NEW DELHI METALO-BETA-LACTAMASE NDM Marcelo Pillonetto LACEN/PR Curitiba, 04 de julho de 2013
Resistência Bacteriana Previa ao uso de antimicrobianos Resistência intrínseca Resistência adquirida S.aureus x Penicillium Natureza Em 1942 10% de resistência
Resistência Bacteriana Fleming 1945 Uso equivocado da penicilina Seleção e propagação de formas mutantes Doses baixas: Falha e propiciam desenv. de formas R, Disseminação para pessoas suscetíveis
Histórico da Resistência Bacteriana 1960-70 S. aureus 1970-80 Enterobactérias 1980-90 MRSA 1990-1995 AmpC
Histórico da Resistência Bacteriana 1995-2000 VRE/ VISA/VRSA 2000-2005 ESBL / OXA-23 2005-2010 KPC / SPM 2010-2015 NDM - 1
E Atualmente? Todas ainda circulam: KPC ESBL, ampc Pseudomonas MBL (SPM) Acinetobacter oxa-23 VRE (vana), MRSA Micobacterias, S. pneumoniae
GN GP
E o que vem pela frente? KPC Tigeciclina e Polimixina R Pseudomonas Polimixina e Colistina R Acinetobacter Polimixina e Colistina R OXA-48 e outras CRE E..
O que é a NDM?
NMD New Delhi Metalo-Beta-Lacmase tipo 1 NDM-1 É uma enzima da classe das metalo-betalactamases (grupo B de Ambler) Veiculada por plasmídeos (gene bla NDM ) Hidrolisa todos beta- lactâmicos.
Onde surgiu a NDM?
NDM - Origins Novembro de 2007 Sueco tratado na Índia Cidade de Ludhiana abscesso glúteo Dezembro de 2007 Nova cirurgia Cidade de New Delhi úlcera de decúbito Janeiro de 2008 Suécia Bactéria multir isolada da urina Metalo-beta-lactamase: New Delhi MBL -1 (NDM-1)
NDM - Origins 2008 India, Paquistao, Inglaterra Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae Novembro de 2010 Canada, EUA, Japao, Europa, Australia Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae Novembro de 2011 Guatemala Klebsiella pneumoniae Junho e Agosto de 2012 Uruguai e Colombia Providencia rettgeri e Klebsiella pneumoniae Novembro de 2012 Paraguai Acinetobacter baumannii
Worldwide distribution of NDM-1-producing E. coli and K. pneumoniae isolates. Poirel L et al. Antimicrob. Agents Chemother. 2011;55:5403-5407
NDM - Origins Abril, 2013 Brasil Porto Alegre, RS Providencia rettgeri e Enterobacter cloacae 5 casos 01 infeccao seguida de obito 04 colonizacoes Caso indice de novembro de 2012
Figure 1 Numbers of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae referred from UK laboratories to the UK Health Protection Agency's national reference laboratory from 2003 to 2009 The predominant gene is bla NDM-1, which was first identified in 2008. The... Karthikeyan K Kumarasamy, Mark A Toleman, Timothy R Walsh, Jay Bagaria, Fafhana Butt, Ravikumar Balakrishnan... Emergence of a new antibiotic resistance mechanism in India, Pakistan, and the UK: a molecular, biological, and epidemiological study The Lancet Infectious Diseases Volume 10, Issue 9 2010 597-602
Como suspeitar de NDM?
Suspeita de NDM Observar: Enterobactérias Resistentes a Carbapenêmicos Providencia rettgeri Enterobacter cloacae e outras spp Klebsiella pneumoniae Escherichia coli Acinetobacter baumannii Região de Foz do Iguaçu Turismo médico no Paraguai
Como pesquisar NDM?
Enterobactérias R a Carbapenêmicos Grupo CESP Pesquisar NDM IMI e MER e IMI e MER + EDTA Se Positivo Provavel MBL Enviar LACEN Se neg : PCR para carbapenemases Nao CESP NDM: IMI, MER, ERT e IMI, MER, ERT + EDTA AmpC Cloxacilina KPC Ac. Fenilborônico
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Como interpretar?
NDM CESP E NÃO-CESP Halo de (IMP/MER+ EDTA) halo (IMP/MER) 5 mm Em função da positividade do teste fenotípico para (MBL) metalo-betalactamase (bloqueio enzimático com EDTA) será realizada PCR para blandm. 5 mm: Pesquisa fenotípica de MBL negativa Grupo CESP: pesquisar KPC por métodos moleculares CESP: Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Providencia, Morganella e Hafnia
KPC NÃO-CESP Halo de (IMP/MER+ AFB ) halo (IMP/MER) 5 mm E Halo de (IMP/MER+ CLOX ) halo (IMP/MER) 5 mm A detecção de KPC foi realizada por bloqueio enzimático com ácido fenilborônico, método com especificidade superior a 99%. A confirmação por PCR poderá ser realizada mediante solicitação específica ou envio a laboratório de referência. CESP: Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Providencia, Morganella e Hafnia
AmpC plasmidial + perda de porina NAO-CESP Halo de (IMP/MER+ AFB ) halo (IMP/MER) 5 mm E Halo de (IMP/MER+ CLOX ) halo (IMP/MER) 5 mm A detecção de AmpC plasmidial foi realizada por bloqueio enzimático pelo ácido fenilborônico e potenciação com cloxacilina. A expressão de AmpC plasmidial, quando associada à perda de porinas pode causar resistência aos carbapenêmicos. CESP: Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Providencia, Morganella e Hafnia
Outras situações Diferenças de halo de (IMP/MER+ AFB ) halo (IMP/MER) Todos 5 mm Oxa-48 ou perda de porina Nas enterobactérias não pertencentes ao grupo CESP, a negatividade dos testes fenotípicos para KPC, metalobetalactamases e AmpC, mas resistência a carbapenêmicos podem indicar a presença da carbapenemase OXA-48 ou perda deporinas.
Como interpretar?
Metodos Todas as cepas CRE (IMP e/ou ERT e/ou MER) Teste de Hodge Pesquisa molecular de bla KPC e bla NDM Protocolo CDC qpcr Duplex Pesquisa de NDM, KPC e OXA-48 qpcr automatizado TESTES DE BLOQUEIO ENZIMATICO Aguardando aquisição de insumos.
O que o LACEN faz?
Testes realizados até 03/07/2013 Pesquisa de NMD (qpcr) Acinetobacter baumannii 150 testes Todos negativos Enterobactérias (CESP e NAO-CESP) Aprox. 329 isolados Todos negativos para NDM
Marcelo Pillonetto Serviço de Bacteriologia Molecular marcelopilonetto@gmail.com 41-3299-3245/3243