Comunicado. Técnico. Vânia Bianchin 1, Paulo Roberto Valle da Silva Pereira 1, Douglas Lau 1, Denise Navia 2

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1 Comunicado 289 Técnico ISSN Dezembro, 2010 Passo Fundo, RS Técnica para amostragem, coleta e triagem de ácaros Eriophyideos em Poaceas Vânia Bianchin 1, Paulo Roberto Valle da Silva Pereira 1, Douglas Lau 1, Denise Navia 2 Introdução O ácaro do enrolamento, Aceria tosichella Keifer (acari: Eriophyidae), é uma importante praga para a cultura do trigo. Este ácaro encontra-se distribuído nas principais regiões produtoras de trigo do mundo: América do Norte, Ásia (SMITH, 1972; SLYKHUIS, 1980), Europa, Índia, Jordânia, Nova Zelândia (OLFIELD, 1970), África do Sul (MEYER, 1981), Austrália (ELLIS et al., 2003), dentre outros locais. Entretanto, é uma praga recente na América do Sul; em 2004 foi detectado na Argentina (NAVIA et al., 2006) e em 2006 no Brasil, em quatro municípios do Rio Grande do Sul: Passo Fundo, Palmeira das Missões, São Luiz Gonzaga e Santo Antônio das Missões (PEREIRA et al., 2009). Este ácaro tem como hospedeiro principal o trigo, entretanto, mais de 100 espécies de poaceas são relatadas abrigando-o (JEPPSON et al., 1975), entre estas espécies estão as cultivadas, como milho, sorgo, arroz, aveia e cevada, espécies daninhas e espontâneas. Os principais danos causados pelo A. tosichella se deve a transmissão de vírus. Os principais vírus transmitidos são o Wheat streak mosaic virus (WSMV) (Família Potyviridae, gênero Tritimovirus) e o High plains virus (HPV) (família e gênero não designado). Este último está sendo (tentativamente) denominado de Maize red stripe virus (SKARE et al., 2006). Os vírus transmitidos por este vetor ainda não foram identificados no Brasil. Uma vez verificada a presença de A. tosichella no Brasil, surge a necessidade de acompanhar a ocorrência e a distribuição nas principais regiões tritícolas. Para tanto, desde 2006 (data de detecção) estão sendo feitas coletas sistemáticas, abrangendo os estados do Mato Grosso do Sul, Paraná, Santa Catarina e Rio Grande do Sul. Nestas amostras, além da detecção de ácaros, há também a investigação a fim de verificar a presença dos vírus associados. 1 Embrapa Trigo, Rodovia BR 285 km 294, Cx. Postal 451, Passo Fundo, RS. 2 Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia.

2 Material e métodos Até o ano de 2009, as coletas visavam cobrir as áreas de fronteira e, a partir de 2009, as amostras passaram a ser retiradas de áreas núcleos de coletas (fixas). Destas áreas são amostrados pontos distintos (um ou mais) tanto no espaço como no tempo, visto que a rota 1 é feita em três períodos do ano e que todas as rotas são refeitas, ano após ano (Fig. 1). Além dos núcleos fixos de coleta, são amostradas plantas que exibem sintomas típicos de infecção pelas viroses e/ou sintomas de enrolamento por ácaro. Fig. 3. Plantas amostradas, identificadas e acondicionadas em sacos plásticos. Fig. 1. Núcleos fixos de coleta e períodos de amostragem. A amostragem é realizada pelo corte das plantas rente ao solo, com o uso de uma tesoura de poda (Fig. 2). Cada amostra é identificada e acondicionada em saco plástico (Fig. 3). Estas são encaminhadas ao laboratório de entomologia da Embrapa Trigo, para processamento e triagem de ácaros Eriophyideos. No laboratório, são destacadas as folhas dos colmos (Fig. 4) e as plantas são cortadas (Fig. 5) em pedaços com aproximadamente cinco centímetros. O material é lavado em uma solução de água + detergente, de uso doméstico, na concentração aproximada de 1% do volume total (Fig. 6). A lavagem é feita através de agitação manual de 1 a 2 minutos (Fig. 7). Fig. 4. Folhas sendo destacadas dos colmos em plantas amostradas. Fig. 2. Plantas amostradas, cortadas rente ao solo.

3 8). Na peneira superior, de malha mais grossa, são retidos os resíduos maiores que são descartados e, o material retido na peneira de menor malha é coletado em tubos plásticos com o auxílio de uma pisseta contendo álcool 70% (Figs. 9 e 10). O material coletado, é armazenado e destinado à triagem sob microscópio estereoscópico, com aumento de 40 vezes objetivando a retirada dos ácaros. Fig. 5. Plantas sendo cortadas para posterior lavagem. Fig. 8. Processo de peneiramento, peneira superior 24 mesh e peneira inferior 400 mesh. Fig. 6. Adição de detergente na solução de lavagem das amostras. Fig. 7. Agitação manual na lavagem das amostras. Fig. 9. Recolhimento do material retido na peneira inferior (400 mesh). Após o processo de lavagem, segue-se duplo peneiramento, com uma peneira de 24 mesh posicionada sobre uma peneira de 400 mesh (Fig.

4 Fig. 10. Acondicionamento em tubos plásticos da amostra destinada à triagem de ácaros eriophyideos. Os ácaros eriophyideos encontrados durante a triagem em microscópio estereoscópico, são separados e transferidos para lâminas contendo meio de Berlesse modificado; a lâmina é coberta por uma lamínula e levada para secagem em estufa a 45 C por 7 dias. As lâminas são enviadas ao Laboratório de Quarentena de Plantas, Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, Brasília, DF, para identificação do A. tosichella. Resultados e discussão Até o presente momento, 277 pontos georeferenciados (espaço-temporal) foram amostrados. Tais pontos abrangem 79 municípios nos estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Paraná e Mato Grosso do Sul. Foram coletadas plantas de aveia, azevém, trigo, milho, dentre outras espécies de poaceas não cultivadas. Considerando os levantamentos efetuados desde 2006, são 47 amostras positivas que correspondem a 16 municípios localizados no estado do Rio Grande do Sul (Fig. 11). Nos anos 2006/2007 cinco locais apresentaram amostras positivas quanto ao ácaro; em 2007/2008, 26 amostras foram positivas para o ácaro, representando dez municípios distintos e, em 2009, 15 amostras apresentaram o ácaro em 11 municípios, todos do Rio Grande do Sul. Fig. 11. Ocorrência e distribuição de Aceria tosichella no Brasil. O total de amostras obtidas desde o início das coletas em 2009 e 2010 foi de 692. Em 2010, até o momento (levando-se em conta que as amostras estão em fase de análise) detectou-se uma amostra positiva, também no Rio Grande do Sul. A presença de A. tosichella (BIANCHIN et al., 2010) foi detectada em 16 municípios gaúchos. As populações do ácaro encontradas nestes pontos, ainda são consideradas baixas, entretanto, é visível ao longo dos anos, que a ocorrência de expansão geográfica, está ainda concentrada no estado do Rio Grande do Sul. Os vírus transmitidos por este vetor (WSMV, HPV), até o momento, não foram encontrados no Brasil, o que reforça a necessidade de monitoramento constante, tanto do ácaro como dos vírus. Para o monitoramento do A. tosichella, a técnica de amostragem, coleta e triagem descrita acima tem se mostrado uma ferramenta bastante eficiente. Referências bibliográficas BIANCHIN, V.; PEREIRA, P. R. V. da S.; LAU, D.; NAVIA, D. Ocorrência e distribuição, no Brasil, do complexo Aceria tosichella Wheat streak mosaic virus/hight plains virus. In: SEMINÁRIO INTERNACIONAL PARA TERCEROS PAÍSES, 2010, Córdoba, Argentina. Caracterización, diagnóstico, epidemiologia y manejo de enfermedades virales y mollicutes em plantas. Córdoba: INTA, p

5 ELLIS, M. H.; REBETZKE, G. J.; CHU, P. First report of wheat streak mosaic virus in Australia. Plant Pathology, London, v. 52, p JEPPSON, L. R.; KEIFER, H. H.; BAKER, E. W. Mites injurious to economic plants. Berkeley: University of California Press, p. MEYER, M. K. P. South Africa Eriophyidae (Acari): the genus Aceria Keifer, Phytophylactica, Pretoria, v. 13, p , NAVIA, D.; TRUOL, G.; MENDONÇA, R. S.; SAGADÍN, M. Aceria tosichella Keifer (Acari: Eriophyidae) from Wheat Streak Mosaic Virusinfected wheat plants in Argentina. International Journal of Acarology, Michigan, v. 32, n. 2, p , OLDFIELD, G. N. Mite transmission of plant viruses. Annual Review of Entomology, Palo Alto, v. 15, p , PEREIRA, P. R. V. S.; NAVIA, D.; SALVADORI, J. R.; LAU, D. Occurrence of Aceria tosichella in Brazil. Pesquisa Agropecuária Brasileira, Brasília, DF, v. 44, n. 5, p , SKARE, J. M.; WIJKAMP, I.; DENHAM, I.; REZENDE, J. A. M.; KITAJIMA, E. W.; PARK, J. W.; DESVOYES, B.; RUSH, C. M.; MICHELS, G.; SCHOLTHOF, K. B. G.; SCHOLTHOF, H. B. A new eriophyid mite-borne membrane enveloped virus-like complex isolated from plants. Virology, New York, v. 347, p , SLYKHUIS, J. T. Mites. In: HARRIS, K. F.; MARAMOROSCH, K. (Ed.). Vectors of plant pathogens. New York: Academic Press, p SMITH, K. M. A textbook of plant virus diseases. New York: Academic Press, Comunicado Técnico Online, 289 Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento Embrapa Trigo Caixa Postal, 451, CEP Passo Fundo, RS Fone: (54) Fax: (54) sac@cnpt.embrapa.br Comitê de Publicações Expediente Presidente: Sandra Maria Mansur Scagliusi Membros: Anderson Santi, Douglas Lau (vice-presidente), Flávio Martins Santana, Gisele Abigail M. Torres, Joseani Mesquita Antunes, Maria Regina Cunha Martins, Martha Zavariz de Miranda, Renato Serena Fontaneli Referências bibliográficas: Maria Regina Cunha Martins Editoração eletrônica: Márcia Barrocas Moreira Pimentel BIANCHIN, V.; PEREIRA, P. R. V. da S.; LAU, D.; NAVIA, D. Técnica para amostragem, coleta e triagem de ácaros Eriophyideos em poaceas. Passo Fundo: Embrapa Trigo, p. html. (Embrapa Trigo. Comunicado técnico online, 289). Disponível em: <