Multiplicação in vitro do hibrido de morangueiro CRxSC adaptado as condições do Norte de Minas

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1 Multiplicação in vitro do hibrido de morangueiro CRxSC adaptado as condições do Norte de Minas Débora Francine Gomes Silva Pereira 1, Tiago Vieira Sousa 3, Annanda Mendes Costa 5, Luciana Nogueira Londe 2, Wagner Ferreira Mota 4 [1] Mestranda em Produção Vegetal no semi árido, Universidade Estadual de Montes Claros - UNIMONTES, Janaúba, MG, CEP deborafrancinep@yahoo.com.br; [2] Doutora. Pesquisadora de Biotecnologia, Empresa de Pesquisa Agropecuária de Minas Gerais EPAMIG, Nova Porteirinha, MG, CEP llonde@hotmail.com; [3] Mestrando em Genética e Melhoramento de plantas, Universidade Federal de Viçosa -UFV, Viçoa, MG, CEP ; [4]Professor de Olericultura- Universidade Estadual de Montes Claros UNIMONTES; [5] Acadêmica do curso de Agronomia, Universidade Estadual de Montes Claros RESUMO Pesquisas realizadas na Empresa de Pesquisa Agropecuária de Minas Gerais na Unidade Regional do Norte de Minas, mostraram resultados satisfatórios quando o morangueiro foi conduzido em condições de clima Semi-Árido, no Norte de Minas Gerais, tendo como principal vantagem a não ocorrência de doenças. Obtendo assim material genético adaptado as condições do norte de Minas. Objetivou-se com esse trabalho avaliar a ação de diferentes concentrações de fitorreguladores ANA(ácido naftalenocético) e BAP(6- benzilaminopurina) em meio de cultura MS Murashige;Skoog (1962) para o desenvolvimento in vitro do híbrido de morango Camino Real com Sweet Charlie(CRxSC). Foram utilizados como explantes meristemas isolados de estolões, que foram submetidos à desinfestação e estabelecidos em sala de fluxo laminar em meio MS e depois transferidos para sala de crescimento com temperatura de 25ºC ±1 e fotoperíodo de 16 horas. No quarto subcultivo os explantes foram submetidos aos tratamentos que foram constituídos de diferentes concentrações de ANA 0,0; 0,1; 0,5; 1,0; 1,5 mg.l -1 e BAP 0,0; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0 mg.l -1, em todas as combinações possíveis.o experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições, sendo conduzido em esquema fatorial 5x5. Foram feitas avaliações trinta dias após o início dos tratamentos sendo avaliados altura de planta e número de brotações aos 30 dias foi observado que a maior média para a variável altura de plantas se manteve na ausência de ANA combinada a 0,5 mg.l -1 de BAP e o maior número de brotações por explante foi obtido na ausência de ANA e 0,5 mg.l -1 de BAP (2,16 brotações/explante) esta média, diferiu estatisticamente apenas da média encontrada na combinação de 0,5 mg.l -1 ANA com 0,5 mg.l -1 de. Para o híbrido originado de CRxSC a interação de auxinas internas com reduzidas doses de BAP é suficiente para induzir o alongamento de plantas e presença de brotações nos explantes. PALAVRAS-CHAVE: Fragaria x Ananassa., micropropagação,reguladores de crescimento ABSTRACTS In vitro multiplication of hybrid strawberry CRxSC adapted to the conditions of the North Mines Research in Agricultural Research Company of Minas Gerais in the Regional Unit of the North of Minas Gerais, showed satisfactory results when the strawberry was conducted in conditions of semi-arid region in northern Minas Gerais, the main Hortic. bras., v. 30, n. 2, (Suplemento - CD Rom), julho 2012 S 93

2 advantage of the non-occurrence of diseases. Thereby obtaining genetic material adapted to conditions in northern Minas. The objective of this paper multiply and evaluate the effect of growth regulators NAA (naphthalene acetic acid) and BAP (6- benzylaminopurine) in vitro cultivation of strawberry adapted to the conditions of semiarid northern mining. Were used as explants isolated stolon meristems, from the hybrid strawberry produced in the experimental farm of EPAMIG located in Nova Porteirinha (MG). The hybrid used was from the intersection of Camino Real with Sweet Charlie (CRxSC). The completely randomized design with four replications, being conducted in a factorial 5x5. Evaluations was performed at the fourth subculture when tested different concentrationsof growth regulators. Within thirty days after initiation of treatment was evaluated the number of shoots and plant height. The data were subjected to statistical analysis using the program SISVAR. For the hybrid CRxSC originating from the interaction of internalauxins with reduced levels of BAP is sufficient to induce elongation of plants and shootsin the presence of explants. KEYWORDS: Fragaria x ananassa., micropropagation, growth regulators O morangueiro é conhecido como uma planta típica de climas frios, por não se adaptar a temperaturas elevadas,sendo difundido em regiões de clima temperado e subtropical, tornando assim seu cultivo limitado em outros tipos de clima. Pesquisas realizadas na Empresa de Pesquisa Agropecuária de Minas Gerais na Unidade Regional do Norte de Minas, com o objetivo de superar essa limitação, mostraram resultados satisfatórios quando o morangueiro foi conduzido em condições de clima Semi-Árido, no Norte de Minas Gerais, tendo como principal vantagem a não ocorrência de doenças. Obtendo assim material genético adaptado as condições do norte de Minas. Através da cultura de tecidos vegetais é possível multiplicar os genótipos dos frutos de interesse, para aumentar o número de mudas adaptadas as condições edafoclimáticas do Norte de Minas Para que a técnica de micropropagação tenha sucesso, existem alguns pontos que devem ser levados em consideração como o meio de cultivo usado para a espécie e a utilização de fitorreguladores. A ação dos fitorreguladores é imprescindível para uma produção de mudas abundante e que apresentem qualidade. Objetivou-se com esse trabalho avaliar a ação de diferentes concentrações de fitorreguladores ANA e BAP em meio de cultura Murashige;Skoog (1962) para o desenvolvimento in vitro do híbrido de morango Camino Real com Sweet Charlie. Hortic. bras., v. 30, n. 2, (Suplemento - CD Rom), julho 2012 S 94

3 MATERIAL E MÉTODOS O trabalho foi desenvolvido no laboratório de Biotecnologia Vegetal da Empresa de Pesquisa Agropecuária do Norte de Minas, localizada em Nova Porteirinha,MG. Foram utilizados como explantes meristemas isolados de estolões, provenientes dos híbridos de morango produzidos na Fazenda Experimental da EPAMIG, Unidade Regional Norte de Minas, localizada no município de Nova Porteirinha (MG). O híbrido utilizado foi proveniente do cruzamento de Camino Real com Sweet Charlie. No Laboratório de Biotecnologia foi realizada a desinfestação dos estolões. No estabelecimento em câmara de fluxo laminar, os meristemas foram colocados em meio MS (MURASHIGUE; SKOOG, 1962), suplementado com 1 mg.l -1 de BAP (6- benzilaminopurina), 0,01 mg.l -1 de ANA (ácido naftalenocético) e 0,1 mg.l -1 de GA 3 (acido giberélico), acrescido 0,5 mg.l -1 de tiamina, 0,5 mg.l -1 de piridoxina, 0,5 mg.l - 1, 0,5 mg.l -1 de ácido nicotínico, 2 mg.l -1 de glicina, 30 g.l -1 de sacarose, 100 mg.l -1 de myo-inositol e 7 g de ágar. O ph do meio foi ajustado para ±5,8 antes da autoclavagem. O meio foi autoclavado a 121ºC 1 atm, por 20 minutos. Foram distribuídos 10 ml de meio de cultura em tubos de ensaio de 15 mm de diâmetro por 150 mm de altura, e depois foram transferidos para câmara de crescimento com temperatura de 25ºC ±1 e fotoperíodo de 16 horas. No quarto subcultivo, os explantes foram subcultivados em meio MS suplementado com fitorreguladores em concentrações diferenciadas e avaliados. Os tratamentos foram constituídos de diferentes concentrações de ANA 0,0; 0,1; 0,5; 1,0; 1,5 mg.l -1 e BAP 0,0; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0 mg.l -1, em todas as combinações possíveis.o experimento foi conduzido em delineamento casualizado, com quatro repetições, sendo conduzido em esquema fatorial 5x5. Foram feitas avaliações trinta dias após o início dos tratamentos sendo avaliados altura de planta e número de brotações. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística, com a utilização do programa SISVAR (FERREIRA, 2000), sendo as médias obtidas comparadas pelo teste de Scott-Knott (P<0,05) RESULTADOS E DISCUSSÃO Aos 30 dias foi observado que a maior média para a variável altura de plantas se manteve na ausência de ANA combinada a 0,5 mg.l -1 de BAP (Tabela 1). Este resultado é importante uma vez que uma altura bastante expressiva de planta foi obtida em Hortic. bras., v. 30, n. 2, (Suplemento - CD Rom), julho 2012 S 95

4 reduzida concentração de fitorreguladores, o que é interessante do ponto de vista econômico, pois ao reduzir a quantidade de fitorreguladores, reduz-se também, os custos na produção de mudas. O maior número de brotações por explante foi obtido na ausência de ANA e 0,5 mg.l - 1 de BAP (2,16 brotações/explante) esta média, diferiu estatisticamente apenas da média encontrada na combinação de 0,5 mg.l -1 ANA com 0,5 mg.l -1 de BAP (Tabela 2).Neste trabalho foram observadas que as melhores médias estavam associadas às menores concentrações de BAP, o que indica que houve menor requerimento de BAP pelos explantes. Foi verificado que a interação de menores doses de ANA com menores doses de BAP favoreceu a maior altura de plantas e maior número de brotações sugerindo assim que os níveis endógenos de ANA foram suficientes para induzir o alongamento das plantas e para balancear a relação auxinas/citocininas favorecendo o aumento no número de brotações,isto é favorável do ponto de vista econômico pois os reguladores de crescimento aumentam os gastos na produção de mudas in vitro. Para o híbrido originado de CRXSC a interação de auxinas internas com reduzidas concentrações de BAP é suficiente para induzir o alongamento de plantas e presença de brotações nos explantes. REFERÊNCIAS FERREIRA, D.F, Sistema de análises de variância para dados balanceados. Lavras: UFLA. (SISVAR Pacote computacional ). MURASHIGE, T; SKOOG, F., 1962.A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures.physiologia Plantarum, v.15, p Hortic. bras., v. 30, n. 2, (Suplemento - CD Rom), julho 2012 S 96

5 TABELA 1 Altura de plantas em mm aos 30 dias do subcultivo sob ação de combinações de ANA e BAP para o híbrido CRxSC.(Plant height in mm at 30 days of subculture under the action of combinations of NAA and BAP for hybrid CRxSC), Janaúba MG,Epamig Concentração de ANA Concentração de BAP 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 0,0 1,25Aa 21,25Ab 5,25Aa 3,50Aa 8,00Aa 0,1 0,00Aa 10,00Ba 2,50Aa 1,75Aa 1,00Ba 0,5 2,00Aa 0,00 Ba 0,50Aa 0,00Aa 15,50Ab 1,0 0,00Aa 1,75 Ba 0,50Aa 5,25Aa 0,00Ba 1,5 12,00Ba 4,25 Ba 0,00Aa 3,75Aa 0,25Ba Letras distintas maiúsculas, na coluna e, minúscula na linha, diferem entre si pelo teste de Scott-Knott (P<0,05). TABELA 2 Número de brotação em mm aos 30 dias do subcultivo sob ação de combinações de ANA e BAP para o híbrido CRxSC.( Number of sprouting in mm at 30 days of subculture under the action of combinations of NAA and BAP for hybrid CRxSC) Janaúba MG, Epamig,2011. Concentração Concentração de BAP de ANA 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 0,0 0,25Aa 2,16 Ab 1,45Ab 1,60Ab 1,10Ab 0,1 0,00Aa 1,30Aa 1,04Aa 0,68Ba 0,35Aa 0,5 0,75Aa 0,00Ba 0,25Ba 0,00Ba 0,93Aa 1,0 0,00Aa 0,85Ab 0,35Ba 1,60Ab 0,00 Aa 1,5 0,60Aa 1,11Aa 0,00Ba 1,25Aa 0,35 Aa Letras distintas maiúsculas, na coluna e, minúscula na linha, diferem entre si pelo teste de Scott-Knott (P<0,05). Hortic. bras., v. 30, n. 2, (Suplemento - CD Rom), julho 2012 S 97

6 Figura 1: Ilustração do híbrido CR XSC cultivado in vitro (Ilustration of the hybrid CR XSC grown in vitro) Janaúba MG, Epamig,2011. Hortic. bras., v. 30, n. 2, (Suplemento - CD Rom), julho 2012 S 98