Envoltório nuclear poro nuclear. Nucléolo. Cromatina

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2 Envoltório nuclear poro nuclear poro nuclear Nucléolo Cromatina

3 O ácido desoxirribonucleico que compõe a informação genética de todos os seres vivos atuais. Dupla hélice Fenda maior e fenda menor Ligações fosfodiéster entre nts da mesma fita Pareamento por pontes de hidrogênio entre bases de fitas opostas Fitas antiparalelas Extremidade 5 contém fosfato Extremidade 3 contém hidroxila

4 De forma geral, existe um aumento da quantidade de DNA que equivale ao aumento da complexidade dos organismos, mas há exceções. Cada espécie tem seu valor C característico, sendo C em células haplóides e 2C nas diplóides.

5 DNA associado a proteínas básicas denominadas histonas e outras proteínas não-histonas. Heterocromatina (constitutiva ou facultativa) maior grau de condensação Eucromatina material genético mais descompactado A cromatina se organiza em cromossomos. Subcompartimentos nucleares: nucléolo, corpos de Cajal e intercromatina. Nas células de certos organismos do sexo feminino, um dos cromossomos X fica condensado, e é visível no núcleo. É um tipo de heterocromatina facultativa.

6 Um cromossomo apresenta diversas origens de replicação, um centrômero e dois telômeros. Tanto o posicionamento do centrômero quanto o padrão de bandeamento pode auxiliar a identificação do cromossomo.

7 Giemsa Marcação por sondas fluorescentes

8 Sequências únicas: genes, sequências de funções desconhecidas Sequências repetidas: DNA satélite, minisatélite, Alu. Proporcionalmente, a quantidade de material genético responsável pela codificação de proteínas é muito pequeno. O genoma humano, por exemplo, tem 25 mil genes distribuídos em 3,2 x 10 9 pbs. Mas quase 50% de seu genoma codifica sequências repetitivas. "Se em tudo o mais forem idênticas as várias explicações de um fenômeno, a mais simples é a melhor William de Ockham... E aí? Será que a navalha de Occam se aplica à natureza dos seres vivos??

9 A cromatina apresenta diversos níveis de organização. O primeiro deles se deve à existência dos nucleossomos. O DNA percorre duas vezes o octâmero, totalizando 147 pbs. O DNA espaçador encontrado entre os nucleossomos varia de 20 a 80 pbs. Portanto, os nucleossomos se repetem em média a cada 200 pbs. Essa organização dá a impressão de colar de contas do cromossomo interfásico.

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11 Fibra de 11 nm Colar de contas Fibra de 30 nm solenóide No núcleo celular o DNA se encontra na configuração de 30 nm. Ainda não está completamente definida a forma de organização deste nível. Um modelo sugere configuração zique-zague, outro solenóide.

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13 Na região dos cromômeros durante a meiose de oócitos de anfíbios, a cromatina permanece condensada.

14 Graus de compactação da Cromatina O solenóide é organizado por proteínas não-histonas, das quais a mais conhecida é a condensina.

15 Os cromossomos ocupam regiões específicas dentro do núcleo. A heterocromatina se concentra próxima ao envoltório nuclear. Os genes podem mudar de lugar quando aumentam sua expressão.

16 No nucléolo ocorre a síntese do rrna e a montagem dos ribossomos.

17 O nucléolo apresenta uma parte fibrilar e uma parte granular. Presença de cromatina associada ao nucléolo. Região fibrilar: síntese de rrna e processamento Região granular: montagem dos ribossomos

18 Composto por duas membranas que delimitam o espaço perinuclear. A membrana externa se continua com a membrana do retículo endoplasmático. Presença de lâmina nuclear. Presença de poros nucleares, estruturas complexas onde a membrana interna e externa se conectam.

19 A lamina nuclear é composta por proteínas denominadas laminas, que formam uma rede de nm, interrompida na região dos poros. Essa rede se conecta a proteínas transmembrana que atravessam a membrana interna do núcleo. Entre as proteínas específicas da membrana interna, estão a emerina, o receptor para filamentos da lamina (LBR), Sun1 e Sun2, Lap1 e Lap2 e MAN1. Na membrana externa temos as nesprinas.

20 Constituída por filamentos intermediários nucleares. 3 tipos: Dois tipos de A Três tipos de B Dois tipos de C São dímeros proteicos que se associam em α-hélice e tem regiões não helicoidais nas extremidades. Os dímeros se associam, formando protofilamentos que se unem lateralmente e se ancoram em proteínas da membrana nuclear interna, como LAP1 e LAP2, emerina e LBR. Função de suporte estrutural do envoltório, montagem e remontagem (mediada por fosforilação), e ancoramento das fibras cromatínicas.

21 Milhares de poros estão presentes no envoltório nuclear. O complexo do poro é uma estrutura complexa que permite a troca regulada de moléculas entre núcleo e citoplasma. O complexo do poro nuclear é composto por mais de 100 unidades de 30 tipos diferentes de proteínas as nucleoporinas (Ex: Nup153, Nup50, etc.).

22 Cada complexo pode transportar centenas de moléculas ao mesmo tempo, em ambas as direções. Apresenta um sistema de transporte complexo: Água, íons e moléculas de até 5kDa/9nm passam livremente (difusão rápida). Moléculas de até 60 kda passam por difusão mais lenta. Moléculas e partículas maiores usam um mecanismo mediado por proteínas transportadoras (importinas e exportinas).

23 Parede composta por 8 colunas proteicas que atravessam o envoltório nuclear por completo. As colunas proteicas são fixadas ao envoltório por proteínas transmembrana. Protuberâncias de nucleoporinas diminuem o seu diâmetro central de 100nm para ca. 20nm. Presença de fibrilas que se projetam tanto para o citossol quanto para o núcleo. No núcleo as fibrilas estão ligadas em aspecto de cesta.

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25 IMPORTAÇÃO 1. Para ser importada, a proteínas deve conter uma sequência SLN (sequência de localização nuclear). 2. Deverá ser associar a proteínas denominadas IMPORTINAS. 3. No núcleo, o complexo proteína_sln+importina se associa a Ran-GTP e o complexo de importação se desmonta.

26 EXPORTAÇÃO 1. A proteína deve conter uma sequência denominada SEN. 2. Deverá ser associar a proteínas denominadas EXPORTINAS, e a uma molécula denominada Ran GTP. 3. No citoplasma, a Ran-GTP é transformada em Ran-GDP pela RanGAP e o complexo de transporte se desmonta. A presença de GAP no citoplasma e GEF no núcleo é fundamental.

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28 DNA fingerprint

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