GBM Antibody ELISA. ImmuLisaپ6¾4. IVD For in vitro diagnostic use. PRODUCT INSERT REF 5154 GBM Antibody ELISA 96 Determinations

Transcrição

1 1 3EN ImmuLisaپ6¾4 GBM Antibody ELISA Detection of glomerular basement membrane (GBM) antibodies IVD For in vitro diagnostic use PRODUCT INSERT REF 5154 GBM Antibody ELISA 96 Determinations INTENDED USE An enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for the qualitative or semi-quantitative detection of glomerular basement membrane (GBM) antibodies in human serum as an aid in diagnosis of autoimmune renal disorders such as Goodpasture's Syndrome in conjunction with other laboratory and clinical findings. SUMMARY AND EXPLANATION Rapidly progressive glomerulonephritis (RPGN) is a clinical syndrome developing over days or weeks characterized by crescentic glomerulonephritis on histopathology of the kidney. The prognosis is poor if not recognized early and if an appropriate treatment is not instituted. To optimize patient management, RPGN may be classified based on a) clinical assessment, b) direct immunofluorescence and electron microscopic studies of renal biopsy and c) serum antibody studies. Using the above criteria, RPGN may be classified into a) immune complex mediated disease characterized by the presence of anti-dna antibodies or anti-streptococcal antibodies, b) anti-glomerular basement membrane (GBM) mediated glomerulonephritis and Goodpasture's Syndrome and c) anti-neutrophil cytoplasmic antibody (ANCA) associated glomerulonephritis. In a study by Jayne et al, of 889 RPGN suspected patients, 47 (5%) had anti-gbm, 246 (28%) had ANCA and 576 (65%) had neither antibodies. Two percent had both ANCA and anti-gbm antibodies. 1 Anti-GBM antibodies can be detected by indirect immunofluorescence or by ELISA The antigen associated with anti-gbm antibodies is a non-collagenous domain of collagen IV. PRINCIPLES OF PROCEDURE The test is performed as a solid phase immunoassay. Microwells are coated with purified GBM antigen followed by a blocking step to reduce non-specific protein binding during the assay run. Controls, calibrators and patient sera are incubated in the antigen coated wells to allow specific antibodies present in the serum to bind to the antigen. Unbound antibodies and other serum proteins are removed by washing the microwells. Bound antibodies are detected by adding an enzyme labeled anti-human IgG conjugate to the microwells. Unbound conjugate is removed by washing. Specific enzyme substrate (TMB) is then added to the wells and the presence of antibodies is detected by a color change produced by the conversion of TMB substrate to a colored reaction product. The reaction is stopped and the intensity of the color change, which is proportional to the concentration of antibody, is read by a spectrophotometer at 450 nm. Results are expressed in ELISA units per milliliter (EU/ml) and reported as positive or negative. 1

2 1 3EN REAGENTS Storage and Preparation Store all reagents at 2 C8 مC. Do not freeze. Reagents are stable until the expiration date when stored and handled as directed. Do not use if reagent is not clear or if a precipitate is present. All reagents must be brought to room temperature (20 C25 مC) prior to use. Reconstitute the wash buffer to 1 liter with distilled or deionized water. When stored at 2-8 مC, the reconstituted wash buffer is stable until the kit expiration date. Coated microwell strips are for one time use only. Unused microwell strips should be carefully resealed in the pouch containing desiccants to prevent condensation and stored at 2-8 مC. Precautions All human derived components used have been tested for HBsAg, HCV, HIV-1 and 2 and HTLV-I and found negative by FDA required tests. However, human blood derivatives and patient specimens should be considered potentially infectious. Follow good laboratory practices in storing, dispensing and disposing of these materials. 11 Stop Solution is a dilute sulfuric acid solution. Sulfuric acid (H 2SO 4) is poisonous and corrosive. Do not ingest and avoid contact with skin and eyes. Avoid exposure to bases, metals or other compounds that may react with acids. TMB Enzyme Substrate contains an irritant that may be harmful if inhaled, ingested or absorbed through the skin. Do not ingest and avoid contact with skin and eyes. Instructions should be followed exactly as they appear in this kit insert to ensure valid results. Do not interchange kit components with those from other sources. Follow good laboratory practices to minimize microbial and cross contamination of reagents when handling. Do not use kit components beyond expiration date on the labels. Materials provided ImmuLisaپ6¾4 GBM Antibody ELISA REF 5154 Kits contains sufficient reagents to perform 96 determinations. 12 x 8 MICROPLATE GBM Microplate with individual breakaway microwells. Coated with GBM antigen. Ready for use. 1 x 1.75 ml CONTROL + GBM Ready to use Positive Control (red cap). Contains human serum positive for GBM antibodies. The expected concentration range in EU/ml is printed on the label. 1 x 1.75 ml CONTROL - Ready to use Negative Control (white cap). Contains human serum. 2

3 1 3EN 5 x 1.75 ml CALIBRATOR A GBM CALIBRATOR B GBM CALIBRATOR C GBM CALIBRATOR D GBM Ready to use set of 5 Calibrators. Calibrator A (green cap) 160 EU/ml, Calibrator B (violet cap) 80 EU/ml, Calibrator C (blue cap) 40 EU/ml, Calibrator D (yellow cap) 20 EU/ml, and Calibrator E (orange cap) 1 EU/ml. Derived from human serum containing GBM antibodies. Concentrations in EU/ml are printed on the labels. CALIBRATOR E GBM 1 x 15 ml IgG-CONJ HRP HRP goat anti-human IgG Conjugate. Ready for use. Color coded pink. 1 x 60 ml DIL Serum Diluent. Ready for use. Color coded purple. 1 x 15 ml SUBSTRATE TMB TMB enzyme substrate. Ready for use. Protect from light. 1 x 15 ml STOP H2SO4 Stop Solution. Ready for use. 2 x vials BUF WASH Powder Wash Buffer. Reconstitute to one liter each. 1 x Protocol Sheets Optional Components 1 x 60 ml BUF WASH Liquid concentrated Wash Buffer. Reconstitute to one liter. Symbols used on labels: LOT Lot number REF Catalog number IVD In vitro diagnostic use e Use by t Storage temperature! Read instructions for use s Number of Tests M Manufacturer Material required but not provided Deionized or distilled water Squeeze bottle to hold diluted wash buffer Pipettes capable of delivering 5 پ0 8l to 1000 پ0 8l Disposable pipette tips Clean test tubes 12 x 75 mm and test tube rack Timer Absorbent paper towels 3

4 1 3EN Microplate reader capable of reading absorbance values at 450 nm. If dual wavelength microplate reader is available, the reference filter should be set at 600 C650 nm Automatic microplate washer capable of dispensing 200 پ0 8l SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION Only serum specimens should be used in this procedure. Grossly hemolyzed, lipemic or microbially contaminated specimens may interfere with the performance of the test and should not be used. Store specimens at 2 م C8 مC for no longer than one week. For longer storage, serum specimens should be frozen. Avoid repeated freezing and thawing of samples. It is recommended that frozen specimens be tested within one year PROCEDURE Procedural Notes Carefully read the product insert before starting the assay. All dilutions of the patient samples should be prepared prior to starting with the assay. Let patient specimens and test reagents equilibrate to room temperature before starting with the test procedure. It is suggested that reagents be left on the bench out of the box for 30 minutes prior to use. Return all unused specimens and reagents to refrigerator immediately after use. Remove required microwell strips from the pouch and carefully reseal the pouch to prevent condensation in the unused wells. Return pouch immediately to refrigerator. Good washing technique is critical. If washing is performed manually, adequate washing is accomplished by directing a forceful stream of wash buffer with a wide tip wash bottle across the entire microplate. An automated microplate washer is recommended. Use a multichannel pipette capable of delivering 8 or 12 wells simultaneously. This speeds the process and provides more uniform incubation times. For all steps, careful control of timing is important. The start of all incubation periods begins with the completion of reagent addition. Addition of all samples and reagents should be performed at the same rate and in the same sequence. Test Method Step 1 Step 2 Let all reagents and specimens equilibrate to room temperature. Label protocol sheet to indicate sample placement in the wells. It is good laboratory practice to run samples in duplicate. 4

5 1 3EN Step 3 For a qualitative determination use Calibrator D (vial with yellow cap) only. or For a semi-quantitative determination use Calibrators A through E as depicted in the sample layout below. Step 4 Step 5 Step 6 Step 7 Step 8 Step 9 Qualitative 5 Semi-Quantitative A Blank S5 Etc. A Blank S1 Etc. B - S6 B - S2 C + S7 C + S3 D Cal D S8 D Cal A S4 E S1 S9 E Cal B S5 F S2 S10 F Cal C S6 G S3 S11 G Cal D S7 H S4 S12 H Cal E S Prepare a 1:101 dilution of the patient samples by mixing 5 پ0 8l of the patient sera with 500 ul of Serum Diluent. Remove the required microwells from pouch and return unused strips in the sealed pouch to refrigerator. Securely place the microwells into the extra provided holder. Pipette 100 پ0 8l of Ready to use Calibrators, Positive and Negative controls and diluted patient samples (1:101) to the appropriate microwells as per protocol sheet. Note: Include one well which contains 100 پ0 8l of the Serum Diluent as a reagent blank. Zero the ELISA reader against the reagent blank. Incubate 30 minutes ( ہ5 min) at room temperature. Wash 4x with wash buffer. For manual washing, fill each microwell with reconstituted wash buffer. Discard the fluid by inverting and tapping out the contents of each well or by aspirating the liquid from each well. To blot at the end of the last wash, invert strips and tap the wells vigorously on absorbent paper towels. For automatic washers, program the washer as per manufacturer s instructions. Pipette 100 پ0 8l of Conjugate into microwells. Step 10 Incubate 30 minutes ( ہ5 min) at room temperature. Step 11 Wash all microwells as in Step 8. Step 12 Pipette 100 پ0 8l of Enzyme Substrate into each microwell in the same order and timing as for the Conjugate. Step 13 Incubate 30 minutes ( ہ 5 min) at room temperature. Step 14 Pipette 100 پ0 8l of Stop Solution into each microwell using the same order and timing as for the addition of the Enzyme Substrate. Read absorbance values within 30 minutes of adding Stop Solution. Step 15 Read absorbance of each microwell at 450 nm using a single or at 450/630 nm using a dual wavelength microplate reader against the reagent blank set at zero absorbance. Quality Control Calibrators, Positive and Negative Controls and a reagent blank must be run with each assay to verify the integrity and accuracy of the test. The absorbance reading of the reagent blank should be <0.3. The Calibrator A should have an absorbance reading of not less than 1.0, otherwise the test must be repeated. The negative control must be <10 EU/ml. If the test is run in duplicate, the mean of the two readings should be taken for determining EU/ml. While performing Qualitative determinations, the optical

6 1 3EN density of Calibrator D must be greater than that of the negative control and less than the absorbance of the positive control. For semi-quantitative determinations the positive control must give values in the range stated on the vial. RESULTS Calculations The concentrations of the patient samples can be determined by either of two methods: 1. QUALITATIVE DETERMINATION Abs. of Test Sample Abs. of Calibrator D x EU/ml of Calibrator D = EU/ml Test Sample It is recommended that qualitative results be reported as positive ± or negative. ± Sample results greater than or equal to Calibrator D are considered positive. 2. SEMI-QUANTITATIVE DETERMINATION Plot the absorbance of Calibrator A through E against their respective concentrations on linear-log graph paper. Plot the concentrations in EU/ml on the X-axis against the absorbance on the Y-axis and draw a point-to-point curve fit. Determine the concentrations of the patient samples from the curve according to corresponding absorbance values. Alternately, a four parameter curve may be used to plot the standard curve. It is recommended that semi-quantitative results be reported as positive, ± negative, ± or indeterminate ± with EU/ml unit values. Indeterminate/ borderline results should be retested and evaluated along with other laboratory methods. Interpretation Interpretation values were determined by testing 64 normal blood donors and disease control specimens. The cutoff was established using mean of the normal subjects plus 3.5 SD for the GBM Ab ELISA and assigned an arbitrary value of 20 EU/ml. IMMCO suggests use of the reference range below. Each laboratory should validate assay values for their own conditions. GBM Ab value Interpretation <20 EU/ml Negative EU/ml Indeterminate (Borderline) >25 EU/ml Positive Calibrator The Ready to Use Calibrators are included to provide semi-quantitation and must be used with each run. Patient samples containing high antibody levels may give absorbance values greater than that of Calibrator A. For determining accurate semi-quantitative values, such specimens should be further diluted so they fall within the range of the calibrator curve when retested. For determining EU/ml values, multiply the units obtained by the dilution factor. LIMITATIONS OF PROCEDURE The assay should not be performed on grossly hemolyzed, microbially contaminated or lipemic samples. This method should be used for testing human serum samples only. The results obtained serve only as an aid in the diagnosis. Taken alone, these results should not be interpreted as diagnostic. Serum of patients with RPGN may be negative for GBM antibodies. Store specimens at 2 C8 مC for no longer than one week. For longer storage, serum specimens should be frozen. Avoid repeated freezing and thawing of samples. 6

7 1 3EN EXPECTED VALUES Test results in a normal population are usually expected to be negative. Studies of clinical populations were tested to survey positive incidence for GBM antibodies with this assay. Populations included subjects with Goodpasteur s syndrome, autoimmune disease controls and presumed disease-free normal human subjects. n % Disease Expected n Pos Pos Goodpasture s Syndrome 95% % Systemic lupus erythematosus < % Sjپ0 2gren s syndrome < % Systemic sclerosis < % Thyroiditis < % Mixed connective tissue disease < % Rheumatoid arthritis < % Celiac disease < % Vasculitis < % Normal Human Sera < % Total NHS and Disease Controls % PERFORMANCE CHARACTERISTICS The utility of the ImmuLisaپ6¾4 GBM Antibody ELISA was evaluated by testing Goodpasture s specimens alongside disease controls and normal ± human sera. These specimens were also tested on commercially available test kits. Only specimens in the linear range of the assay were included in the method comparison. These results are summarized below. A. ImmuLisaپ6¾4 GBM Antibody ELISA vs. other GBM Antibody kit: Other GBM Antibody ELISA Positive Negative Total IMMCO Positive GBM Ab Negative ELISA Total Positive Percent Agreement: 100% (95% CI 89.6% C100%) Negative Percent Agreement: 94% (95% CI 86.0% C97.8%) Relative Agreement: 96% (95% CI 90.5% C98.5%) B. Cross Reactivity: A total of 68 from individuals with associated connective tissue disorders or other potentially cross-reactive autoimmune disorders were selected to test for GBM antibodies using the ImmuLisaپ6¾4 assay. Condition n Positive Celiac disease 8 0 Hashimoto s disease 16 0 Rheumatoid arthritis 8 0 Sjپ0 2gren s syndrome 16 0 Systemic lupus erythematosus 8 0 Vasculitis 8 0 Total 64 0 (0%) 7

8 1 3EN Precision Precision was tested with positive specimens selected throughout the range of the assay. Assay runs of 6 replicates of each specimen were conducted on 13 days. Repeatability was determined with 12 replicates of each specimen. S # Mean Total Imprecision SD Between days (EU/ml) (EU/ml) CV% (EU/ml) CV% (EU/ml) SD Within run (Repeatability) SD CV% % % % % % % % % % % % % % % % % % % Reproducibility Qualitative reproducibility was tested with 90 runs of samples in the negative range, ~20% below cutoff, ~20% above cutoff and in the moderate positive range of the assay using the qualitative analysis method. 6 replicates were tested in 13 runs and an additional 12 replicates were tested in a following run over multiple days. Assay results for these tests produced 100% qualitative (positive/negative) agreement. Limit of Detection The limit of detection (LoD) was determined based on 60 replicates of the blank and 10 replicates each of 6 low-level (NHS) samples. LoD was determined to be 2.4 EU/ml. Linearity and Recovery Linearity and recovery were tested by diluting positive specimens through the assay range in equidistant dilutions and comparing actual vs. expected results. The linear range of the assay was determined be 2.4 (LoD) C 160 EU/ml. Results are summarized below: Test Range (EU/ml) Slope (95% CI) Y-intercept (95% CI) Rپ0 5 % recovery (obtained/expected) 1.9 to (.923 to 1.105) 0.7 (-4.2 to 5.6) % to 116% 19.7 to (.891 to 1.131) 2.9 (-5.1 to 10.9) % to to (.889 to 1.070) 1.2 (-9.5 to 11.8) % to 104% Interference Interference was studied by mixing sera with known GBM antibody levels with potentially interfering serum samples and studying deviation from expected results. No significant interference was demonstrated for the following substances at the levels indicated: hemoglobin (2 g/l), bilirubin (342 جmol/L), rheumatoid factor (100 EU/ml), cholesterol (13 mmol/l), and triglycerides (37 mmol/l). 8

9 1 3EL ImmuLisaپ6¾4 پ0ث5 ب د ؤ دپ0ث9 ELISA أ ة ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ² حپ0ث7 ض ح إ ش ز ا أ ة ء ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ت ء سپ0ث4 س اپ0ث9 ز ذ إ ة ر ء ج ء س ة تپ0ث6پ0ث9 آ ء ز ة تپ0ث6پ0ث9 ج إ ج آ رپ0ث4 ح اپ0ث9 ( ² ) IVD ة ء ؤ ة ء أ ح ط ز س ة تپ0ث6 ض رپ0ث6 ز ا in vitro ³ ± پ0ث2پ0ت6 ³ ² REF 5154 پ0ث5 ب د ؤ دپ0ث9 ELISA أ ة ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ت ء سپ0ث4 س اپ0ث9 ز ذ إ ة ر ء ج ء س ة تپ0ث6پ0ث9 آ ء ز ة تپ0ث6پ0ث9 ج إ ج آ رپ0ث4 ح اپ0ث9 ( ² ) 96 ر د ز ؤ ة د ر ة ز ج دپ0ث7 ± ± ± ² ة ء جپ0ث5 ب د ؤ دپ0ث9 إ ح ئ ش ج ة ت دپ0ج3 ء ح د ز د ء ذ د ر ر د ص ا س ة ت دپ0ج3 ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز ج دپ0ج3 (ELISA) أ ة ء س ا ح ذ د ة د س ة تپ0ث6 پ0ث6 ا ج ة ذ د ز د س ة تپ0ث6 ء حپ0ث7 ض ح إ ش ز ا س ط ح ء ح س ة ز ط جپ0ث4 س ط ح ت ء سپ0ث4 س اپ0ث9 ز ذ إ ة ر ء ج ء س ء ة تپ0ث6پ0ث9 آ ء ز ة تپ0ث6پ0ث9 ج إ ج آ رپ0ث4 ح اپ0ث9 ( ² ) ز إ د رپ0ج2 ء ح ب رپ0ج4 ذ د ش طپ0ث9 إ ذ ة ت د ش ر ة تپ0ج2 جپ0ث5 ز د أ ة ء س ا ؤ ةپ0ث4 أ ح ط ز ا ء ش س دپ0ث4 ح د ز ط ح ح إ ص ر ة تپ0ج4 ح ؤ ة ء س ء ر ء ضپ0ج4 ح پ0ج2 ذ طپ0ث9 س د ²پ0ج3 ح ؤ ر د ج د Goodpasture ز إ ز ش ح ؤ ش ء ز جپ0ج2 ج إ پ0ث4 ث ث ء إ ر أ ء ز س ا ر ة ء تپ0ث4 ت ء ة ت ث ة ح ة تپ0ث4 إ ش رپ0ث6 ج ء س ء. ± «ھ ² س ء ضپ0ث5 طپ0ث9 إ خ إ ث ة ز زپ0ج2 ج إ ح ا ذ ر د د ؤ إ ش س ة تپ0ث6 ز ذ إ ة ر ء ج ء س د ح إ ص رپ0ث7 س ة ؤ ء ( ³ ²) إپ0ث7 ح ء ة پ0ث5 ح ء ت ث ة ح ة تپ0ج2 زپ0ج3 ح ؤ ر د ج د ذ د ش ء ح ء ذ سپ0ج3 ز ز إ س ء ة إ ح سپ0ج2پ0ث9 ا ج إ رپ0ج4 ح پ0ث6 إ آ ؤ د جپ0ث4 ؤ ط ح ت ء ة ض ء ر ء ت س ا رپ0ث7 ئ إ س ء ة ء ذپ0ج2 إ خ إ ث ة ز زپ0ج2 ج إ ح ا ز ذ إ ة ر ء ج ء س د ح إ ص رپ0ث7 س ة ؤ ء ز س ا ح ة ز س د ذ ء ب د ث د أپ0ث7 ء س د ش ح إ ص ر دپ0ج3. پ0ث4 ح ؤ إ ح ء ح ء أ ح ط ر ة ز س إپ0ث7 پ0ث5 أ ت ء ة ر ء ت ء ة ؤ إ ح إ ص ء ر ج د ز س إپ0ث7 ا ت ء سپ0ث4 ث ث ا ث ا ب إ ر ء ذ إپ0ث7 ء, ا ذ رپ0ج2 أ ح ط ز ا إپ0ث7 ح ء ة ت ء تپ0ث6. ة ء س ا آپ0ث5 ث س ز س ا ء ح س ة ج إ سپ0ج4 ذ ة ز ا س ط ح ء ز ب إ حپ0ج4 ح, ا ³ ² ج ذ د ر إپ0ث7 ح ء س ء خ ة ح د ج ا ب إپ0ث7 ج إ آپ0ث4 ز ا ء) س ا ح ت ث ة ح ة تپ0ث6 ء خ ة د ثپ0ج2 أ ا ز ا, آ) پ0ث4 ج إ ز إپ0ث9 ج إ ثپ0ث5 س إپ0ث9 ح إ ص ر ة تپ0ث6پ0ث9 آ ة د پ0ث7 ءپ0ث9 ج إ ء ح د ز د ص ب د ر ة ز جپ0ج2 ت ء ة ا ث إ ت س ر د ح ة تپ0ث6 ج ة ت ر د ز ت د ذپ0ث7 ء, ت ء ة أ) ج إ ثپ0ث5 س إپ0ث9 ء ح س ة ز ط جپ0ث4 س ط ح ز س د ح د رپ0ج2. ر ا ز ة ج د ذ د ةپ0ج4 ح س ءپ0ث9 س ء ذ ء ر ء ذپ0ث4 ح ط ت ر ة سپ0ث6 ر ة ء, ا ³ ² ج ذ د ر إپ0ث7 ح ء س ء خ ة ح د ج ا ب إپ0ث7 ز إ ء) حپ0ج2 ز د ز س ا ح د ذ دپ0ث7 ء ؤ ة ء ج إ ز د ث ء آ دپ0ج3 ح ء ح د ز د زپ0ج3 ج ذ ث د ت ء ت ء ة ض ء ر ء ت س ا رپ0ث7 ئ إ س ء ة ء ذپ0ج2 س ا ح ذ ء ر د ش زپ0ث7 ء ء ح س ة ز ط جپ0ث4 س ط ح ت ء سپ0ث4 س د ش DNA پ0ث6 ت ء سپ0ث4 س د ش ز س ر إ ذ سپ0ج2 ت د ت ت د ش, آ) زپ0ج3 ح ؤ ر د ج د Goodpasture ت ء ة ز ذ إ ة ر ء ج ء س د ح إ ص رپ0ث7 س ة ؤ ء ز س ا ح د ذ دپ0ث7 ء ؤ ة ء ج إ ز د ث ء آ دپ0ج3 ح ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ت ء سپ0ث4 س اپ0ث9 ز ذ إ ة ر ء ج ء س ة تپ0ث6پ0ث9 آ ء ز ة تپ0ث6پ0ث9 ج إ ج آ رپ0ث4 ح اپ0ث9 ( ² ), ت ء ة أ) ز ذ إ ة ر ء ج ء س د ح إ ص رپ0ث7 س ة ؤ ء ز ض إ س ة ئپ0ج2 ج إ ح ا ج إ ت ش س س ء ر د ذ ث ء ز ج ء س ة تپ0ث4 ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ت ء سپ0ث4 س ط ح د ش ؤ إ س إ رپ0ج2 ص ة ث ط ح (ANCA). ² إ ج ة ء ج إ ثپ0ث5 س ا ء ذپ0ج2 س د شپ0ث9 Jayne et al, ء ذپ0ج2 889 ء ز ب إ ح إپ0ث7پ0ث9 ج إ ش ذ د پ0ث7 ء ³ ², 47 (5%) إ ج صپ0ث4 ح ة ز ء ح ء ح س ة- ² ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء, 246 (28%) إ ج صپ0ث4 ح ة ز ء ح ANCA ت ء ة 576 (65%) ؤ إ ح إ ج صپ0ث4 ح ة ز ء ح ت ء حپ0ث5 ح ء ء ذپ0ج2 س ء ؤپ0ج3 د ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء. پ0ج3 د س د ةپ0ث9 إ ت ء سپ0ج2 س ط ح ء ز ب إ حپ0ج4 ح إ ج صپ0ث4 ح ة ز ء ح سپ0ج2 ز د ANCA پ0ج2 ز د ت ء ة ء ح س ة- ² ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء. 1 ³ ء ء ح س ة- ² ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ج ذ د ر دپ0ج3 ح ح ء ء ح ة ض ح إ ش ب دپ0ج3 ح إپ0ث7 س إ ج إ پ0ث5 ج ج إ ز د ء ح د ز د ص ب د ر ة ز جپ0ج2 إپ0ث7 س إ ج إ ELISA ³ د ء ح س ة أپ0ج2 ح د ذ د ش ز ض إ سپ0ث7 ئ إ س ء ة ج إ س ء ء ح س ة- ² ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء إپ0ث7 ح ء ة ج ة ء ت د ث ث ء أ د حپ0ج4 ؤ اپ0ث9 ذ إ ر ة د ضپ0ث6 س د ش ت د ث ث ء أپ0ج2 ح د ش IV. ± ² ³ ² ھ ² ² ء حپ0ث4 ث ش ز ا ؤ ة إ خپ0ث4 أ إ س ء ة طپ0ث9 ء ح د ز د ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز جپ0ج2پ0ث9 ز س إ ر إپ0ث4پ0ث9 صپ0ث4 ز اپ0ث9. ة ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9 إ ذ ة ت ء ثپ0ج3 ذ س د ح س ء ة ج إ ت إ ت ء ب ء ر جپ0ث5 ح د ء ح س ة أپ0ج2 ح د ² ت ء ة ز س ا ز ش حپ0ث5 ض إ ة ء ج إ آپ0ث6 ج ء ء ذ د ت ث إ ة ز ج دپ0ج3 پ0ج4 ز س إ ح ء ج إ ة ط ب د إپ0ث7 ا ج ا إ ة ؤ ة تپ0ث6 ذ ر ط س إپ0ث0 ح ا ذ د ش ؤ إ ز ج إپ0ج3 إ س ء ة ت ء سپ0ث4 س ا ؤ ةپ0ث4 ر ت إ ة ء إ ت سپ0ث5 ث إ ز اپ0ث9 س اپ0ث9 ج إ بپ0ج2 ؤ د ش. ³ ء ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س ء إ ثپ0ث5 أ ض د ش, د ة آ ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث5پ0ث9 ت ء ة د ة د ر دپ0ث7 س ط ح ء ز ب إ حپ0ج4 ح إ ذ طپ0ث4 ئ د ح س ء ة ز س ةپ0ث9 إ ذ ة ت ء ث ش ج جپ0ث5 ح إپ0ث9 ج إ س د ء ح س ة أپ0ج2 ح د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9, إ ذ ة س رپ0ث5 ذ د ح س ءپ0ث9 پ0ث5 س ز ة س ا ؤپ0ث5 ز ج إ ش ز ا ز س د ء ح س ة أپ0ج2 ح د س ط ح ز ش أ ت إ ت ر ة جپ0ث5 ح ط ح ء ح س ة ز ط جپ0ث4 س ط ح ذ د ش آ رپ0ث7 ز ت د ح س ء ة ز س د ح د رپ0ج2. ³ ء ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ذ د ش ؤ إ ح ؤ إ ز ج إپ0ج3 ب ا ت ء ح ت ء ة پ0ث4 ث ث إپ0ث9 ذ ر ط س إپ0ث0 ح إپ0ث9 س د ش د ر دپ0ج3 ء ذ د ج ء ت رپ0ج3 ح د ح س ء ة ج إ س ا ح پ0ث5 ت ذ ث ش ز ا س ط ح ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ ط ح. ³ ء ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ذ د ش ؤ إ ز ج إپ0ج3 ب ا ت ء ح ء ح ة ض ح إپ0ج3 د ح س ء ة ج إ س ا ح ذ ر د ز بپ0ث6 ت ا ز س ةپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9 ز ا ج ء ز جپ0ث5 ح د ش ج إ پ0ث5 ح ئ ش ج د ز ش ئ إ ش ت س ة ت دپ0ج3 ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س دپ0ث9 ت ء سپ0ث4 س اپ0ث9 ء ح ب رپ0ج4 ذ ة ح اپ0ث9 IgG. ³ د ج ا ؤ إ ز ج إ ش جپ0ث5 ح د ز ش ئ إ ش ت س ة تپ0ج2 ء ح سپ0ث7 ز ط ج ء ء ذ د ج ء ت رپ0ج3 ح إ س ء ة ج إ پ0ث5 ت ذ ث ش ز ا. ² س ا ز ش حپ0ث5 ض إ ة ء, ذ ر د ز سپ0ث7 ب إ س ء ة ز س ةپ0ث9 ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9 س د إ ة ؤ ة تپ0ج2 ش ذپ0ج2 ز س ر ط ج ء س د ش إ ح ئپ0ج3 ج د ش (TMB) ت ء ة ء ح ة ض ح إپ0ج3 إ س ء ة ا ذ ء ر د ش زپ0ث7 ء ء ح س ة ز ط جپ0ث4 س ط ح ج إ س ا ح ء ث ث ء أپ0ث6 ض رپ0ج4 ج ء س دپ0ث9 ذ د ش ذ ر د تپ0ج3 ذ س إ ة ثپ0ج2 أ ط س اپ0ث9 ج إ س ء س ر د ذپ0ث6پ0ث9 س د ش ش ذ د ز س رپ0ج4 ج ء س دپ0ث9 TMB ز إ پ0ث5 أ ض ر ط ج د ذ ر دپ0ج0پ0ج2 ح ء ح سپ0ث7 ؤ ر ء ز اپ0ث9. ء ح سپ0ث7 ؤ ر ء ز ا س إ ر ج ء سپ0ث7 ئ إ س ء ة ت ء ة ا پ0ث5 ح س ء ز ا س اپ0ث9 ء ث ث ء أپ0ث6پ0ث9 س د ش ض رپ0ج4 ج ء س دپ0ث9, ا د ذ دپ0ث7 ء إپ0ث7 ح ء ة ء حپ0ث4 ث د أ ا س اپ0ث9 ز ش أ تپ0ث5 ح س ر ط ز اپ0ث9 س د ش ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س دپ0ث9, ء ح ة ض ح إپ0ج3 إ س ء ة ء ذپ0ج2 پ0ث5 ح ء ص ء ز ج ء س د ص ط سپ0ج2 ج إ س ر د, ز إ جپ0ث6 ت دپ0ث9 تپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 450 nm. ³ ء 9

10 1 3EL ء ذ د س إ ثپ0ث5 ز ج ء س ء إ ت ص رپ0ث4 ئ د ح س ء ة ز إ ج د حپ0ث4 ؤ إپ0ث9 ELISA ء حپ0ث4 ض ة ث ة د ز سپ0ج2 ث ة س ر د (EU/ml) ت ء ة ء ح ء صپ0ث5 ر د ح س ء ة طپ0ث9 ب إ س ة تپ0ث5پ0ث9 پ0ث6 ء ر ح ا س ة تپ0ث5پ0ث9. ³ ± ² ³ ± µپ0ج3 ث ء خ ا ت ء ة ر د إ س د ة ج ء زپ0ث7 ء پ0ت6 ث ء س ء ء ح س ة ؤ ر ء ز سپ0ث6 ر ة ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ص ش ثپ0ث4 ز ز د ح س ء ة ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء 2 C8 مC. ا ح س ء ت ء س ء پ0ج3 ض إ س إ. ³ ء ء ح س ة ؤ ر ء ز سپ0ث6 ر ة ء إپ0ث7 ح ء ة ء ح ء ث ث دپ0ث7 ط س ء پ0ث5 طپ0ث9 س ا ح ا ج إ ر د ج ا حپ0ث7 ء ثپ0ث6 خ اپ0ث9 ت ء ة ض ر ا ز ة ج د ذ د ة دپ0ج3 ح س ء ة زپ0ج3 ج ص ط ح ء ج إ س ةپ0ث9 د ؤ ا أپ0ث7 إپ0ث9. ا ض ر ا ز ة ج د ذ د ة إپ0ث7 س إ س ء ء ح س ة ؤ ر ء ز سپ0ث6 ر ة ء إپ0ث4 ح ؤ إ ح إپ0ث7 ح ء ة ؤ ة ء ش أپ0ث6 پ0ث6 إپ0ث4 ح ذ إ ر ةپ0ث5 ض د ش ح پ0ث7 ئ ا ج ء. پ0ت6 ث ء س ء ء ح س ة ؤ ر ء ز سپ0ث6 ر ة ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ص سپ0ث4 ز د ش ح ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء ؤ ط ج ء سپ0ث7 د ش (20 C25 مC) ذ ر ة ح ء ذپ0ج2 س ا ض رپ0ث6 ز ا. ء ح ء زپ0ج3 ز س ء ز ا س د ش ر ش ب ج ة ز س ة ت دپ0ج3 ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء أپ0ث7 ح إ س ء ة ج إ ء ذ إ ز س ء أ جپ0ث5 ح د پ0ث6 ء ذ ة د ح ة ز جپ0ث5 ح د ح إ رپ0ج2, ز إ پ0ج2 أ ت د 1 ثپ0ث7 س ر د ش. پ0ت6 س ء ح ص ش ثپ0ث4 ز ز إ س ء ة ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء 2 C8 مC, س د ء ح ء ز ش ز س ء بپ0ث5 ح ر ش ب ج ة ز س ة تپ0ج2 ؤ ةپ0ث4 ث ش ج ء پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9 ذ ء ر ء جپ0ث5 ح إ ة ء ح ء ث ث دپ0ث7 ط س د جپ0ث5 ض ر ة س ا ح ا ج إ ر د ج ا حپ0ث7 ء ثپ0ث6 خ اپ0ث9 س د ش ت ة س. ة إ ذ ة ت ء ث ش ج جپ0ث5 ح إپ0ث9 س ء ة حپ0ث7 إپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ ط ح ذ ر د د رپ0ث7 ئ د ح س ء ة أ ة ء جپ0ث7 ء جپ0ج2 ح د ض رپ0ث6 ز ا. ة ج ا ض ر ا ز ة ج د ذ د ة ا جپ0ث5 ح إپ0ث9 إ ذ ة ت ء ث ش ج جپ0ث5 ح إپ0ث9 س ء ة حپ0ث7 إپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ ط ح ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء إ ذ ء ح ء ز ص ر ء أپ0ث7 ئ د ح س ء ة ذ ر د ز إ ت س ة تپ0ث4 ز س ا بپ0ث6 ت ا ذ د ش ذ إ ر ةپ0ث5 ض إ ة ء ذ د خ ا ر ء ح س ة تپ0ث5پ0ث9 د ش زپ0ث7 إپ0ث9 پ0ج4 ز س إ ح ء ء ذ د ص إ ش ض ب إپ0ث7 ز ش ج ذپ0ج3 ت ح ط ز ا ت ء ة ء ذ د ب ا ت إپ0ج3 د ح س ء ة ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء 2 C8 مC. ر د ص ش ثپ0ث4 خ إ ةپ0ث9 پ0ت6 ث ء س ء ز ش ز س ء س ة تپ0ث4 ء ح ب رپ0ج4 ذ ة ح اپ0ث9 ذ ر دپ0ث5 ث إ ش ز اپ0ث9 ذ د ش ض ر ا ز ة ج د ذ د ة دپ0ج3 ح س ء ة پ0ث5 ض د ش ح إ ث إ أ ض ب إپ0ث7 أ ة ء س ا ح ذ ء ر د ش زپ0ث7 ء س د ش ء ح س ة أپ0ج2 ح د ش HBsAg, س ط ح ةپ0ج4 ح HCV, HIV-1 ت ء ة 2, ت ء بپ0ج4پ0ث9 ت ء ة س د ش ة دپ0ج3 HTLV-I ت ء ة پ0ث5 ض د ش ح آ ر إ ب إپ0ث7 ء ر ح ا س ة تپ0ث4, زپ0ج3 ج ص ط ح ء ج إ س ةپ0ث9 إ خ إ سپ0ث4 ز إ ةپ0ث9 ذ د ش ء ذ ء ة س إپ0ث7 د ر أ ء ح ة ز جپ0ج2پ0ث9 ³ ر د صپ0ث7 ج ط ح ت ء ة µ ء ر جپ0ث4 ت ط ح س ط ح... (FDA). ز سپ0ج2 ز د, س ء ذ ء رپ0ث4 أ ط أ ء ء ح ب رپ0ج4 ذ ة ح د ش ءپ0ث7 ج ء س دپ0ث9 ت ء ة س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ء ز ب إ حپ0ج4 ح ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ب إ ط ر دپ0ج3 ح س ء ة طپ0ث9 ؤ ش ح ا س ة تپ0ث4 ث د ة ج د أپ0ج2 ح ء. ت د ث د ش بپ0ث6 ز س إ س ةپ0ث9 د ر بپ0ث5پ0ث9 إ ر أ ء ز س ا ر ة ء تپ0ث5پ0ث9 ذ ر ء ت س ة تپ0ث5پ0ث9 ت ء سپ0ث4 س ا صپ0ج3 ث ء خ ا, س ا ح پ0ث5 ت ض ش ز ا ت ء ة س ا ح ء ذپ0ج2 ر ر ة ا س ط ح ش ث ة تپ0ج4 ح ء ش سپ0ج4 ح 11. ³ د ةپ0ث4 ث ش ج ء ءپ0ج3 ز اپ0ث9 إپ0ث7 ح ء ة ؤ ةپ0ث4 ث ش ج ء ء ر ء ة ط جپ0ث5 ح د ش ب إ ة ة ت دپ0ج3 د خپ0ث5 طپ0ث9. ³ د ب إ ة ة تپ0ج2 د خپ0ج3 (H 2SO 4) إپ0ث7 ح ء ة ؤ ا ث ا س ا ر ةپ0ج4 ؤ إپ0ث9 ت ء ة ؤ ة ء آ ر ط س ة تپ0ج2. ا ح س د ت ء س ء ذپ0ث7 ح إ س إ ت ء ة ء ذ د صپ0ج3 أ إ س إ س ا ح إ ذ ء صپ0ث6 ج إ س د ؤپ0ث5 ر ج ء ت ء ة س ء جپ0ث4 س ة ء. ذ د صپ0ج3 أ إ س إ س ا ح پ0ث5 ت ب إ ز ا ز إ آپ0ث4 ز إ ةپ0ث9, جپ0ث5 س ء ث ث ء پ0ث6 پ0ث4 ث ث إپ0ث9 ض ا ج ة تپ0ث5پ0ث9 إ حپ0ج4 ز إ ةپ0ث9 ذ د ش ج ذ د ر إپ0ث7 ح ء ء ح س ة ؤ ر دپ0ج3 ح ج إ د خپ0ث5 ء. ³ د إ ة ؤ ة تپ0ج2 ش ذپ0ج2 ز س ر ط ج ء س د ش إ ح ئپ0ج3 ج د ش (TMB) ذ إ ر ةپ0ث5 ض إ ة إ ر إ ب ة ز س ة تپ0ث6 د ش زپ0ث7 ء ذ د ش ج ذ د ر إپ0ث7 ح ء إپ0ث7 ح ء ة إ ذ ة تپ0ث7 ح ؤ ش ح ا ز إ ذ إ رپ0ث7 ذ س ط ز ا إ ة ز ذ ح دپ0ث6پ0ث9, ت ء سپ0ث4 ذ د ز اپ0ث9 پ0ث6 ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز اپ0ث9 جپ0ث5 ز ط س د ش ؤپ0ث5 ر ج ء س دپ0ث9. ا ح س د ت ء س ء ذپ0ث7 ح إ س إ ت ء ة ء ذ د صپ0ج3 أ إ س إ س ا ح إ ذ ء صپ0ث6 ج إ س د ؤپ0ث5 ر ج ء ت ء ة س ء جپ0ث4 س ة ء. ة ء س ا ؤ ة ء ز صپ0ث4 ث ة ز ا س اپ0ث9 إ أ ت ش رپ0ج2 س ا س ءپ0ث9 س ط ح ء ذ د س إ ث إ ز جپ0ث4 س ط ح, ء ت د ث د ش بپ0ث6 ز س إ س ةپ0ث9 د ؤ ا أپ0ث7 إپ0ث9 ء ت ر ة آپ0ج4پ0ث9 پ0ج2 ذ طپ0ث9 إ ج ص ء حپ0ث7 ئ د ح س ء ة ز إ ء ش سپ0ج2 س د پ0ث5 ح ب إ س د س د ش ت ة س. ا ح إ ح ء ث ثپ0ث4 ز ز إ س إ س ء ز ش ز س ء س ة تپ0ث4 س د ش ت ة س ج إ ز ش ز س ء س ة تپ0ث4 پ0ث4 ث ث اپ0ث9 ذ ر دپ0ث5 ث إ ش ز اپ0ث9. ء ض ر ا ز ة ج د ذ د ة إپ0ث7 س إ س ةپ0ث9 د ر بپ0ث5پ0ث9 إ ر أ ء ز س ا ر ة ء تپ0ث5پ0ث9 س إ ض ح ة تپ0ث5پ0ث9 ذ ر د ت إ ة جپ0ث5 ح د ش ح ء إ ث ء ض ة ز س د ذ د ة إپ0ث7 س ء ة د تپ0ث7 ح ؤ ش ح دپ0ث9 ج ة ت ر د آ ة ء تپ0ث6پ0ث9 ت ء ة ض ا ج ة تپ0ث6پ0ث9 جپ0ج2 ث ش ح ز اپ0ث9. ³ د ت ة س ح ء ج ا ح ض ر ا ز ة ج د ذ د ة إپ0ث7 س ء ة ج إ سپ0ث4 س ا ح ذ ء رپ0ث5 ث إ ش ز ا س اپ0ث9 ا ج إ ر د ج ا حپ0ث7 ءپ0ث9 ثپ0ث6 خ اپ0ث9 ذ د ش ء ح ء أ رپ0ث4 ص إ س ء ة ز س ةپ0ث9 إ س ة تپ0ث5 س إپ0ث9. ث ة تپ0ث4 ذ د ش ذ ء رپ0ث5 ض د ح س ء ة ImmuLisaپ6¾4 پ0ث5 ب د ؤ دپ0ث9 ELISA أ ة ء ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ² REF 5154 ھپ0ث4 ب إ ت ة س ذ إ ر ةپ0ث5 ض إ ة إ ذ ء ر تپ0ث6 ء ح س ة ؤ ر ء ز سپ0ث6 ر ة ء أ ة ء س ا ح إ ت سپ0ث5 ث إ ز ا 96 ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز جپ0ج4 ح. 12 x 8 MICROPLATE GBM ة ت ر د ذ ثپ0ث4 ت ء ج إ ء س د ج ة تپ0ث4 آ ش بپ0ث7 ز ج ء س ء إ ت تپ0ث7 ح ا ز اپ0ث9. ذ إ ح ؤ إ ؤ ش جپ0ث5 ح ا ج إ ء ح س ة أپ0ج2 ح د ². پ0ت2 س د ة ج ا ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا. 1 x 1,75 ml CONTROL + GBM پ0ت2 س د ة ج دپ0ث9 ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا إ س ة تپ0ج2پ0ث9 پ0ت2 ث إ أ ض دپ0ث9 ( تپ0ج2 ت ت ة ح د ذپ0ج4 ج ء). إ ر ةپ0ث5 ض إ ة ء ح ب رپ0ج4 ذ ة ح د د رپ0ج2 ب إ س ة تپ0ج2 أ ة ء ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ². ³ د إپ0ج3 ر دپ0ث9 ء ح ء ج إ حپ0ج2 ج إ ح اپ0ث9 ذ ش ت حپ0ج2 س ا س ءپ0ث9 ز إ EU/ml إ ج ص ء حپ0ث7 ئ إ س ء ة ز س ا ح إ س ة تپ0ث5 س ء. 1 x 1,75 ml CONTROL - پ0ت2 س د ة ج دپ0ث9 ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا ر ح ا س ة تپ0ج2پ0ث9 پ0ت2 ث إ أ ض دپ0ث9 ( ث إ ش تپ0ج2 ذپ0ج4 ج ء). إ ر ةپ0ث5 ض إ ة ء ح ب رپ0ج4 ذ ة ح د د رپ0ج2. 10

11 1 3EL 5 x 1,75 ml CALIBRATOR A GBM CALIBRATOR B GBM CALIBRATOR C GBM CALIBRATOR D GBM CALIBRATOR E GBM پ0ت2 س د ة ج د ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا ز إ س 5 ء ب ج د ح د ج ا سپ0ج4 ح. ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6پ0ث9 A ( ذ رپ0ث4 ز ة ح د ذپ0ج4 ج ء) 160 EU/ml, ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6پ0ث9 B ( ةپ0ج4 ؤ إپ0ث9 ذپ0ج4 ج ء) 80 EU/ml, ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6پ0ث9 ( ج ذ ث إ ذپ0ج4 ج ء) 40 EU/ml, ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6پ0ث9 ( تپ0ث7 س ر ة ح د ذپ0ج4 ج ء) 20 EU/ml, ت ء ة ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6پ0ث9 E ( ذ د ر س د ت ء ثپ0ث7 ذپ0ج4 ج ء) 1 EU/ml. ر د إ ر ضپ0ج2 ج إ ح ء ء ذپ0ج2 ء ح ب رپ0ج4 ذ ة ح د د رپ0ج2 ذ د ش ذ إ ر ةپ0ث5 ض إ ة ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ². ² ش أ ت إ ح س رپ0ج4 ز إ ةپ0ث9 ز إ EU/ml ء ح ء أ رپ0ث4 ص د ح س ء ة ز س ةپ0ث9 إ س ة تپ0ث5 س إپ0ث9. 1 x 15 ml IgG-CONJ HRP ²پ0ج3 ئ إ ش خ ا د ر دپ0ج3 ء ح ب رپ0ج4 ذ ة ح اپ0ث9 ء ح س ة- ء ح د ز د ز ص ء ة رپ0ث7 ح اپ0ث9 G ء ذپ0ج2 ش ذ إ ر د خ إ ة ؤپ0ث4 ز ا ء ذپ0ج2 ر ء ص ء حپ0ث7 ؤ ء. پ0ت2 س د ة ج ا ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا. ھ ط ؤ ة ت د ذ د ة ا جپ0ث5 ح د ج إ ر د ئ ض رپ0ج4 ج ء. 1 x 60 ml DIL ر ء ة ط س ة تپ0ج2 د ر دپ0ج3. پ0ت2 س د ة ج د ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا. ھ ط ؤ ة ت د ذ د ة ا جپ0ث5 ح د ج إ ةپ0ج4 ؤ إپ0ث9 ض رپ0ج4 ج ء. 1 x 15 ml SUBSTRATE TMB ح ئ ش ج د- ش ذپ0ج2 ز س ر ط ج ء س إ س ر ء ج إ ب ش ث د آ إ ح ئ ة ؤپ0ث7 ح اپ0ث9 (TMB). پ0ت2 س د ة ج د ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا. ر د ز س ء سپ0ث5 س إ ء ذپ0ج2 س د ص طپ0ث9. 1 x 15 ml STOP H2SO4 ةپ0ث4 ث ش ج ء ذ ءپ0ج3 ز اپ0ث9. پ0ت2 س د ة ج د ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا. 2 x vials BUF WASH ² تپ0ج2 ح ا ر ش ب ج ة ز س ة ت دپ0ج3 ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9. ء ح ء زپ0ج3 ز س ء ز ا ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء أپ0ث7 ح إ س ء ة پ0ث5 طپ0ث9 پ0ج2 أ ت د إ حپ0ج2پ0ث9 ثپ0ث7 س ر د ش أ ة ء س د ت ء بپ0ث5 ح ء. 1 x µپ0ج3 ث ث ء ذ ر ط س د تپ0ج2 ث ث د ش ر د ء ة ر إ س ة تپ0ث4 ² ش ز س ء س ة تپ0ث4 1 x 60 ml BUF WASH أ رپ0ج2 ز ش ج ذ ش ت ح ط جپ0ث5 ح د ر ش ب ج ة ز س ة ت دپ0ج3 ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9. ء ح ء زپ0ج3 ز س ء ز ا ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء أپ0ث7 ح إ س ء ة پ0ث5 طپ0ث9 پ0ج2 أ ت د إ حپ0ج2پ0ث9 ثپ0ث7 س ر د ش أ ة ء س د ت ء بپ0ث5 ح ء. ²پ0ج3 ج آ د ث ء ذ د ش ض ر ا ز ة ج د ذ د ة دپ0ج3 ح س ء ة ز س ةپ0ث9 إ س ة تپ0ث5 س إپ0ث9: LOT ر ة ب جپ0ج2پ0ث9 ذ ء ر سپ0ث7 ؤ ءپ0ث9 REF ر ة ب جپ0ج2پ0ث9 ت ء س ء ثپ0ج2 أ د ش IVD e t! s M In vitro ؤ ة ء أ ح ط ز س ة تپ0ث6 ض رپ0ث6 ز ا ج إ ر د ج ا حپ0ث7 ء ثپ0ث6 خ اپ0ث9 إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء ء ذ د بپ0ث6 ت إ ش ز اپ0ث9 ة ء آپ0ث4 ز س إ س ةپ0ث9 د ؤ ا أپ0ث7 إپ0ث9 ض رپ0ث6 ز اپ0ث9 ذ ر ة ح س د ض ر ا ز ة ج د ذ د ةپ0ث6 ز إ س إ ر ة ب جپ0ج2پ0ث9 ء ح ء ثپ0ج3 ز إ ط ح ھ ء س ء ز ت إ ش ء ز سپ0ث6پ0ث9 ذ ء ة س دپ0ج3 ج إ ح ء ش ث ة تپ0ث4 ذ د ش ؤ إ ح ذ ء رپ0ث5 ض د ح س ء ة ذ ة د ح ة ز جپ0ث5 ح د پ0ث6 ء ذ إ ز س ء أ جپ0ث5 ح د ح إ رپ0ج2 پ0ج3 ت ء ج ذ س ا ذ ث ء ز س ة تپ0ث6 ص ةپ0ث4 ث ا أ ة ء س د ء ر ء ة ط جپ0ث5 ح د ر ش ب ج ة ز س ة تپ0ج2 ؤ ةپ0ث4 ث ش ج ء ة ذپ0ث5 س إپ0ث9 ج إ ؤ ش ح ء سپ0ج2 س ا س ء ض د رپ0ث6 أ ا ز اپ0ث9 5 ج پ0ث5 طپ0ث ج ح ء ثپ0ج4 ز ة ج ء ء ت ر د صپ0ج3 ز ة ء ذ ة ذ إ سپ0ج4 ح ھ ء ب ء ر دپ0ث7 ؤ د ت ة ج ء ز س ة ت دپ0ث7 ز ط ثپ0ث6 ح إپ0ث9 ؤ ة ء ز سپ0ث4 ز إ ط ح 12 x 75 mm ت ء ة ص د رپ0ث5 ءپ0ث9 ؤ د ت ة ج ء ز س ة تپ0ج4 ح ز ط ثپ0ث6 ح ط ح ر د ح د ج إ س ر ا سپ0ث6پ0ث9 11

12 1 3EL ذ د ر ر د ص ا س ة تپ0ج2 ض ء ر سپ0ث7 ² ش ز ت إ شپ0ث6 ء حپ0ث4 أ ح ط ز اپ0ث9 ذ ث ء ت ة ؤپ0ث7 ط ح ج إ ؤ ش ح ء سپ0ج2 س ا س ء ء حپ0ث4 أ ح ط ز اپ0ث9 س ة جپ0ج4 ح ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز اپ0ث9 ز إ جپ0ث6 ت دپ0ث9 تپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 450 nm. پ0ث4 ح ش ذپ0ث4 ر ض إ ة ؤ ة ء بپ0ث5 ز ة ج ا ز ش ز ت إ شپ0ث6 ء حپ0ث4 أ ح ط ز اپ0ث9 ذ ث ء ت ة ؤپ0ث7 ط ح ؤ ة ذ ث دپ0ج3 جپ0ث6 ت د شپ0ث9 تپ0ج3 ج ء س دپ0ث9, س د صپ0ث7 ث س ر د ء ح ء ص د رپ0ث4پ0ث9 ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ر ش ب ج ة ز س إپ0ث7 ز س ء 600 C650 nm ش سپ0ج2 ج ء س ا ز ش ز ت إ شپ0ث6 پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9 ذ ث ء ت ة ؤپ0ث7 ط ح ج إ ؤ ش ح ء سپ0ج2 س ا س ء ض د رپ0ث6 أ ا ز اپ0ث9 200 ج ² ««ھ ± ² ² ³ ² ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ض ر ا ز ة ج د ذ د ة دپ0ج3 ح س ء ة جپ0ج2 ح د ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء د ر دپ0ج3 أ ة ء ء ش سپ0ث6 س ا ؤ ة ء ؤ ة ت ء زپ0ث7 ء. إپ0ث7 أ ج ء س ء ذ د ش پ0ث5 ض د ش ح ش ذ د ز س إپ0ث7 ج إ أپ0ث4 ث د ش آ ء ب ج دپ0ج3 ء ة جپ0ج2 ث ش ز ا, ث ة ذ ء ة ج ة تپ0ث4 پ0ث6 ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ج د ث ش ز جپ0ث5 ح ء ج إ ج ة ت رپ0ج2 آ ة ء إ ح ؤپ0ث5 ض إ س ء ة ح ء إ ذ ا ر إپ0ث4 ز د ش ح س ا ح ء ذپ0ج2 ؤ د ز ا س اپ0ث9 ء حپ0ث4 ث ش ز اپ0ث9 ت ء ة ؤ إ ح ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ض ر ا ز ة ج د ذ د ة دپ0ج3 ح س ء ة. µ ش ثپ0ث4 خ س إ س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء 2 م C8 مC, إ ذپ0ث7 پ0ج2 ض ة ذ إ ر ة ز زپ0ج2 س إ ر د ء ذپ0ج2 جپ0ث7 ء إ آ ؤ د جپ0ث4 ؤ ء. ة ء ذ ة د ج ء ت ر د ض رپ0ج2 ح ة ء صپ0ج3 ث ء خ ا س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء د ر دپ0ج3 ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ت ء س ء پ0ج3 ض د ح س ء ة. ذ د صپ0ج3 أ إ س إ س ا ح إ ذ ء ح ء ث ء ج آ ء حپ0ج2 ج إ ح ا ت ء سپ0ث4 ش خ ا ت ء ة ء ذپ0ج2 ش خ ا س ط ح ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح. ² ش ح ة ز سپ0ث4 س ء ة س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ذ د ش پ0ث5 ض د ش ح ت ء س ء ش ض ب إپ0ث7 ح ء إ ثپ0ث5 أ ض د ح س ء ة إ ح سپ0ج2پ0ث9 س د ش پ0ث5 س د شپ0ث9. ھ ² ² ا ج إ ةپ0ج4 ز إ ةپ0ث9 س اپ0ث9 ؤ ة ء ؤ ة ت ء زپ0ث7 ءپ0ث9 ر د س دپ0ج3 خ إ ت ة حپ0ث6 ز إ س إ س ا ح ء حپ0ث4 ث ش ز ا ؤ ة ء آپ0ث4 ز س إ ذ ر د ز إ ت س ة تپ0ث4 ء ش سپ0ث5پ0ث9 س ةپ0ث9 د ؤ ا أپ0ث7 إپ0ث9. ر د إ س د ة جپ0ث4 ز س إ پ0ج2 ث إپ0ث9 س ةپ0ث9 ء ر ء ةپ0ج4 ز إ ةپ0ث9 س ط ح ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح ء ز ب إ حپ0ج4 ح ذ ر د س دپ0ج3 خ إ ت ة حپ0ث6 ز إ س إ س ا ح ء حپ0ث4 ث ش ز ا. صپ0ث6 ز س إ س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء د ر دپ0ج3 ت ء ة س ء ء ح س ة ؤ ر ء ز سپ0ث6 ر ة ء س اپ0ث9 ء حپ0ث4 ث ش ز اپ0ث9 ح ء ص سپ0ث4 ز د ش ح ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء ذ إ ر ة آپ0ث4 ث ث د ح س دپ0ث9 ذ ر د س دپ0ج3 خ إ ت ة حپ0ث6 ز إ س إ س ا ؤ ة ء ؤ ة ت ء زپ0ث7 ء س اپ0ث9 ء حپ0ث4 ث ش ز اپ0ث9. ² ش ح ة ز سپ0ث4 س ء ة ح ء ء صپ0ث6 ح إ س إ س ء ء ح س ة ؤ ر ء ز سپ0ث6 ر ة ء ز س د ح ذپ0ث4 أ ت د پ0ث5 خ ط ء ذپ0ج2 س د ت د ش سپ0ث7 أ ة ء 30 ث إ ذ سپ0ث4 ذ ر ة ح ء ذپ0ج2 س ا ض رپ0ث6 ز ا. ذ ة ز س رپ0ث5 س إ س ء ش ث ة تپ0ث4 ت ء ة س ء ء ح س ة ؤ ر ء ز سپ0ث6 ر ة ء ذ د ش ؤ إ ح ض ر ا ز ة ج د ذ د ةپ0ث6 ب ا ت ء ح ز س د ش أ إپ0ث7 د ء جپ0ث5 ز طپ0ث9 ج إ سپ0ث4 س ا ض رپ0ث6 ز ا س د شپ0ث9. ص ء ة رپ0ث5 ز س إ ء ذپ0ج2 س ا بپ0ث6 ت ا س ةپ0ث9 ء ذ ء ة س دپ0ج3 ج إ ح إپ0ث9 س ء ة حپ0ث7 إپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ ط ح ت ء ة إ ذ ء ح ء ز ص ر ء أپ0ث7 ز س إ ذ ر د ز إ ت س ة تپ0ث4 س ا بپ0ث6 ت ا پ0ج4 ز س إ ح ء ء ذ د س ر ء ذ إپ0ث7 س ش ضپ0ج2 ح ز ش ج ذپ0ج3 ت ح ط ز ا ش ؤ ر ء س جپ0ج4 ح ز س ةپ0ث9 ء ض ر ا ز ة ج د ذ دپ0ث7 ا س إپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9. ذ ة ز س رپ0ث5 س إ ء جپ0ث5 ز طپ0ث9 س ا بپ0ث6 ت ا ز س د ش أ إپ0ث7 د. پ0ث7 ح ء ة ز ا ج ء ح س ة تپ0ث6 ا ض رپ0ث6 ز ا د ر بپ0ث6پ0ث9 س إ ض ح ة تپ0ث6پ0ث9 پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9. پ0ث4 ح ا پ0ث5 ت ذ ث ش ز ا ؤ إ ح إ ت س إ ث إپ0ث7 س ء ة ء ش سپ0ج2 ج ء س ء, إ ذ ء ر تپ0ث6پ0ث9 پ0ث5 ت ذ ث ش ز ا إ ذ ة س ش أ ضپ0ث4 ح إ س ء ة ت ء س إ ش بپ0ج3 ح د ح س ءپ0ث9 ج ة ء ة ز ض ش رپ0ث6 ر ة ذپ0ث6 ر ش ب ج ة ز س ة ت دپ0ج3 ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9 ء ذپ0ج2 ج ة ء ص ةپ0ث4 ث ا پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9 ج إ إ ش رپ0ج3 ء ت ر د صپ0ج3 ز ة د ت ء سپ0ث4 جپ0ث6 ت دپ0ث9 د ثپ0ج2 ت ث ا ر د ش س د ش ذ ث ء ت ة ؤپ0ث7 د ش. ² ش ح ة ز سپ0ث4 س ء ة ا ض رپ0ث6 ز ا ء ش سپ0ج2 ج ء س اپ0ث9 ز ش ز ت إ شپ0ث6پ0ث9 پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9 ذ ث ء ت ة ؤپ0ث7 ط ح. ر ا ز ة ج د ذ د ةپ0ث6 ز س إ ج ة ء ذ د ث ش تپ0ث4 ح ء ث ا ذ ة ذپ0ث5 س ء ج إ ؤ ش ح ء سپ0ج2 س ا س ء س ء ش سپ0ج2 ض ر د ح اپ0ث9 ض د رپ0ث6 أ ا ز اپ0ث9 ز إ 8 ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9. إ س د ح س رپ0ج2 ذ د ء ش سپ0ج2, إ ذ ة س ء ضپ0ج3 ح إ س ء ة ا ؤ ة ء ؤ ة ت ء زپ0ث7 ء ت ء ة إ ذ ة س ش أ ضپ0ث4 ح إ س ء ة ذ ة د د ج د ةپ0ج2 ج د ر ص دپ0ث9 ض رپ0ج2 ح دپ0ث9 إ ذپ0ج4 ء ز اپ0ث9. ² إ پ0ج2 ث ء س ء آپ0ث6 ج ء س ء إپ0ث7 ح ء ة ز ا ج ء ح س ة تپ0ج2پ0ث9 د ذ ر د ز إ ت س ة تپ0ج2پ0ث9 پ0ث5 ث إ أ ض دپ0ث9 س ط ح ض رپ0ج2 ح ط ح. پ0ت6 ث إپ0ث9 د ة ذ إ رپ0ث7 د ؤ د ة إ ذپ0ج4 ء ز اپ0ث9 خ إ ت ة ح دپ0ج3 ح ج إ س ا ح د ث د ت ثپ0ث6 ر ط ز ا س اپ0ث9 ذ ر د ز بپ0ث6 ت اپ0ث9 س د ش ء ح س ة ؤ ر ء ز س ا رپ0ث7 د ش. ذ ر د ز بپ0ث6 ت ا پ0ج2 ث ط ح س ط ح ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح ت ء ة ء ح س ة ؤ ر ء ز س ا رپ0ث7 ط ح ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء أپ0ث7 ح إ س ء ة ج إ س د ح پ0ث7 ؤ ة د ر ش ب جپ0ج2 ت ء ة ج إ س ا ح پ0ث7 ؤ ة ء ز إ ة رپ0ث4. پ0ث5 ب د ؤ دپ0ث9 ء حپ0ث4 ث ش ز اپ0ث9 پ0ث6 ج ء 1 پ0ث6 ج ء 2 صپ0ث6 ز س إ پ0ج2 ث ء س ء ء ح س ة ؤ ر ء ز سپ0ث6 ر ة ء ت ء ة س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ح ء ص سپ0ث4 ز د ش ح ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء ذ إ ر ة آپ0ث4 ث ث د ح س دپ0ث9. ² ا جپ0ث4 ح إ س إ س د صپ0ج3 ث ث د س د ش ذ ر ط س د تپ0ج2 ث ث د ش پ0ج4 ز س إ ح ء ش ذ د ؤ إ ة ت حپ0ج3 إ س ء ة ا س د ذ د بپ0ث5 س ا ز ا س ط ح ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح ز س ةپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9. ء حپ0ث4 ث ش ز ا س ط ح ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح إ ةپ0ث9 ؤ ة ذ ث دپ0ج3 ح ء ذ د س إ ث إپ0ث7 د ر بپ0ث6 إ ر أ ء ز س ا ر ة ء تپ0ث6 ذ ر ء ت س ة تپ0ث6. 12

13 1 3EL پ0ث6 ج ء 3 ة ء ذ د ة د س ة تپ0ج2 ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز جپ0ج2 ض ر ا ز ة ج د ذ د ةپ0ث6 ز س إ جپ0ج2 ح د س د ح پ0ث5 س د ة ج د ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6 D ( ص ة ء ثپ0ث7 ؤ ة د ج إ تپ0ث7 س ر ة ح د ذپ0ج4 ج ء) پ0ث6 ة ء ا ج ة- ذ د ز د س ة تپ0ج2 ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز جپ0ج2 ض ر ا ز ة ج د ذ د ةپ0ث6 ز س إ س د شپ0ث9 پ0ث5 س د ة ج د شپ0ث9 ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث5پ0ث9 پ0ث5 طپ0ث9 D, پ0ج2 ذ طپ0ث9 ء ذ إ ة ت د حپ0ث7 ئ إ س ء ة ز س ا ح ذ ء ر ء تپ0ث4 س ط ؤ ة ء جپ0ج2 ر ص ط ز ا ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح. پ0ث6 ج ء 4 پ0ث6 ج ء 5 د ة د س ة تپ0ج2پ0ث9 ر د ز ؤ ة د ر ة ز جپ0ج2پ0ث9 ج ة ذ د ز د س ة تپ0ج2پ0ث9 ر د ز ؤ ة د ر ة ز جپ0ج2پ0ث9 A ھ إ حپ0ج2 S5 ھ ث ذ. A ھ إ حپ0ج2 S1 ھ ث ذ. B - S6 B - S2 C + S7 C + S3 D Cal D S8 D Cal A S4 E S1 S9 E Cal B S5 F S2 S10 F Cal C S6 G S3 S11 G Cal D S7 H S4 S12 H Cal E S ر د إ س د ة جپ0ث4 ز س إ ج ة ء ء ر ءپ0ث7 ط ز ا س ط ح ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح ء ز ب إ حپ0ج4 ح ز إ ء ح ء ث د أپ0ث7 ء 1:101, ء ح ء ج ة أ حپ0ج3 د ح س ءپ0ث9 5 ج س د ش ؤ إپ0ث7 أ ج ء س دپ0ث9 س د ش ء ز ب إ ح دپ0ج3پ0ث9 ج إ 500 ml س د ش ء ر ء ة ط س ة ت دپ0ج3 ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 د ر دپ0ج3. ص ء ة رپ0ث5 ز س إ س ةپ0ث9 ء ذ ء ة س دپ0ج3 ج إ ح إپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9 ء ذپ0ج2 س ا بپ0ث6 ت ا ت ء ة إ ذ ة ز س رپ0ث5 س إ س ش ضپ0ج2 ح ج ا ض ر ا ز ة ج د ذ د ة ا جپ0ث5 ح إپ0ث9 س ء ة حپ0ث7 إپ0ث9 ذ د ش ش ذپ0ث4 ر ض د ش ح ز س ا ز ص ر ء أ ة ز جپ0ث5 ح ا بپ0ث6 ت ا ز س د ش أ إپ0ث7 د. ³ د ذ د ب إ سپ0ث6 ز س إ ز س ء ب إ رپ0ث4 س ةپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9 ز س د ذ ث ءپ0ث7 ز ة د ز سپ0ث6 ر ة خ اپ0ث9 ذ د ش ؤ ة ء سپ0ث7 ب إ س ء ة. پ0ث6 ج ء 6 ر د ز بپ0ث5 ز س إ 100 ج پ0ث5 س د ة ج ط ح ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا آ ء ب ج د ح د ج ا سپ0ج4 ح, ؤ ة ء ث ش جپ0ث4 س ط ح ب إ س ة ت دپ0ج3 ت ء ة ء ر ح ا س ة ت دپ0ج3 إ ثپ0ث5 أ ض د ش ت ء ة ء ر ء ة ط جپ0ث5 ح ط ح ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح ء ز ب إ حپ0ج4 ح (1:101) ز س ةپ0ث9 ت ء سپ0ث4 ث ث ا ث إپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9, پ0ج2 ذ طپ0ث9 ش ذ د ؤ إ ة ت حپ0ج3 إ س ء ة ز س د صپ0ج3 ث ث د ذ ر ط س د تپ0ج2 ث ث د ش. ² ا ج إپ0ث7 ط ز ا: ² ش ج ذ إ ر ة ثپ0ث4 آ إ س إ ج ة ء ت ش إ ثپ0ث7 ؤ ء ج إ 100 جl ء ر ء ة ط س ة ت دپ0ج3 ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 د ر دپ0ج3 طپ0ث9 س ش ص ثپ0ج2 ء ح س ة ؤ ر ء ز س ا رپ0ث7 د ش. ا ؤ إ حپ0ث7 ز س إ س ا ز ش ز ت إ شپ0ث6 ء حپ0ث4 أ ح ط ز اپ0ث9 ELISA ج إ س د س ش ص ثپ0ج2 ء ح س ة ؤ ر ء ز س ا رپ0ث7 د ش. پ0ث6 ج ء 7 پ0ث6 ج ء 8 پ0ث6 ج ء 9 پ0ث6 ج ء 10 ذ طپ0ث4 ز س إ إ ذپ0ث7 30 ث إ ذ سپ0ث4 ( ہ5 ث إ ذ سپ0ث4) ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء ؤ ط ج ء سپ0ث7 د ش. ت ذ ثپ0ج3 ح إ س إ 4x ج إ س د ر ش ب ج ة ز س ة تپ0ج2 ؤ ةپ0ث4 ث ش ج ء پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9. ة ء ج ا ء ش سپ0ج2 ج ء س ا پ0ث5 ت ذ ث ش ز ا, ذ ث ا رپ0ج4 ز س إ تپ0ث4 ب إ ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ ء ج إ ء ح ء ز ش ز س ء بپ0ث5 ح ر ش ب ج ة ز س ة تپ0ج2 ؤ ةپ0ث4 ث ش ج ء پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9. ذ د ر رپ0ث7 س إ س د ش أ رپ0ج2 ء ح ء ز س رپ0ث5 ص د ح س ءپ0ث9 س د ذ ث ء تپ0ث7 ؤ ة د ت ء ة ت س ش ذپ0ج4 ح س ءپ0ث9 س د إ ث ء ص رپ0ث4 پ0ج4 ز س إ ح ء ء ؤ إ ةپ0ث4 ز د ش ح پ0ج2 ث إپ0ث9 د ة ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9 پ0ث6 ء ح ء ر ر د صپ0ج4 ح س ءپ0ث9 س د ش أ رپ0ج2 ء ذپ0ج2 تپ0ث4 ب إ ت ش إ ثپ0ث7 ؤ ء. ة ء ح ء ز س ش ذپ0ج4 ز إ س إ ز س د سپ0ث5 ث دپ0ث9 س اپ0ث9 س إ ث إ ش س ءپ0ث7 ءپ0ث9 پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9, ء ح ء ز س رپ0ث5 س إ س ةپ0ث9 س ء ة حپ0ث7 إپ0ث9 ت ء ة ت س ش ذپ0ث6 ز س إ ؤ ش ح ء سپ0ث4 س ةپ0ث9 ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9 إ ذپ0ث4 ح ط ز إ ء ذ د ر ر د ص ا س ة تپ0ج2 ض ء ر سپ0ث7. ة ء ء ش سپ0ج2 ج ء س إپ0ث9 ز ش ز ت إ شپ0ث5پ0ث9 پ0ث5 ت ذ ث ش ز اپ0ث9, ذ ر د أ ر ء ج ج ء سپ0ث7 ز س إ س ا ز ش ز ت إ شپ0ث6 زپ0ج3 ج ص ط ح ء ج إ س ةپ0ث9 د ؤ ا أپ0ث7 إپ0ث9 س د ش ت ء س ء ز ت إ ش ء ز سپ0ث6. ر د ز بپ0ث5 ز س إ 100 ج ز ش ئ إ ش ت س ة ت دپ0ج3 ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س دپ0ث9 ز س ةپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9. ذ طپ0ث4 ز س إ إ ذپ0ث7 30 ث إ ذ سپ0ث4 ( ہ5 ث إ ذ سپ0ث4) ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء ؤ ط ج ء سپ0ث7 د ش. پ0ث6 ج ء 11 ت ذ ثپ0ج3 ح إ س إ پ0ج2 ث إپ0ث9 س ةپ0ث9 ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ إپ0ث9 پ0ج2 ذ طپ0ث9 ز س د آپ0ث6 ج ء 8. پ0ث6 ج ء 12 پ0ث6 ج ء 13 پ0ث6 ج ء 14 پ0ث6 ج ء 15 ر د ز بپ0ث5 ز س إ 100 ج إ ح ئ ش ج ة ت دپ0ج3 ش ذ د ز س رپ0ج4 ج ء س دپ0ث9 ز إ تپ0ث4 ب إ ت ش إ ثپ0ث7 ؤ ء, ج إ س ا ح پ0ث7 ؤ ة ء ز إ ة رپ0ث4 ت ء ة ج إ س د شپ0ث9 پ0ث7 ؤ ة د شپ0ث9 ض رپ0ج2 ح د شپ0ث9 پ0ج2 ذ طپ0ث9 س د ز ش ئ إ ش ت س ة تپ0ج2 ء ح سپ0ث7 ز ط ج ء. ذ طپ0ث4 ز س إ إ ذپ0ث7 30 ث إ ذ سپ0ث4 ( ہ5 ث إ ذ سپ0ث4) ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء ؤ ط ج ء سپ0ث7 د ش. ر د ز بپ0ث5 ز س إ 100 ج ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 س إ ر ج ء س ة ز ج دپ0ج3 ز إ تپ0ث4 ب إ ج ة ت ر د ت ش إ ثپ0ث7 ؤ ء, ج إ س ا ح پ0ث7 ؤ ة ء ز إ ة رپ0ث4 ت ء ة ج إ س د شپ0ث9 پ0ث7 ؤ ة د شپ0ث9 ض رپ0ج2 ح د شپ0ث9 پ0ج2 ذ طپ0ث9 س د إ ح ئ ش ج ة تپ0ج2 ش ذپ0ج2 ز س ر ط ج ء. ة ء آپ0ث4 ز س إ س ةپ0ث9 س ة جپ0ث5پ0ث9 ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز اپ0ث9 إ ح سپ0ج2پ0ث9 1 پ0ج4 ر ءپ0ث9 ء ذپ0ج2 س ا ح ذ ر د ز بپ0ث6 ت ا س د ش ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 س إ ر ج ء س ة ز ج دپ0ج3. ة ء آپ0ث4 ز س إ س ا ح ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز ا تپ0ث4 ب إ ت ش إ ثپ0ث7 ؤ ءپ0ث9 ز إ جپ0ث6 ت دپ0ث9 تپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 450 nm ض ر ا ز ة ج د ذ د ةپ0ج4 ح س ءپ0ث9 ج ة ء ز ش ز ت إ شپ0ث6 ء حپ0ث4 أ ح ط ز اپ0ث9 ذ ث ء ت ة ؤپ0ث7 ط ح ج د ح دپ0ج3 پ0ث6 ؤ ة ذ ث دپ0ج3 جپ0ث6 ت د شپ0ث9 تپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 450/630 nm, پ0ث5 ح ء ح س ة س د ش س ش ص ث دپ0ج3 ء ح س ة ؤ ر ء ز س ا رپ0ث7 د ش ذ د ش ر ش ب جپ0ث7 ز س ا ت إ ح ء پ0ث5 ض إ ة ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز ا ج ا ؤپ0ث5 ح. 13

14 1 3EL پ0ت2 ث إ أ ض دپ0ث9 ذ د ةپ0ج2 س ا س ءپ0ث9 ² إ تپ0ث4 ب إ ء حپ0ث4 ث ش ز ا ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ض ر ا ز ة ج د ذ د ة دپ0ج3 ح س ء ة آ ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث5پ0ث9, ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س ء ب إ س ة ت دپ0ج3 ت ء ة ء ر ح ا س ة ت دپ0ج3 إ ثپ0ث5 أ ض د ش ت ء ة پ0ث5 ح ء س ش ص ثپ0ج2 ء ح س ة ؤ ر ء ز س ا رپ0ث7 د ش, ذ ر د ت إ ة جپ0ث5 ح د ش ح ء إ ذ ة آ إ آ ء ةپ0ج4 ح إ س ء ة ا ء ت إ ر ء ةپ0ج2 س ا س ء ت ء ة ا ء ت رپ0ث7 آ إ ة ء س اپ0ث9 ء حپ0ث4 ث ش ز اپ0ث9. جپ0ث5 س ر ا ز ا ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز اپ0ث9 س د ش س ش ص ث دپ0ج3 ء ح س ة ؤ ر ء ز س ا رپ0ث7 د ش ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء إپ0ث7 ح ء ة <0,3. ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6پ0ث9 ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ؤپ0ج4 ز إ ة س ة جپ0ث6 ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز اپ0ث9 پ0ج2 ض ة ج ة ت رپ0ج2 س إ ر ا ء ذپ0ج2 1,0, ؤ ة ء ص د ر إ س ة تپ0ث4 ا ء حپ0ث4 ث ش ز ا ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء إ ذ ء ح ء ث ا ص ب إپ0ث7. ³ د ؤ ةپ0ث4 ث ش ج ء ء ر ح ا س ة ت دپ0ج3 إ ثپ0ث5 أ ض د ش ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ؤپ0ج4 ز إ ة س ة جپ0ث6 <10 EU/ml. پ0ث4 ح ا إ خپ0ث5 س ء ز ا ؤ ة إ خپ0ث4 أ إ س ء ة إ ةپ0ث9 ؤ ة ذ ث دپ0ج3 ح, ض ر ا ز ة ج د ذ د ةپ0ث6 ز س إ س ا جپ0ث5 ز ا س ة جپ0ث6 س ط ح ؤپ0ج3 د ج إ س رپ0ث6 ز إ ط ح أ ة ء ح ء ذ ر د ز ؤ ة د رپ0ث7 ز إ س إ س ا ز ش أ تپ0ث5 ح س ر ط ز ا س ط ح ء ح س ة ز ط جپ0ث4 س ط ح ز إ EU/ml. ھ ء سپ0ث4 س ا ؤ ة إ خ ء أ ط أپ0ث6 ذ د ة د س ة تپ0ج4 ح ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز جپ0ج4 ح, ا د ذ س ة تپ0ث6 ذ ش ت حپ0ج2 س ا س ء س د ش ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6 D ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء إپ0ث7 ح ء ة ج إ أ ء ثپ0ج3 س إ ر ا ء ذپ0ج2 ء ش سپ0ث6 ح س د ش ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 ء ر ح ا س ة ت دپ0ج3 إ ثپ0ث5 أ ض د ش ت ء ة ج ة ت رپ0ج2 س إ ر ا ء ذپ0ج2 ء ش سپ0ث6 ح س د ش ؤ ة ء ثپ0ج3 ج ء س دپ0ث9 ب إ س ة ت دپ0ج3 إ ثپ0ث5 أ ض د ش. ة ء ا ج ة- ذ د ز د س ة ت دپ0ج3پ0ث9 ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز ج دپ0ج3پ0ث9, س د ؤ ةپ0ث4 ث ش ج ء ب إ س ة ت دپ0ج3 إ ثپ0ث5 أ ض د ش ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ؤپ0ث7 ح إ ة س ة جپ0ث5پ0ث9 إ ح سپ0ج2پ0ث9 س د ش إپ0ج3 ر د شپ0ث9 ذ د ش ء ح ء أ رپ0ث4 ص إ س ء ة ز س د ص ة ء ثپ0ث7 ؤ ة د. ³ «² ³ ذ د ث د أ ة ز ج دپ0ث7 ة ز ش أ ت إ ح س رپ0ج4 ز إ ةپ0ث9 س ط ح ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح س د ش ء ز ب إ ح دپ0ج3پ0ث9 ج ذ د ر دپ0ج3 ح ح ء ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز س دپ0ج3 ح ج إ جپ0ث7 ء ء ذپ0ج2 س ةپ0ث9 إ خپ0ث6پ0ث9 ؤپ0ج3 د ج إ بپ0ج2 ؤ د شپ0ث9: 1. QUALITATIVE DETERMINATION ذ/ ز ا إ خ إ س ء ئپ0ج2 ج إ ح د ش ؤ إپ0ث7 أ ج ء س دپ0ث9 ذ/ ز ا س د ش ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6 D x EU/n I س د ش ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6 D = EU/ I س د ش إ خ إ س ء ئپ0ج2 ج إ ح د ش ؤ إپ0ث7 أ ج ء س دپ0ث9 ² ش ح ة ز سپ0ث4 س ء ة س ء ذ د ة د س ة تپ0ث4 ء ذ د س إ ثپ0ث5 ز ج ء س ء ح ء ء ح ء صپ0ث5 ر د ح س ء ة طپ0ث9 ب إ س ة تپ0ث4 ± پ0ث6 ء ر ح ا س ة تپ0ث4. ± ³ ء ء ذ د س إ ثپ0ث5 ز ج ء س ء ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح ذ د ش إپ0ث7 ح ء ة ج إ أ ء ثپ0ج3 س إ ر ء ء ذپ0ج2 پ0ث6 پ0ث7 ز ء ج إ س د ح ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6 ب إ ط ر دپ0ج3 ح س ء ة ب إ س ة تپ0ث ² ³ ھ ² ± ² ± ² ² ذ إ ة ت د حپ0ث7 ز س إ ز إ أ ر ء ص ة تپ0ث6 ذ ء رپ0ث4 ز س ء ز ا س ا ح ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز ا س ط ح ء ب ج د ح د ج ا سپ0ج4 ح پ0ث5 طپ0ث9 ت ء ة D طپ0ث9 ذ ر دپ0ث9 س ا ح ء ح سپ0ث7 ز س د ة ض ا ز ش أ تپ0ث5 ح س ر ط زپ0ث6 س د شپ0ث9, ز إ پ0ث5 ح ء ض ء ر سپ0ث7 ج إ أ ر ء ج ج ة ت دپ0ج3پ0ث9 پ0ث4 خ د ح إپ0ث9. ³ د ذ د ب إ سپ0ث6 ز س إ ز س د ح پ0ث4 خ د ح ء س ط ح س ا ز ش أ تپ0ث5 ح س ر ط ز ا ز إ EU/ml ت ء ة ز س د ح پ0ث4 خ د ح ء س ط ح س ا ح ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز ا ت ء ة ز ض إ ؤ ةپ0ث4 ز س إ س ا ح ت ء ج ذپ0ج3 ث ا آپ0ث5 ث س ة ز س اپ0ث9 ذ ر د ز ء ر ج د أپ0ث6پ0ث9. ر د ز ؤ ة د رپ0ث7 ز س إ س ةپ0ث9 ز ش أ ت إ ح س رپ0ج4 ز إ ةپ0ث9 س ط ح ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح س ط ح ء ز ب إ حپ0ج4 ح ء ذپ0ج2 س ا ح ت ء ج ذپ0ج3 ث ا, ز إ ز ضپ0ث5 ز ا ج إ س ةپ0ث9 ء ح سپ0ث7 ز س د ة ض إپ0ث9 س ة جپ0ث5پ0ث9 ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز اپ0ث9 س د شپ0ث9. ح ء ث ث ء ت س ة تپ0ث4, ت ء ج ذپ0ج3 ث ا س إ ز زپ0ث4 ر ط ح ذ ء ر ء جپ0ث5 س ر ط ح ج ذ د ر إپ0ث7 ح ء ض ر ا ز ة ج د ذ د ة ا ب إپ0ث7 أ ة ء ح ء ء ذ إ ة ت د حپ0ث7 ز إ س إ س ا ح ذ رپ0ج2 س ش ذ ا ت ء ج ذپ0ج3 ث ا. ² ش ح ة ز سپ0ث4 س ء ة س ء ا ج ة- ذ د ز د س ة تپ0ث4 ء ذ د س إ ثپ0ث5 ز ج ء س ء ح ء ء ح ء صپ0ث5 ر د ح س ء ة طپ0ث9 ب إ س ة تپ0ث4, ± ء ر ح ا س ة تپ0ث4, ± پ0ث6 ء ذ ر د ز ؤ ةپ0ج2 ر ة ز س ء ± ج إ س ة جپ0ث5پ0ث9 ج د حپ0ث4 ؤ ءپ0ث9 EU/ml. ³ ء ء ذ ر د ز ؤ ةپ0ج2 ر ة ز س ء/ د ر ة ء تپ0ث4 ء ذ د س إ ثپ0ث5 ز ج ء س ء ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء إ ذ ء ح إ ثپ0ث5 أ ض د ح س ء ة ت ء ة ء خ ة د ث د أ دپ0ج3 ح س ء ة ج ء ئپ0ث7 ج إ پ0ث4 ث ث إپ0ث9 إ ر أ ء ز س ا ر ة ء تپ0ث5پ0ث9 ج إ بپ0ج2 ؤ د شپ0ث9. ر ج ا ح إپ0ث7 ء ة س ة جپ0ث5پ0ث9 إ ر ج ا ح إپ0ث7 ءپ0ث9 ذ ر د ز ؤ ة د رپ0ث7 ز س ا ت ء ح ج إ ؤ د ت ة جپ0ث6 64 ء ذ ثپ0ج4 ح ؤ د سپ0ج4 ح ءپ0ث7 ج ء س دپ0ث9 ت ء ة ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء إ ثپ0ث5 أ ض د ش حپ0ج2 ز د ش. ³ د ز ا ج إپ0ث7 د ؤ ة ء ض ط ر ة ز ج دپ0ج3 ت ء ب ة إ رپ0ج4 ب ا ت إ ض ر ا ز ة ج د ذ د ةپ0ج4 ح س ءپ0ث9 س د ح جپ0ث5 ز د پ0ج2 ر د س ط ح ز ش حپ0ث6 ب ط ح ء ح س ة ت إ ة جپ0ث5 ح ط ح ز ش ح 3.5 SD أ ة ء س د ء ح سپ0ث7 ز ط ج ء ت ء سپ0ث4 ² ELISA ت ء ة ت ء بپ0ج2 ر ة ز إ س ا ح ء ش ب ءپ0ث7 ر إ س ا س ة جپ0ث6 س ط ح 20 U/ml. IMMCO ذ ر د س إپ0ث7 ح إ ة س ا ض رپ0ث6 ز ا س د ش ذ ء ر ء تپ0ث4 س ط إپ0ج3 ر د شپ0ث9 ء ح ء ص د رپ0ث4پ0ث9. ھپ0ث4 ب إ إ ر أ ء ز سپ0ث6 ر ة د ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء إ ذ ة ت ش رپ0ج4 ح إ ة س ةپ0ث9 س ة جپ0ث5پ0ث9 ؤ د ت ة ج ء زپ0ث7 ءپ0ث9 أ ة ء س ةپ0ث9 ؤ ة تپ0ث5پ0ث9 س د شپ0ث9 ز ش ح بپ0ث6 ت إپ0ث9. ³ ة جپ0ث6 ء ح س ة- ² ر ج ا ح إپ0ث7 ء <20 EU/ml ر ح ا س ة تپ0ج2 20 C25 EU/ml ذ ر د ز ؤ ةپ0ج2 ر ة ز س د ( د ر ة ء تپ0ج2) >25 EU/ml إ س ة تپ0ج2 ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6پ0ث9 ة پ0ث5 س د ة ج د ة ذ ر دپ0ث9 ض رپ0ث6 ز ا آ ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث5پ0ث9 ز ش ج ذ إ ر ة ث ء ج آپ0ث4 ح د ح س ء ة أ ة ء س د ح ا ج ة- ذ د ز د س ة تپ0ج2 ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز جپ0ج2 ت ء ة ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ض ر ا ز ة ج د ذ د ة دپ0ج3 ح س ء ة ز إ تپ0ث4 ب إ ء حپ0ث4 ث ش ز ا. ³ ش ضپ0ج2 ح ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ء ز ب إ حپ0ج4 ح ذ د ش ذ إ ر ةپ0ث5 ض د ش ح ش ا ثپ0ج2 س إ ر ء إ ذپ0ث7 ذ إ ؤ ء ء ح س ة ز ط جپ0ث4 س ط ح إ ح ؤپ0ث5 ض إ س ء ة ح ء ؤپ0ج4 ز د ش ح س ة جپ0ث5پ0ث9 ء ذ د ر رپ0ج2 ص ا ز اپ0ث9 ش ا ثپ0ج2 س إ ر إپ0ث9 ء ذپ0ج2 ء ش سپ0ث5پ0ث9 س د ش ء ب ج د ح د ج ا سپ0ث6. ة ء س د ح ء ت ر ة آپ0ث6 ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز جپ0ج2 س ط ح س ة جپ0ج4 ح ا ج ة- ذ د ز د س ة ت دپ0ج3 ذ ر د ز ؤ ة د ر ة ز ج دپ0ج3, س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ء ش سپ0ث4 ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ء ر ء ة ط ب دپ0ج3 ح ذ إ ر ء ة سپ0ث5 ر ط, پ0ث5 س ز ة پ0ج4 ز س إ پ0ج2 س ء ح إ ذ ء ح إ خ إ س ء ز س دپ0ج3 ح ح ء إ ج ذپ0ث7 ذ س د ش ح إ ح سپ0ج2پ0ث9 س د ش إپ0ج3 ر د شپ0ث9 س اپ0ث9 ت ء ج ذپ0ج3 ث اپ0ث9 14

15 1 3EL آ ء ب ج د حپ0ج2 ج ا ز اپ0ث9. ة ء ح ء ذ ر د ز ؤ ة د رپ0ث7 ز إ س إ س ا ز ش أ تپ0ث5 ح س ر ط ز ا ز إ EU/ml, ذ د ث ث ء ذ ث ء ز ةپ0ث4 ز س إ س ةپ0ث9 ج د حپ0ث4 ؤ إپ0ث9 ذ د ش ذ ر د تپ0ج3 ذ س د ش ح ج إ س د ز ش ح س إ ث إ ز سپ0ث6 ء ر ءپ0ث7 ط ز اپ0ث9. ± ± ² ³ ² ھ ² ² ء حپ0ث4 ث ش ز ا ؤ إ ح ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء إ ت س إ ث إپ0ث7 س ء ة ز إ ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ذ د ش پ0ث5 ض د ش ح ش ذ د ز س إپ0ث7 ج إ أپ0ث4 ث د ش آ ء ب ج دپ0ج3 ء ة جپ0ج2 ث ش ز ا, ز إ ج د ث ش ز جپ0ث5 ح ء ء ذپ0ج2 ج ة ت رپ0ج2 آ ة ء پ0ث6 ث ة ذ ء ة ج ة تپ0ث4 ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء. جپ0ث5 ب د ؤ دپ0ث9 ء ش سپ0ث6 ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ض ر ا ز ة ج د ذ د ة إپ0ث7 س ء ة جپ0ج2 ح د أ ة ء س ا ح إ خپ0ث5 س ء ز ا ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح د ر دپ0ج3 ء ح ب رپ0ج4 ذ د ش. ³ ء ء ذ د س إ ثپ0ث5 ز ج ء س ء ذ د ش إ ذ ة س ش أ ضپ0ث4 ح د ح س ء ة إ خ ش ذ ا ر إ س دپ0ج3 ح جپ0ج2 ح د ح طپ0ث9 آ دپ0ث6 ب ا ج ء ز س ا ؤ ةپ0ث4 أ ح ط ز ا. پ0ج2 ح ء س د شپ0ث9, ء ش سپ0ث4 س ء ء ذ د س إ ثپ0ث5 ز ج ء س ء ؤ إ ح ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء إ ر ج ا ح إپ0ج3 د ح س ء ة طپ0ث9 ؤ ة ء أ ح ط ز س ة تپ0ث4. رپ0ج2پ0ث9 ء ز ب إ حپ0ج4 ح ج إ س ء ضپ0ث5 طپ0ث9 إ خ إ ث ة ز زپ0ج2 ج إ ح ا ذ ر د د ؤ إ ش س ة تپ0ث6 ز ذ إ ة ر ء ج ء س د ح إ ص رپ0ث7 س ة ؤ ء ( ³ ²) إ ح ؤپ0ث5 ض إ س ء ة ح ء إپ0ث7 ح ء ة ء ر ح ا س ة تپ0ث4 أ ة ء ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ². µ ش ثپ0ث4 خ س إ س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ز إ ب إ ر ج د ت ر ء زپ0ث7 ء 2 C8 مC أ ة ء ؤ ةپ0ث4 ز س ا ج ء پ0ج2 ض ة ج إ أ ء ثپ0ج3 س إ ر د ء ذپ0ج2 جپ0ث7 ء إ آ ؤ د جپ0ث4 ؤ ء. ة ء صپ0ج3 ث ء خ ا أ ة ء ج إ أ ء ثپ0ج3 س إ ر د ض ر د ح ة تپ0ج2 ؤ ةپ0ث4 ز س ا ج ء, س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء د ر دپ0ج3 ب ء ذ رپ0ث5 ذ إ ة ح ء ت ء س ء پ0ج3 ض د ح س ء ة. ذ د صپ0ج3 أ إ س إ ح ء پ0ج3 ض إ س إ ت ء ة ء ذ د پ0ج3 ض إ س إ س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء. ² ³ ² ة ء ح ء ج إ حپ0ج2 ج إ ح إپ0ث9 س ة جپ0ث5پ0ث9 ز إ پ0ث5 ح ء ص ش ز ة د ث د أ ة تپ0ج2 ذ ث ا ب ش ز جپ0ج2 إپ0ث7 ح ء ة ء ر ح ا س ة تپ0ث5پ0ث9. إ ثپ0ث5 س إپ0ث9 ت ث ة ح ة تپ0ج4 ح ذ ث ا ب ش ز جپ0ج4 ح إ ثپ0ث5 أ ض ب ا ت ء ح أ ة ء ب إ س ة تپ0ث6 ز ش ض حپ0ج2 س ا س ء ج إ ثپ0ث5 س اپ0ث9 أ ة ء ء ح س ة زپ0ج4 ج ء س ء ² ج إ ء ش سپ0ث6 ح س ا ح جپ0ث5 ب د ؤ د. ة ذ ث ا ب ش ز ج دپ0ث7 ذ إ ر ة إ ثپ0ث4 ج آ ء ح ء ح ش ذ د ت إپ0ث7 ج إ ح ء ج إ زپ0ج3 ح ؤ ر د ج د Goodpasteur, إ ثپ0ث5 أ ض د شپ0ث9 ء ش س دپ0ث4 ح د ز اپ0ث9 حپ0ج2 ز د ش ت ء ة ء ح ء ج إ حپ0ج2 ج إ ح ء پ0ث4 ح د ز ء ص ش ز ة د ث د أ ة تپ0ث4 ء ح ب رپ0ج4 ذ ة ح ء ش ذ د ت إپ0ث7 ج إ ح ء. پ0ج2 ز دپ0ث9 ح ء ج إ حپ0ج2 ج إ ح د n إ س n % إ س ²پ0ج3 ح ؤ ر د ج د Goodpasture 95% ,8% ² ش ز س ا ج ء س ة تپ0ج2پ0ث9 إ ر ش ب ا ج ء سپ0ج4 ؤ اپ0ث9 ثپ0ج3 ت دپ0ث9 < ,0% ²پ0ج3 ح ؤ ر د ج د Sjپ0 2gren < ,0% ² ش ز س ا ج ة تپ0ث6 ز ت ثپ0ث6 ر ط ز ا < ,0% ش ر إ د إ ة ؤپ0ث7 س ة ؤ ء < ,0% إ ة ت سپ0ث6 حپ0ج2 ز دپ0ث9 س د ش ز ش ح ؤ إ س ة ت دپ0ج3 ة ز س دپ0ج3 (MCTD) < ,0% ± إ ش ج ء س د إ ة ؤپ0ث6پ0ث9 ء ر ب رپ0ث7 س ة ؤ ء < ,0% ھ د ة ث ة د تپ0ث4 ت ا < ,0% أ إ ةپ0ث7 س ة ؤ ء < ,0% µ ش ز ة د ث د أ ة ت دپ0ث7 ح ب رپ0ج4 ذ ة ح د ة ر دپ0ث7 (NHS) < ,5% ²پ0ج3 ح د ث د NHS ت ء ة ثپ0ث5 أ ض ط ح پ0ج2 ز د ش ,6% ± ھ ³ ± ² ³ ھ ² ² ض ر ا ز ة جپ0ج2 س ا س ء س د ش ImmuLisaپ6¾4 ح س ة زپ0ج4 ج ء س دپ0ث9 ت ء سپ0ث4 ² ELISA ء خ ة د ث د أپ0ث6 ب ا ت إ ج إ ؤ د ت ة جپ0ث6 ؤ إ ة أ جپ0ث4 س ط ح Goodpasture ج ء ئپ0ث7 ج إ إ ثپ0ث5 أ ض د شپ0ث9 حپ0ج2 ز ط ح ت ء ة ص ش ز ة د ث د أ ة ت دپ0ج3پ0ث9 ± ء ح ب رپ0ج4 ذ ة ح د شپ0ث9 د ر دپ0ج3پ0ث9. ش سپ0ث4 س ء ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ؤ د ت ة جپ0ث4 ز س ا ت ء ح إ ذپ0ث7 ز اپ0ث9 ز إ إ ج ذ د ر ة تپ0ث4 ؤ ة ء بپ0ث5 ز ة ج ء ت ة س. پ0ج2 ح د ح ؤ إپ0ث7 أ ج ء س ء ز س د أ ر ء ج ج ة تپ0ج2 صپ0ث4 ز ج ء س اپ0ث9 ؤ د ت ة ج ء زپ0ث7 ءپ0ث9 ز ش ج ذ إ ر ة إ ثپ0ث6 ص ب ا ز ء ح ز س ا ح زپ0ج3 أ ت ر ة ز ا س اپ0ث9 ج إ بپ0ج2 ؤ د ش. ش سپ0ث4 س ء ء ذ د س إ ثپ0ث5 ز ج ء س ء ز ش ح د پ0ث7 ئ د ح س ء ة ت ء س ط سپ0ث5 ر ط. A. ImmuLisaپ6¾4 ح سپ0ث7 ز ط ج ء ² ELISA پ0ث5 ح ء ح س ة پ0ث4 ث ث د ش ت ة س ح س ة زپ0ج4 ج ء س دپ0ث9 ² : پ0ت0 ث ث د ح سپ0ث7 ز ط ج ء ² ELISA إ س ة تپ0ج2 ر ح ا س ة تپ0ج2 ²پ0ج3 ح د ث د IMMCO إ س ة تپ0ج GBM Ab ر ح ا س ة تپ0ج ELISA ²پ0ج3 ح د ث د ² ش ج ص ط حپ0ث7 ء إ س ة ت دپ0ج3 د ز د ز س دپ0ج3: 100% (95% CI 89,6% C100%) ² ش ج ص ط حپ0ث7 ء ر ح ا س ة ت دپ0ج3 د ز د ز س دپ0ج3: 94% (95% CI 86,0% C97,8%) ² ض إ س ة تپ0ث6 ² ش ج ص ط حپ0ث7 ء: 96% (95% CI 90,5% C98,5%) 15