UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MONTES CLAROS

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MONTES CLAROS DISPERSÃO DO PARASITOIDE Diachasmimorpha longicaudata (ASHMEAD) (HYMENOPTERA: BRACONIDAE) EM CAFEEIRO IRRIGADO, NO SEMIÁRIDO MINEIRO CRISTIANE RAMOS COUTINHO 2012

CRISTIANE RAMOS COUTINHO DISPERSÃO DO PARASITOIDE Diachasmimorpha longicaudata (ASHMEAD) (HYMENOPTERA: BRACONIDAE) EM CAFEEIRO IRRIGADO, NO SEMIÁRIDO MINEIRO Dissertação apresentada à Universidade Estadual de Montes Claros, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Produção Vegetal no Semiárido, área de concentração em Produção Vegetal, para obtenção do título de Magister Scientiae. Orientadora Prof a. D.Sc. Clarice Diniz Alvarenga Corsato JANAÚBA MINAS GERAIS BRASIL 2012

C871d Coutinho, Cristiane Ramos. Dispersão do parasitóide Diachasmimorpha longicaudata (Ashmead) (Hymenoptera: Braconidae) em cafeeiro irrigado, no semiárido mineiro. [manuscrito] / Cristiane Ramos Coutinho. 2012. 58 p. Dissertação (mestrado)-programa de Pós-Graduação em Produção Vegetal no Semiárido, Universidade Estadual de Montes Claros-Janaúba, 2012. Orientadora: Profª.D.Sc.Clarice Diniz Alvarenga Corsato. 1. Café. 2. Controle biológico. 3. Moscas-das-frutas. I. Corsato, Clarice Diniz Alvarenga. II. Universidade Estadual de Montes Claros. III. Título. CDD. 633.7387 Catalogação: Biblioteca Setorial Campus de Janaúba

CRISTIANE RAMOS COUTINHO DISPERSÃO DO PARASITOIDE Diachasmimorpha longicaudata (ASHMEAD) (HYMENOPTERA: BRACONIDAE) EM CAFEEIRO IRRIGADO, NO SEMIÁRIDO MINEIRO Dissertação apresentada à Universidade Estadual de Montes Claros, como parte das exigências do Programa de Pós- Graduação em Produção Vegetal no Semiárido, área de concentração em Produção Vegetal, para obtenção do título de Magister Scientiae. APROVADA em 05 de setembro de 2012. Profa. D.Sc. Clarice Diniz Alvarenga Corsato UNIMONTES (Orientadora) Profa. D.Sc. Teresinha Augusta Giustolin UNIMONTES (Coorientadora) Prof. D.Sc. Carlos Augusto Rodrigues Matrangolo UNIMONTES D.Sc. Beatriz Aguiar Jordão Paranhos EMBRAPA SEMIÁRIDO JANAÚBA MINAS GERAIS BRASIL 2012

A Deus onipotente; Aos meus pais, Débora e Waldecy; Aos meus irmãos, Delane e Rodrigo. Dedico

AGRADECIMENTOS Receber o diagnóstico de um câncer foi a parte mais difícil da história, mas com muita fé consegui vencer. Por esse e outros motivos só tenho a agradecer a Deus, por ter me dado forças e coragem para seguir em frente. Só Ele sabe o quanto foi difícil concluir mais esta etapa de minha vida. A minha família, em especial aos meus pais, Débora e Waldecy, pelo apoio e pelas palavras sábias e amorosas, que não me deixaram desanimar ou desistir dos meus sonhos. À CAPES, pela concessão da bolsa. À FAPEMIG, pelo apoio financeiro para realização desta pesquisa, e à UNIMONTES, pela oportunidade dada à minha formação profissional. A todos os professores e funcionários da UNIMONTES, pelo apoio. A minha orientadora, professora Clarice Diniz Alvarenga Corsato, juntamente com a coorientadora, a professora Teresinha Augusta Giustolin, pelos ensinamentos transmitidos, apoio nos momentos mais difíceis e principalmente compreensão durante a realização desta pesquisa. Serei sempre grata a vocês! Ao professor Carlos Augusto Rodrigues Matrangolo e à pesquisadora Beatriz Aguiar Jordão Paranhos, pela participação na banca examinadora. Ao Sr. Paulo Sérgio, proprietário da área de café do Projeto Jaíba onde foi realizado o experimento. Ao professor José Ermelino, pelo auxílio nas primeiras análises estatísticas. A Amiga Néia, pela amizade e carinho. Obrigada por todo o apoio durante a fase mais difícil da minha vida. Amizade eterna! Aos amigos Heliselle, Thallyta, Bruninha, Hugo, Hérika, Leandro, Eriksen e Fernandinha, pela amizade mais que especial. Aos amigos do laboratório de Entomologia: Marcelo, Hérika, Patrícia, Maria, Eriksen, Marianne, Amanda, Angra, Vaniane, Hercules, Bruna Antunes e em

especial a Edna, pela amizade e pelo auxílio na realização do experimento. Muito obrigada a todos pela ajuda, amizade e companheirismo. Aos meus mais novos irmãozinhos Marcelo, Patrícia, Marianne e Josimara. Muito obrigada por terem me acolhido, pela amizade e por fazerem mais felizes os meus dias nesses últimos meses de mestrado. Aos colegas de mestrado pela amizade e companheirismo durante todo o curso. As minhas primas Karla e Bella, e aos amigos Thiago, Daniella e Priscila, por sempre estarem ao meu lado, pela amizade e confiança. 7

SUMÁRIO LISTA DE TABELAS... i LISTA DE FIGURAS... ii RESUMO... iii ABSTRACT... v 1 INTRODUÇÃO... 1 2 REFERENCIAL TEÓRICO... 4 2.1 Moscas-das-frutas... 4 2.1.1 Plantas hospedeiras... 5 2.1.2 Ocorrência moscas frugívoras em cafeeiro... 7 2.1.3 Controle... 9 2.1.3.1 Controle biológico... 10 2.2 Diachasmimorpha longicaudata... 12 2.3 Capacidade de dispersão de parasitoides... 14 3 MATERIAL E MÉTODOS... 17 3.1 Local e caracterização da área de estudo e obtenção dos insetos... 17 3.2 Demarcação da área... 18 3.3 Liberação dos parasitoides e avaliação da dispersão de D. longicaudata no cafezal... 19 4 RESULTADOS E DISCUSSÃO... 23 5 CONCLUSÕES... 44 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS... 45 APÊNDICE A... 58

LISTA DE TABELAS TABELA 1 Parasitismo médio (%), distância média (DM) e área de dispersão (S 2 ) percorrida pelo parasitoide Diachasmimorpha longicaudata após liberações, em cafezal irrigado, em Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011.... 24 TABELA 2 Parasitismo (%) médio de larvas de Ceratitis. capitata por Diahasmimorpha. longicaudata liberado em cafezal irrigado a diferentes distâncias do hospedeiro, e avaliado dias após a liberação, Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011.... 26 TABELA 3 - Presença (1) ou ausência (0) de pelo menos uma unidade de parasitismo com larvas de Ceratitis capitata parasitadas por Diachasmimorpha. longicaudata liberado em cafezal irrigado, em cada direção. Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011.... 28 TABELA 4 Porcentagem de parasitismo por Diachasmimorpha longicaudata em larvas de Ceratitis. capitata em diferentes direções do ponto de liberação, durante cinco dias após a liberação, Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011.... 29 TABELA 5 Número de Diachasmimorpha. longicaudata recuperados em unidades de parasitismo dispostas em diferentes direções, após seis liberações em cafezal irrigado, Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011.... 30 TABELA 6 - Correlação de Pearson (r) entre a distância (m) onde foram instaladas as unidades de parasitismo e a porcentagem de parasitismo durante os cinco dias após a liberação dos parasitoides, em cafezal irrigado, Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011.... 31 TABELA 7 - Correlação de Pearson (r) entre distância média (DM) e área de dispersão (S 2 ) e os dias após a liberação de Diachasmimorpha. longicaudata em cafezal irrigado, Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011.... 34 TABELA 8 - Correlação de Pearson (r) entre as variáveis tempo após a liberação dos parasitoides (24 a 120 horas) e a porcentagem de parasitismo por Diachasmimorpha. longicaudata em larvas de Ceratitis. capitata dispostas em unidades de parasitismo em cafezal irrigado, Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011.... 38 TABELA 9 - Correlação de Pearson (r) entre as condições climáticas e as variáveis distância média de dispersão (DM) e área de dispersão (S 2 ) de Diachasmimorpha. longicaudata após ser liberado em cafezal irrigado, Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011.... 41 i

LISTA DE FIGURAS FIGURA 1 Mapa da área experimental Projeto de Irrigação município do Jaíba, agosto a novembro de 2011.... 17 FIGURA 2 - Distribuição dos pontos para avaliação da dispersão de Diachasmimorpha longicaudata em cafezal irrigado, Jaíba, MG, agosto a novembro de 2011.... 19 FIGURA 3 - Porcentagem de parasitismo por Diachasmimorpha longicaudata de larvas de Ceratitis. capitata ( unidades de parasitismo ) dispostas em diferentes distâncias do ponto de liberação em cafezal irrigado, Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011. A. 24 h após a liberação; B. 48 h após a liberação; C. 72 h após a liberação; D. 96 h após a liberação.... 32 FIGURA 4 Relação entre a distância média (DM) - A e a área de dispersão (S 2 ) - B e os dias após a liberação do parasitoide Diachasmimorpha. longicaudata em cafezal irrigado, Jaíba, Minas Gerais, agosto a novembro de 2011.... 35 FIGURA 5 Efeito do tempo após a liberação dos parasitoides na porcentagem de parasitismo de Diachasmimorpha. longicaudata em larvas de Cerattis capitata dispostas em unidades de parasitismo em cafezal irrigado, Jaíba, Minas Gerais, liberação em 21 de novembro de 2011.... 39 FIGURA 6 - Temperatura média ( C) e umidade relativa do ar (%) A e precipitação (mm) e radiação (lux) B em cafezal irrigado, Jaíba, Minas Gerais (agosto a novembro de 2011).... 40 ii

RESUMO COUTINHO, Cristiane Ramos Coutinho. Dispersão do parasitoide Diachasmimorpha longicaudata (Ashmead) (Hymenoptera: Braconidae) em cafeeiro irrigado, no semiárido mineiro. 2012. 58 p. Dissertação (Mestrado em Produção Vegetal no Semiárido) - Universidade Estadual de Montes Claros, Janaúba, MG. 1 O objetivo deste trabalho foi conhecer o padrão de dispersão do parasitoide D. longicaudata durante os cinco primeiros dias após sua liberação, em um cafezal situado no semiárido mineiro, região norte do estado de Minas Gerais. O experimento foi realizado em um cafezal de 2 ha irrigado e cultivado a pleno sol com as variedades Catuaí Vermelho IAC 99 e IAC 144 e Topázio MG 1190, localizado no Projeto de Irrigação do Jaíba, MG. Foram realizadas quinzenalmente, de agosto a novembro de 2011, liberações de cerca de 800 casais de D. longicaudata, com idade entre 5 a 6 dias. Os parasitoides foram liberados no centro da área e as avaliações realizadas nas quatro direções cardeais (leste, oeste, norte e sul) e nas quatro colaterais (nordeste, sudeste, noroeste e sudoeste). Em cada direção os parasitoides foram avaliados em 10 pontos, espaçados cerca de 6 m entre si, totalizando 80 pontos, distribuídos em toda a extensão do cafezal. Para avaliar a dispersão foram utilizadas unidades de parasitismo (pequenas sacolas confeccionadas com tecido voile contendo cerca de 120 larvas de Ceratitis capitata (Wiedemann) no 3 instar mais dieta), com a finalidade de simular frutos infestados. As unidades de parasitismo foram penduradas nas árvores e permaneceram por 24 h na área, quando então, foram substituídas por novas unidades as quais permaneceram por mais 24 h e assim por diante (1, 2, 3, 4 e 5 dias após a liberação dos mesmos). Após a retirada (a cada 24 h), as unidades foram abertas e as larvas acondicionadas em copos plásticos (200 ml) contendo vermiculita, utilizada como substrato de pupação e obtenção de adultos de D. longicaudata (descendentes) ou do hospedeiro (C. capitata). Foi determinada a distância média de dispersão (DM) e a área de dispersão (S 2 ) de D. longicaudata, durante os cinco dias de avaliação, utilizando-se o modelo proposto por Dobzhansky e Wright. A DM e a S 2 foram analisadas em relação aos dias após a liberação. A distância média de dispersão e a área média de dispersão do parasitoide foram de 44,14 m e 2.721,73 m 2, respectivamente. As maiores DM (59,15) e S 2 (4.229,76) foram observadas no quinto dia após a liberação. Houve correlação positiva entre a distância média e 1 Comitê de Orientação: Prof a. D.Sc. Clarice Diniz Alvarenga Corsato UNIMONTES (Orientadora); Prof a. D.Sc. Teresinha Augusta Giustolin (Coorientadora); Prof. D.Sc. Carlos Augusto Rodrigues Matrangolo; D.Sc. Beatriz Aguiar Jordão Paranhos. iii

área de dispersão do parasitoide com o passar dos dias após a liberação. É possível afirmar que D. longicaudata após ser liberado em campo foi capaz de sobreviver até 5 dias nas condições de semiárido, efetuando parasitismo a uma distância média de até 44,14 m. Palavras-Chave: Moscas-das-frutas, controle biológico, liberação, café. iv

ABSTRACT COUTINHO, Cristiane Ramos Coutinho. Dispersion of Diachasmimorpha longicaudata (Ashmead) (Hymenoptera: Braconidae) in irrigated coffee in semiarid of Minas Gerais. 2012. 58 p. Dissertation (Master s degree in Plant Production in the Semi-arid) - Universidade Estadual de Montes Claros, Janaúba, MG. 2 The aim of this study was to know the dispersion pattern of the parasitoid D. longicaudata during the first five days after its release, on a coffe plantation located in semiarid in northern of Minas Gerais. The experiment was carried out on a plantation of 2 ha irrigated and grown in full sun with varieties Catuaí Vermelho IAC 99 and IAC 144 and Topázio MG 1190, located in the Jaíba Irrigation Project, MG. About 800 couples of D. longicaudata, aged from 5 to 6 days were released fortnightly from August to November 2011. The parasitoids were released in the center of the area and the evaluations in the four cardinal directions (east, west, north and south) and the four side (northeast, southeast, northwest and southwest). In each direction the parasitoids were evaluated in 10 points, spaced about 6 m apart, totaling 80 points, distributed throughout the coffee plantation. The dispersion was evaluated by means of "units parasitism" (small bags made from voile fabric containing about 120 larvae of Ceratitis capitata (Wiedemann) in the third instar plus diet), in order to simulate an infested fruit. The units of parasitism were hung in trees and maintained for 24 h in area when then are replaced by new units which remained for 24 h and so on (1, 2, 3, 4 and 5 days after their release). After removal (every 24 h), the units were opened and the larvae put in plastic cups (200 ml) containing vermiculite, used as substrate for pupation and obtaining D. longicaudata adult (descendants) or host (C. capitata). It was determined the mean distance of dispersion (MD) and the dispersion area (S 2 ) of D. longicaudata, during the five days of evaluation, using the model proposed by Dobzhansky and Wright. The MD and S 2 were analyzed in relation to days after release. The mean distance of dispersion and average area of dispersion of the parasitoid were 44.14and 2721.73 m 2, respectively. The highest MD (59.15) and S 2 (4229.76) were observed in the fifth day after the release. There was a positive correlation between the mean distance and dispersion area of the parasitoid along of days after release. It is possible to affirm that D. longicaudata after being released in 2 Guidance Committee: Prof a. D.Sc. Clarice Diniz Alvarenga Corsato UNIMONTES (Advisor); Prof a. D.Sc. Teresinha Augusta Giustolin (Co-advisor); Prof. D.Sc. Carlos Augusto Rodrigues Matrangolo; D.Sc. Beatriz Aguiar Jordão Paranhos. v

the field was able to survive to 5 days under conditions of semiarid, parasitizing an average distance up to 44.14 m. Keywords: Fruit flies, biological control, release, coffee. vi

1 INTRODUÇÃO As moscas das famílias Tephritidae e Lonchaeidae são consideradas mundialmente como sendo os insetos-praga de maior importância para frutas e hortaliças (UCHÔA-FERNANDES et al., 2003). As espécies dos gêneros Anastrepha, Bactrocera, Rhagoletis e Ceratitis (Tephritidae) destacam-se entre as moscas que ocorrem no Brasil (ZUCCHI, 2000). Os insetos dessa família são vulgarmente conhecidos como moscas-das-frutas, e, além de causarem danos diretos, constituem-se como a principal barreira fitossanitária para o comércio mundial de frutas e hortaliças (WHITE e ÉLSON-HARRIS, 1992). As moscas frugívoras (Diptera: Tephritoidea) constituem as principais pragas da fruticultura mundial, e vêm apresentando importância nos plantios de café (CAMARGOS, 2010). Vários autores já relataram a ocorrência destas moscas em cafezais no Brasil, com destaque para a espécie Ceratitis capitata (Wiedemann.) e também para algumas espécies do gênero Anastrepha, sendo o cafeeiro considerado o hospedeiro preferencial de C. capitata (RAGA et al., 1996 e 2002; TORRES, 2004; SOUZA et al., 2005; AGUIAR-MENEZES et al., 2007; WALLER et al., 2007; TORRES et al., 2009). O cafeeiro tem se destacado por ser uma cultura que funciona como um reservatório natural das moscas-das-frutas, pois apresenta frutos suscetíveis à infestação durante um período em que há uma menor disponibilidade hospedeira (ORLANDO e SAMPAIO, 1973). A proximidade entre os pomares comerciais de frutas e as lavouras cafeeiras na região de Jaíba, localizada no norte de Minas Gerais, tem causado preocupação aos fruticultores e técnicos que trabalham para o controle de moscas frugívoras. Essa preocupação se deve a frequente intervenção com produto químico nos pomares da região (CAMARGOS, 2010). Para o controle da população desta praga têm sido utilizada iscas tóxicas compostas de proteína hidrolisada associada a um inseticida químico 1

(CARVALHO, 2004). Embora a técnica seja considerada eficiente para controlar as moscas-das-frutas, o uso de iscas não tem sido feito de forma intensa pelos produtores. As restrições estão relacionadas à baixa persistência das iscas após a ocorrência de chuva, havendo então a necessidade de reaplicação a cada sete a dez dias (RAGA, 2005). Além disso, essa técnica causa efeitos negativos à população de inimigos naturais e polinizadores (NONDILLO et al., 2007). Os programas de manejo integrado de pragas têm incentivado a utilização de vários métodos e táticas de controle das moscas-das-frutas; dentre eles estão os métodos culturais, a utilização de substâncias atrativas, o uso da resistência varietal e, principalmente, o controle biológico, no qual a finalidade deve ser a redução da densidade populacional da praga (FÉLIX et al., 2005). Dentro do controle biológico natural das moscas-das-frutas são utilizados vários grupos de organismos, como vírus, bactérias, fungos, nematoides, predadores e parasitoides. Este último têm se destacado como o mais efetivo (BARANOWSKI et al., 1993). O sucesso dos programas de controle biológico de moscas-das-frutas, por meio de liberações inundativa de parasitoides está associado, basicamente, à habilidade dos inimigos naturais em se dispersarem, sobreviverem e encontrarem os seus hospedeiros (CAMARGOS, 2010). Antes de recomendar uma espécie para ser utilizada no controle biológico de uma determinada cultura é necessário conhecer sua atuação em campo. A eficiência de controle de um parasitoide, em liberações inundativas, depende basicamente do conhecimento da sua capacidade de dispersão, uma vez que a partir desta variável será possível definir o número de pontos de liberações por unidade de área (ZACHRISSON e PARRA, 1998). O parasitoide muito utilizado no controle de moscas-das-frutas na América Central, do Sul e nos Estados Unidos é o Diachasmimorpha. 2

longicaudata (Ashmead) (Hymenoptera: Braconidae) (PURCELL et al., 1998; SIVINSKI et al., 1996; THOMPSON, 1991; WALDER et al., 1995). Esse parasitoide é atualmente o mais estudado devido à facilidade com que ele é criado em laboratório, à intensa atividade de forrageamento em frutos caídos no solo que ele apresenta (PURCELL et al., 1994) e à alta atividade de exploração de recursos disponíveis pelas fêmeas (SIVINSKI et al., 1998). Embora o D. longicaudata seja muito utilizado em programas de controle biológico no mundo, no Brasil ainda são escassas as informações referentes à sua atuação em campo, sua habilidade de dispersão e sobrevivência após sua liberação, nos diferentes agroecossistemas do país. Assim, o objetivo deste trabalho foi conhecer o padrão de dispersão do parasitoide D. longicaudata durante os primeiros cinco dias após sua liberação, em um cafezal situado no semiárido mineiro, região norte do estado de Minas Gerais. 3

2 REFERENCIAL TEÓRICO 2.1 Moscas-das-frutas As moscas-das-frutas pertencem à ordem Díptera, família Tephritidae, sendo uma das maiores e mais importantes dentro desse grupo. Nessa família estão presentes as pragas de maior expressão econômica na fruticultura mundial, uma vez que atacam os órgãos de reprodução das plantas, frutas com polpas e flores (SILVA e BATISTA, 2011). As moscas da família Tephritidae são consideradas as principais pragas quarentenárias da fruticultura mundial, pois causam danos diretos aos frutos e apresentam grande capacidade de adaptação a diferentes regiões. Na fase larval, alimentam-se da polpa dos frutos, tornando-os impróprios para o consumo ou para a industrialização, causando sérios prejuízos (ARAÚJO e ZUCCHI, 2003). A família Tephritidae apresenta ampla distribuição geográfica, com predominância na região neotropical, apresentando 4.352 espécies agrupadas em 481 gêneros, sendo somente cinco os que apresentam importância econômica: Anastrepha, Ceratitis, Bractrocera, Rhagoletis e Toxotrypana (MALAVASI et al., 2000). Bactrocera e Ceratitis estão representados no Brasil por uma única espécie, sendo a mosca-da-carambola, B. carambolae (Drew e Hancock), e a mosca do mediterrâneo, C. capitata, respectivamente. O gênero Rhagoletis é representado por quatro espécies (ZUCCHI, 2000) e o gênero Anastrepha é representado no Brasil por 112 espécies (ZUCCHI, 2012), no qual sete são consideradas importantes do ponto de vista econômico A. grandis (Macquart), A. fraterculus (Wiedemann), A. obliqua (Macquart), A. pseudoparallela (Loew), A. sororcula (Zucchi), A. striata (Schiner) e A. zenildae (Zucchi) (ZUCCHI, 2000). 4

2.1.1 Plantas hospedeiras As moscas-das-frutas são consideradas espécies monófagas, oligófagas e polífagas, nas duas últimas classificações estão incluídos os tefritídeos frugívoros, os quais são responsáveis por sérios danos econômicos (ZUCCHI, 2000). Segundo Selivon (2000), a distribuição geográfica de uma espécie de mosca-das-frutas está intimamente relacionada à distribuição dos frutos hospedeiros. As moscas-das-frutas são encontradas causando prejuízos a uma grande variedade de plantas frutíferas, em torno de 300 espécies de plantas, que pertencem a 41 famílias botânicas (NORRBOM e KIM, 1988 APUD SOUZA, 2004). Para decidir os métodos para o controle das moscas-das-frutas, é importante conhecer a diversidade de espécies dessa praga em uma região, saber quais são as suas plantas hospedeiras e quais os índices de infestação (ARAUJO et al., 2005). Ferrara et al. (2005) caracterizaram as populações de moscas-das-frutas em quatro municípios da região Noroeste do Estado do Rio de Janeiro, realizando uma análise faunística. Dos espécimes coletados, em pomares comerciais de goiaba (Psidium guajava L.) e laranja doce (Citrus sinensis Osbeck) e em pomares caseiros diversificados, durante dois anos, concluíram que A. fraterculus ocorreu com maior frequência (63,3%), sendo considerada constante; C. capitata (34,6%) foi mais frequente e A. obliqua foi caracterizada como acessória. No Ceará, Souza et al. (2008) obtiveram exemplares de C. capitata em nove espécies de plantas: goiaba, manga (Mangifera indica L.), seriguela (Spondias purpúrea L.), azeitona preta (Syzygium cumini L.), jambo (S. jambos L. Alston), pitanga (Eugenia uniflora L.), carambola (Averrhoa carambola L.), tangerina (Citrus reticulata Blanco) e acerola (Malpighia glabra L.), através de coletas dos frutos das plantas hospedeiras. 5

Em Minas Gerais, Canal (1997) constatou que A. fraterculus, A. obliqua, A. pickeli (Lima), A. zenildae e C. capitata foram as espécies predominantes associadas às frutíferas. A espécie A. obliqua teve preferência pela família Anacardiaceae, enquanto que as espécies A. fraterculus e A. sororcula infestaram os frutos de Myrtaceae, e a família Euphorbiaceae foi infestada por A. fraterculus, A. pickeli e Anastrepha spp. Canal et al. (1998) realizaram um leventamento faunístico de espécies de moscas-das-frutas, em seis locais de quatro municípios do Norte do Estado de Minas Gerais (Nova Porteirinha, Janaúba, Jaíba e Itacarambi), coletando 29.454 tefritídeos no período de três anos, sendo 15.243 pertencentes a C. capitata e 14.211 a várias espécies de Anastrepha, com predominância de A. obliqua. Os autores relataram que além dos pomares de manga, uva e citros, outros frutos hospedeiros dessas moscas foram constatados, destacando-se a castanhola (Terminalia catappa L.), a seriguela, a goiaba, a mandioca (Manihot esculenta Crantz) e a pitanga. Alves et al. (2003) constataram em Janaúba, MG a emergência de 378 exemplares de C. capitata e 136 de Anastrepha spp. em frutos de seriguela. Alvarenga et al. (2009) realizaram levantamento des moscas-das-frutas através de coleta de frutos em áreas rurais e urbanas de três municípios do norte do estado (Jaíba, Janaúba e Nova Porteirinha), por um período de 50 meses. As espécies de moscas-das-frutas associadas às plantas hospedeiras no norte de Minas Gerais foram: A. frateculus, A. obliqua, A. sororcula, A. turpiniae (Strone), A zenildae, A. pickeli, A. montei (Lima), Anastrepha n.sp.3 e C. capitata. Segundo os autores, o umbu (Spondias tuberosa, L.) e a goiaba são os hospedeiros mais infestados por moscas-das-frutas no norte de Minas Gerais. Alvarenga et al. (2010) selecionaram dez pomares domésticos no município de Janaúba, MG e encontraram C. capitata infestando dez espécies de frutos hospedeiros, sendo a goiaba e a seriguela as principais. Coletaram também três espécies de Anastrepha (A. obliqua, A. sororcula e A. zenildae) associadas a 6

cinco espécies de fruteiras: acerola, goiaba, cajá-manga (Spondias dulcis Parkinson), seriguela e umbu. 2.1.2 Ocorrência moscas frugívoras em cafeeiro As moscas-das-frutas, principalmente as da família Tephritidae têm sido relatadas em cafezais, em diferentes regiões do mundo. A cultura do café tem sido considerada como repositório natural dessas espécies-praga que danificam frutas de importância econômica (WHITE e ELSON - HARRIS, 1992). As moscas-das-frutas aparecem nos cafezais no início da fase de maturação dos grãos e atacam preferencialmente os frutos maduros, depositando seus ovos na lateral do fruto através de orifícios abertos por elas (GERALDO et al., 2002). A larva completa seu ciclo dentro do grão cereja, alimentando-se da mucilagem, causando dessa forma fermentação excessiva no fruto. Esse fato acarreta um dano indireto que provoca a queda prematura dos frutos, resultando em sementes com características inferiores e bebida de pior qualidade (CIVIDANES et al., 1993). O cafeeiro é tido como hospedeiro preferencial de C. capitata (RAGA et al., 1996), possibilitando a persistência dessa mosca nas áreas rurais em que vive (MARICONI e IBA, 1955; PUZZI et al., 1957). Apesar de as moscas-das-frutas não serem consideradas pragas de cafeeiro, as informações existentes são contraditórias (CIVIDANES et al., 1993). A espécie C. capitata, por exemplo, exerce uma posição de destaque, já que o cafeeiro é considerado seu hospedeiro primário, funcionando como um reservatório dessa mosca que também atacam citrus e outras frutas tropicais (SOUZA-FILHO et al., 2003). Raga et al. (1997) observaram em Atibaia (SP) altos níveis de infestação de moscas-das-frutas em um pomar de laranja-pêra, adjacente a um cafezal. De acordo com alguns autores, a cultura do café, além 7

de funcionar como um repositório dessas pragas, vem assumindo importância econômica em alguns estados do Brasil, como a Bahia e Minas Gerais (BAETA- NEVES et al., 2002; CIVIDANES et al., 1993). Espécies de Anastrepha, C. capitata e lonqueídeos já foram registradas em cafezais do Brasil (MALAVASI et al., 1980; RAGA et al., 2002). Torres (2004) constatou na Bahia a presença de três espécies de Anastrepha associadas aos frutos de café, que foram: A. amita (Zucchi), A. distincta (Greene) e A. fraterculus. Em trabalho realizado por Souza et al. (2005), os autores identificaram quatro espécies de Tephritidae em café, que foram: C. capitata, A. fraterculus, A. obliqua e A. sororcula, como também seis espécies de Lonchaeidae: Neosilba pendula (Bezzi), N. pseudopendula, N. certa (Walker), N. glaberrima (Wiedemann), Neosilba n.sp.9 e Neosilba n.sp.10. Aguiar-Menezes et al. (2007) estudaram em Valença no Rio de Janeiro, seis cultivares de café-arábica quanto à suscetibilidade às moscas frugívoras. O experimento constou do café plantado em sistema orgânico com e sem arborização. Os autores observaram a ocorrência de C. capitata, A. fraterculus e A. sororcula. A maioria das espécies de Lonchaeidae encontrada pertencia ao gênero Neosilba, sendo no total sete espécies: N. bifida Strikis e Prado, N. certa, N. glaberrima, N. pendula, N. pseudopendula, Neosilba sp.10 e Neosilba sp.14. Verificaram também a presença no cafezal de outro lonqueídeo, Dasiops rugifrons Henning. Camargos et al. (2011), em trabalho realizado na região do projeto Jaíba, norte de Minas Gerais, constataram a presença de três espécies de lonqueídeos: N. pendula; N. zadolicha (McAlpine e Steyskal) e N. inesperata (Strikis e Prado) na cultura do café, sendo o primeiro relato de N. inesperata em Minas Gerais. 8

2.1.3 Controle Os custos para realizar o controle e estabelecer os programas de monitoramento ou do sistema integrado de mitigação de risco para as moscasdas-frutas são caros, e, como consequência, há um aumento nos custos da oferta de frutas e de outros produtos vegetais, seja no mercado interno como no externo (OLIVEIRA et al., 2006). Um dos métodos utilizados, visando ao controle das moscas-das-frutas é o uso de iscas tóxicas à base de proteína hidrolisada associada a um inseticida ou por meio de produtos químicos aplicados em cobertura (CARVALHO e NASCIMENTO, 2002). O controle químico tem como vantagens: ser um método com resultados rápidos, e de prevenir o ataque das fêmeas e o desenvolvimento larval, porém, os custos ecológicos associados são elevados (SUGAYAMA, 2000). Segundo Nascimento et al. (2002), o controle químico causa problemas de ordem ambiental, como por exemplo, o impacto sobre organismos benéficos como as abelhas e os inimigos naturais, tanto específicos quanto de outras pragas devido aos resíduos de agrotóxicos, acarreta a saúde humana para os trabalhadores rurais e, principalmente, de mercado, já que com o uso intensivo de defensivos químicos, a aceitação do produto in natura é prejudicada, o que pode causar prejuízos econômicos significativos. Atualmente, o consumidor tem exigido alimentos com níveis reduzidos, ou mesmo isentos de agrotóxicos, induzindo a busca através da pesquisa científica de alternativas ecologicamente corretas para o controle de insetospraga (CARVALHO et al., 2000). DesSa forma, o controle biológico seria a alternativa mais viável, assumindo importância cada vez maior nos programas de controle de moscas-das-frutas (CAMPANHOLA, 1998). 9

2.1.3.1 Controle biológico O controle biológico é um fenômeno natural que se baseia na regulação do número de plantas e animais por inimigos naturais, os quais se constituem nos agentes de mortalidade biótica (PARRA et al., 2002). Como o controle biológico é um método que apresenta um efeito mais lento em relação ao químico, é necessário que ocorram mudanças na política de manejo de insetospraga (LAZZARINI, 2005). O controle biológico é um fenômeno dinâmico que sofre influência das condições climáticas, da disponibilidade de alimentos e da competição, bem como de aspectos independentes e dependentes da densidade (BOSCH et al., 1982). Por isso, é uma tendência que esse método se torne parte integrante e fundamental dos programas de manejo integrado de moscas-das-frutas. Do ponto de vista ecológico, a utilização desse método é de grande importância, pois tem como premissa aumentar a população de inimigos naturais das moscasdas-frutas nos pomares de frutíferas. Com o uso dos agentes de controle biológico ocorre uma redução na utilização de produtos químicos e nos níveis de resíduos nos frutos, aumentando, dessa forma, a qualidade do produto bem como a competitividade no mercado de frutos in natura (ALVARENGA et al., 2006). São agentes de controle biológico natural das moscas-das-frutas os vírus, as bactérias, os fungos, os nematoides, os predadores e os parasitoides, estes últimos destacam-se como sendo os mais eficientes e, entre eles, os braconídeos como os mais utilizados em programas de controle biológico dos tefritídeos pragas (BARANOWSKI et al., 1993). Entre os fatores que normalmente são analisados para indicar o sucesso no parasitismo desses insetos está a habilidade dos parasitoides de encontrarem a planta hospedeira das larvas da mosca e a própria larva hospedeira dentro dos frutos (HICKEL, 2002). 10

A localização das frutíferas é feita pelos parasitoides através das substâncias voláteis produzidas pelos frutos maduros e deteriorados (MESSING e JANG, 1992). A localização da larva da mosca no interior do fruto inicia a ação do parasitoide. Esse processo ocorre através das vibrações que as larvas produzem ao se alimentarem, que são identificadas pelo parasitoide por meio de suas antenas. Ao localizar a larva da mosca, a fêmea do parasitoide introduz o ovipositor no interior do fruto e realiza a postura dentro do corpo da larva. Os óvulos, se fecundados, irão originar fêmeas; os não fecundados, originarão somente machos, devido a reprodução partenogênica do tipo arrenótoca. O parasitoide se desenvolve no interior da larva da mosca, que, ao entrar na fase de pupa no solo, tem o seu conteúdo corporal consumido pela larva do parasitoide. No final do ciclo emerge um parasitoide, ao invés de um adulto da mosca (CARVALHO e NASCIMENTO, 2002). Os parasitoides da família Braconidae podem pertencer à subfamília Opiinae, a mais comum, e à Alysinae. São endoparasitoides coinobiontes de Diptera Cyclorrhapha, ou seja, a fêmea do parasitoide oviposita nos ovos ou larvas de seu hospedeiro, o qual permanece vivo até a fase de pupa, para que haja desenvolvimento completo do parasitoide (WHARTON, 1997). Os opiíneos apresentam especificidade hospedeira para com a família Tephritidae, portanto, são os mais utilizados nos programas de controle biológico de moscas-das-frutas (CLAUSEN, 1940). Segundo Wharton (1997), todas as espécies registradas nos gêneros Utetes, Doryctobracon e a maioria das espécies do gênero Diachasmimorpha são parasitoides de Tephritidae. O controle biológico clássico dentro do contexto da produção agrícola comercial é limitado, uma vez que requer uma certa estabilidade ambiental e alta biodiversidade, sendo utilizado apenas em alguns ecossistemas perenes. Nestes sistemas, a taxa de parasitismo natural de espécies introduzidas e/ou endêmicas não é, em alguns casos, suficientemente elevada para exercer, por si só, um 11

controle adequado. Nesses casos, a solução seria optar pelo controle biológico aumentativo (SIVINSKY, 1996). Dessa forma, em locais que apresentam baixos índices naturais de parasitismo de moscas-das-frutas, as liberações inundativas de inimigos naturais são de grande valia para o manejo integrado (CANAL e ZUCCHI, 2000). 2.2 Diachasmimorpha longicaudata O parasitoide exótico D. longicaudata sinonímia (Opius longicaudatus (Ashmead) e Biosteres longicaudatus (Ashmead)) é originário da região Indoaustraliana e é um endoparasitoide que está entre as cinco espécies de braconídeos da subfamília Opiinae. Estes insetos apresentam importância na regulação das populações de moscas-das-frutas, parasitando, de preferência, as larvas de 2º e 3º estádio (PURCELL et al., 1994). Em diversos países esse parasitoide tem sido a espécie mais utilizada, dentro do controle biológico clássico de moscas-das-frutas (PENÃ, 1993). D. longicaudata é um endoparasitoide coinobionte que oviposita no último ínstar larval das moscas-das-frutas, e, que tem o desenvolvimento completo no pupário do hospedeiro (PARRA et al., 2002). A localização da larva no interior do fruto ocorre através da alimentação constante da mesma, a qual causa vibrações através do seu aparelho bucal, que é identificada pelo parasitoide através de suas antenas (CARVALHO e NASCIMENTO, 2002). No Brasil, o parasitoide foi introduzido em setembro de 1994 pela Embrapa Mandioca e Fruticultura. O objetivo da introdução foi avaliar a eficiência no controle de moscas-das-frutas neotropicais do gênero Anastrepha e da espécie C. capitata (CARVALHO e NASCIMENTO, 2002). Após sua introdução em vários países, esse braconídeo tem controlado larvas de Anastrepha sp. e C. capitata (ALUJA, 1994). Wong et al. (1991) realizaram 12

liberações inundativas para o controle de C. capitata no Havaí, e observaram parasitismo de 47% comparado à testemunha (14,2%). O número de adultos de Anastrepha suspensa (Loew) caiu cerca de 40% depois que o braconídeo foi introduzido na Flórida (BARANOWSKI et al., 1993). A porcentagem de parasitismo dos braconídeos, inclusive de D. longicaudata, pode ser influenciada pelo tamanho do fruto. Normalmente em frutos de menor tamanho (em geral aferido pelo diâmetro do fruto), o nível de parasitismo de moscas-das-frutas é maior (VARGAS et al., 1993; SALLES, 1995; MATRANGOLO et al., 1998). Hickel (2002) estabeleceu uma correlação entre o nível de parasitismo e a espessura da polpa de frutos de café (Coffea arabica L.), jabuticaba (Myrciaria cauliflora, Mart), cajá-mirim (Spondias lutea L.) e laranja (Citrus aurantium L.). Houve uma correlação negativa em relação ao nível de parasitismo com a espessura da polpa dos frutos, sendo aqueles que apresentavam polpa fina mais adequados para a multiplicação de parasitoides de moscas-das-frutas. Fatores como o número de vespas liberadas, as condições climáticas, a qualidade da criação massal, a competição inter e intraespecífica, a abundância e a viabilidade de frutos nas plantas hospedeiras podem interferir no comportamento do parasitoide de moscas-das-frutas no campo e na sua dispersão (PARANHOS et al., 2007). Na região do semiárido do norte de Minas Gerais, Alvarenga et al. (2005) liberaram D. longicaudata em pomares comerciais de goiaba, com o objetivo de conhecer a capacidade de parasitismo de larvas de moscas-das-frutas naquele agroecossistema. Liberaram cerca de 34.000 casais do parasitoide, realizando coletas de frutos maduros ou em estágio de amadurecimento sete dias após a liberação. Os autores recuperaram 37 espécimes, e observaram que o parasitoide conseguiu completar seu ciclo de vida nas condições locais, demonstrando, dessa forma, a possibilidade de estabelecimento na região. Conforme os autores, o baixo número de parasitoides que foram recuperados 13

pode ser atribuído à baixa disponibilidade de frutos maduros e a coleta dos que foram encontrados. Em cafezais, no norte de Minas Gerais, D. longicaudata foi capaz também de exercer parasitismo e de completar seu ciclo após liberação, mesmo o baixo número de espécimes recuperados em frutos de café (CAMARGOS et al., 2009). 2.3 Capacidade de dispersão de parasitoides Nem sempre os parasitoides liberados em campo têm a capacidade de encontrar imediatamente os seus hospedeiros, pois estes podem estar presentes em níveis muito reduzidos ou até mesmo indisponíveis, previamente parasitados, em idade inadequada, etc. O fator que determina a eficiência de um parasitoide está intimamente ligado à sua capacidade de encontrar o hospedeiro em campo, manipular o número de ovos a serem depositados por hospedeiro e sua sobrevivência, em resposta à disponibilidade de hospedeiros. Nessas condições, o estado fisiológico do parasitoide tem implicações importantes para seu sucesso reprodutivo (HOHMANN e LUCK 2004). Portanto, o sucesso do parasitismo depende da procura e da localização do hospedeiro pelo parasitoide, o que envolve processos complexos, em que o parasitoide utiliza toda informação possível para se orientar até o hospedeiro (WAAGE e GREATHEAD, 1986, APUD PACHECO e CORRÊA FERREIRA, 2000). Consoante Vinson (1976, 1985), van Alphen e Vet (1986), esse processo é dividido em quatro fases: a localização do habitat do hospedeiro, localização do hospedeiro propriamente dito, a aceitação do hospedeiro e o parasitismo. O estudo da capacidade de dispersão de um parasitoide em uma cultura é de extrema importância, pois esse parâmetro definirá o número de pontos de liberação por unidade de área, promovendo o sucesso de um programa de controle biológico (ZACHRISSON e PARRA, 1998; BOTELHO, 1997). A 14

dispersão de parasitoides e a localização do hospedeiro podem ser influenciadas por fatores abióticos e bióticos inerentes ao parasitoide e ao seu hospedeiro (SILVA-TORRES, 2009). Conforme Gordh et al. (1999), muitos fatores sejam abióticos (temperatura, umidade, fotoperíodo, vento) ou bióticos (planta hospedeira, idade e fecundidade do parasitoide, tamanho e idade do hospedeiro, competidores, etc.) podem influenciar neste processo. Características da espécie/linhagem da cultura na qual as liberações serão realizadas podem, por exemplo, influenciar na capacidade de dispersão do parasitoide (LOPES, 1988; SÁ et al., 1993), tais como os infoquímicos utilizados pelo parasitoide na localização do habitat do hospedeiro a longas distâncias e estímulos visuais a curtas distâncias (VAN ALPHEN e JERVIS, 1996). Trabalhos com dispersão de parasitoides têm resultado em definições de número de pontos de liberação para o controle biológico aplicado no Brasil. Em pesquisa realizada por Domingues (2006), com a espécie Trichogramma atopovirilia Oatman e Platner para o controle da traça-da-batata (Phthorimaea operculella Zeller), após 24 horas da liberação dos parasitoides, o raio de ação deste foi de 8,5 m, e a área de dispersão de 97,6 m 2. Os autores concluiram que seriam necessários 100 pontos de liberação de T. atopovirilia por hectare, para uma distribuição homogênea em toda a área e um controle efetivo de P. operculella, no campo. Pratissoli et al. (2005) estudaram a capacidade de dispersão de T. pretiosum Riley em ovos de Anagasta kuehniella (Zeller), na cultura do tomateiro, em diferentes estágios fenológicos e sistemas de condução das plantas. Verificaram que a distância percorrida por T. pretiosum, 24 horas após a liberação foi de 7,37 a 7,94 m. A área de dispersão foi de 120,20 a 138,72 m 2, e o parasitismo de 53,1% a 87,3%, sendo diferente dependendo do estágio fenológico da cultura. Os autores definiram 75 pontos de liberação dos parasitoides por hectare para o controle de Tuta absoluta (Meyrick). 15

Paranhos et al. (2007) avaliaram os padrões de dispersão de D. longicaudata em citrus e verificaram que os parasitoides chegaram a uma distância de 40 m, dispersando-se mais durante o verão do que no inverno. Além disso, verificaram que os parasitoides preferiam parasitar larvas que estavam a uma altura de 0,5 m nas plantas. Camargos et al. (2008), trabalhando com este mesmo parasitoide, em cafezal irrigado na região semiárida do norte de Minas Gerais, observaram que a distância média percorrida por ele (24 horas após a liberação) foi de 35,2 m e a área de dispersão média de 1.899,3 m 2. Nesta situação o D. longicaudata parasitou larvas que estavam a distâncias de até 69,3 m, atingindo uma área de dispersão de até 5.504,4m 2, o que demonstrou sua capacidade de dispersão em áreas de clima quente e seco como no semiárido mineiro. Leal (2008) realizou liberação de D. longicaudata em um pomar de goiaba na região norte do estado do Rio de Janeiro. Utilizando unidades de parasitismo contendo larvas de 3 instar de C. capitata, após 24 horas da liberação do parasitoide, a autora observou a visitação de fêmeas do parasitoide em unidades de parasitismo dispostas a 10 e 20 m de distância do ponto de liberação. Segundo a autora, a presença de machos não foi observada. De acordo com Camargos (2010), ainda são escassas as informações relacionadas à atuação do parasitoide D. longicaudata em campo, principalmente em regiões de semiárido. Neste contexto, mais estudos referentes ao padrão de dispersão deste parasitoide, tais como sua capacidade de dispersão e sobrevivência, visando a gerar informações úteis aos programas de controle biológico de moscas-das-frutas, ainda são necessários. 16

3 MATERIAL E MÉTODOS 3.1 Local e caracterização da área de estudo e obtenção dos insetos O trabalho foi realizado em um cafezal localizado no município de Jaíba (Mocambinho) Norte do Estado de Minas Gerais. Esta região se caracteriza por ser semiárida e apresentar o bioma conhecido por Caatinga. O cafezal, localizado no lote número 191 da área A no projeto de Irrigação do Jaíba (Figura 1), era constituído por 2 ha de área irrigada em sistema de aspersão convencional, com as cultivares Catuaí Vermelho IAC 99, Catuaí Vermelho IAC 144 e Topázio MG 1190, com 6 anos de idade. Nenhuma pulverização visando ao controle das moscas-das-frutas foi realizada durante a execução do experimento. FIGURA 1 Mapa da área experimental Projeto de Irrigação município do Jaíba, agosto a novembro de 2011. 17

Nos experimentos foram utilizadas larvas de 3 ínstar de C. capitata e adultos de D. longicaudata (com 5 a 6 dias de idade), oriundos de criação estoque mantida no Laboratório de Controle Biológico e Bioatividade de Produtos Vegetais da Universidade Estadual de Montes Claros (UNIMONTES), Campus de Janaúba. As larvas de moscas-das-frutas foram criadas em dieta artificial para larvas até atingirem o 3 instar. Os exemplares do parasitoide D. longicaudata foram criados, utilizando-se as larvas de 3º instar de C. capitata como hospedeiro. Esses insetos foram mantidos no laboratório sob condições controladas (temperatura de 26 ± 2 o C, UR de 65 ± 10% e fotofase de 14 h). 3.2 Demarcação da área Com o objetivo de obtenção de informações a respeito da capacidade de dispersão do parasitoide, e com o propósito de determinação do raio efetivo de ação do mesmo no cafezal, foram demarcados na área experimental 80 pontos, nas direções norte, sul, leste, oeste, nordeste, sudeste, noroeste e sudoeste, a partir de um ponto central. Os pontos foram escolhidos de acordo com a distribuição das plantas no cafezal respeitando o espaçamento entre linhas (3,5 m) e o tamanho efetivo da área de café. A partir do centro foram demarcados pontos nas direções citadas, formando 11 círculos concêntricos, com raios médios de aproximadamente 5 m; 10 m; 18 m; 25 m; 33 m; 41 m; 48 m; 56 m; 64 m; 72 m e 90 m. O primeiro e o último círculo foram divididos em quatro pontos, nas direções cardeais e colaterais, respectivamente, e os demais em oito pontos, totalizando os 80 pontos, 10 em cada direção (Figura 2). 18

FIGURA 2 - Distribuição dos pontos para avaliação da dispersão de Diachasmimorpha longicaudata em cafezal irrigado, Jaíba, MG, agosto a novembro de 2011. 3.3 Liberação dos parasitoides e avaliação da dispersão de D. longicaudata no cafezal Quinzenalmente, a partir de agosto de 2011, foram realizadas liberações de adultos de D. longicaudata na área de cafezal durante os meses de florescimento e frutificação do cafezal (agosto a novembro), totalizando seis liberações. Foram liberados aproximadamente 800 casais de parasitoides com idade entre 5 e 6 dias de idade em cada liberação. As vespas foram liberadas das próprias gaiolas de multiplicação, que possuíam a parte superior telada com fitas 19

de velcro fixadas em sua borda e na armação de madeira, de modo que para liberação dos parasitoides bastava retirar essa tela. Na área experimental foram distribuídas 80 unidades de parasitismo (uma em cada ponto previamente demarcado), antes da liberação, com o objetivo de recuperar os descendentes dos parasitoides liberados e verificar a distância (raio) e a área de dispersão de D. longicaudata em campo. As unidades consistiram de pequenas trouxas confeccionadas com tecido voile envolvendo cerca de 120 larvas de C. capitata no 3 o instar mais dieta artificial, com a finalidade de simular os frutos infestados. As unidades de parasitismo (UPs) foram penduradas na copa das plantas a uma altura entre 1,0 e 1,3 m do solo. As UPs permaneceram por 24 h na área, quando então foram substituídas por novas UPs as quais também permaneceram 24 h, e, assim por diante, de forma que a dispersão dos parasitoides pudesse ser avaliada durante os cinco primeiros dias após a liberação dos mesmos. As UPs retiradas foram abertas e as larvas acondicionadas em copos plásticos (200 ml) contendo uma camada de vermiculita umedecida, que servia de substrato para pupação e emergência de adultos de D. longicaudata (descendentes) ou do hospedeiro (C. capitata), caso a larva não tivesse sido parasitada pelas fêmeas liberadas. Os recipientes foram identificados (data, local e ponto) e foram encaminhados ao laboratório, onde ficaram acondicionados em sala sob condições controladas (temperatura de 26 ± 2 o C, UR de 65±10% e fotofase de 14 h). Os adultos emergidos (mosca e/ou parasitoide) foram retirados e o exame cuidadoso da vermiculita foi feito, visando a verificar e contar os pupários dos quais emergiram e não emergiram adultos. Os insetos foram armazenados em álcool 70%, para posterior identificação. Esse procedimento foi repetido a cada liberação dos parasitoides. A identificação das espécies de parasitoides que emergiram das UPs foi feita de acordo com a metodologia proposta por Canal e Zucchi (2000). 20

Foi realizado o cálculo do índice de parasitismo em cada coleta, para cada distância do centro de liberação dos parasitoides. Para tal, foi utilizada a seguinte fórmula: %P = (número de adultos do parasitoide emergidos no raio / número de parasitóides + moscas no raio) x 100 A distância média de dispersão (DM) e a área de dispersão (S2) do parasitoide no cafezal, para cada coleta foram determinadas pelo modelo proposto por Dobzhansky e Wright (1943), conforme abaixo: D.M r. r i a 2. i a c 2 S 2 r. r i a 3. i a c 2 Onde: DM = distância média (m) de dispersão do parasitoide durante o período experimental; S2 = área de dispersão (m2) durante o período experimental; r = distância (m) do centro às unidades de parasitismo; a = nº de pontos por círculo; C = média de parasitoides no círculo central; i = porcentagem de parasitismo. Foram estabelecidas as relações matemáticas entre: o raio de dispersão (distância do centro) e o parasitismo (% de parasitismo); os dias após a liberação dos parasitoides e a DM e S 2 ; DM e S 2 com a porcentagem de parasitismo e as 21

datas das coletas das UPs (dias após a liberação do parasitoide) com a porcentagem de parasitismo através da análise de correlação de Pearson (r) e regressão linear, utilizando-se o programa Sigmaplot 12 (SISTAT, 2011). Os dados da porcentagem de parasitismo por direção (cardeal e colateral) foram submetidos ao teste de Scott-Knott, a 5% de probabilidade por meio do software SISVAR (FERREIRA, 2000). Para relacionar a área de dispersão (S 2 ) e a distância média de dispersão (DM) dos parasitoides com os fatores climáticos (temperatura máxima, média, mínima, umidade relativa do ar, precipitação e radiação) os dados foram submetidos a análises de correlação de Pearson (r) e regressão linear, utilizandose o programa Sigmaplot 12 (SISTAT, 2011). Os valores médios mensais dos dados climáticos foram obtidos na Estação Climatológica da Usina de Bioenergia SADA, localizada a cerca de 25 km do projeto Jaíba. 22