TEMA DA AULA. Fluxo da informação genética: I Replicação do DNA, II Transcrição do DNA, III - Tradução do DNA. Localização do DNA



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Fatores que estabilizam a dupla hélice: interações hidrofóbicas forças de van der Walls pontes de hidrogênio interações iônicas A Dupla Hélice Entre as bases nitrogenadas Entre os grupos fosfato do e os cátions (Mg 2+ ) presentes na solução fisiológica. A Dupla Hélice A = T 0,34nm C= G 1 espiral = 10 pb Propriedades Químicas e Físicas do Desnaturação: separação das fitas de quando aquecida; enaturação: a dupla hélice se refaz, quando a solução é esfriada aos poucos. Empacotamento do : a estrutura terciária A estrutura terciária do é como um fio de telefone quando enrola-se nele mesmo. Empacotamento do Estrutura do Nucleossomo núcleo dos nucleossomos é um octâmero de proteínas histonas, composto por 1 tetrâmero H3-H4 e 2 dímeros H2A- H2B. A histona H1 une os nucleossomos do solenóide. H1 Núcleo transmite sua informação genética em duas ocasiões: 1.quandoacélulasereproduz Mitose; 2. quando fabrica e envia ao citoplasma o NA. Nucleossomo (146 pb) 200 pb eplicação f luxo de informação genética é transmitida do para o NA e utilizada para a síntese das Proteínas. Proteína EPLICAÇÃ D Características: 1. Semiconservativa e Assimétrica; 2. Bidirecional ponto de origem; 3. Direção 5 3 ; 4. Semidescontínua 5 3 = fita líder; 5 3 = fita complementar. Fragmento de kazaki Primer Polimerase III Polimerase I Primase Helicase Girase original Proteínas de ligação à fita-simples 2

Extração de - Eletroforese Verificação em Gel de Agarose - Perfil eletroforético - Molécula de fita simples Nucleotídeos ibonucleotídeos Bases: Citosina Guanina Uracila Adenina NA Pentose Desoxirribose ibose Purinas A e G A e G Bases Pirimidinas T e C U e C Ácido Fosfórico H 3P 4 H 3P 4 NAm codifica proteínas. NAr estrutura dos ribossomos e síntese de proteínas. NAt síntese de proteínas (adaptador NAm - aa). Pequenos NAs splicing de NA eplicação eplicação cromossomo inteiro é copiado para produzir duas moléculas de sidênticos; Eucariotos X Procariotos apenas genes ou grupos de genes particulares são transcritos num certo tempo. 3

é formado por 2 regiões: Intergênicas egiões Codificadoras e Não-Codificadoras do Gênicas egião Intergênica É a porção regulatória, que sinaliza o início ou o final de um gene, que influencia a transcrição gênica, ou que é o ponto de início para a replicação do. Intergênicas Gênicas egião Gênica É a porção que codifica para um produto final, que pode ser uma cadeia polipeptídica ou um NA. egiões de um gene de um eucarionte intron exon intron exon intron exon Introns ou regiões nãocodificadoras egiões Codificadoras e Não-Codificadoras do Exons ou regiões codificadoras TANSCIÇÃ D Gene ativo 5 3 A C G T A 3 A T G C A T T 3 5 5 Molécula de NA nascente NA polimerase Pirimidinas Purinas C G U A Sentido da NA polimerase Etapas: 1. Iniciação equer um promotor (sequência ) para a NA-polimerase se ligar 2. Alongamento NA-polimerase adiciona nucleotídeos. 3. Terminação NA-polimerase alcança o sítio de terminação. Processamento do NA egião codificadora gene Promotor E1 I1 E2 I2 E3 Terminal TAC ATC CAP E1 I1 E2 I2 E3 Cauda NAm AAAAAA AUG precursor UAG CAP Cauda NAm AAAAAA maduro AUG UAG Inibidores da antibióticos: - actinomicina D; - acridina; - rifampicina; - α-amanitina. Mecanismo em que uma proteína é sintetizada Etapas: 1. Iniciação complexo de iniciação (tna carregado + aa + subunidade ribossomal menor). 2. Alongamento quebra da ligação tna (sítio P) + seu aa; formação da ligação peptídica entre esse aa e o ligado ao tna do sítio A; 3. Terminação encontrocom umdoscódons deparada (UAA, UAG ou UGA). 4

Código Genético Subunidade menor do ibossomo P A 5 AAAAAA 3 A U G C A A U A C U G C U U A C G A U A G Códon Anticódon NAt NAm Subunidade menor do ibossomo P A 5 AAAAAA3 A U G C A A U A C G U U U G C U U A C G A U A G (i) Aminoácido (i) s polipeptídeos crescem enquanto cada ribossomo movem-se em direção ao final 3 do NAm P L I I B S S M S MUTAÇÃ GÊNICA Mutação silenciosa Mutação silenciosa Alterações na sequência de nucleotídeos do. Tipos: - Silenciosa; - Perda de sentido; - Sem sentido; - Alteração no módulo de leitura; - Junção éxon-íntron. Fita molde NAm Polipeptídeo efeito neutro dada a redundância do código genético, não provocando modificações na sequência de aminoácidos da proteína (mutação silenciosa). 3...ACCGAGGGACTAATT... 5 5...UGGCUCCCAGAUUAA... 3 Trp Leu Pro Asp Peptídeo 5

Alteram o "sentido"do filamento codificador do gene ao especificar um aminoácido diferente. Hemoglobina Normal Mutação de perda de sentido Hemoglobina Mutante Normalmente a tradução do NAm cessa quando um códon finalizador (UAA, UAGe UGA) é alcançado e/ou produzido. Filamento Normal de TAC CAC GTC ATA TGA GGA CTC mna AUC CUC CAC UAU AGU CCU CAC MET - VAL - HIS -TY - TH - P- GLU Proteína Normal Mutação Sem Sentido TAC CAC GTC ATA TGA GGA CTC mna com susbstituição de um nucleotídeo AUC CUC CAC UAA MET - VAL - HIS Proteína Alterada Códon stop prematuro Mutação de alteração no módulo de leitura Fita molde Fita molde NAm Polipeptídeo esultado: todos aa trocados após a inserção. Mutação de alteração no módulo de leitura Deleções e Inserções Causadas pela inserção ou deleção de um ou mais pares de bases. Quando o número de bases envolvidas não é múltiplo de três, a mutação altera a leitura da tradução a partir do ponto de mutação resultando numa umaproteínacomsequênciadeaminoácidosdiferentes. Mutação no Processamento do NAm Junção éxon íntron: podendo criar sítios doadores ou aceptoresalternativosque competem com osnormais durante o processamento do NA. Deleção = perda de 1 segmento Duplicação e Deleção = cromossomos homólogos quebram-se em pontos diferentes...... e trocam segmentos...leu-val-val-th-p...... CTC GTG GTG ACC CCT T... Alelo normal...leu-val-val-p-leu...... CTC GTG GT ACC CCT T... Deleção de uma única base Inversão = segmento quebrado é inserido na ordem reversa. Translocação recíproca= cromossomos não-homólogos trocam segmentos. ALBETS, B. et al. Biologia Molecular da Célula. Porto Alegre: Artmed, 2004. CPE,G. A Célula, Uma Abordagem Molecular. Porto Alegre: Artmed, 2002. LEHNINGE, A. L.; NELSN, D. L.; CX, M. Princípios de Bioquímica. São Paulo: Savier, 2000. SADAVA, D. et al. Vida: a ciência da biologia. 8.ed., Porto Alegre: Artmed, 2009. 6