta, sobretudo as fêmeas, as quais sofrem acentuadas variações nos níveis hormonais, principalmente no período de procriação. Um fenômeno que vem sendo observado há bastante tempo é a queda na resistência adquirida pelas ovelhas aos parasitas gastrintestinais no período próximo ao parto e durante a lactação, ou Período Peri-Parto, com importantes conseqüências epidemiológicas e produtivas (BARGER, 1993). Essa queda na resistência às infecções, resulta em aumento na quantidade de ovos eliminados juntamente com as fezes do hospedeiro no período que antecede o parto e se prolonga até o fim da lactação, denominado Fenômeno do Peri-Parto (FPP) (AMARANTE et al., 1992; CIARLINI, 1998). Nos países de clima frio ocorre principalmente na primavera, porém nos países de clima tropical este fenômeno é passível de ocorrer durante o ano todo. Desde que foi descrito pela primeira vez por TAYLOR em 1935, várias hipóteses vêm sendo formuladas ao longo do tempo na tentativa de explicar o Fenômeno do Peri-Parto, todas elas envolvendo três pontos básicos: a imunidade do animal, sua condição nutricional e a ação dos hormônios do peri-parto. No intuito de demonstrar a complexidade do assunto e a divergência de opiniões entre os vários pesquisadores, considera-se conveniente fazer uma retrospectiva dos vários trabalhos até agora publicados. 5

NEARLAND (1949) pela primeira vez tenta explicar tal fenômeno sugerindo que o aumento do número de ovos nas fezes, no período pós-parto, deve-se à maturação de larvas que estavam em dormência (inibidas), sendo o estresse do parto o fator desencadeante desse desenvolvimento, também consideram o estresse do parto como o mecanismo desencadeante do reinício de desenvolvimento de larvas que estavam em quiescência (TAYLOR & MICHEL, 1953). CROFTON em 1954 procura explicar a associação entre lactação e aumento na contagem de ovos nas fezes após o parto. Segundo ele nesse período haveria perda de resistência da ovelha, permitindo entrada e instalação de larvas infectantes. Já SOULSBY (1957) propõe uma base imunológica para o fenômeno, alegando que durante o inverno a pouca quantidade de larvas leva a uma queda na estimulação antigênica do organismo hospedeiro; e que o aumento que ocorre na primavera é conseqüência dessa falha no sistema imune justamente no momento em que as larvas estão acordando. DUNSMORE (1965) cita vários exemplos de parasitas nos quais as atividades reprodutiva foi alterada devido a variações no estado hormonal do hospedeiro, sem que houvesse necessariamente ação direta do hormônio sobre o parasita. GIBBS (1967), apud GIBBS & BARGER (1986), observou o efeito direto dos hormônios do hospedeiro no parasita, ou mais especificamente hormônios do parto e da lactação que atuariam permitindo massiva ativação de larvas que estavam em dormência. O aumento de Ovos por Grama de Fezes - OPGF foi verificado por CONNAN (1968) em fêmeas que permaneceram com suas crias e número bastante baixo naquelas cujos borregos foram retirados logo após o nascimento, concluindo que o pico pós-parto está mais intimamente associado com a lactação do que com a gestação ou o parto. ARUNDEL & FORD (1969) constataram o efeito direto dos hormônios do hospedeiro em larvas dormentes, durante a lactação, com subseqüente elevação na contagem do (OPGF), reforçando a hipótese de GIBBS (1967). 6

BRUNSDON (1970) compara cargas de helmintos e OPGF de ovelhas no período do parto, com disponibilidade de várias espécies de tricostrongilídeos na pastagem e conclui que a suscetibilidade é espécieespecífica, ou seja, para cada gênero de helminto o hospedeiro apresenta um determinado grau de suscetibilidade. O SULLIVAN & DONALD (1970) observaram aumento no OPGF e no número de parasitas em ovelhas lactantes, sobretudo de Haemonchus contortus, Trichostrongylus colubriformis e Ostertagia spp. Eles postularam que esse fato pode ocorrer primeiramente a uma depressão temporária da capacidade imunológica, em função de alterações endócrinas associadas à lactação e segundo que se a lactação for evitada, ou prematuramente encerrada, a parturiente recupera sua capacidade imune efetiva e é capaz de rejeitar larvas recentemente adquiridas e alguns dos parasitas que tenham se estabelecido anteriormente. SANTIAGO et al. (1970), no Rio Grande do Sul, fizeram à primeira publicação de trabalho realizado no Brasil sobre o tema em questão. Encontraram uma estreita relação entre o aumento do OPGF e o parto. Para BRUNSDON (1971) a variação na população de parasitas, e conseqüentemente no OPGF no período peri-parto está relacionado ao ano, ao experimento, e com a resistência herdada ou adquirida pelo animal utilizado no experimento. BRUNSDON & VLASSOFF (1971) observaram aumento do número de ovos eliminados no período pré-parto e enfatizaram que tal fato deve-se a uma queda no estado imunológico das ovelhas naquele período. Em 1972, DINEEN & KELLY demonstraram, em ratos, a ação de hormônios lactogênicos inibindo direta ou indiretamente os linfócitos responsáveis pela eliminação de vermes, fazendo com que a população dos mesmos permanecesse alta. Experimento realizado em 1973 por O SULLIVAN & DONALD, com ovelhas prenhes e em lactação contaminadas com Haemonchus contortus, os levaram a concluir que a gestação e a lactação não afetaram o estabelecimento de infecções por aquele parasita, porém aumentaram sua fecundidade. 7

Dados obtidos por MICHEL (1974 e 1976) levam-no a concluir que o aumento de ovos no período pós-parto se deve à queda no índice normal de mortalidade de parasitas adultos em ovelhas lactantes. Segundo COURTNEY et al. (1984) o aumento no OPGF no periparto deve-se a mudanças hormonais associadas a uma supressão imunitária no período da lactação que leva a uma queda nas barreiras que impedem a instalação das larvas; assim como há aumento na fecundidade das fêmeas dos helmintos e diminuição na capacidade de expulsão dos mesmos. De acordo com GIBBS (1986) as ovelhas em lactação têm sua resposta imunológica temporariamente prejudicada, culminando em aumento na suscetibilidade a novas infecções, e na quantidade de fêmeas de parasitas resultantes das formas jovens que estavam até então em dormência. GIBBS & BARGER (1986) observaram em ovelhas, logo após o parto, aumento na OPGF. Verificam também que fêmeas lactantes se contaminam mais com larvas de Ostertagia circumcincta e Trichostrongylus colubriformis quando comparadas com fêmeas secas, porém o nível de contaminação é o mesmo em relação a Haemonchus contortus. Esses resultados os levam a sugerir que a queda de imunidade a infecções helmínticas em fêmeas em reprodução pode ser mais específica do que se imaginava. FLEMING et al. (1988) trabalhando com ovelhas ovariectomizadas e tratadas com prolactina e progesterona simultaneamente, observaram aumento do OPGF nesses animais, comprovando efeito dessa combinação hormonal. AMARANTE et al. (1992), comparando o OPGF em ovelhas de quatro raças (Romney-Marsh, Merino Australiano, Corriedale e Ideal), observaram aumento significativo no final da gestação e durante a lactação, sendo que as Romney-Marsh apresentaram menor OPGF, considerando assim essa raça mais resistente à verminose que as demais. WOOLASTON (1992) verificou significante diferença no OPGF de fêmeas lactantes de diferentes linhagens de Merino Australiano, postulando que o componente genético do animal é muito importante na resposta às infecções por helmintos. 8

Em experimento realizado no Paraná, OTTO et al., (1994) observaram ovelhas com maior OPGF no final da gestação e início da lactação, sendo que as que perderam suas crias passaram a apresentar um OPGF negativo. Corroborando com estes dados MORRIS et al. (1998) verificaram haver uma acentuada correlação positiva no OPGF de ovelhas e suas crias, reinfatizando a transmissão do caráter genético que favorece a resistência às infecções por nematódeos gastrintestinais. Já TEMBELY et al. (1998) verificaram que o número de borregos ao parto também tem influência no OPGF apresentado pelas mães, ou seja, partos com duas crias levam a um aumento acentuado no OPGF materno. AMARANTE et al., (1999) chamaram a atenção para o fato que algumas raças de ovinos são geneticamente mais resistentes às infecções por nematódeos, e nesses casos o Fenômeno do Peri-Parto (FPP) é menos pronunciado. AMARANTE, (2002) observou que ovinos da raça Santa Inês são mais resistentes às infecções por nematódeos, quando comparados com Suffolk e Ile de France, o que lhes permite um FPP menos estressante. NG ANG A et al., (2004), no Kênia, registraram a ocorrência do fenômeno do peri-parto em ovelhas Dorper, no final da estação seca e início das chuvas, atribuindo-o ao recomeço do desenvolvimento das larvas hipobióticas, uma vez que nesse período a quantidade de larvas nas pastagens estavam muito baixa. HOUDIJK et al., (2001) demonstraram que uma suplementação de proteína metabolizável pode atenuar a queda de imunidade contra Teladorsagia circumcincta, que comumente ocorre durante o período periparto. 9

2. OBJETIVO Verificar a quantidade de ovos de nematódeos gastrintestinais eliminados durante o peri-parto, em ovelhas Santa Inês criadas semiintensivamente no Distrito Federal. 10

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Capítulo único - Contagem de ovos de nematódeos gastrintestinais em ovelhas Santa Inês no período periparto, no Distrito Federal. 18

Contagem de ovos de nematódeos gastrintestinais em ovelhas Santa Inês no período periparto, no Distrito Federal. L.A.L.Rufino 1, A. Dell Porto 1, D.S.V. de Melo 1 1 Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, Caixa Postal 04508 CEP 70910-900 Brasília-DF, Brasil. RESUMO A presente pesquisa teve por objetivo avaliar a variação na quantidade de ovos de nematódeos gastrintestinais eliminados nas fezes de ovinos da raça Santa Inês no período do peri-parto criados semi-intensivamente numa propriedade próxima a cidade de Samambaia, no Distrito Federal. O grupo experimental foi composto por dezenove matrizes em período peri-parto, com idades entre 2 e 3,5 anos, mantidas em regime semi-intensivo, sendo sete nativas e doze adicionadas ao rebanho um ano antes do início do experimento. Foram realizadas colheitas quinzenais individuais, totalizando quatrocentas amostras. As fezes foram obtidas diretamente da ampola retal em sacos plásticos individuais e mantidas a 4ºC até o processamento. O número de ovos foi determinado utilizando-se a técnica de GORDON & WHITLOCK (1939) modificada. Os animais não foram vermifugados durante o experimento. Observaram-se diferenças nas quantidades de ovos eliminados nas fezes desses animais na fases de lactação. Palavras-chave: ovelhas Santa Inês, OPGF, peri-parto, nematódeos, Distrito Federal. uadnum@yahoo.com.br, arletedp@unb.br. Fone/Fax; (61) 3307.2989 19

Counting of gastrintestinal nematode eggs in Santa Inês sheep during the periparturition period, in the Distrito Federal. L.A.L.Rufino 1, A. Dell Porto 1, D.S.V. de Melo 1 ABSTRACT The present research was carried out (performed) to evaluate the variation on output of eggs by gastrintestinal nematodes in Santa Inês sheep in the periparturient period. The experimental group were composed by nineteen ewes), aged between 2 to 3.5 years old, maintained in semi-intensive system in a farm near Samambaia district, in the Distrito Federal. The ewes were from different origins: seven were natives and twelve were introduced to the flock one year before the beginning of the experiment. Individual samples were collected each fifteen days, with a total of four hundred samples. Rectal faecal samples were collected in plastic bags and stored at 4ºC until to be processed. The number of eggs was determined for each sample using the modified GORDON & WHITLOCK technique (1939). The ewes were not treated during the experimental period. Differences in the eliminated eggs quantities were observed related to the stages of the lactation. Key-words: sheep, Santa Inês breed, EPGF, periparturient, nematodes, Distrito Federal. 20

1. INTRODUÇÃO Praticamente 100% dos ruminantes domésticos albergam uma ou mais espécies de endoparasitas. Os parasitas do trato gastrintestinal infectam o hospedeiro quando ainda muito jovem, ocasião em que seu sistema imune não está completamente desenvolvido e a partir do 3º ou 4º mês de vida essas infecções tornam-se de caráter misto com várias espécies atuando de maneiras diversas sobre o organismo hospedeiro. O maior ou menor sucesso do organismo para controlar essas infecções depende de diversos fatores, tais como: a carga genética herdada, o grau de nutrição da ovelha durante a gestação, a tensão de infestação do ambiente onde esse hospedeiro se encontra e dos gêneros de parasitas aí presentes (DONALD et al., 1982; HOUDJIK et al, 2001). Contudo, é importante salientar que infecções causadas por helmintos do trato gastrintestinal, são responsáveis pela queda de produção e de produtividade do rebanho. O risco desta parasitose ocasionar a morte das mães e filhotes é permanente. Os efeitos mais comumente observados são: má absorção de nutrientes, anemia, desidratação, perda de peso, redução da fertilidade e diminuição na quantidade e qualidade da lã. No que diz respeito aos cordeiros a situação torna-se ainda mais delicada, visto que um animal infectado dificilmente recupera-se em termos de ganho de peso, resultando em desenvolvimento corporal inadequado (AMARANTE, 2004 e OTTO, 1994). O acompanhamento desta parasitose é importante para identificar o grau de contaminação do rebanho, além de auxiliar na definição de estratégias de controle dos parasitas gastrintestinais. O primeiro passo para esse 21

acompanhamento é o exame laboratorial no qual se quantifica os ovos dos parasitas que saem juntamente com as fezes do hospedeiro e que irão contaminar as pastagens. Nessa quantificação, portanto, determina-se o número de ovos por grama de fezes vulgarmente denominado OPG. Embora se considere que para ovinos um OPGF de 1000 represente uma infecção moderada (UENO & GONÇALVES, 1998) indicando necessidade de tratamento, há que se considerar que dependendo do número de ovos eliminado por um determinado gênero de tricostrongilídeo e, principalmente da ação patogênica do helminto, a ação requerida junto ao hospedeiro irá variar. Tais fatos reiteram a importância da identificação dos gêneros de helmintos que estão infestando os animais. Embora a quantidade de ovos eliminados seja variável em função de inúmeros fatores como: condições climáticas, topografia de região, raça, estado nutricional e fisiológico do animal, alguns fatores são predominantes em determinado(s) período(s) da vida do animal. Assim tem-se, em praticamente todas as espécies animais e, sobretudo em ovinos, que as fêmeas sofrem uma queda na resistência aos parasitas gastrintestinais no período do parto e da lactação, ou Período Peri-Parto (BARGER, 1993). Essa queda na resistência resulta em aumento na quantidade de ovos eliminados juntamente com as fezes do hospedeiro no período que antecede o parto e se prolonga até o final da lactação, e a este se denomina Fenômeno do Peri-Parto - FPP (AMARANTE et al., 1992; CIARLINI, 1998), ou mais comumente Aumento do Peri-Parto (APP). Várias teorias foram sendo propostas para explicá-lo. Nos países de clima frio ocorre principalmente na primavera, porém nos países de clima tropical este fenômeno é passível de ocorrer durante o ano todo. 22

Várias hipóteses têm sido levantadas na tentativa de explicar esse fenômeno seja por fatores genéticos (MORRIS et al., 1998 e ROCHA et al., 2004), hormonais (ARUNDEL & FORD, 1969 e O SULLIVAN & DONALD, 1980), nutricionais (MORGAN et al., 1951), imunológicos (SOULSBY, 1957), bem como em função da tensão de infestação do ambiente. (COOP & KYRIAZAKIS, 2001 e KHAN et al., 2003). Os aspectos de clima, vegetação e tipo de terreno onde vivem os animais podem influenciar nesse fenômeno, juntamente com o tipo de manejo a que são submetidos. Animais confinados ou semi-confinados ou de criações extensivas responderão de forma distinta à quantidade de ovos nas fezes, pois a quebra do ciclo do parasita através da mudança de pastagem, ou mesmo limpeza de instalações, temperaturas elevadas, baixa umidade e alta pluviometria podem criar barreiras para instalações de novos vermes ou mesmo dificultar a sobrevivência dos mesmo no hospedeiro.. 23

2. OBJETIVO Verificar a quantidade de ovos de nematódeos gastrintestinais eliminados durante o peri-parto, em ovelhas Santa Inês criadas semiintesivamente no Distrito Federal. 24

2. MATERIAL E MÉTODO 2.1 Locais de execução, Animais e Manejo. O experimento foi realizado na fazenda Asa Alimentos filial 04 setor de ovinos, situada na zona rural de Samambaia - Distrito Federal, e que conta com um rebanho de corte de aproximadamente 600 matrizes da raça Santa Inês, mantidos em sistema semi-intensivo com rotação de pastagens em pastos capim-elefante (Pennisetum purpureum), capim - tanzânia (Panicum maximum Jacq. cv. Tanzânia) capim-aruana (Panicum maximum Jacq. cv. Aruana) Do total de animais foram selecionadas, por exames de fezes positivos para ovos de tricostrongilídeos ou mesmo de Strongyloides (raros), 19 (dezenove) fêmeas naturalmente infectadas, no último mês de gestação. Durante a realização do experimento essas fêmeas ficaram alojadas numa maternidade do galpão, saindo apenas depois do desmame, que ocorre quando os cordeiros atingem 60 (sessenta dias). Diariamente, recebiam forragem nos cochos, suplementada com ração produzida na própria propriedade. No período de fevereiro a julho de 2006, foram realizadas colheitas quinzenais individuais, para fins de diagnóstico quantitativo dos nematódeos gastrintestinais. As colheitas eram realizadas sempre no período da manhã, e envolveram as seguintes fases do periparto: antes do parto, durante a lactação e após o desmame. Os animais alojados estavam em bom estado de saúde. As matrizes do experimento não sofreram escassez de alimentos. Apesar do período da execução da pesquisa ter acometido na estação da seca, o volumoso oferecido 25

vinha das capineiras mantidas na propriedade, sem utilização de silagem. Não faltou fornecimento de ração, que é fabricada na própria empresa, e a suplementação do sal. O fornecimento do volumoso e concentrado era realizado diariamente pela manhã e no início da tarde, sendo que o sal mineral ficava com livre acesso às matrizes ao longo do experimento. 2.2. Técnicas Parasitológicas As fezes foram colhidas em sacos plásticos, diretamente da ampola retal e mantidas sob refrigeração até chegada ao Laboratório de Parasitologia da FAV/UnB e processadas segundo técnica de GORDON & WHITLOCK (1939) modificada, com o resultado expresso em Ovos por Grama de Fezes (OPGF). Durante esse período os animais não foram submetidos a nenhum tratamento antihelmíntico. Foi determinado o OPGF médio antes do parto, durante a lactação e após o desmame dos cordeiros. Utilizando-se destes dados fez-se um acompanhamento de todas as ovelhas, e como se comportavam nessas fases do ciclo reprodutivo. Para melhor compreensão da dinâmica de infecção, os dados foram agrupados em médias mensais. O delineamento experimental utilizado foi o DIC (Delineamento Inteiramente Casualisado) com os animais sendo usados como repetição. Os resultados foram submetidos à analise de variância usando o procedimento GLM do pacote SAS (System of it Analyzes Statistics,1999). As médias foram comparadas pelo teste de Tukey s a 5% de probabilidade. 26

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO O fenômeno do peri-parto tem grande importância na epidemiologia das nematodioses gastrintestinais nos ovinos. Ele se caracteriza por um aumento na contagem de ovos eliminados nas fezes (OPGF) perto do período de parição até o fim da lactação. Segundo SOULSBY (1987) dentre os fatores que promovem essa elevação há que se considerarem os hormônios glicocorticóides, adrenocorticotróficos e a prolactina que causam supressão da reatividade dos linfócitos, permitindo a manutenção da população de parasitas adultos. Essa elevação também se deve a um aumento na fecundidade dos vermes adultos; à retomada do desenvolvimento de larvas hipobióticas e ao estabelecimento de novas larvas infectantes (AMARANTE, 1992). Há ainda várias publicações sobre outros fatores que podem causar esse aumento na eliminação dos ovos nas fezes. Os resultados do presente estudo mostram ocorrência de aumento na contagem dos ovos eliminados nas fezes, por ovelha da raça Santa Inês, durante o período peri-parto (PPP), sendo que algumas matrizes tiveram um comportamento típico em conformidade com a maioria das publicações, enquanto que outras apresentaram respostas bem peculiares. No geral, os dados revelam uma diversidade na quantidade de ovos nas fezes, Embora aumentos de contagem tenham sido observados em períodos que variaram de catorze dias antes do parto até setenta e sete dias pós-parto, a elevação maior ocorreu no primeiro mês de lactação. Resultado semelhantes foram obtidos por (OTTO, 1994; SALISBURY & ARUNDEL, 1970) Alguns animais apresentaram aumento no OPGF durante o desmame, fato também constatado por COURTNEY et al. (1984). 27

3.1 OPGF MÉDIO Os dados obtidos com as 19 ovelhas, nas três fases do Período Peri- Parto (antes do parto, lactação e desmame) foram agrupados e acham-se expressos na Fig. 1. 460 440 420 400 380 360 340 320 300 Ovos por Grama de Fezes 280 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 ANTES PARTO LACTAÇÃO DESMAME MATRIZES Figura 1 Valores médios das contagens de ovos de nematódeos nas matrizes Santa Inês. Antes do Parto, na Lactação e depois do Desmame. Na Fig. 1 comparam-se os valores médios das contagens de ovos de nematódeos gastrintestinais por grama de fezes (OPGF) eliminados por matrizes Santa Inês no período peri-parto. Observa-se que essas ovelhas na fase de lactação tiveram um OPGF médio maior que nos demais períodos. A análise estatística dos dados da Fig. 1 revela diferença significativa apenas no OPGF do período de lactação (P< 0,05). A análise dos valores obtidos nos períodos antes do parto e ao desmame não tiveram diferenças estatísticas significativas. 28

Para melhor visualização do ocorrido nessas fases, os dados foram mais especificamente detalhados em cada uma das fases do PPP, ou seja: AP = 357,26; 1ML = 603,56; 2ML = 268,84; 1MD = 189,58 e 2MD = 97,88, e acham-se demonstrados na Fig. 2. 700,00 650,00 600,00 550,00 500,00 Ovos por Grama de Fezes 450,00 400,00 350,00 300,00 250,00 MATRIZES 200,00 150,00 100,00 50,00 0,00 AP 1ML 2ML 1MD 2MD Figura 2 Valores médios das contagens de ovos de nematódeos das matrizes Santa Inês. Antes do parto (AP), Lactação - 1 mês (1ML), Lactação 2 mês (2ML), Desmame 1 mês (1MD), Desmame 2 mês (2MD). Na Fig. 2 fica evidenciado o fenômeno do peri-parto, em função do aumento ocorrido na contagem média de ovos após o parto (> 600 OPGF), sobretudo no primeiro mês de lactação, com posterior queda gradual. No desmame as contagens de ovos atingiram valores menores que 150 OPGF. 29

Também na Fig. 2 estão representadas as médias de OPGF de todos os animais do experimento, porém tem-se que a maioria das matrizes compradas teve parto gemelar. Esse fato também pode ter interferido na quantidade de ovos eliminados nas fezes por essas ovelhas, uma vez que nessa condição as exigências do organismo materno são maiores principalmente em termos de nutrientes, e em não havendo uma suplementação adequada, o animal torna-se menos apto a controlar as infecções por parasitas (HOUDJIK, 2001; TEMBLEY, 1998). Mesmo com o aumento do OPGF em determinados momentos do experimento, os valores médios observados estipulados por UENO & GONÇALVES (1998) para ovos de helmintos em ovinos, para infecção mista. Além disso, algumas matrizes mantiveram a contagem de ovos nas fezes com valores mínimos, mesmo durante o PPP. Esses dados sugerem que esses animais possam ser considerados resistentes aos parasitas. Esse tipo de resposta é semelhante à observada por COURTNEY et al. (1984) em fêmeas de outras raças, que foram consideradas resistentes por terem apresentado um pequeno ou nenhum aumento no OPGF durante o peri-parto. Resultados semelhantes também foram obtidos por MORAES (2000); BUENO et al. (2002); AMARANTE et al. (2004) e ROCHA et al. (2004) com ovinos da raça Santa Inês, levando-os a considerar os animais dessa raça como portadores de uma resistência natural às infestações por nematódeos. O aumento do OPGF observado no período de lactação, tanto nas pode ter acontecido devido a uma depressão na capacidade imunológica associadas com mudanças hormonais decorrentes da lactação. De acordo com O SULLIVAN & DONALD (1970,1973); CONNAN (1968); COURTNEY et al. 30